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Identificazione molecolare di lieviti ricorrenti nella ... - FedOA

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N=2 n<br />

dove n = numero <strong>di</strong> cicli. Questa formula è valida solo in con<strong>di</strong>zioni ideali,<br />

cioè imponendo una resa del 100%, ma ciò è ottenibile solo nei primi cicli<br />

della reazione, mentre, successivamente per la formazione <strong>di</strong> sottoprodotti,<br />

tale resa <strong>di</strong>minuisce, fino a <strong>di</strong>venire non accettabile per n > 35. la resa <strong>di</strong><br />

un'amplificazione generalmente si aggira intorno a valori <strong>di</strong> 80-85%, e il<br />

numero <strong>di</strong> copie è quin<strong>di</strong> calcolabile attraverso una nuova espressione<br />

matematica:<br />

dove n = numero <strong>di</strong> cicli; R = resa.<br />

N = (1+R) n<br />

I cicli <strong>di</strong> denaturazione, ibridazione e polimerizzazione possono essere<br />

reiterati in una macchina programmata per compiere queste operazioni,<br />

detta termociclizzatore, che consiste in una celletta termostatata che viene<br />

ritmicamente riscaldata per denaturare il DNA e raffreddata per permettere<br />

l'appaiamento <strong>di</strong> questo con i primer e la copia del filamento.<br />

Nel presente lavoro la reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata<br />

applicata ad entrambe le vinificazioni in stu<strong>di</strong>o ed è stata eseguita<br />

nell'ambito <strong>di</strong> due <strong>di</strong>versi meto<strong>di</strong> molecolari:<br />

Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD)<br />

Amplificazione del 26S rDNA.<br />

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