Bioseed - Biotissue Technologies Gmbh

Table des matières
Introduction 5
Caractéristiques 6
Efficacité clinique 9
Sécurité 15
Indications 17
Technique opératoire 18
Cas cliniques 24
Formulaires 28
Bibliographie 30
3
BioSeed ® -C
Pour la régénération du
cartilage articulaire

Support tridimensionnel en polymère
Membrane non tissée avec marquage CE
Env. 20 x 10 6 cellules par cm 3
Fixation innovante, exclusive et sûre
Stabilité primaire optimale du greffon
Mise en culture a l’aide d’un sérum autologue au laboratoire BPF
Peut être implanté 21 jours après prélèvement
Cryoconservation permettant des dates variables de greffe
Livraison possible au niveau européen
Plus de 300 patients soignés avec succès
Les chondrocytes
(Illustration)
5
BioSeed ® -C
Technique de régénération tissulaire
Grâce à la greffe autologue de chondrocytes
avec matrice tridimensionnelle, les lésions du
genou (condyle du fémur, plateau du tibia,
patella), les lésions de la cheville (talus) ou
les lésions de la hanche (acetabulum) peuvent
être soignées par les cellules du patient.
Pour ce faire, les cellules sont multipliées en
laboratoire et retransplantées ensuite dans la
zone lésée.
Le cartilage articulaire hyalin ne peut se régénérer
tout seul. Par contre, il est possible de
multiplier les chondrocytes (cellules cartilagineuses)
en laboratoire en les stimulant de
manière appropriée et de les transplanter dans
le corps où ils se transforment en cartilage
articulaire hyalin.
Avant de procéder à la greffe des cellules
cartilagineuses, un petit prélèvement de tissu
cartilagineux sur une zone saine peu chargée
par le genou est effectué par arthroscopie.
Les cellules sont ensuite cultivées in vitro
pendant trois semaines et elles sont placées
pendant cette période dans une matrice tridimensionnelle.
La matrice utilisée est à deux
composantes. Il s'agit d'une membrane-
support non tissée qui constitue la structure,
et d'une „colle“ biologique qui fixe dans la
membrane-support non tissée les cellules
réparties de façon homogène. Cette combinaison
des deux composants de la matrice
confère aux chondrocytes un environnement
tridimensionnel idéal qui les incite à se redifférencier
et, par là même, à reprendre leur
morphologie et leur fonction d'origine. Le
greffon lui-même possède ainsi une stabilité
mécanique, il est souple, flexible, et il peut
être découpé de façon à correspondre à la
taille du défaut. Ces propriétés particulières
permettent d'utiliser une nouvelle technique
de fixation (fixation transosseuse) et la transplantation
arthroscopique, et elles permettent
également d'élargir l'indication. Grâce à ces
propriétés, BioSeed ® -C est prévu pour traiter
des défauts cartilagineux s'étendant sur une
grande surface. La greffe de cellules cartilagineuses
est principalement effectuée chez
les patients de moins de 60 ans souffrant de
douleurs permanentes et ayant des difficultés
fonctionnelles liées à des lésions cartilagineuses
ponctuelles ou multiples d’une taille de
plus de 1,5 cm 2 provoquées par traumatisme
ou des modifications focalement dégénératives.

Photo 01
Photo 02
BioSeed ® -C
Caractéristiques
La greffe autologue de chondrocytes n'est pas
nouvelle. Selon les publications de Brittberg
et al. (17) en 1994, l'application clinique de
chondrocytes autologues pour le traitement
de défauts cartilagineux a été documentée
par plus de 5000 cas. Les résultats ont été
présentés dans diverses publications (15, 16).
Les résultats des études à moyen et long
terme sont surtout prometteurs lorsqu'il s'agit
de patients dont un traitement osseux antérieur
était resté sans résultats.
La technique initiale se caractérisait au début
par l’injection d’une suspension de chondrocytes
à l’intérieur d’une „chambre bioactive“
en-dessous d’un „flap“ périostique. De nos
jours, les innovations techniques en matière
de culture cellulaire permettent l’expansion
des chondrocytes dans une membrane tridimensionnelle
résorbable en non-tissé – fait
qui a conduit à la standardisation de la répartition
cellulaire et à la simplification de la
technique de transplantation (1, 2 , 3 , 4 , 5). La
qualité du cartilage hyalin récemment constitué
a été testée dans le cadre d’expériences
faites sur des animaux (6, 8, 9, 10, 11, 12, 13).
À titre d’exemple, des expériences précliniques
faites sur des chevaux montrent, 24 mois
après la greffe de BioSeed ® -C, la formation
caractéristique du cartilage articulaire hyalin
(7 / Photo 4).
6
Photo 03
Photo 04
7
Une unité de BioSeed ® -C est composée de
deux membranes-supports non tissées
tridimensionnelles rectangulaires, faites de
fils de suture résorbables, d'une taille de
30 x 20 x 2 mm (longueur x largeur x hauteur).
La membrane-support non tissée contient
des cavités interconnectantes (plus de 90 %
du volume total) où les cellules cultivées
sont régulièrement réparties par utilisation
de colle de fibrine. La densité cellulaire est de
20 x 10 6 /cm 3 .
Grâce aux caractéristiques de cette membranesupport
non tissée, BioSeed ® -C dispose d’une
excellente stabilité mécanique primaire ainsi
que d’une compatibilité biologique parfaite.
En outre, cette matrice permet une distribution
tridimensionnelle régulière des cellules,
tandis que le phénotype de chondrocytes
reste différencié.
Les chondrocytes autologues sont obtenus
de manière arthroscopique au moyen d’un
prélèvement osseux et mis en culture pendant
environ 21 jours selon les directives BPF
(bonnes pratiques de fabrication). Pour ce faire,
seul du sérum sanguin autologue est utilisé.
Le greffon peut être découpé à l’aide de
ciseaux anatomiques ou chirurgicaux
de manière à ce qu’il ait la forme souhaitée
nécessaire pour la greffe.
BioSeed ® -C est le résultat de travaux de
recherche effectués pendant de longues
années à la Charité-Universitätsmedizin
[médicine universitaire] de Berlin et à la
Clinique Universitaire de Freiburg.

9
BioSeed ® -C
L’efficacité clinique
Résultats constatés 6, 12 et 24 mois après
la greffe de BioSeed ® -C pour le traitement
des endommagements cartilagineux du
genou
L’étude prospective effectuée par PD Dr. C.
Erggelet du service de chirurgie orthopédique
de la Clinique Universitaire de Freiburg a
commencé en novembre 2001. L’évaluation
clinique et les résonances magnétiques ont
été effectuées à différents moments :
• au moment de la greffe de BioSeed ® -C
• après 3 mois de suivi
• après 6 mois de suivi
• après 12 mois de suivi
• après 24 mois de suivi

Photo 05
Image IRM
six mois
après la
greffe de
BioSeed ® -C
dans le
condyle du
fémur.
Photo 06
Une arthroscopie
de
second look
9 mois
après la
greffe
Transplant
Méthode
Jusqu’en novembre 2004, 79 patients au
total (30 femmes, 49 hommes) âgés de 17 à
64 ans ont été soignés avec BioSeed ® -C.
L’âge moyen des patients était de 36 ans.
Les défauts cartilagineux ont été localisés
chez 42 patients au genou gauche et chez
37 patients au genou droit. Tous les défauts
ont été classifiés degré 4 selon Outerbridge
(défaut cartilagineux jusqu’à l’os). Dans la
plupart des cas, les défauts se situaient au
niveau du condyle médian du fémur. Dans
17 cas, BioSeed ® -C a été transplanté de
manière rétropatellaire. Dans 6 cas dans la
trochlée et dans 3 cas au niveau du condyle
latéral du fémur. Dans un cas, BioSeed ® -C
été transplanté sur le plateau médial du tibia.
Chacun des 21 patients a présenté 2 défauts :
5 fois sur le condyle médial du fémur, 3 fois
sur le condyle latéral du fémur, 8 fois sur la
trochlée et 5 fois sur la patella.
Des opérations secondaires ont été effectuées
chez 34 patients, ce qui est illustré par le
tableau suivant :
Opérations secondaires Nombre
Micro-fracture 5
Intervention plastique
ligament croisé
4
Ostéotomie corrective 21
Raccourcissement médial
capsule
2
Release latéral (coupage du
retinaculum latéral)
2
Chez 71 patients, l’opération a été effectuée
par arthrotomie, chez 8 patients de façon
arthroscopique. L’exploitation des données a
été réalisée sur la base du IKDC (International
Knee Documentation Committee), du KOOS
(Knee Osteoarthritis Outcome Score) ainsi
que des critères modifiés du Cincinnati Knee
Rating.
10
Photo 07
Histologie
9 mois
après la
greffe
Photo 08
Agrandissement
de
l’histologie
à l’échelle
1:100
11
Résultats
Les IRM de tous les patients montrent 6 mois
après la greffe une bonne intégration et un
bon remplissage du défaut. Le greffon présente
une connexion optimale, tant par
rapport au cartilage environnant que par
rapport à l’os sous-chondral. Il est encore
possible de reconnaître un contraste coloré
par rapport au cartilage environnant et les
canaux de forage transosseux. Aucun phénomène
de coincement, relâchement du
greffon ou détachement n’a pu être constaté.
(Photo 05).
Histologie
Cette biopsie effectuée 9 mois après la greffe
montre sur le plan histologique une bonne
intégration du greffon, avec une connexion
ferme avec l’os environnant. On peut percevoir
la structure caractéristique du cartilage
hyalin (Photo 07, Photo 08).

Diagramme A
Diagramme B
Résultats cliniques
Au mois de novembre 2004, les résultats de
60 patients sur 3 mois (3 mo) étaient disponibles,
de 66 patients sur 6 mois (6 mo),
de 60 patients sur 12 mois (12 mo) et de
40 patients sur 24 mois (24 mo).
Cincinnati-Knee-Score (modifié)
Le diagramme A indique la valeur moyenne
(mean) et l’écart type (ecty) du nombre de
points donné par le médecin et le patient. Le
nombre de points 10 représente le meilleur
état de santé.
IKDC-Score (hématome articulaire)
Le diagramme B indique le pourcentage des
patients présentant des hématomes à l’articulation
du genou.
12
Diagramme C
Diagramme D
13
IKDC – Score (questionnaire subjectif
d’évaluation du genou)
Les données du diagramme C sont composées
par l’addition de différentes évaluations. Le
champ de valeurs de la gamme s’échelonne
de 0 à 100. Les résultats doivent être interprétés
comme un critère relatif à la fonction
du genou. 100 points sur la gamme signifient
une activité sans restriction dans la vie quotidienne
et une absence totale de symptômes.
Exploitation KOOS
Le diagramme D illustre l’évolution de toute
question de l’exploitation KOOS 24 mois
après l’opération. Le champ de valeurs de la
gamme s’échelonne de 0 à 100, 100 étant le
meilleur état de santé imaginable. Dans le graphique,
tous les patients évalués sont inclus.

Autorisation administrative pour la production de produits
pharmaceutiques avec l'emploi de matériel de dérivation humaine.
Photo 09
Producion
dans le
laboratoire
salle propre
certifié BPF
Photo 10
15
BioSeed ® -C
Sécurité
BioSeed ® -C est fabriqué à partir d’une biopsie
cartilagineuse et de sérum sanguin propre
au patient. Avant la mise en culture, le sang
du patient est analysé au laboratoire de sérologie
virale.
La membrane-support non tissée nécessaire
à la mise en culture de BioSeed ® -C est à cent
pour cent biologiquement compatible et elle
est composée de fils de suture chirurgicaux
résorbables.
La colle de fibrine, produit pharmaceutique
homologué, qui est utilisée dans BioSeed ® -C,
est optimisée en laboratoire pour être adaptée
aux besoins des cellules.
Lors de la mise en culture de BioSeed ® -C,
les directives BPF (bonnes pratiques de fabrication)
sont appliquées. La fabrication des
greffons de chondrocytes 3D est effectuée
selon la législation européenne dans un laboratoire
BPF (bonnes pratiques de fabrication)
spécialement conçu pour la mise en culture
de cellules et soumis à des critères stricts.
La fabrication des greffons est cautionnée par
une autorisation de fabrication valable pour
médicaments humains.

Classification Outerbridge
Photo 11
17
I II III IV
BioSeed ® -C
Indications
Les indications pour BioSeed ® -C sont les
suivantes : défauts chondraux traumatiques
et défauts focalement dégénérés (degrés III
et IV de la classification Outerbridge),
supérieurs à 1,5 cm 2 .
Le traitement avec BioSeed ® -C est recommandé
pour l’application dans le condyle du
fémur, à la patella, à la trochlée, au plateau
du tibia, au talus et dans l’acetabulum.
BioSeed ® -C peut être appliqué de manière
secondaire lors d’opérations comme la
micro-fracture, la plastie du ligament croisé,
l’ostéotomie, le raccourcissement médial
capsulaire et le release latéral.
BioSeed ® -C est indiqué aux patients de moins
de 60 ans, bien qu’il n’existe aucune limitation
d’âge relative à la mise en culture. Aucune
infection antérieure ou actuelle de l’articulation
ne devraient être présentes.
Le patient ne doit pas souffrir de maladies
aiguës de type infectieux, systémiques du
métabolisme ou affectant le système immunitaire.
Ceci est également valable pour la
néoplasie.

Phase 01
Phase 02
BioSeed ® -C
Technique opératoire
L'application de BioSeed ® -C s'effectue en
deux phases : Le prélèvement de la biopsie
cartilagineuse et la greffe de BioSeed ® -C.
Première phase : le prélèvement de la
biopsie cartilagineuse sous arthroscopie
Le prélèvement de la biopsie cartilagineuse
est effectué de manière arthroscopique. Au
cours de cette intervention, environ 250 mg
(environ six grains de riz) de tissu cartilagineux
provenant d’une zone saine peu sollicitée
sont prélevés (Phase 01).
La biopsie cartilagineuse est remplie dans le
tube biopsie destiné à cette fin (tube conditionné
sous double emballage stérile) contenant
le liquide pour le transport (Phase 02).
18
Phase 03
Phase 04
19
Prélèvement d’environ 100 ml de sang servant
à la mise en culture de chondrocytes en laboratoire
(Phase 03).
Le tube de biopsie et les monovettes contenant
les cellules cartilagineuses et le sang
du patient sont placés dans le récipient thermique
destiné au transport (Phase 04).
La biopsie et le sang propres au patient, ainsi
que les formulaires dûment remplis, sont
envoyés ensemble dans 72 heures au laboratoire
pour cultiver les cellules cartilagineuses.

Phase 01
Phase 02
Deuxième phase : Greffe de BioSeed ® -C
Préparation
La zone endommagée est préparée à l’aide
d’une curette. Pour ce faire, il est nécessaire
de débrider jusqu’à l’os sous-chondral. En
fonction du défaut, une forme géométrique
(rectangulaire, triangulaire, trapézoïdale)
conférant au greffon une première stabilité
optimale est préparée (Phase 01). Il est recommandé
d’enlever tout le tissu cartilagineux
endommagé. Si la zone à soigner est très
profonde, il est possible de superposer deux
membranes non tissé. Dans le cas de défauts
encore plus profonds, il est possible de régénérer
le lit osseux sous-chondral en utilisant
de la spongiosa avant d’appliquer le greffon
de cellules cartilagineuses.
La zone préparée est mesurée et la membrane
BioSeed ® -C découpée de façon à ce que
l’on obtienne la taille correspondante (Phase
02 / 03).
Implantation
La fixation de BioSeed ® -C prévoit différentes
alternatives :
Pour traiter de grands défauts ou des défauts
sans cartilage situé aux bords, le greffon devra
être fixé de manière solide et sûre. À cet
effet, il est recommandé d’utiliser la technique
d'ancrage par nœuds.
20
Phase 03
Phase 04
21
Technique d'ancrage par nœuds (fixation
transosseuse ou technique Erggelet)
Cette technique est composée de forages
transosseux et de l’ancrage de nœuds. Le
forage transosseux est réalisé à l’aide
de quatre broches de Kirschner (Ø 1,7 mm)
passant à travers les quatre angles de la
zone endommagée (Phase 04).

Phase 05
Phase 06
Phase 07
Technique de nœud
Le premier angle de BioSeed ® -C est muni de
fils de suture résorbables (vicryl 2-0). Le
premier nœud, le nœud d’ancrage, est placé
à une distance d’environ 0,5 – 1 cm de la
membrane non tissé. Pour ce faire, le fil vicryl
est bloqué par une pince. Ensuite, un nœud
composé de trois nœuds superposés est
formé. Chacun de ces nœuds est composé
de quatre boucles alternantes. Ce triple nœud
(Ø 1,7mm) assure la fixation dans le canal
de forage.
A l’aide d’une autre pince, une nouvelle distance
de 0,5 – 1 cm est définie et le fil vicryl
est bloqué. Ensuite, un nœud composé de
deux nœuds dont chacun est composé de
trois boucles alternantes (Phase 05) est appliqué.
Le deuxième nœud forme une boucle
de passage destinée à l’enfilement ultérieur
d’un fil de traction (fil de vicryl), cette boucle
servant à l’insertion du nœud d’ancrage
(Phase 06). On procède de la même façon
sur les quatre angles de la membrane non
tissé.
22
Phase 08
Phase 09
Photo 12
23
Les fils de traction sont passés à travers la
boucle de passage préparée, ensuite les deux
extrémités des fils de traction sont passées
à travers les oeillets des quatre broches de
Kirschner. Puis, l’insertion du greffon est
effectuée de façon transcondylaire (Phase 07).
La membrane non tissé est ancrée dans la
zone endommagée (Phase 08). On retire les
fils de traction à la sortie subcutanée.
Il est possible d’appliquer la même technique
par arthroscopie (Phase 09).
Des instruments spécialement conçus pour la
greffe arthroscopique sont mises à la disposition
du chirurgien.
Suture du transplant (technique selon Fichtl)
BioSeed ® -C se laisse également suturer dans
le défaut. Une suture stable s'obtient par le
biais d'une fixation avec la technique du bouton
simple, aux points angulaires et à deux
autres points du transplant. On utilisera, à cet
effet, le matériel de suture PDS 6 - 0.
Fixation à l’aide de colle de fibrine
Dans ce cas de figure, il suffit d’appliquer,
après la préparation, de la colle de fibrine
latéralement par rapport au défaut, d’y poser
la membrane en non tissé et d’y exercer une
légère pression avec les doigts durant environ
trois minutes.

Photo 13
Photo 15
Photo 17
BioSeed ® -C
Cas cliniques
Photo 14
Photo 16
Photo 18
Condyle fémoral
Patient âgé de 41 ans, présentant une
lésion post-traumatique du condyle
fémoral médian
Photo 13 Défaut du cartilage
Photo 14 Fixation par la technique de
nouage, renforcement de BioSeed ® -C
Photo 15 Insertion du greffon dans les
quatre angles
Photo 16 BioSeed ® -C transplanté
Avec l'aimable autorisation du
Dr. P. Bachelin, Genolier
Patiente âgée de 34 ans, présentant
une lésion traumatique du condyle
fémoral médian
Photo 17 Mesure de la taille du défaut
par impression sur feuille
Photo 18 BioSeed ® -C transplanté
Avec l'aimable autorisation du
Dr. F. Zeifang, Heidelberg
24
25
Photo 19
Photo 21
Photo 23
Photo 20
Photo 22
Photo 24
Transplantation arthroscopique
Condyle fémoral
Patient âgé de 24 ans, présentant un
défaut traumatique du cartilage
Photo 19 Surface préparée arthroscopiquement
Photo 20 Insertion du greffon
Photo 21 Ancrage des nœuds
Photo 22 BioSeed ® -C transplanté
Transplantation arthroscopique
Tibia
Patiente âgée de 41 ans, présentant un
défaut dégénératif du cartilage
Photo 23 Défaut débridé
Photo 24 BioSeed ® -C transplanté
arthroscopiquement
Avec l'aimable autorisation du
PD Dr. C. Erggelet, Freiburg

Photo 25 Photo 26
Photo 27
Photo 29
Photo 28
Photo 30
Transplantation arthroscopique
Acetabulum
Patient âgé de 42 ans, présentant un
défaut traumatique dans l'acetabulum
Photo 25 Zone défectueuse dans
l'acetabulum
Photo 26 Greffon fixé par adhérence
Avec l'aimable autorisation du
Dr. A. Fontana, Monza
Patella (Rotule)
Patient âgé de 26 ans, présentant un
défaut traumatique par subluxation
de la rotule
Photo 27 Lésion rétropatellaire
Photo 28 Mesure du défaut
Photo 29 Découpe du greffon
Photo 30 BioSeed ® -C transplanté
Avec l'aimable autorisation du
Prof. J.-L. Rhenter, Genolier
26
27
Photo 31
Photo 33
Photo 35
Photo 32
Photo 34
Photo 36
Trochlée
Patient âgé de 41 ans, présentant un
défaut traumatique de la trochlée
Photo 31 Surface du cartilage défectueux
Photo 32 BioSeed ® -C transplanté
Avec l'aimable autorisation du
Dr. F. Zeifang, Heidelberg
Patient âgé de 43 ans, présentant une
gonarthrose avancée
Photo 33 Défaut dans la trochlée avant
transplantation
Foto 34 24 mois après la transplantation
Avec l'aimable autorisation du
Dr. J. Holz, Hamburg
Talus
Patient âgé de 29 ans, présentant
une lésion traumatique de la cheville
Photo 35 Défaut du cartilage
Photo 36 Fixation de BioSeed ® -C par
couture
Avec l'aimable autorisation du
Dr. W. Fichtl, Ulm

BioSeed ® -C
Formulaires
Ces formulaires permettent d'assurer une
sécurité optimale et de gérer chaque
biopsie et chaque prélèvement de sang
effectués. Il est nécessaire de les remplir
intégralement avant le traitement
avec BioSeed ® -C. Veuillez observer ce
faisant les directives jointes au kit de
prélèvement biopsique.
Formulaire de commande de fabrication
Celui-ci est nécessaire pour indiquer les
données du patient, du chirurgien et de
la quantité souhaitée de membranes non
tissé. Les étiquettes jointes servent à
l’identification du patient.
Formulaire pour la cryoconservation /
commande décongélation
Celui-ci sert à demander la conservation
des substances tissulaires en vue d’une
intervention postérieure. Il est transmis
par fax.
28 29
Autorisation du patient
Celle-ci est nécessaire pour obtenir
l’autorisation du patient relative à l’analyse
sanguine nécessaire pour la mise
en culture ainsi que pour obtenir l’autorisation
concernant l’utilisation des
données relatives à la personne.

BioSeed ® -C
Bibliographie
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Steinkopff Verlag Darmstadt;
2004
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Vous trouverez la bibliographie et la
technique opératoire sur le CD joint.
30
BioSeed ® -C
CD

ioSeed®-C
BioTissue Technologies GmbH
Engesserstr. 4b
D -79108 Freiburg
Tél. +49(0)761 7676-555
Fax +49 (0) 7 61 76 76 - 430
customerservice@biotissue.de
www.biotissue.de
Greffon tridimensionnelle de
chondrocytes autologues