Marcadores moleculares - LAC Biosafety

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Principios de la técnica AFLPGAATTCTTAACTTAAGAATT1. Digestión delADN GenómicoEco RIMse IAATTCTTAAAdaptador Eco RIGAdaptador EcoRI: 5’-CTCGTAGACTGCGTACCCATCTGACGCATGGTTAA-5’AATTCNTTAAGNTATAATAdaptador Mse INTTANAATLiberación de fragmentos conterminales Eco RI y Mse I2. Ligación conadaptadores desecuencia conocidaAdaptador Msel: 5’-GACGATGAGTCCTGAGTACTCAGGACTCAT-5’
Primer EcoRI+1(E+1): 5’-GACTGCGTACCAATTCN5 TAATTCNTTAAGNPrimer Msel+1 (M+1): 5’-GATGAGTCCTGAGTAAN’NTTANAATG 53. Amplificación preselectivaAATTCTNNTTAAGANN5’ TTGAATTCTNNTTAAGANNAATTCTTGTTAAGAACNNCTTANNGAAT4. Amplificación selectivaNNCTTANNGAATAGG 5’TCCTTAAGGAATElectroforesis en geles de poliacrylamida
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ConsideraciónLa selección asistid
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