Ensayo de toxicidad crónica con el alga Selenastrum capricornutum ...

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Ensayos para agua dulce
Soluciones de macronutrientes
Adicionar en los frascos respectivos de 500 mL las cantidades de las sales
indicadas a continuación (tabla 5.2).
Tabla 5.2. Reactivos utilizados en la preparación de la solución de macronutrientes para el
ensayo con Selenastrum capricornutum
Frasco Compuesto Fórmula Masa (g)
Solución 2 Nitrato de sodio NaNO 3 12.25
Solución 3 Sulfato de magnesio MgSO 4 •7H 2 O 7.35
Solución 4 Fosfato de potasio K 2 HPO 4 0.522
Solución 5 Bicarbonato de sodio NaHCO 3 7.5
Mezclar bien hasta disolver y posteriormente adicionar agua hasta alcanzar
el volumen de aforo.
Las soluciones stock pueden ser conservadas refrigeradas (sin congelar)
durante dos meses.
Por cada litro de medio de cultivo que se desee preparar, se adiciona en
agua destilada 1 mL de cada una de las cinco soluciones en forma ordenada.
Así, se debe iniciar con la 1 hasta terminar con la 5, llevando a volumen de 500
mL al finalizar. Se sugiere no alterar el orden de adición de las soluciones ya
que se pueden formar precipitados difíciles de eliminar. Mezclar bien después
de la adición de cada solución.
Al final, el pH del medio deberá ser de 7.5 ± 0.1, por lo que es necesario
ajustarlo, ya sea con NaOH o HCl 1 N. Inmediatamente, filtrar el medio bajo
condiciones asépticas (mechero o campana de flujo laminar) a través de una
membrana de éster de celulosa de 0.22 µm de abertura de poro y 47 mm de
diámetro. El sistema de filtración y el matraz de captación deben estar estériles.
Para la filtración se puede utilizar una bomba de vacío. El medio nutritivo
esterilizado se inocula con las algas.
Medio nutritivo enriquecido (18X)
Este medio se prepara a partir de las soluciones 1, 2, 3, 4, y 5 empleadas en
la elaboración del medio nutritivo para la proliferación de algas. Para la preparación
se recomienda utilizar un recipiente aforado de 1 L debidamente
rotulado. Se coloca 800 mL de agua a los cuales se adiciona 18 mL de cada