JVermeiden Sie den Umgang mit Ethidiumbromid

Für die Überlassung der folgenden Information danken wir den Abteilungen
Arbeitssicherheit & Biologische Sicherheit der Albert-Ludwigs-Universität Freiburg.
Die Abteilungen
Arbeitssicherheit & Biologische Sicherheit
informieren
Ethidiumbromid (EtBr)
Hinweise zum sicheren Arbeiten
Arbeitssicherheits-Info 17/97
Neuauflage '99
Ethidiumbromid 1% EtBr-Lösung

Ethidiumbromid ist sehr giftig, mutagen und umweltgefährdend
Deshalb � jegliche Exposition mit Ethidiumbromid vermeiden
� ordnungsgemäße Entsorgung EtBr-haltiger Abfälle
Ethidiumbromid-Entsorgung
Maßnahme zur Reduzierung der Sonderabfälle
� Exposition vermeiden
� ordnungsgemäß entsorgen
Ethidiumbromid-haltige, wässrige Lösungen fallen beim Anfärben von Nukleinsäuren
in Gelen an. Sie dürfen nicht ins Abwasser gelangen und müssen vor der Entsorgung
durch Adsorption des Ethidimbromids an Aktivkohle inaktiviert werden.
Alle Lösungen, die Ethidiumbromid enthalten, über eine mit Aktivkohle (Körnung
20-35 mesh) gefüllte Glassäule* geben.
Kontrolle der Aktivkohle-Erschöpfung: Auftrag einiger Tropfen des Eluats auf
Dünnschichtplatte oder DC-Folie (Aluminiumoxid oder Kieselgel) und Überprüfung
unter UV-Licht.
Ethidiumbromid fluoresziert im UV-Licht bei 366 nm orange-rot.
Das ethidiumbromidfreie Eluat kann in den Ausguß geschüttet werden.
Die beaufschlagte Aktivkohle entweder im Muffelofen ausglühen (Pyrolyse des
Ethidiumbromids) oder als festen Sonderabfall getrennt sammeln.
* kurze Glassäulen mit in Wasser aufgeschlemmmter Aktivkohle befüllen (Vermeidung von Luftblasen).
1 mg Aktivkohle adsorbiert ca. 50 ml einer frisch angesetzten Ethidiumbromid-
Lösung

Firma Merck bietet fertige Adsorber an,
deren Kapazität beträgt 300 mg Farbstoff,
die Beladung wird optisch angezeigt.
Art.Nr. 1.02243
Preis ca DM 80, 00
inkl. MWSt.
Wie können Sie eine Exposition mit Ethidiumbromid vermeiden?
�Vermeiden Sie den Umgang mit Ethidiumbromid
in kristalliner Form!
Das Einatmen von Stäuben läßt sich durch den Einsatz
von Stammlösungen oder Tabletten vermeiden. Auf dem
Markt erhältlich sind 1%ige EtBr-Stammlösungen und
EtBr-Tabletten (10/100 mg) zum Auflösen (Bezugsquelle
z.B. Fluka, Merck)
Kann auf Ethidiumbromid in kristalliner Form nicht
verzichtet werden, bitte nur unter wirksamer Absaugung
mit Staubschutzmaske und geeigneten
Schutzhandschuhen abwiegen oder abfüllen!
�Schützen Sie Ihre Hände!
Bei Arbeiten mit Ethidiumbromid werden in der Regel
Einmalhandschuhe aus Latex getragen. Da es in der
Literatur keine Hinweise auf deren Beständigkeit gibt,
haben die Abt. Biologische Sicherheit und
Arbeitssicherheit dieses in eigenen Versuchen getestet.

Handschuhmaterial Stärke (mm) Einwirkzeit (sec.)
1 %ige EtBr-Lsg
Latex (Standard) 0,15- 0,20 30 ++
Latex (Standard) 0,15- 0,20 60 +++
Latex 0,30- 0,35 30 +
Latex 0,30- 0,35 60 +
Nitril 0,10 30 -
Nitril 0,10 60 -
0,1 %ige EtBr-Lsg
Latex (Standard) 0,15- 0,20 30 (+)
Latex (Standard) 0,15- 0,20 60 +
Nitril 0,10 60 -
Durchdringung
�Gebräuchliche dünnwandige Einmalhandschuhe aus Latex werden in kurzer Zeit
von Ethidiumbromid-Lösung durchdrungen!
�Einmalhandschuhe aus Nitril zeigten eine wesentliche bessere Beständigkeit;
weitere Vorteile: höhere mechanische Stabilität !
k e i n allergenes Potential !

�wichtig: der AQL (statist. Größe von Mikrolöchern) der Handschuhe muß < 1,5
sein
�Vermeiden Sie daher bei Arbeiten mit Ethidiumbromid, insbesondere beim
Umgang mit Stammlösungen oder beim Färben von Gelen Latexhandschuhe !
�Prinzipiell Einmalhandschuhe unmittelbar nach Kontakt mit Ethidiumbromid
abstreifen !
Hände gründlich waschen !
Die im ersten Info erwähnten Alternativmethoden zum Anfärben von DNA (Nile blue;
SYBR Green) sind leider keine wirklichen Alternativen, da sie in DMSO gelöst
werden und so die Hautschranke ungehindert durchdringen !
Weitere Hinweise zu Schutzmaßnahmen und
Verhaltensregeln zu Verhalten im Gefahrfall,
Erster Hilfe und zur sachgerechten
Entsorgung finden Sie in den beigefügten
aktualisierten Betriebsanweisungen

B E T R I E B S A N W E I S U N G
nach § 20 GefStoffV
ALBERT - LUDWIGS - UNIVERSITÄT FREIBURG I. BRSG.
ETHIDIUMBROMID
3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridiniumbromid
Homidiniumbromid
Gefahren für Mensch und Umwelt
Kontakt mit Oxidationsmitteln vermeiden, nicht stark erhitzen. Gefährliche
Zersetzungsprodukte: Nitrose Gase, Brom, Bromwasserstoff. Der Stoff ist mit
besonderer Vorsicht zu handhaben,
Mutagen (blockiert die RNA-Synthese)
Gefahrensymbol: T + , sehr giftig; N, umweltgefährdend CAS-Nr.: 1239-45-8
R 22 Gesundheitsschädlich beim Verschlucken
R 26 Sehr giftig beim Einatmen
R 36/37/38 Reizt die Augen, Atmungsorgane und die Haut
R 40 Irreversibler Schaden möglich
Schutzmaßnahmen und Verhaltensregeln
Handschutz: Schutzhandschuhe aus Nitril;-keine Einmalhandschuhe aus Latex, sie
werden sofort durchdrungen-
Augenschutz: Schutzbrille mit Seitenschutz
Atemschutz: Bei Auftreten von Dämpfen Gasfilter E2P2 oder B2P2.
S 26
Bei Berührung mit den Augen gründlich mit Wasser abspülen und Augenarzt
konsultieren.
S 28 Bei Berührung mit der Haut sofort mit viel Wasser und Seife abwaschen
S
36/37
Bei der Arbeit geeignete Schutzkleidung und Schutzhandschuhe tragen.

S 45 Bei Unfall und Unwohlsein Arzt hinzuziehen
Verhalten im Gefahrfall
Verschüttete und ausgelaufene Lösung mit Absorptionsmittel aufnehmen und gut
nachreinigen (UV-Kontrolle)
Jeden Hautkontakt und Einatmen von Stäuben unbedingt vermeiden.
Löschmittel: Wasser, CO2, Schaum, Pulver
Bei massiver Schadstoffentwicklung umgebungsluftunabhängiges Atemschutzgerät.
Im Brandfall können Nitrose Gase, Brom, Bromwasserstoff entstehen.
Erste Hilfe
Nach Hautkontakt: Mit reichlich Wasser abwaschen. Kontaminierte Kleidung
entfernen.
Nach Augenkontakt: Mit fließendem Wasser bei gut geöffnetem Lidspalt ausspülen
(mind. 10 Min.). Vorher Proparakerakain, zuletzt Isogutt-Augentropfen. Augenarzt
hinzuziehen !
Nach Einatmen: Frischluft. Ggf. Atemspende, Arzt hinzuziehen.
Nach Verschlucken: Viel Wasser trinken lassen, Erbrechen auslösen. Arzt
konsultieren.
Sachgerechte Entsorgung
WGK 2, wassergefährdend, darf nicht ins Abwasser gelangen.
Ethidiumbromidhaltige Gele, Pipettenspitzen, Handschuhe usw. als "Mit Chemikalien
verunreinigte Betriebsmittel" in 30l-Fässern entsorgen, Färbe und Stammlösung
lassen sich mit Hilfe einer Aktivkohle-Säule leicht entgiften. Nähere Informationen bei
der Abt Umweltschutz und Abfallwirtschaft, Tel.: 7970
Empfehlung: Stammlösung oder Tabletten verwenden, um Staubentwicklung zu
vermeiden.
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B E T R I E B S A N W E I S U N G
nach § 20 GefStoffV
für chemische und artverwandte Laboratorien der
ALBERT - LUDWIGS - UNIVERSITÄT FREIBURG I. BRSG.
ETHIDIUMBROMID
1%ige-Lösung in Wasser
Homidiniumbromid
Gefahren für Mensch und Umwelt
Gefahrensymbol: Xn, gesundheitsschädlich; N, umweltgefährdend
Mutagen
R 40 Irreversibler Schaden möglich
Schutzmaßnahmen und Verhaltensregeln
Handschutz: Schutzhandschuhe aus Nitril; -keine Einmalhandschuhe aus Latex,
sie werden sofort durchdrungen-
Augenschutz: Schutzbrille mit Seitenschutz
Atemschutz: Bei Auftreten von Dämpfen Gasfilter E2P2 oder B2P2.
S 36/37
Bei der Arbeit geeignete Schutzkleidung und Schutzhandschuhe
tragen
Verhalten im Gefahrfall
Verschüttete und ausgelaufene Lösung mit Absorptionsmittel aufnehmen und gut
nachreinigen (UV-Kontrolle)
Jeden Hautkontakt und Einatmen von Stäuben unbedingt vermeiden.
Löschmittel: auf Umgebung abstimmen

Nach
Hautkontakt:
Nach
Augenkontakt:
Erste Hilfe
Mit reichlich Wasser abwaschen. Kontaminierte Kleidung
entfernen.
Mit fließendem Wasser bei gut geöffnetem Lidspalt ausspülen
(mind. 10 Min.). Isogutt-Augentropfen- Augenarzt hinzuziehen !
Nach Einatmen: Frischluft. Ggf. Atemspende, Arzt hinzuziehen.
Nach
Verschlucken:
Viel Wasser trinken lassen, Erbrechen auslösen. Arzt konsultieren.
Sachgerechte Entsorgung
WGK 1, schwach wassergefährdend, darf nicht ins Abwasser gelangen.
Ethidiumbromidhaltige Gele, Pipettenspitzen, Handschuhe usw. als "Mit Chemikalien
verunreinigte Betriebsmittel" in 30 l-Fässern entsorgen, Färbe- und Stammlösung
lassen sich mit Hilfe einer Aktivkohle-Säule leicht entgiften. Nähere Informationen bei
der Abt. Umweltschutz und Abfallwirtschaft, Tel.: 7970
Für die freundliche Unterstützung
bedanken wir uns bei der Abteilung für
Umweltschutz und Abfallwirtschaft und
beim
Institut für Biologie II, Lehrstuhl
Professor Neuhaus

Albert-Ludwigs-Universität Freiburg
Abteilungen Arbeitssicherheit & Biologische Sicherheit
Fahnenbergplatz
79085 Freiburg
Tel.0761/203- 4203 o. 4204 - Fax 4312- e-mail:
asicher@verwaltung.uni-freiburg.de
http://www.verwaltung.uni-freiburg.de