Ensayo de toxicidad crónica con el alga Selenastrum capricornutum ...

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Ensayos para agua dulce
% I = 100 – [(promedio células/mL de las réplicas en la dilución / promedio
células/mL de las réplicas del control)] x 100
Tabla 5.3. Condiciones recomendadas para las pruebas de toxicidad crónica
con Selenastreum capricornutum
Tipo de ensayo Estático
Temperatura 24 ± 2 °C
Calidad de luz Fluorescente, blanco-frío
Intensidad luminosa 60-80 µE/m 2 /s (4,000 ± 10% luxes)
Fotoperíodo Iluminación continua
Recipientes de prueba Viales de 20 mL
Volumen de la solución de prueba 2.6 mL
Edad del cultivo usado como inóculo 4 a 7 días
Densidad celular inicial 104 células/mL
Número de réplicas 3
Tipo de agitación Manual, discontinua
Agua de dilución Solución amortiguadora de bicarbonato de sodio
Factor de dilución 0.3 o 0.5
Duración de la prueba 72 horas
Efecto medido Crecimiento (conteo)
Resultado final IC 50
Aceptabilidad de los resultados Densidad celular en el control >16 veces a la
densidad inicial
Control positivo Cu(II), a partir de una solución de CuSO 4
Conteo de las algas con la Cámara Neubauer
La cámara Neubauer, también conocida como hemocitómetro, consta de un
cubre-objetos de cuarzo y un porta-objetos de un grosor mayor a los de uso
común. En la parte superior del porta-objetos se encuentran cuatro canales
longitudinales y uno transversal central. En la parte superior e inferior del
canal transversal están grabadas dos rejillas de 9 mm 2 de superficie, las cuales
están a su vez subdivididas en una cuadrícula más pequeña (figura 5.4. A y
B) (UNAM, 1986).
Usando el objetivo de 10X de un microscopio óptico, se enfoca de forma
que en el campo se cubra un cuadrado cuya área corresponde a 1 mm 2 , generalmente
se trabaja con el cuadro central. El área del cuadro central es de 1
mm 2 y se encuentra subdividida en 25 cuadrados. Cada uno de estos cuadrados
mide 0.2 mm de lado, por lo que el área de cada uno será 0.04 mm 2 .