Ensayos de metabolismo microbiano en suelo: actividad ...
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<strong>Ensayos</strong> para <strong>suelo</strong>s<br />
Para la <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong> nitratos<br />
Ácido sulfúrico (H 2 SO 4 ). Hidróxido <strong>de</strong> potasio (KOH) 12N, nitrato <strong>de</strong> potasio<br />
(KNO 3 ), f<strong>en</strong>ol blanco.<br />
Solución <strong>de</strong> ácido f<strong>en</strong>ol disulfónico<br />
Se pesan 25 g <strong>de</strong> f<strong>en</strong>ol blanco puro <strong>en</strong> 150 mL <strong>de</strong> H 2 SO 4 fumante (15% <strong>de</strong> SO 3<br />
libres). Se agitan bi<strong>en</strong> y se cali<strong>en</strong>tan por 2 horas <strong>en</strong> baño María. La solución<br />
se <strong>en</strong>fría y se guarda <strong>en</strong> un frasco ámbar a temperatura ambi<strong>en</strong>te.<br />
Solución ácido sulfúrico 1N<br />
Se disuelv<strong>en</strong> 28 mL <strong>de</strong> H 2 SO 4 conc<strong>en</strong>trado <strong>en</strong> 1 L <strong>de</strong> agua <strong>de</strong>stilada.<br />
Solución madre <strong>de</strong> nitratos<br />
Se pesan 7.223 g <strong>de</strong> nitrato <strong>de</strong> amonio y se disuelv<strong>en</strong> <strong>en</strong> 1000 mL <strong>de</strong> agua<br />
<strong>de</strong>stilada, para dar una conc<strong>en</strong>tración <strong>de</strong> NO 3 -N <strong>de</strong> 1000 µg/mL. Veinticinco<br />
mL <strong>de</strong> esta solución madre se diluy<strong>en</strong> a 500 mL con agua <strong>de</strong>stilada. La conc<strong>en</strong>tración<br />
final que se obti<strong>en</strong>e es <strong>de</strong> 50 µg/mL <strong>de</strong> NO 3 -N.<br />
Curva <strong>de</strong> calibración <strong>de</strong> nitratos<br />
Se toma volúm<strong>en</strong>es (<strong>en</strong> mL) <strong>de</strong> la solución madre <strong>de</strong> nitratos <strong>de</strong> 0, 0.1, 0.2,<br />
0.3, 0.4, 0.5, 1.0, para preparar diluciones con conc<strong>en</strong>traciones finales <strong>en</strong> µg<br />
NO 3 -N <strong>de</strong> 0, 5, 10, 15, 20, 25, 50.<br />
Para la <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong> nitritos<br />
Clorhidrato <strong>de</strong> L-Naftilamina, ácido sulfanílico EDTA disódico, acetato <strong>de</strong><br />
sodio, nitrito <strong>de</strong> sodio (NaNO 2 ), hidróxido <strong>de</strong> sodio (NaOH) 6N.<br />
Solución <strong>de</strong> ácido sulfanílico<br />
Se pesan 0.6 g <strong>de</strong> ácido sulfanínico y se disuelv<strong>en</strong> <strong>en</strong> 70 mL <strong>de</strong> ácido clorhídrico.<br />
Se afora a 100 mL con agua <strong>de</strong>stilada.