Material und Methoden 60 3.1 Material 3.1.1 Probenmaterial Das ...
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<strong>Material</strong> <strong>und</strong> <strong>Methoden</strong> 67<br />
Zur Stammhaltung wurden die Stämme zuerst in einer Bouillon angezüchtet:<br />
ISO-Bouillon:<br />
Pepton aus Casein (Fa. Merck, 7213) 15,0 g<br />
Fleischextrakt, trocken (Fa. Merck, 3979) 3,0 g<br />
Hefeextrakt, granuliert (Fa. Merck, 3753) 5,0 g<br />
D(+)-Glukose-Monohydrat (Fa. Merck, 4074) 1,0 g<br />
Aqua demin. 1000 ml<br />
pH-Wert des Mediums 7,0±0,1<br />
Anschließend wurde der dicht bewachsenen Bouillon (Bebrütung 2 bis 4 Tage bei<br />
+25°C) Glycerol (Fa. Roth, 7530) zugesetzt, so daß es in einer Endkonzentration von<br />
etwa 20% vorlag. Als Aufbewahrungsgefäße dienten 2 ml Eppendorf-Reaktionsgefäße.<br />
Diese wurden im Gefrierschrank (Arctis Jumbo 2200 GS, Fa. AEG) bei -<br />
20±1°C gelagert. Außerdem erfolgte die Stammhaltung auf Schrägagar im<br />
Kühlschrank bei einer Temperatur von 4 bis 6°C.<br />
Schrägagar:<br />
Pepton aus Fleisch (Fa. Merck, 7224) 3,45 g<br />
Pepton aus Casein (Fa. Merck, 7213) 3,45 g<br />
Natriumchlorid (Fa. Merck, 6400) 5,0 g<br />
Agar-Agar (Fa. Aldrich, 28289-8) 13,0 g<br />
Aqua demin. 1000 ml<br />
<strong>3.1</strong>.3.2 Probenaufbereitung<br />
Für die Aufbereitung des Hackfleisches als <strong>Probenmaterial</strong> wurden folgende Medien<br />
verwendet:<br />
Pepton-Kochsalz-Lösung zur Herstellung der Erst- <strong>und</strong> Dezimalverdünnung:<br />
Pepton aus Casein (Fa. Merck, 7213) 1,0 g<br />
Natriumchlorid (Fa. Merck, 6400) 8,5 g<br />
Aqua demin. 1000 ml<br />
Plate-Count-Agar (Fa. Merck, 5463) zur Bestimmung der aeroben Keimzahl bei<br />
25±1°C.
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