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factores ambientales que influyen en el desarrollo de sporothrix

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MATERIALES Y MÉTODOS<br />

Para <strong>el</strong> aislami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> S. sch<strong>en</strong>ckii a partir <strong>de</strong> su<strong>el</strong>o, se tomó la muestra con una<br />

pe<strong>que</strong>ña pala, perfectam<strong>en</strong>te limpia, a partir <strong>de</strong> la capa superficial <strong>de</strong> la tierra<br />

<strong>el</strong>iminando la materia orgánica pres<strong>en</strong>te; se colectó aproximadam<strong>en</strong>te 100 g, se<br />

guardó <strong>en</strong> una bolsa <strong>de</strong> plástico <strong>de</strong>bidam<strong>en</strong>te eti<strong>que</strong>tada: fecha, número, lugar <strong>de</strong><br />

recolección y tipo <strong>de</strong> planta al <strong>que</strong> estaba asociado este su<strong>el</strong>o. Se pesó 1 g <strong>de</strong><br />

su<strong>el</strong>o y se susp<strong>en</strong>dió <strong>en</strong> 9 mL <strong>de</strong> agua estéril, se <strong>de</strong>jó reposar y se realizaron las<br />

sigui<strong>en</strong>tes diluciones 1:10, 1:100, 1:1000; se sembró 0.5 mL <strong>de</strong> cada dilución <strong>en</strong><br />

agar <strong>de</strong>xtrosa Sabouraud (ADS); los cultivos se incubaron por 30 días a 28° C y se<br />

revisaron diariam<strong>en</strong>te. De las colonias sugestivas a ser S. sch<strong>en</strong>ckii, se realizaron<br />

resiembras hasta obt<strong>en</strong>er colonias libres <strong>de</strong> hongos y/o bacterias contaminantes<br />

(Mackinnon, 1969; Espinosa, 2002).<br />

Id<strong>en</strong>tificación f<strong>en</strong>otípica <strong>de</strong> los aislados: Para estudiar la morfología macroscópica<br />

mic<strong>el</strong>ial, los aislados se sembraron <strong>en</strong> ADS, se incubaron por 7 días a 28 o C, y se<br />

registraron las características <strong>de</strong> las colonias: aspecto, consist<strong>en</strong>cia, pigm<strong>en</strong>tación<br />

<strong>de</strong> la colonia, crecimi<strong>en</strong>to, bor<strong>de</strong>s. Se realizaron microcultivos observándose y<br />

registrándose las características microscópicas d<strong>el</strong> hongo, como son: forma,<br />

tamaño y disposición <strong>de</strong> los conidos, pres<strong>en</strong>cia o aus<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> agregación mic<strong>el</strong>ial.<br />

Para observar la morfología <strong>de</strong> la fase levaduriforme, se sembró un fragm<strong>en</strong>to <strong>de</strong><br />

mic<strong>el</strong>io <strong>en</strong> agar y caldo BHI; se incubó por 5 días a 37 o C y al final <strong>de</strong> este periodo<br />

se registraron las características <strong>de</strong> las colonias; mediante un exam<strong>en</strong> directo se<br />

observó la reversión a levadura.<br />

El pH d<strong>el</strong> su<strong>el</strong>o se midió directam<strong>en</strong>te con un pot<strong>en</strong>ciómetro, <strong>de</strong> cada muestra<br />

estudiada <strong>de</strong> cada municipio y se sacó un promedio.<br />

La <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong> calcio, hierro y magnesio se realizó por la metodología <strong>de</strong><br />

valoración por E.D.T.A. y Absorción Atómica. (NOM. AS-32-1998, NOM. AS-20-<br />

1998 SEMARNAP)<br />

Figura 2 Municipio <strong>de</strong> Huauchinango, Puebla.<br />

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