manual de de Bioseguridad de CONICYT

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42 Virus del grupo de Bioseguridad nivel 4 (Los virus transmitidos por artrópodos están marcados con un asterisco). Arenaviridae: Virus Lassa. Junin. Machupo. Sabia. Guanarito. Bunyaviridae*: Género Nairovirus, Fiebre hemorrágica de Congo-Crimea. Filoviridae: Virus Marburg. Virus Ebola. Flaviviridae*: Complejo de las encefalitis transmitidas por garrapatas, incluyendo la encefalitis de primavera-verano de Rusia; Virus del bosque de Kyasanur; Virus de la fiebre hemorrágica de Omsk. Herpesviridae: Alphaherpesvirinae, Género Simplexvirus Virus Herpes B (virus de los monos). Poxviridae, Género Orthopoxvirinae Viruela, Monkeypox. 8.6. Bioseguridad en el manejo de vectores virales y virus quiméricos Una partícula viral recombinarte se define como un virus genéticamente modificado, que porta uno o más genes de origen no viral que sirve de vehículo para el trasporte de estos genes a un blanco biológico (célula). Los vectores virales aprovechan las estrategias desarrolladas evolutivamente por los virus para poder infectar células para introducir información génica en una célula blanco. Se caracterizan por permitir una alta eficiencia de la transferencia de genes, en comparación con estrategias alternativas como son los vectores no virales (moléculas coadyuvantes que facilitan el ingreso de ácidos nucleicos a las células). Los virus utilizados con mayor frecuencia en protocolos de transferencia genética son: los retrovirus, los adenovirus, los virus asociados a adenovirus y los virus de herpes simplex. Idealmente el diseño del vector viral asegura que éste sólo sirve para el transporte de material génico exógeno siendo incapaz de dar origen a nuevas partículas virales replicativas en las células transducidas. En consecuencia, se entiende que un vector viral no puede producir ningún escape ni
43 reversión en formas virulentas. Por ello, los vectores virales básicos (no incluyen genes exógenos, y carecen de genes virales que permitan su replicación) se clasifican dentro del grupo de riesgo biológico de nivel 2 y deben ser manejados en un laboratorio de Bioseguridad de nivel 2 (BS-2) y en un gabinete de seguridad de nivel 2. Sin embargo, el riesgo biológico real de un vector viral (vehículo) puede variar a un nivel de Bioseguridad mayor. El nivel de riesgo biológico real de estos vectores está determinado por el riesgo biológico, para el operador y el ambiente, de él o los genes exógenos que éste porta así como por el tropismo de la partícula viral recombinante. El tropismo viral se refiere a la capacidad de una partícula viral de interactuar con una célula blanco de manera específica. Existe una gran gama vectores virales con diferente tropismo que varia entre aquellos de amplio tropismo (capaces de infectar un gran número de tipos celulares diferentes y no se encuentran restringidos a una sola especie) a aquellos que presentan un tropismo extremadamente selectivo (capaces de infectar un solo tipo celular de una especie en particular). En consecuencia, para determinar el nivel de Bioseguridad real de un vector viral se debe considerar el tropismo de éste y adicionar la evaluación del riesgo potencial que representa él o los genes exógenos introducidos en vector. Los virus recombinantes que contienen una mezcla de genes de dos o más virus diferentes merecen una consideración especial. Dentro de esta categoría se incluye a los virus de genoma completo y los replicones de genoma trunco. Sin embargo, la clasificación en los grupos de riesgo respectivo debe hacerse considerando la habilidad de estos virus quiméricos de replicar en cultivo celular y en modelos animales, sus patrones de virulencia o atenuación con respecto a las cepas parentales, y capacidad de reversión hacia especies de alta virulencia y patogenicidad con respecto a las cepas parentales. Dependiendo de los parámetros anteriores los virus quiméricos deben ser manejados en un laboratorio de Bioseguridad de nivel 2 (BS-2) o 2 y en un gabinete de seguridad de nivel 2.
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