Documento completo - SeDiCI - Universidad Nacional de La Plata

laboratorio. La alimentación se realizaba conjuntamente con el cambio de medio, y su
frecuencia era diaria y en el caso de no necesitar neonatos para ensayos, se realizaba
cada tres días. Se agregaba 1/3 del medio con algas, con una concentración
aproximada de 10 6 células/ml. Si era necesario diariamente se retiraban los neonatos,
los cuales eran destinados al desarrollo de pruebas o eliminados. Para la limpieza, se
removían las mudas y los restos de alimento. Al finalizar, se recuperaba el volumen de
agua en cada recipiente haciendo el recambio de 1/3 del volumen con agua fresca. El
último día de cada ciclo se separan las hembras de mayor tamaño y se pasaban al
recipiente de la semana correspondiente. Los organismos mayores a cuatro semanas se
descartaban y eran reemplazados por nuevas hembras de menor edad. El día previo a
realizar ensayos se extraían los neonatos presentes en el cultivo, para de esa forma,
garantizar que los neonatos encontrados al día siguiente tenían menos de 24 h.
Control del cultivo
Se construyó una carta control para evaluar la sensibilidad de los organismos a partir
de dicromato de potasio (K2Cr2O7) como tóxico de referencia. Se calculaba su LC50
mensualmente y se incorporaba a la carta control. A partir de estos resultados, se
determinaba la LC50 promedio, así como la desviación estándar (σ) de la LC50. Los
límites LC50 ± 2σ, corresponderán al intervalo de concentración aceptable para aceptar
los resultados de los ensayos (Castillo Morales, 2004).
Procedimiento de la prueba
Para el desarrollo de pruebas de toxicidad aguda con D. magna se emplearon neonatos
(