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Teórica 10 - Nematodes - Departamento de Biodiversidad y Biología ...

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Procedimientos Soluciones<br />

45<br />

Verificación <strong>de</strong> quistes (hembras grávidas).<br />

Método <strong>de</strong>l vaso: se disgrega el suelo en agua y se mezcla bien. Se <strong>de</strong>ja reposar y se<br />

coloca y se saca verticalmente y <strong>de</strong> forma rápida, un papel <strong>de</strong> diario junto a la pared<br />

<strong>de</strong>l vaso. Los quistes quedan adheridos a él.<br />

Método <strong>de</strong> la botella: mediante un embudo se llena una botella con la muestra, se llena<br />

<strong>de</strong> agua hasta un 75% y se agita durante 5 minutos. Se <strong>de</strong>ja reposar. Se agrega agua<br />

hasta el bor<strong>de</strong>. Los quistes flotan en la superficie.<br />

Lavado.<br />

Los nematodos admiten ser lavados <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong>l tamaño <strong>de</strong>l tamiz correspondiente, por<br />

soluciones <strong>de</strong> hipoclorito <strong>de</strong> sodio al 2,5 % en solución acuosa (agua lavandina diluida<br />

11 veces), durante 5 minutos.<br />

Anestesiado.<br />

Dos gotas <strong>de</strong> éter etílico en 50 mililitros <strong>de</strong> agua <strong>de</strong>clorada, en frasco cerrado.<br />

Desanestesiar en agua <strong>de</strong>clorada.<br />

Fijación.<br />

- FAA: 2 mililitros <strong>de</strong> alcohol etílico; 6 <strong>de</strong> formol solución comercial;<br />

1 <strong>de</strong> ácido acético glacial; 40 <strong>de</strong> agua <strong>de</strong>stilada.<br />

- Ácido acético glacial al 0,5%, entre 60 y 80 °C. Pasar a solución <strong>de</strong> formal<strong>de</strong>hído al<br />

5%, salado (36 por mil) y neutralizado pH 7.<br />

Observación.<br />

En cajas <strong>de</strong> Petri, para microscopio estereoscópico.<br />

Coloración.<br />

“En masa", con ver<strong>de</strong> luz, azul <strong>de</strong> Nilo o azul <strong>de</strong> anilina.<br />

Para preparados semi<strong>de</strong>finitivos: azul <strong>de</strong> algodón - lactofenol.<br />

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