Conseils et astuces de pipetage

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Conseil 3 : Pré-rincer les cônesPré-rincer au moins deux fois les cônesLorsque vous dosez un liquide à l'aide d'une pipette, un dépôt de liquide se forme sur le cône. Levolume expulsé est donc légèrement inférieur à ce qu'il devrait être. Chaque fois que vous utilisez unnouveau cône, vous devez le rincer au moins deux fois avec le liquide à doser avant toute opération depipetage, afin de compenser la quantité nécessaire à la formation de ce film de liquide. Le pré-rinçagecontribue également à neutraliser les effets de capillarité dans les micropipettes et à égaliser latempérature de l'air contenu à l'intérieur de la pipette avec la température de l'échantillon, ce qui s'avèreimportant pour les pipettes de grand volume.Exceptions au pré-rinçageLe pré-rinçage peut avoir des effets négatifs sur les résultats lors du pipetage de solutions très chaudesou très froides. Il est déconseillé de procéder à un pré-rinçage pour le pipetage de solutions très froides,telles que celles provenant d'un bain de glace, ou de solutions supérieures à 37 °C, car cette opérationpeut générer des erreurs dans une proportion pouvant atteindre 5 %.Cônes BioCleanConseil 4 : Éviter les variations de températureMaintenir une température ambiante constanteConservez les pipettes à une température ambiante constante. Il est recommandé d'éviter les variationsde température importantes ou soudaines, car la température de l'air contenu à l'intérieur de la pipettes'ajuste lentement, ce qui peut avoir un impact sur le volume d'échantillon distribué. Une températureconstante peut accroître la précision de pipetage jusqu'à 5 %.Laisser un temps d'équilibrage appropriéLes pipettes sont sensibles aux variations de la température des échantillons distribués. Les liquidesfroids ont tendance à provoquer un dosage excessif, alors que les liquides chauds peuvent entraîner ladistribution de volumes inférieurs au dosage souhaité. Sauf indication contraire, laissez un délaisuffisant pour que la température de vos pipettes et des liquides s'équilibre avant toute utilisation.Effets de réchauffement par la chaleur de la mainDurant les opérations de pipetage sur de longues périodes, la chaleur émise par la main peut réchaufferl'air contenu à l'intérieur de la pipette et provoquer sa dilatation, générant ainsi des résultats inexacts.Utilisez des pipettes en polymères PVDF de haute qualité, évitez de tenir en permanence la pipette dansla main entre les cycles de pipetage et replacez toujours la pipette sur son support après chaqueopération de pipetage.Pour en savoir plus, reportez-vous au manuel électronique World of Wonders d'Academia.
Conseil 5 : Assurer un dosage completAssurer la descente appropriée de la dernière goutteIl est impératif de veiller à ce que la dernière goutte soit entièrement distribuée et n'adhère pas àl'extrémité du cône afin d'obtenir une précision et une reproductibilité optimales d'un échantillon àl'autre. Ce point s'avère particulièrement important pour le pipetage de micro-volumes, en raison desfaibles volumes d'échantillons requis. Pour la plupart des applications, il est recommandé de distribuerle liquide avec l'extrémité du cône placée contre la paroi du récipient afin de réduire ou d'éliminer laquantité d'échantillon restant dans le cône. Retirez la pipette en faisant glisser l'extrémité du cône lelong de la paroi afin de libérer toute gouttelette retenue au niveau de l'orifice du cône. Cette techniquepermet d'accroître l'exactitude de pipetage de 1 % ou plus. Pour les applications pour lesquelles ellen'est pas appropriée, utilisez des cônes à parois fines, qui permettent de libérer complètement ladernière gouttelette, afin de distribuer l'échantillon au-dessus de la surface du liquide ou directementdans le liquide.Pipettes électroniques monocanalPipettes électroniques multicanauxConseil 6 : Remplissage correct du cône et profondeur d'immersion appropriéeRemplissage correct du côneLes meilleurs résultats sont obtenus en aspirant 50 % du volume maximum du cône. Il estrecommandé d'appliquer des volumes de pipetage compris entre 35 et 100 % du volume nominal ducône afin de réduire les exigences en matière de technique de l'opérateur et d'améliorer les résultatsd'environ 1 %. Des volumes de pipetage inférieurs à 10 % du volume nominal du cône posentproblème.Profondeur d'immersionUne profondeur appropriée d'immersion du cône peut accroître l'exactitude de pipetage jusqu'à 5 % ets'avère particulièrement importante pour les micropipettes. La profondeur d'immersion du cône doit êtrede 1 à 2 mm pour les micropipettes et jusqu'à 6 à 10 mm pour les pipettes de grand volume, selon lataille du cône. Si le cône est immergé trop profondément, le gaz contenu à l'intérieur de celui-ci estcomprimé et provoque l'aspiration d'une quantité excessive de liquide. Le liquide retenu à la surface ducône peut également altérer les résultats. Si le cône n'est pas immergé assez profondément, de l'air peutêtre aspiré, occasionnant des bulles d'air et des volumes inexacts.Liquidator96S'inscrire à un séminaire sur les bonnes pratiques de pipetage
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