03 Aminosavak szöveg.pdf

antranilsavon keresztül négy lépésbentriptofánná alakul. A további mennyiségbőlprefénsav lesz, ami egy további elágazásután fenilalanint és tirozint ad.Az anyagcsere-mérnökség elveinek megfelelőena klasszikus mutációs-szelekciós technikávala következő tulajdonságú mutánsokatizolálták:Phe - , Tyr - , (auxotrófok)5-Me-Trp r (5-metil-triptofánantimetabolitra rezisztensek)A mutánsokkal a fermentáció megvalósítható, de az előzőekben említett technológiákhozképest hátrány, hogy a triptofán sokkal rosszabbul oldódik, mint a poláris oldalláncúaminosavak. Az oldhatósági határ ~12 g/l (erősen függ a pH-tól és a hőmérséklettől), azazcsak kb. tizedrésze a lizinnél vagy a glutaminsavnál elérhető koncentrációnak.2. Prekurzoros bioszintézis: indol, vagy indol+glicin adagolásával.A triptofán bioszintézis utolsó lépésében a triptofán szintetáz enzim az indol vázróllehasítja az addig felépített oldalláncot, és egy szerint kapcsol a helyére. A reakció másodiklépését, az indol + szerin = triptofán folyamatot számos mikroba enzime képes katalizálni.OOH 2 N CH COHNH+H 2 N CH CCH 2OHOHE.coliTrp szintetázCH 2IndolL-szerinHNErre a folyamatra többféle technológiát is lehet építeni. Az indol mindegyikben szintetikusanelőállított prekurzor. Indolt adhatunk:• Szerintermelő metilotrófok tenyészetéhez, ezzel a szerin és a triptofán szintézist összelehet kapcsolni: metanol, glicin és indol adagolásával.• Élesztő törzsek (Candida, Hansenula) tenyészetéhez – jó hatásfokkal triptofánná alakítják. Az indol nagyobb koncentrációban károsítja a sejteket, ezért folyamatosan,mérések alapján adagolják, a 0,5 – 1,0 g/l-es tartományban tartják. Triptofánra el lehetérni az oldhatósági határt (~12 g/l)3. Enzimes biokonverzióval: pl. az E. coli triptofán-szintáz enzime a szerinből és indolbóltriptofánt hoz létre. Az Amino GmbH (D) 1988-ban kezdte a triptofán termelést az ábrán láthatóreakcióséma szerint, nyugvósejtes E. coli szuszpenziót használva.15