植物病原细菌分类
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第二节<br />
<strong>植物病原细菌分类</strong><br />
根据目前公认的五界生物分类系统,细菌属<br />
于原核生物界。由于原核生物形态简单、差<br />
异较小,内部的分类系统还不完善。<br />
目前国际公认和普遍采用的是伯杰氏分类系<br />
统,《柏杰氏细菌鉴定手册》(Bergey’s<br />
Manual of Determinative<br />
Bacteriology,9th Edition,1994)
原核生物的主要类群<br />
属于原核生物界,目前国际公认和普遍采<br />
用的是伯杰氏分类系统,伯杰氏系统细菌学<br />
手册 (Bergey’s Manual of Determinative<br />
Bacteriology,9th Edition,1994)<br />
该手册分为4卷<br />
第一卷 医学或工业上重要的革兰氏阴性细菌(11群<br />
)<br />
第二卷 除放线菌之外的革兰氏阳性细菌(8群)<br />
第三卷 古细菌 蓝细菌和其他革兰氏阴性细菌(8群<br />
)
一、原核生物界分类系统<br />
原核生物界通常分为4个门,7个纲,35个组群。<br />
薄壁菌门:有壁较薄。革兰氏染色反应阴性,包括大多数<br />
植物病原细菌。<br />
厚壁菌门:有壁较厚。革兰氏染色反应阳性,包括棒形杆<br />
菌属、芽孢菌属和链霉菌属。<br />
(软)无壁菌门:菌体无壁。包括类菌原体。<br />
疵壁菌门:没有进化的原细菌或古细菌。包括产甲烷细菌<br />
和高盐细菌。<br />
薄壁菌门和厚壁菌门的有细胞壁,软壁菌门的也称菌<br />
原体,三者统称为真细菌。
原核生物的主要类群<br />
原核生物的主要类群-种群划分<br />
1 种(species):细菌种是由一些具有许多共同特征的菌系组成的<br />
群体。菌系(Strains)是由分离获得的纯培养物的单个菌落繁衍<br />
的后代组成。一个细菌种具有一个典型菌系(type strain)或称<br />
代表菌系、模式菌系。<br />
2 亚种(subspecies):在一个细菌种内有些菌系的特征与典型菌<br />
系基本相符,但有少数表型的或遗传的特性不同,而这些特征是<br />
稳定的,可将这些细菌称为这个种的亚种。<br />
3 种或亚种以下的分类单元<br />
(1)致病变种或致病型(pathovar,pv.;pathotype):指一个菌系或<br />
一些具有相同或相似特征的菌系,它与同一个种或亚种的其他菌<br />
系在致病性(包括症状、寄主范围)方面有区别。<br />
(2)生物变种(生物型)、(3)血清变种(血清型)、(4)噬菌体变种(<br />
噬菌体型)、(5)形态变种(形态型)、 (6)生化变种(biovar)
原核生物的主要类群<br />
原核生物的主要类群-分类单元<br />
细菌命名<br />
拉丁双名法(属和种)命名<br />
俗名:甘薯瘟病菌<br />
番茄青枯病菌病菌种<br />
学名:(Ralstonia solanacearum<br />
=Pseudmonas solanacearum)<br />
亚种(subspecies) :胡萝卜软腐欧氏菌黑胫亚种<br />
Erwinia caratovora subsp. atrosepitica<br />
致病变种(pathovar,Pv.):油菜黄单胞菌柑橘致病<br />
变种Xanthomonas campestris pv. citri
表 3—2 植物病原原核生物的主要属和代表种<br />
门 属名 病原菌代表种<br />
薄壁菌门 Agrobacterium 土壤杆菌属* A. tumefacians 蔷嶶科根癌病<br />
Acidovorax 嗜酸菌属<br />
A.avenae 燕麦条纹病<br />
Burkholderia 布克氏菌属* A.cepacia 洋葱腐烂病<br />
Erwinia 欧文氏菌属*<br />
E.amylovora 梨火疫病<br />
Liberobacter 韧皮部杆菌属* L.asiaticum 柑桔黄龙病<br />
Pantoea 泛生菌属*<br />
P.ananas 菠萝腐烂病<br />
Pseudomonas 假单胞菌属* P.syringae 丁香疫病<br />
Rhizobzcter 根杆菌属<br />
R.daucus 胡萝卜瘿瘤病<br />
Rhizomonas 根单胞菌属<br />
R.suberifaciens 莴苣栓皮病<br />
Xanthomonas 黄单胞菌属* X.campestris 甘蓝黑腐病<br />
Xylella 木质部小菌属*<br />
X.fastidiosa 葡萄皮尔斯病<br />
Xylophilus 嗜木质菌属<br />
X.ampelinus 葡萄溃疡病<br />
厚壁菌门 Arthrobacter 节杆菌属<br />
Bacillus 芽孢杆菌属<br />
Clavibacter 棒形杆菌属*<br />
Curtobacterium 短小杆菌属*<br />
Rhodococxcus 红球菌属<br />
Streptomyces 链丝菌属<br />
无壁菌门 Spiroplasma 螺原体属<br />
Pyhtoplasma 植原体属*<br />
A.ilicis 冬青叶疫病<br />
B.megaterium 小麦白叶条斑病<br />
C.michiganese 番茄溃疡病<br />
D.flaccumfaciens 菜豆萎蔫病<br />
R.fascians 香豌豆带化病<br />
S.citri 马铃薯疮痂病<br />
S.citri 柑桔僵化病<br />
P.aurantifolia 柑桔从枝病
1. 土壤杆菌属<br />
(Agrobacterium)<br />
又称野杆菌属,俗称农杆菌<br />
• 短杆状<br />
• 1-6根鞭毛,周生或<br />
• G -<br />
侧生<br />
• 菌落白色至灰白色、<br />
无色素<br />
好气<br />
。<br />
• 最适培养温度25 28<br />
>PH6.0
1. 土壤杆菌属<br />
(Agrobacterium)<br />
又称野杆菌属,俗称农杆菌<br />
质粒:Ti质粒<br />
质粒<br />
重要种:<br />
Ri质粒<br />
细菌素<br />
根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)<br />
冠瘿病或根癌<br />
发根土壤杆菌(A.rhizogenes)<br />
发根<br />
放射土壤杆菌(A.radiobacter)
土壤杆菌属<br />
土壤杆菌属(Agrobacterium<br />
Agrobacterium)<br />
大多数细菌都带有除染色体之外的另—种遗传<br />
物质,一种大分子的质粒,它控制着细菌的致<br />
病性和抗药性等,如侵染寄主引起肿瘤症状的<br />
质粒称为“ 致 瘤质粒” (tomor inducine<br />
plasmid,俗称为Ti质粒),有的能引起寄主产<br />
生不定根的“致发根质粒”(rhizogen inducine<br />
plasmid,比俗称Ri质粒)。
冠瘿病发生机理<br />
<br />
<br />
Braun and Schilperoort (1960s): 瘿瘤产<br />
生与农杆菌的遗传物质有关<br />
Zaenen et al., Chilton et al. (1970s –<br />
80s): 肿瘤产生的分子机理
Ti质粒 Ti质粒<br />
肿瘤产生的分子机理<br />
(tumor-inducing (tumor inducing plasmid)<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
伤口侵入<br />
薄壁组织表<br />
层细胞间扩<br />
展<br />
T-DNA转移<br />
T-DNA整合<br />
T-DNA表达<br />
<br />
生长素<br />
细胞分离素
植物冠瘿病的防治<br />
<br />
<br />
<br />
无病苗木<br />
田园卫生<br />
生物防治:<br />
<br />
<br />
放射土壤杆菌<br />
(A. radiobacter) K 84菌株<br />
(Allan Kerr, 1973), 商品Galltrol<br />
王慧敏<br />
(2000) 研制抗根癌菌剂已获准农药<br />
登记和工业化生产
2.布克氏菌属<br />
2. 布克氏菌属(Burkholderia)<br />
<br />
<br />
<br />
布克氏菌属是由假单胞菌<br />
属中的rRNA第二组独立出<br />
来的。<br />
模式种:B.cepacia 引起洋<br />
葱腐烂病<br />
该属为非荧光的假单胞菌属
3.劳尔氏菌属<br />
劳尔氏菌属(Ralstonia Ralstonia)<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
布克氏菌属是由假单胞菌属中的rRNA第二组<br />
独立出来的(1993,1995)。<br />
茄青枯劳尔氏菌(R.solanacearum)能引起多<br />
种作物,特别是茄科植物的青枯病。<br />
在组合培养基上形成光滑、湿润、隆起和灰<br />
白色的菌落。<br />
病菌的寄主范围很广,可以为害30余科,<br />
100多种植物。病害的典型症状是全株呈现<br />
急性凋萎,病茎维管束变褐,横切后用手挤<br />
压可见有白色菌脓温出。<br />
病菌可以在土中长期存活,是土壤习居菌。<br />
病菌可随土壤、灌溉水和种薯、种苗传染与<br />
传播。侵染的主要途径是伤口,高温多湿有<br />
利发病。
4. 欧文氏杆菌属<br />
(Erwinia)<br />
属薄壁菌门。菌体短杆状,周生多根鞭毛。菌落灰白色,<br />
革兰氏染色反应阴性。主要引致腐烂,如大白菜软腐病。<br />
短杆状,多根鞭毛周生,G -<br />
腐生性强,腐烂、萎蔫<br />
十字花科软腐病<br />
黄瓜细菌性萎蔫病<br />
玉米细菌性萎蔫病<br />
苹果、梨火疫病
欧文氏菌-大白菜软腐病<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
伤口侵入<br />
分泌果胶酶,破坏中胶<br />
层,导致细胞离析,组织<br />
解体<br />
病株、病残体、堆肥或土<br />
壤中越冬<br />
昆虫、雨水、灌溉水、农<br />
事活动传播<br />
防治:<br />
抗病品种
欧文氏菌-黄瓜细菌性萎蔫<br />
• 细菌在病残体内存活时<br />
间极短<br />
• 在黄条跳甲或黄斑跳甲<br />
防治?<br />
的肠道内越冬<br />
• 甲虫叶部取食时,侵入<br />
叶脉<br />
• 维管束内扩展<br />
• 先部分叶片后整株萎蔫
欧文氏菌-梨火疫病<br />
isopropy
5. 假单胞杆菌属<br />
(Pseudomonas)<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
最大类群,假单胞菌属是薄壁菌门假单胞菌科的模式属。<br />
菌体短杆状或略弯,单生,大小为0.5—1.0μm ×1.5—<br />
5.0μm,鞭毛1—4根或多根,极生。<br />
杆状,1-多根鞭毛,极生<br />
据rRNA的同源性,分出新的属:<br />
3. 布克氏菌属<br />
菌属 (Ralstonia)<br />
(Burkholderia) / 劳尔氏
假单胞杆菌-黄瓜角斑病<br />
• 气孔、伤口侵入<br />
• 薄壁细胞间扩展<br />
• 散生多角形病斑<br />
• 种子或病残带菌<br />
• 风雨、昆虫传播<br />
• 防治
6. 黄单孢杆菌属<br />
(Xanthomonas)<br />
较大类群, 是薄壁菌门一个成员。短杆<br />
状,单鞭毛极生,G-<br />
菌落常为蜜黄色<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
水稻白叶枯病<br />
十字花科植物黑腐病<br />
棉花细菌性角斑病<br />
柑橘溃疡病
黄单孢杆菌-水稻白叶枯病<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
越冬<br />
<br />
<br />
带菌种子<br />
稻桩带菌<br />
侵入途径<br />
<br />
<br />
水孔<br />
伤口<br />
沿叶脉扩展<br />
传播<br />
<br />
种传
黄单孢杆菌-十字花科植物黑腐病<br />
<br />
<br />
“V”病斑<br />
叶脉变黑
7. 韧皮部杆菌属<br />
(Liberobacter)<br />
寄生于韧皮部<br />
早期称作韧皮部难养菌<br />
(fastidious<br />
phloem-limited bacteria)、类细菌<br />
短杆状、无鞭毛、G -<br />
不能进行人工培养
韧皮部杆菌-柑橘黄龙病<br />
<br />
<br />
<br />
传播与侵入<br />
<br />
<br />
嫁接传播<br />
木虱传播<br />
韧皮部扩展<br />
防治:<br />
<br />
<br />
昆虫防治<br />
苗木的高温处理<br />
田园卫生
8. 木质部小菌属<br />
(Xylella)<br />
• 新建属,原称作类立克次氏体<br />
(rickettsialike organism, RLO), 木质部<br />
难养菌<br />
bacteria)<br />
(fastidious xylem-limited<br />
• 短杆状,无鞭毛,G-, 细胞壁波纹状<br />
• 营养要求荷刻
木质部小菌属-葡萄皮尔氏病<br />
<br />
<br />
叶蝉传播<br />
防治?<br />
<br />
取食时侵入<br />
木质部扩展
English Reading<br />
Citrus canker 柑橘溃疡病
二、厚壁菌门植物病原细菌<br />
棒形杆菌属<br />
<br />
<br />
<br />
(Clavibacter)<br />
从原棒状杆菌属 (Corynebacterium) 划分<br />
出的新属;棒状杆菌属仍然保留,但都为<br />
动物病原菌<br />
<br />
<br />
棒状或不规则状,无鞭毛,G + ,细胞壁厚<br />
所致病害症状:萎蔫<br />
马铃薯环腐病<br />
番茄溃疡病
棒形杆菌-马铃薯环腐病<br />
<br />
症状:<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
病叶边缘上卷、脉<br />
间变黄、枯焦<br />
病薯维管束变褐、<br />
腐烂<br />
挤压病薯有菌脓从<br />
维管束溢出<br />
随病薯越冬<br />
切刀传播<br />
伤口侵入<br />
韧皮部扩展
棒形杆菌-番茄溃疡病<br />
• 症状:<br />
• 叶片脉间变黄<br />
• 茎部产生暗褐色<br />
条斑、深陷<br />
• 维管束变褐<br />
• 果实病斑小,有<br />
白色晕圈<br />
• 随病残、种薯越冬<br />
• 风雨、水流、农事<br />
操作传播<br />
• 伤口侵入
三、无壁菌门植物病原生物<br />
病毒病?<br />
<br />
<br />
症状<br />
<br />
<br />
<br />
黄花<br />
丛枝<br />
粗缩<br />
叶蝉传播
植物的菌原体<br />
1967年,日本学者土居养二<br />
(Doi,Y)首先从桑萎缩病电镜<br />
切片中中发现了类菌原体<br />
(Mycoplasma like orgnism,<br />
MLO),其属于原核生物界无壁菌<br />
门。<br />
目前已知约有300中植物发生菌原<br />
体病害,如桑萎缩病、枣疯病、<br />
苹果缩果病、梨衰退病、水稻黄<br />
矮病、甘薯丛枝病、泡桐丛枝病<br />
和椰子死亡黄化病等。
菌原体的主要类群<br />
1.螺原体属(Spiroplasma):菌体的基本形态为螺旋形,繁殖时可产生分<br />
枝,分枝亦呈螺旋形。植物病原螺原体只有3个种,主要寄主是双子叶<br />
植物和昆虫。如柑桔僵化病、玉米矮化病和蜜蜂的爬蜂病等都是螺原体<br />
侵染所致。叶蝉是传染螺原体的媒介昆虫,从吸食到传染也须经2—3<br />
周的循回期,接种后到发病的潜育期约4—6周。螺原体也可以在多年<br />
生宿主假高梁的体内越冬存活,也可在介体叶蝉体内越冬。<br />
2.植原体属(Phytoplasma):植原体属即原来的类菌原体(Mycoplasma—<br />
Like Like Organism,MLO),菌体的基本形态为圆球形或椭圆形。目前还不能<br />
在离体条件下培养它们。日本学者土居养二(Doi,Y)首先从桑萎缩病病<br />
组织切片中发现了病原体,称之为类菌原体(MLO),传播介体是桑菱纹<br />
叶蝉。在国内,除桑萎缩病外,还有枣疯病、泡桐丛枝病、水稻黄矮<br />
病、水稻橙叶病和甘薯丛枝病等,亦是由这类菌原体侵染所致。
菌原体的基本特性<br />
1. 1. 球形,无细胞壁,只有单位膜。<br />
2. 2. 可以人工培养,在培养基上形成“荷包蛋”状菌落。<br />
3. 3. 对四环素类药物敏感,可用于诊断和治疗。对青霉素和<br />
链霉素不敏感,因无细胞壁。<br />
4. 4. 引致黄化、矮缩、丛生、小叶等症状。<br />
5. 5. 必须依赖昆虫介体传播。叶蝉和飞虱等刺吸式口器是主<br />
要媒介。
类菌原体的发现
柑橘顽固病(僵化病)(citrus<br />
stubborn disease)
玉米矮缩
柑橘顽固病和玉米矮缩<br />
最初以为类菌原体引起<br />
1973和1975年被证明皆有螺原体<br />
引起
1. 植原体<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
原称作类菌原体<br />
organism, MLO)<br />
(Phytoplasma)<br />
(Mycoplasma-like<br />
菌体无细胞壁,圆形、椭圆形、有时为<br />
丝状或哑铃形<br />
不能进行人工培养<br />
叶蝉带菌(循回型)<br />
常见病害:枣疯病、梧桐丛枝等
黄化、丛枝、叶变小
菟丝子嫁接接种
Phytoplasma:Friend or foe?<br />
Phytoplasma casts a magic spell<br />
that turns the fair poinsettia<br />
into a Christmas showpiece
2. 螺原体属<br />
<br />
<br />
<br />
(Spiroplasma)<br />
菌体无胞壁,螺旋形,繁殖时产生<br />
分支<br />
可人工培养,但生长条件荷刻<br />
叶蝉带菌
表 3—2 植物病原原核生物的主要属和代表种<br />
门 属名 病原菌代表种<br />
薄壁菌门 Agrobacterium 土壤杆菌属* A. tumefacians 蔷嶶科根癌病<br />
Acidovorax 嗜酸菌属<br />
A.avenae 燕麦条纹病<br />
Burkholderia 布克氏菌属* A.cepacia 洋葱腐烂病<br />
Erwinia 欧文氏菌属*<br />
E.amylovora 梨火疫病<br />
Liberobacter 韧皮部杆菌属* L.asiaticum 柑桔黄龙病<br />
Pantoea 泛生菌属*<br />
P.ananas 菠萝腐烂病<br />
Pseudomonas 假单胞菌属* P.syringae 丁香疫病<br />
Rhizobzcter 根杆菌属<br />
R.daucus 胡萝卜瘿瘤病<br />
Rhizomonas 根单胞菌属<br />
R.suberifaciens 莴苣栓皮病<br />
Xanthomonas 黄单胞菌属* X.campestris 甘蓝黑腐病<br />
Xylella 木质部小菌属*<br />
X.fastidiosa 葡萄皮尔斯病<br />
Xylophilus 嗜木质菌属<br />
X.ampelinus 葡萄溃疡病<br />
厚壁菌门 Arthrobacter 节杆菌属<br />
Bacillus 芽孢杆菌属<br />
Clavibacter 棒形杆菌属*<br />
Curtobacterium 短小杆菌属*<br />
Rhodococxcus 红球菌属<br />
Streptomyces 链丝菌属<br />
无壁菌门 Spiroplasma 螺原体属<br />
Pyhtoplasma 植原体属*<br />
A.ilicis 冬青叶疫病<br />
B.megaterium 小麦白叶条斑病<br />
C.michiganese 番茄溃疡病<br />
D.flaccumfaciens 菜豆萎蔫病<br />
R.fascians 香豌豆带化病<br />
S.citri 马铃薯疮痂病<br />
S.citri 柑桔僵化病<br />
P.aurantifolia 柑桔从枝病
五、植物细菌病害的诊断<br />
1. 1. 症状识别:斑点、萎蔫、腐烂、畸形。水浸状、菌<br />
脓、菌痂、流胶。<br />
2. 2. 显微镜检查:喷菌现象。<br />
3. 3. 分离培养:NA培养基稀释法或画线法培养。观察单个<br />
菌落特点。<br />
4. 4. 人工接种:将分离的细菌接种于寄主植物或过敏性发<br />
应植物,观察所得症状。<br />
5. 5. 链霉素防治:植物病原细菌对链霉素敏感,可用于防<br />
治细菌病害。
五、植物细菌病害的诊断<br />
(一)症状识别<br />
1.菌原体病害的症状特点<br />
病株矮化或矮缩,枝叶丛生,叶小而黄化。因此丛生、矮<br />
缩、小叶与黄化相结合是诊断菌原体病害症状时必须掌握的关键。<br />
2.细菌病害的症状特点<br />
类,褪色或变色的较少;有的还有菌脓(ooze)溢出。<br />
(二)显微镜检查<br />
病植物表现的症状类型主要有坏死、萎蔫、腐烂和畸形等<br />
除了菌原体引起的病害以外,由细菌侵染所致病害的病部,无论是维管束系统受害<br />
的,还是薄壁组织受害的,都可以在徒手切片中看到有大量细菌从病部喷出,这种现<br />
象称为喷菌现象(bacteria exudation,BE)。喷菌现象为细菌病害所特有,是区分细菌<br />
病害或真菌、病毒病害的最简便的手段之一。<br />
(三)分离培养与侵染性试验<br />
由于菌原体尚不能在人工培养基上培养,因此分离有困难,但螺原体己可以分离<br />
培养。对于菌原体病害,可采用菟丝子介体接种作桥梁接种传染到长春花上作鉴定的<br />
办法,证明其有无侵染性,从而完成柯赫氏法则的诊断程序。
六、病害诊断和病原鉴定<br />
1. 症状:<br />
• 病征:<br />
• 病状:初期水浸状<br />
2. 室内镜检:<br />
• 喷菌现象<br />
3. 快速检验:<br />
• 血清学检验<br />
• 革兰氏染色
六、病害诊断和病原鉴定<br />
4. 致病性实验、细菌学检验和其他检验技<br />
术:<br />
<br />
<br />
致病性实验<br />
<br />
<br />
Koch’s法则<br />
过敏性坏死反应<br />
细菌学性状:形态、染色反应、培养性状、<br />
营养要求、化学物质的分解途径和产物、特<br />
殊酶的活性和血清学反应等
七、植物病原原核生物病害的防治特点<br />
1. 化学防治<br />
<br />
<br />
种子包衣技术<br />
杀菌剂/抗生素<br />
2. 生物防治<br />
<br />
放射土壤杆菌K84浸根防治果树冠<br />
瘿病<br />
3. 抗病品种<br />
<br />
叶斑病/维管束病害
七、植物病原原核生物病害的防治特点<br />
4. 卫生措施<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
无病种苗<br />
种苗处理<br />
农事操作<br />
拔除病株<br />
清除田间杂草/防虫<br />
5. 轮作防病