1.1 Microscopi - IES Guillem Cifre de Colonya

Objectius.
INSTRUMENTAL I TÈCNIQUES
EL MICROSCOPI
- Aprendre a utilitzar i manipular correctament el microscopi òptic
- Conèixer el nom i la utilitat de cada peça del microscopi.
- Elaborar preparacions microscòpiques.
- Conèixer el funcionament i tipus de microscopis electrònics
1. EL MICROSCOPI ÒPTIC
Materials
- Microscopis
- Portaobjectes, cobreobjectes.
- Colorants.
Fonament teòric
El microscopi òptic és un instrument de precisió que permet veure augmentats objectes molt
petits i detalls invisibles a ull nu.
Microscopi (micros = petit; scopeos = veure, observar).
Identificació de les parts d’un microscopi
Part òptica:
1. Sistema d’il·luminació:
. Mirall o bombeta.
. Condensador.
. Sistema de filtres.
2. Objectiu.
3. Ocular.
Part mecànica:
1. Base o peu.
2. Ansa o braç.
3. Tub òptic.
4. Platina.
5. Pinces.
6. Comandaments d'enfocament:
. Cargol macromètric.
. Cargol micromètric.
7. Revòlver
IES Guillem Cifre de Colonya. Tècniques experimentsls BAT1 Professor: Bartomeu Vilanova Suau 1

Els augments.
Entenem per augments el nombre de vegades que és major la imatge observada que
l'objecte real.
Per a calcular el nombre d'augments es fa:
Augments totals = augments de l'ocular X augments de l'objectiu.
S'indica posant el nombre amb una x darrera. Ex: 40x, 60x, etc..
Protocol per a elaborar preparacions microscòpiques
2
1) La fixació
Consisteix en tractar la mostra amb conservants o fixadors com alcohol etílic de 70%,
formaldehid, glutaraldehid etc.
2) Inclusió
Si les estructures són tendres les mostres s’han d’incloure en una substància que els
proporcioni consistència, això es denomina inclusió.
El medi d’inclusió més utilitzat és la parafina, però com que és hidròfoba, abans de la
inclusió s’ha de procedir a deshidratar la mostra, que consisteix en passar-la per una
sèrie de dissolucions d’alcohol cada vegada més riques en alcohol.
3) Tall
Per fer els talls suficientment prims s’empra el microtom.
4) La tinció
- La majoria de vegades no es veuen bé les estructures i cal tenyir la preparació per
aconseguir poder observar millor allò que apareix a les preparacions.
- S'utilitzen colorants diferents segons els tipus de material que es vol tenyir, alguns dels
més emprats són: blau de metilè, eosina, fucsina, verd de metilè.
5) El muntatge.
- Una vegada fets els talls i estar tenyits cal muntar-los. Utilitzarem pel muntatge un
portaobjectes i un cobreobjectes.
- Hi ha diverses tècniques de muntatge segons es vulguin fer preparacions temporals o
permanents. Es pot muntar:
Preparacions no definitives: en aigua o en glicerina.
Preparacions definitives: en Bàlsam de Canadà.
6) Procediment per a l'observació de les preparacions.
- Col·loca el mirall de tal manera que es reflecteixi el màxim de llum cap al centre de la
platina. Si el microscopi compte amb font de llum, engega la bombeta.
- Posa la preparació de tal manera que l'objecte quedi al centre de la platina i després
subjecta-la amb les pinces.
- Comença l'observació amb l'objectiu de menys augments.
- Mirant lateralment gira el cargol i fes baixar l'objectiu fins que gairebé toqui la preparació.
- No acostis mai la lent a la preparació mentre miris a través de l'ocular.
- Mira a través de l'ocular i gira el cargol macromètric en sentit contrari, de manera que
l'objectiu es vagi allunyant de la preparació, fins que tenguis la imatge enfocada. Després
amb el cargol micromètric acaba d'enfocar bé la preparació fins que es vegi una imatge
nítida.
- Per canviar l'objectiu, quan tinguis la preparació ben enfocada, gira el revòlver i posa un
objectiu superior ( de més augments). Si veus que la preparació no ha quedat ben
enfocada mou lleugerament el cargol micromètric.
IES Guillem Cifre de Colonya. Tècniques experimentsls BAT1 Professor: Bartomeu Vilanova Suau

Activitats 1
1.1. Fotografia el teu microscopi i senyala totes les seves parts.
1.2. Calcula els augments que pots obtenir amb el teu microscopi.
Objectiu X Ocular = Augments totals
1.3. Dibuixa la forma correcte de col·locar el cobreobjectes sobre el portaobjectes.
1.4. Per què serveix el cargol micromètric?. I la platina?.
1.5. Si observes una alga de 10 mm i l'instrument està equipat amb un objectiu de
20x i un ocular de 10x. Quina serà la grandària en que veuràs l'alga?.
1.6. Si en un microscopi tens oculars de 10x, 12x i 15x i objectius de 25x, 40x i 100x.
Quina combinació hem de posar per a observar a 600x?.
1.7. Per què es tenyeixen les preparacions?.
1.8. En un microscopi, es veu major diàmetre de camp microscopic a 200x o a 400x?
1.9. Cerca informació sobre la microscopia de fluorescència.
IES Guillem Cifre de Colonya. Tècniques experimentsls BAT1 Professor: Bartomeu Vilanova Suau 3

2. EL MICROSCOPI ELECTRÒNIC
Objectius
Activitats 2
4
- Investigar el funcionament tipus i aplicacions del microscopi electrònic
2.1 Cerca informació sobre el funcionament del microscopi electrònic i fes un resum. Quin
poder de resolució i quants augments permet el microscopi electrònic? En quin principi
es basa el seu potencial d’ampliació d’imatge front als augments del microscopi òptic?
2.2 Quina diferència hi ha entre el microscopi electrònic de transmissió i el microscopi
d’escombratge o de rastreig?
2.3 Cerca una fotografia feta amb microscopi de transmissió i una altra amb microscopi
d’escombratge i compara-les
IES Guillem Cifre de Colonya. Tècniques experimentsls BAT1 Professor: Bartomeu Vilanova Suau