Plateforme d'expression hétérologue et d'électrophysiologie végétale

Plateforme d'expression hétérologue
et d'électrophysiologie végétale
Contexte institutionnel
Le laboratoire de Biochimie et Physiologie Moléculaire des Plantes
(BPMP) est placé sous la quadruple tutelle du CNRS (UMR 5004),
de l'INRA, de SupAgro et de l'Université Montpellier 2. BPMP
héberge une plate-forme d'expression hétérologue et
d'électrophysiologie végétale (EHEV-BPMP) au sein de l'Institut de
Biologie Intégrative des Plantes - Claude Grignon (IBIP-CG), qui est
un bâtiment commun à BPMP et au Laboratoire d'Écophysiologie
des Plantes sous Stress Environnementaux (LEPSE, UMR INRA-
SupAgro).
L'IBIP-CG, avec une douzaine d’équipes de recherche
(environ 200 personnes) rassemble les compétences et
équipements pour caractériser les chaînes causales qui vont du
génotype au phénotype, et contrôlent ainsi les réponses
adaptatives de ce dernier aux facteurs environnementaux
abiotiques (lumière, température, disponibilité hydrique et
minérale). Il s’agit d’intégrer les approches ascendantes (des gènes
au phénotype) et descendantes (du phénotype aux gènes) pour
caractériser les conséquences phénotypiques de génotypes
donnés, placés dans des scénarios environnementaux de lumière,
de température et de disponibilité hydrique et minérale définis.
Cette intégration constitue le support de modélisations de la
croissance et du fonctionnement de la plante en peuplement.
Après la phase d’installation dans des locaux spécialement
amménagés pour elles, les UMRs BPMP et LEPSE se sont
engagées, avec un soutien fort de la Région Languedoc-Roussillon
(CPER 2007-2013), dans la constitution d'un "Grand Plateau
Technique" intitulé "du Gène au Phénotype Intégré" (GPT-GPI) qui
comporte en particulier la plate-forme de phénotypage automatisée
d'Arabidopsis "PHENOPSIS". Dans ce contexte, la plate-forme
EHEV-BPMP a obtenu pour sa jouvence et son développement,
une dotation de 121 k€ au titre du CPER 2007-2013. Cette plateforme
EHEV-BPMP est placée sous la responsabilité de
Jean-Baptiste Thibaud (directeur de recherche CNRS, BPMP).
Données techniques
La plate-forme EHEV-BPMP est déployée sur plus de 110 m2 de
locaux au premier étage du bâtiment principal de l'IBIP-CG dont la
construction a été achevée en 2005 sur le Campus "la Gaillarde" de
Montpellier SupAgro.
Des locaux ont été spécifiquement conçus pour accueillir
cette plate-forme: en particulier les postes d'enregistrement
électrophysiologique sont installés sur des dalles séparées de la
dalle porteuse du bâtiment par un matériau atténuant les vibrations,
et ils bénéficient d'une prise de terre spécifique qui limite les
perturbations liées au fonctionnement des autres installations
électriques du bâtiment. Les postes d'enregistrement bénéficient
ainsi d'un niveau de bruit électrique et mécanique particulièrement
faible.
Le matériel regroupé sur la plate-forme EHEV-BPMP
représente un patrimoine estimé à 1-1,5 million d'euros. Il se
répartit comme indiqué ci-dessous.
Expression hétérologue- La plate-forme offre des possibilités
d'expression hétérologue dans différents contextes :
(i) lignées cellulaires animales (COS, CHO, Sf9) à la culture
desquelles est dédiée une salle blanche (Fig.1) disposant, avec son
sas technique, d'un équipement complet (surpression par air filtré,
climatisation autonome, deux incubateurs à CO2, deux hottes
stériles, centrifugeuse réfigérée, etc.),
Fig. 1. Salle blanche
page 1
(ii) ovocytes de Xénope, avec une pièce dédiée au prélèvement
chirurgical des ovocytes et à leur incubation à 20°C et les
équipements nécessaires à leur micro-injection par du matériel
génétique (3 postes de micro-injection disponibles), (iii) contexte
végétal (expression transitoire par "floral dip", "PEG" et
"biolistique"). Ces systèmes d'expression sont utilisés à BPMP,
principalement pour la caractérisation de protéines membranaires
impliquées dans le transport. S'ils offrent la possibilité d'étudier les
propriétés fonctionnelles de ces protéines par différents moyens
disponibles à BPMP (spectrométrie 15 N pour les transporteurs
d'azote/acides aminés, gonflement osmotique de protoplastes ou
ovocytes pour les aquaporines, imagerie de l'expression et du
traffic endocellulaire, etc., etc.) et sont à ce titre utilisés par
pratiquement toutes les équipes de BPMP, ces systèmes
d'expression hétérologue sont plus particulièrement exploités dans
la seconde composante de la plate-forme dédiée aux
enregistrements électrophysiologiques.
a b
Fig. 2. Postes de patch-clamp
Electrophysiologie- La plate-forme regroupe sept postes
d'enregistrement dédiés à des applications spécifiques.
Un premier poste de patch-clamp est équipé d'un laser
(Fig.2a) pour la microdissection des la paroi pecto-cellulosique et
permet des enregistrements en patch-clamp in situ sur les poils
racinaires (unique en France, un autre poste connu en Angleterre).
BPMP - IBIP-CG (bât. 7), Campus SupAgro, 2 place Viala, 34060 Montpellier cedex 2, France juin 2011

Un deuxième poste de patch-clamp (Fig.2b) est équipé d'un
système d'imagerie de la fluorescence (monochomateur + source
conventionnelle avec filtres, caméra ultra-sensible refroidie) et
permet le patch-clamp couplé à l'imagerie (GFP ou calcique, par
exemple). Pour des raisons techniques, ces deux postes sont
installés dans des locaux dédiés individuels; outre leurs spécificité,
ils sont disponibles pour des enregistrements en patch-clamp
conventionnels, sur protoplaste, cellule animale en culture ou
ovocyte de Xénope.
Les cinq autres postes sont installés dans une grande salle
attenante à l'atelier de fabrication des microélectrodes. Deux
postes au design identique sont dédiés aux enregistrements sur
ovocyte de Xénope (Fig. 3). Il permettent le voltage-clamp à deux
électrodes (étude de la conductance membranaire) et le patchclamp
(enregistrement de canaux unitaires). Ils sont tous les deux
équipés de "sondes de bain", nécessaires pour enregistrer les forts
courants souvent observés dans les ovocytes surexprimant des
canaux. La microinjection d'effecteurs chimiques ou
pharmacologiques dans l'ovocyte en cours d'enregistrement est
possible sur les deux postes. L'ergonomie de ces deux postes a été
optimisée pour en faciliter l'accès à des opérateurs débutants
(quelques jours de formation seulement sont nécessaires).
Fig. 3. Postes enregistrement (ovocytes et single channel).
Le troisième poste de patch-clamp de la plate-forme (Fig. 3)
a été optimisé pour les enregistrements de courants à travers des
canaux ioniques isolés: l'essentiel de l'équipement constituant ce
poste est alimenté sur une batterie d'accumulateurs 12V. Le bruit
RMS sur ce poste est aussi faible que le niveau nominal de
l'amplificateur (Axopatch 200B), soit 15 fA à 1 kHz.
Un poste permet les enregistrements intra et extracellulaires
à l'aide de microélectrodes à potentiel et/ou de
microélectrodes ioniques spécifiques (H + , K + , NO3 - ,…). Le design
de ce poste est optimisé pour les racines et permet, par exemple la
mesure simultanée de la différence de potentiel et du flux ionique
transmembranaires (Fig. 4).
Fig. 4. Postes d'enregistrement (syst. racinaire et syst. folaire).
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Le dernier poste (en construction, Fig. 4) est dédié aux
enregistrements sur plante entière (Arabidopsis ou plantules de
graminées). Il permet non seulement les enregistrements
intracellulaires de potentiel de membrane ou de concentration
ionique, mais aussi l'enregistrement extracellulaire de signaux
électriques propagés en réponse à divers stimuli. L'équipement de
ce poste permet l'acquisition en différentiel sur 40 canaux
différents (électrodes extra-cellulaires), pour enregistrer les
signaux électriques (de type potentiel d'action) et cartographier
leur propagation dans le système foliaire.
Installations périphériques- Ces installations comprennent (i) un
atelier de fabrication des microélectrodes (Fig.5) avec 1 étireuse
verticale pour les microélectrodes intracellulaires, les
microélectrodes ion-sélectives et les pipette de micro-injection,
une étireuse verticale en deux temps pour les pipettes de patchclamp,
deux étireuses horizontales programmables, dont une avec
"fire-polishing" automatique, et deux microforges, et (ii) un atelier
de micro-mécanique et électronique pour la maintenance et la
réalisation/usinage de dispositifs expérimentaux (outillage de
précision, micro-fraiseuse, micro-tour, perceuse sur colonne,
appareillage de mesure électronique…).
Fig.5. Atelier de fabrication des électrodes (étireuses, microforges)
Assurance-qualité, sécurité, gestion
La connexion à la terre et la suspension de la dalle de sol dès la
conception du bâtiment diminuent les niveaux de bruits électrique
et mécanique. Toutes les cages de Faraday sont en moustiquaire
de cuivre et les tables anti-vibration pneumatiques sont
connectées à la fois sur le réseau de distribution de l'air comprimé
du laboratoire et sur un système de secours autonome. Le vide est
distribué sur tous les postes pour l'aspiration des effluents de
perfusion dans des conteneurs scellés.
Sur chaque poste d'enregistrement la chaîne complète
d'acquisition et d'enregistrement des signaux est assemblée dans
des baies-rack 19" mobiles alimentées par onduleur/régulateur de
tension, pour une protection optimale du matériel et la sécurisation
des enregistrements en cas de coupure accidentelle (autonomie
nominale sur chaque poste de 15 minutes, en enregistrement).
L'ensemble des locaux de la plate-forme bénéficie d'une
climatisation réversible indépendante.
Les principaux protocoles pour la préparation des solutions
de perfusion, les réglages des étireuses, la programmation des
séquences de voltage-clamp sont consignés et accessibles sur
l'Intranet du laboratoire.
La gestion des principaux consommables est assurée par
la plate-forme et la maintenance des matériels est financée sur
une ligne spécifique du budget de l'UMR BPMP.
L'agenda de la plate-forme (réservation des postes
d'enregistrement) est accessible par une application en ligne sur
l'Intranet de BPMP.
Un comité des usagers de la plate-forme est réuni
annuellement par le responsable scientifique.
La création d'un poste d'Ingénieur pour l'animation de la
plate forme a été demandée à l'INSB-CNRS (arbitrage en attente).
BPMP - IBIP-CG (bât. 7), Campus SupAgro, 2 place Viala, 34060 Montpellier cedex 2, France juin 2011

Activités de formation
Les installations d'électrophysiologie de BPMP ont connu une
phase de fort développement à partir du début des années 1990.
Depuis près de 20 ans, ces installations constituent un atout
méthodologique fort qui identifie BPMP dans la communauté
scientifique nationale. La mise en œuvre de techniques spécifiques,
appartenant au domaine de la biophysique, est évidemment au
centre du projet scientifique de BPMP qui concerne l'étude des
déterminants moléculaires du statut hydrominéral de la plante dans
ses aspects nutritionnels et adaptatifs aux contraintes abiotiques.
Les bases théoriques et les approches expérimentales de la
biophysique des transports membranaires chez les plantes sont
depuis longtemps inscrites dans l'offre de formation de BPMP aux
étudiants de Montpellier SupAgro et de l'Université de Montpellier 2.
Les chercheurs praticiens de l'électrophysiologie à BPMP
participent non seulement aux enseignements théoriques dans ce
domaine (niveau M2R, en particulier), mais ils peuvent aussi
proposer un enseignement pratique grâce aux équipements
disponibles sur la plateforme. De nombreux étudiants de niveau
M1, M2 ou Doctorat ont ainsi été formés en électrophysiologie sur
la plate-forme EHEV-BPMP. Quatre d'entre eux (thèses dirigées
par le responsable scientifique de la plate-forme) sont actuellement
des Chargés de Recherche de l'INSB-CNRS : Anne-Aliénor Véry
(section 28, BPMP UMR 5004), Cyril Goudet (section 25, IGF UMR
5203), Benoît Lacombe (section 28, BPMP, UMR 5004), Eric Hosy
(section 24, IINS, UMR 5297).
La plateforme EHEV-BPMP est partie prenante de l'Ecole
d'Electrophysiologie de Montpellier (E2M, co-organisée par les
Service de Formation Permanente du CNRS, de l'INRA et de
l'INSERM, plaquette consultable à l'URL http://www.canauxioniques.fr/congress/images/stories/formation/avise2m2011.pdf).
Cette "école thématique" offre, sur deux semaines, à des
doctorants, post-doctorants et chercheurs de laboratoires publics
ou privés, une formation théorique (une semaine) et pratique (une
autre semaine) en électrophysiologie. Jean-Baptiste Thibaud, le
responsable scientifique de la plate-forme EHEV-BPMP, fait partie
de l'équipe pédagogique de l'E2M et intervient dans la formation
théorique. La plate-forme EHEV-BPMP accueille plusieurs élèves
de l'E2M pour la semaine de formation pratique.
La plate-forme EHEV-BPMP accueille également de jeunes
chercheurs étrangers pour des formations de courte durée
(généralement expression et caractérisation de canaux ioniques en
ovocytes de xénope), en particulier dans le cadre de "Partenariats
Hubert Curien" (PHC): En 2010 et 2011, par exemple, chercheurs
de l'Université de Münster (Allemagne, PHC "Procope") ou de
l'Université de Lublin (PHC "Polonium").
Collaborations de recherche
En dehors de son activité de formation (ci-dessus), la plateforme
EHEV-BPMP n'a jamais proposé jusqu'ici de prestation de
service en expérimentation électrophysiologique, et elle n'a pas
vocation à s'engager dans cette voie à court terme. Ce dispositif
expérimental collectif est utilisé, pour leurs programmes de
recherche propres par au moins 4 des équipes de BPMP
("Aquaporines"/C. Maurel, "Canaux Ioniques"/H. Sentenac;
"Intégration des Fonctions Nutritives"/A. Gojon, "Signalisation
Electrique et Calcique"/J.-B. Thibaud). En plus de cela, cette plateforme
est depuis longtemps au service d'un réseau important de
collaborations scientifiques nationales et internationales. Ces
collaborations reposent sur deux atouts de BPMP : (i) l'expertise
scientifique en biophysique des transport, qui est une
caractéristique de cette UMR, répartie sur au moins 4 des équipes
de recherche de BPMP et (ii) l'existence de cet ensemble (structuré
en plate-forme, unique en France, exceptionnel en Europe, pour la
recherche en végétal) de postes de travail permettant de
caractériser l'activité de systèmes de transport dans un contexte
d'expression hétérologue ou natif, c'est à dire la caractérisation
fonctionnelle de ces systèmes à des niveaux d'intégration allant du
moléculaire au cellulaire et à la plante.
Une liste de collaborations récentes (depuis 2000) et/ou en
cours est donnée ci-dessous. Cette liste témoigne de l'étendue des
sujets de recherche dans lesquels la maîtrise des techniques
d'expression hétérologue et d'électrophysiologie est un atout
précieux. Seules, les publications (hors articles de revue) issues de
ces collaborations sont citées ci-dessous. Les intitulés des
laboratoires d'appartenance des équipes impliquées dans ces
page 3
collaborations sont ceux d'aujourd'hui (quand elles sont affiliées au
CNRS les UMRs sont indiquées avec leur numéro CNRS). Ne sont
pas citées les publications des équipes de BPMP ayant fait usage
de la plate-forme sans collaboration avec d'autres équipes.
• Etude de l'impact de toxines fongiques sur la conductance
membranaire de la plante hôte (voltage-clamp sur bicouches
artificielles). Coll. avec UMR1229-MSE (Dijon, France).
Goudet C, Milat M-L, Sentenac H, Thibaud J-B, (2000) Beticolins,
non-peptidic polycyclic molecules produced by the phytopathogenic
fungus Cercospora beticola, as a new family of ion channel forming
toxins. Mol Plant Microbe Inter 13 : 203-209
• Caractérisation de systèmes de transport de potassium chez
Vitis vinifera, étude de leur rôle dans la balance acide des baies
chez des cépages de cuve. Coll. avec UMR 1334-AGAP
(Montpellier, France) et UMR 1083-SPO (Montpellier, France).
Pratelli R, Lacombe B, Torregrosa L, Gaymard F, Romieu C, Thibaud
J-B, and Sentenac, H. (2002) A grapevine gene encoding a guard cell
K + channel displays developmental regulation in the rapevine berry.
Plant Physiol 128:564-577
Pratelli R, Hosy E, Lacombe B, Romieu C, Torregrossa L, Thibaud J-
B, Sentenac H (2004) "The use of genes encoding outward potassium
channels to modify a phenotype related to the size of a stock organ
and to the acid organic content of this organ" Application for French
patent N°04/50199 deposited on February 03 2004. Application for
International patent N°PCT/FR2005/050060 deposited on February
03 2005
Cuéllar T, Pascaud F, Verdeil J-L, Torregrosa L, Adam-Blondon A-F,
Thibaud J-B, Sentenac H, Gaillard I (2009) A Grapevine Shaker
inward K + channel activated by calcineurin B-like calcium sensor 1protein
kinase CIPK23 network is expressed in grape berries under
drought stress conditions. Plant J 61: 58-69.
• Caractérisation de systèmes de transport ionique impliqués dans
la symbiose mycorhizienne. Coll. avec UMR1222-Eco&Sol
(Montpellier, France), UMR5557 Ecologie microbienne
(Villeurbanne, France)
Plassard C, Guérin-Laguette A, Véry A-A, Casarin V, Thibaud J-B
(2002) Local measurements of nitrate and potassium fluxes along
roots of maritime pine. Effects of ectomycorrhizal symbiosis. Plant
Cell Environ 25:75-84.
Corratgé C, Zimmermann S, Lambilliotte R, Plassard C, Marmeisse R,
Thibaud JB, Lacombe B ,Sentenac H (2007) Molecular and
functional characterization of a Na+-K+ transporter from the TRK
family in the ectomycorrhizal fungus Hebeloma cylindrosporum. J
Biol Chem 282:26057–26066.
• caractérisation fonctionnelle (en contexte hétérologue) du
système AtHKT1 et rôle de ce système dans la tolérance au sel.
Coll. avec UMR 759-LEPSE (Montpellier, France), Nagoya
University (Nagoya, Japon), Fukui Medical University (Fukui,
Japon), University of Cambridge (Cambridge, Royaume-Uni).
Berthomieu, P., Conéjéro, G., Nublat, A., Brackenbury, W.J., Lambert,
C., Savio, C., Uozumi, N., Oiki, S., Yamada, K., Cellier, F., Gosti,
F., Simonneau, T., Essah, P.A., Tester, M., Véry, A-A, Sentenac H,
Casse, F (2003) Functional analysis of AtHKT1 in Arabidopsis
shows that Na + recirculation by the phloem is crucial for salt
tolerance. EMBO J. 22, 2004-2014.
• Appui (électrophysiologie) à l'étude du rôle de canaux de type
"CNGC" dans la résistance au stress (interaction hôte-pathogène).
Coll. avec UMR 2594-LIPM (Toulouse, France).
Balagué C, Lin B, Alcon C, Flottes G, Malmström S, Köhler C,
Neuhaus G, Pelletier G, Gaymard F, Roby D (2003) HLM1, an
essential signaling component in the hypersensitive response, is a
member of the cyclic nucleotide-gated channel ion channel family.
Plant Cell 15:365-379.
• Etude chez le riz du rôle d'une famille de transporteurs de K +
homologues des Shaker et HKT d'Arabidopsis. Coll. avec
UMR 1334-AGAP (Montpellier, France), Centre de
Biotechnologie de Borj-Cédria (Hammam-Lif, Tunisie), Université
Polytechnique de Madrid (Madrid, Espagne).
Jabnoune M, Espeout S, Mieulet D, Fizames C, Verdeil J-L, Conéjéro
G, Rodriguez-Navarro A, Sentenac H , Guiderdoni E, Abdelly C,
Véry A-A (2009) Diversity in expression patterns and functional
BPMP - IBIP-CG (bât. 7), Campus SupAgro, 2 place Viala, 34060 Montpellier cedex 2, France juin 2011

properties in the rice HKT transporter family. Plant Physiol
150:1955-1971.
• Appui (électrophysiologie) à une étude du mode d'action d'un
éliciteur bactérien et de son interaction avec les membranes
végétales. Coll. avec UMR 1301-IBSV (Sophia Antipolis, France).
Racapé J, Belbahri L, Engelhardt S, Lacombe B, Lee J, Lochman J,
Marais A, Nicole M, Nürnberger T, Parlange F, Puverel S, Keller H
(2005) Ca 2+ -dependent lipid binding and membrane integration of
PopA, a harpin-like elicitor of the hypersensitive response in tobacco.
Mol Microbiol 58:1406–1420.
• caractérisation fonctionnelle (en ovocyte de Xénope) de NRT1.1
comme un transporteur d'auxine. Coll. avec Flanders Institute for
Biotechnology (Gent, Belgique), Institute of Experimental Botany
(Prague, République Tchèque) et Umea Plant Science Center
(Umea, Suède).
Krouk G, Lacombe B, Bielach A, Perrine-Walker F, Malinska K,
Mounier E, Hoyerova K, Tillard P, Leon S, Ljung K, Zazimalova E,
Benkova E, Nacry P, Gojon A (2010) Nitrate-Regulated Auxin
Transport by NRT1.1 Defines a Mechanism for Nutrient Sensing in
Plants. Dev Cell 18:927–937.
• Caractérisation fonctionnelle (en contexte hétérologue) de canaux
de type Shaker du Melon. Coll. avec Plant Science Institute
(Shangaï, République Populaire de Chine)
Zhang Y-D, Véry A-A, Wang L-M, Deng Y-W, Sentenac H, Huang D-F
(2011) A K + channel from salt-tolerant melon inhibited by Na + . New
Phytol 189:856-868..
• Caractérisation fonctionnelle (en contexte hétérologue)
d'aquaporines. Coll. avec Physiologie Cellulaire Végétale-CEA
(Grenoble, France), UMR 547 PIAF (Clermont-Ferrand, France),
UMR LMGE (Aubière, France), UPRES EA 1207 (Orléans,
France), USC 2030 ARCHE (Orléans, France), UMR A462
SAGAH (Angers, France)
Tournaire-Roux C, Sutka M, Javot H, Gout E, Gerbeau P, Luu D-T,
Bligny R, Maurel C, (2003) Gating of aquaporins by cytosolic pH
regulates root water transport during anoxic stress. Nature 425:393-
397
Lopez D, Bronner G, Auguin D, Brignolas F, Bourgerie S, Carpin S,
Tournaire-Roux C, Maurel C, Fumanal B, Brunel N, Sakr S, Label P,
Julien JL, Gousset-Dupont A, Venisse JS (2011) Insights into plant
XIP aquaporins: evolutionary expansion, protein functionality and
environmental regulation. J Exp Bot (en révision).
• Etudes de canaux Shaker d'Arabidopsis, de génotypes
d'Arabidopsis porteurs de mutations sur des gènes de canaux
Shaker. Coll. avec UMR 759-LEPSE (Montpellier, France),
UMR 1318-IJPB (Versailles, France), Max-Plank Institute (Golm,
Allemagne), Université de Münster (Münster, Allemagne),
Université de Potsdam (Potsdam, Allemagne), Universidad de
Talca (Talca, Chili).
Mouline K, Véry A-A, Gaymard F, Boucherez J, Pilot G, Devic M,
Bouchez D, Thibaud J-B, Sentenac H, (2002) Pollen tube
development and competitive ability are impaired by disruption of a
Shaker K + channel in Arabidopsis. Gene Dev 16:339-350.
Hosy E, Vavasseur A, Mouline K, Dreyer I, Gaymard F, Porée F,
Boucherez J, Lebaudy A, Bouchez D, Véry A-A, Simonneau T,
Thibaud J-B, Sentenac H (2003) The Arabidopsis outward K + channel
GORK is involved in regulation of stomatal movements and plant
transpiration. Proc Natl Acad Sci USA 100:5549-5554.
Dreyer I, Porée F, Schneider A, Mittelstadt J, Bertl A, Sentenac H,
Thibaud J-B, Müller-Röber B, (2004) Assembly of plant Shaker-like
K-out channels requires two distinct sites of the channel alphasubunit.
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Michard E, Lacombe B, Porée F, Müller-Röber B, Sentenac H, Thibaud
JB, Dreyer I, (2005) A unique voltage sensor sensitizes the potassium
channel AKT2 to phosphoregulation. J Gen Physiol 126:605-17.
Porée F, Wulfetange K, Naso A, Carpaneto A, Roller A, Natura G, Bertl
A, Sentenac H, Thibaud J-B, Dreyer I, (2005) Plant Kin and Kout
channels: Approaching the trait of opposite 3 rectification by
analyzing more than 250 KAT1–SKOR chimeras. Biochem Bioph
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Johansson I, Wulfetange K, Porée F, Michard E, Gajdanowicz P,
Lacombe B, Sentenac H, Thibaud JB, Mueller-Roeber B, Blatt B,
Dreyer I, (2006) External K + modulates the activity of the Arabidopsis
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potassium channel SKOR via an unusual mechanism. Plant J
46:269-281.
Xicluna J, Lacombe B, Dreyer I, Alcon C, Jeanguenin L, Sentenac H,
Thibaud JB, Cherel I (2007) Increased functional diversity of plant
K+ channels by preferential heteromerization of the Shaker-like
subunits AKT2 and KAT2. J Biol Chem 282:486-494.
Lebaudy A, Hosy E, Simonneau T, Sentenac H, Thibaud J-B, Dreyer I
(2008) Heteromeric K + channels in plants. Plant J 54:1076-1082.
Lebaudy A, Vavasseur A, Hosy E, Dreyer I, Leonhardt N, Thibaud J-B,
Véry A-A, Simonneau T, Sentenac H (2008) Plant adaptation to
fluctuating environment and biomass production are strongly
dependent on guard cell potassium channels. Proc Nat Acad Sci
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Lebaudy A, Pascaud F, Véry A-A, Alcon C, Dreyer I, Thibaud J-B,
Lacombe B (2010) Preferential KAT1-KAT2 heteromerization
determines inward K + current properties in Arabidopsis guard cells. J
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Gajdanowicz P, Michard E, Sandmann M, Rocha M, Guedes Corrêa
LG, Gomez-Porras JL, Ramirez Aguilar S, Thibaud J-B, Van
Dongen JT, Dreyer I (2011) K + gradients serve as a mobile energy
source in plant vascular tissues. Proc Natl Acad Sci USA. 108:864–
869
Held K, Pascaud F, Eckert C, Gajdanowicz P, Hashimoto K, Corratgé-
Faillie C, Offenborn JN, Lacombe B, Dreyer I, Thibaud J-B, Kudla J
(2011) Calcium-dependent modulation and plasma membrane
targeting of the AKT2 potassium channel by the CBL4/CIPK6
calcium sensor/protein kinase complex. Cell Res
(doi:10.1038/cr.2011.50).
Sandmann M, Sklodowski K, Gajdanowicz P, Michard E, Rocha M,
Gomez-Porras JL, Gonzalez W, Guesdes Correa LG, Ramírez-
Aguilar SJ, Cuin TA, Van Dongen JT, Thibaud JB, Dreyer I (2011)
The K + battery-regulating Arabidopsis K + channel AKT2 is under the
control of multiple post-translational steps. Plant Signal Behav (in
press).
BPMP - IBIP-CG (bât. 7), Campus SupAgro, 2 place Viala, 34060 Montpellier cedex 2, France juin 2011