Kombinierte Immuntherapie - Dr. Kübler GmbH

DR. MED. ULRICH KÜBLER DR. KÜBLER GMBH
Kombinierte Immuntherapie
TUMOR-FORSCHUNG
SIEBERTSTRASSE 6
81675 MÜNCHEN
TELEFON 0 89 / 47 40 15
TELEFAX 0 89 / 47 41 99
Die konventionellen Krebstherapien sind für die meisten Patienten schmerzhaft und schwä-
chen sie und ihr Immunsystem so stark, daß ein normaler Alltag nicht mehr möglich ist. Nur
allzuoft sind sie wenig erfolgreich und verlängern die Lebensspanne kurzzeitig.
Ziel einer modernen Krebstherapie sollte es sein, neben einer Verbesserung der Heil-
ungschancen, die Lebensqualität der Patienten zu erhalten.
Aufgrund unserer klinischen Erfahrungen können wir sagen, daß eine besonders erfolgreiche
Krebstherapie, was die Heilungschancen und die Erhaltung der Lebensqualität der Patienten
angeht, eine kombinierte adoptive Immuntherapie mit dendritischen und Lymphokin-Aktivier-
ten-Killerzellen (LAK-Zellen) ist.
Diese Art von Therapie hat den Vorteil, daß man die köpereigenen Kräfte mobilisiert. Neben-
reaktionen treten so gut wie nicht auf und eine Resistenzausbildung gegenüber eingesetzten
Medikamenten, wie sie bei Chemotherapien sehr oft beobachtet wird, ist nicht möglich.
Sowohl die dendritischen als auch die LAK-Zellen stammen von den Blutstammzellen ab und
sind entscheidend für die Funktionsfähigkeit des menschlichen Immunsystems.
Die dendritischen Zellen sind die universellen Zellen der Natur für Antigenerkennung. Im aus-
gereiften Zustand kooperieren sie mit anderen Lymphozyten z.B. den LAK-Zellen und ver-
setzten diese in die Lage, Fremdzellen z.B. Tumorzellen zu erkennen. Anschließend werden
diese Fremdzellen von den Killerzellen abgetötet.
Bei einem immungeschwächten Patienten, so auch bei einem Tumorerkrankten, sind diese
Zellen unterrepräsentiert und ihre Immunkompetenz herabgesetzt.
Der Tumor ist in der Lage durch Ausschüttung von Interleukin 10, einem Cytokin, die Ausrei-
fung der dendritischen Zellen zu verhindern, so daß es zu keiner Immunantwort seitens des
Körpers kommen kann.

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Unser Therapieansatz beruht darauf, daß aus- gereifte dendritische Zellen gegen Interleukin
10 immun sind. Stehen dem Immunsystem solche Zellen und genügend T-Killerzellen zur
Verfügung, ist es in der Lage die Tumorzellen zu erkennen und abzutöten. Aus diesem Grund
werden die Zellen in vitro zur vollständigen Ausreife gebracht und erst dann dem Patienten
gegeben.
Gewonnen werden die Zellen aus dem patienteneigenem Blut mittels einer Leukozyten-Aphe-
rese. Durch Purging wird sichergestellt, daß keine Tumorzellen mit kultiviert
werden.
Die gewonnen Leukozyten werden in entsprechenden Nährmedien kultiviert. Durch die Zuga-
be unterschiedlicher Wachstumsfaktoren kommt es zur Ausdifferenzierung und Reifung der
Zellen. Im Falle der LAK-Zellen handelt es sich dabei um IL2, im Falle der dendritischen Zel-
len um GC-MSF und IL4.
Wie durchflußzytometrische Studien zeigen, sind die dendritischen Zellen unter diesen Bedin-
gungen nach einer Woche vollständig ausgereift. Die LAK-Zellen benötigen zur optimalen
Entwicklung drei Wochen.
Unsere Erfahrungen zeigen, daß es wichtig ist beide Zelltypen dem Patienten in ausreichenden
Mengen zuzuführen. Eine alleinige LAK-Therapie führt, wie frühere Studien zeigen, nicht im-
mer zu dem gewünschten Erfolg.
Es ist sogar davon auszugehen, daß die Erfolge der einseitigen LAK-Therapie darauf zurück-
zuführen sind, daß die entsprechenden Kulturen einen geringen Anteil dendritischer Zellen
enthielten. Dieser Anteil ist jedoch sehr patientenspezifisch, wie unsere Studien belegen.
Daher ist es notwendig, neben den LAK-Zellen auch dendritische Zellen anzureichern.
Außerdem konnten wir zeigen, daß die gleichzeitige Gabe von Hitzeschockprotein (HSP)-
Vaccinen während einer LAK/dendritischen Zell-Therapie die Heilungschance erheblich stei-
gert.
Am Anfang einer erfolgversprechenden Behandlung steht jedoch eine umfangreiche Diagnos-
tik, um eine möglichst optimale Therapieform für jeden einzelnen Patienten zu finden. Dies
kann jedoch nur geschehen, wenn zum einen der Krebs so früh wie möglich erkannt wird und
zum anderen die Art bzw. Arten des oder der genetischen Defekte, die zur Transformation der
Zellen führen, herausgefunden werden können.

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Beide Punkte werden von dem von uns entwi- ckelten Diagnostikverfahren erfüllt. Zum
einen sind wir dadurch in der Lage, zirkulierende Tumorzellen aus dem Blut nachzuweisen,
was eine optimale Früherkennung gewährleistet, zum anderen können wir die Art des geneti-
schen Defektes einer transformierten Zelle bestimmen.
Um dieses Verfahren durchführen zu können, ist eine diagnostische Apherese notwendig. Die
so gewonnenen Zellen werden in mehreren Schritten aufgereinigt und für einige Zeit kulti-
viert. Anschließend können auf Protein-Ebene die transformierten Zellen nachgewiesen wer-
den.
Dies geschieht mit Hilfe von membranständigen Antigenen, die nur von Tumorzellen auf-
grund ihres genetischen Defektes expremiert bzw. überexpremiert werden und mittels mono-
klonaler Antikörpern „detektiert“ werden können. Eine anschließende Farbreaktion macht die
„detektierten“ transformierten Zellen sichtbar.
Bei den von uns verwendeten Antiköpern handelt es sich um Antiköper für: b-HCG, cd-44 v5,
cd-44 v6, c-erb B2, CEA, c-myc, Kathepsin D, Kathepsin L, Ki-67, MDR1, MDR 3, MMP 2,
MMP 9, p 53 mutant, 17-1A, PSA, uPA und VEGF.
Der Aufbau unserer Diagnostik entspricht dem des DAKO-Hercep-Antiköper (A0485)-Testes
(Code No. K 5204), der bereits von der FDA zugelassen und von der Firma DAKO (DAKO
Coperation, 6392 Vial Real, Carpinteria, CA 93013 USA) entwickelt wurde. Dieser wird zu-
sätzlich zu unserem eigenen Testverfahren für die Überexpression des HER2-Proteins (c-erb-
Onkogen-Protein, das unter anderem bei Brustkrebs eine Rolle spielt) standardmäßig bei uns
durchgeführt. Beide Diagnostikverfahren ergaben in allen Fällen dasselbe Ergebnis.
Des weiteren sind wir in der Lage mit Hilfe der Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH)
auch direkt auf Gen-Ebene Zelldefekte zu diagnostizieren. Als Beispiel sei hier wiederum die
Amplifikation (Mehrfachkopierung) des HER2-Gens genannt.

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Nachweis der Überexpression des HER2-Proteins nach
unserem Diagnostikverfahren
Nachweis der Überexpression des HER2-Proteins
nach dem DAKO-Hercep-Antikörper-Test

Amplifikation des HER 2-Gens
Abschließend ist zu sagen, daß eine erfolgreiche Krebstherapie nur auf der Grundlage einer
umfangreichen und genauen Diagnostik, die sowohl auf Protein- als auch Gen-Ebene stattfin-
det, durchgeführt werden kann. Die anschließende Therapie sollte dann möglichst patienten-
spezifisch und schonend sein, was die kombinierte Immuntherapie gewährleistet.
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