Ecologia dei principali cianobatteri tossici (Manganelli) - Istituto ...

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Fissare il campione• Fissare sul campo con Lugol e trasportare il campione albuio in laboratorio.• Se il campione arriva in laboratorio entro due ore, si puòfissare il campione in laboratorio, sotto cappa, conformaldeide (anche non tamponata, maprecedentemente filtrata su 0.2 m, concentrazionefinale 4%)• Conservare i campioni in frigo se non si effettua subitola conta
ContaUnità da contare: cellule; filamenti singoli e colonie di unicellulari in cui si possonocontare le singole cellule.Nel caso di filamenti singoli o colonie di unicellulari, si contano i filamenti e le coloniedel campione, come per le cellule. Sullo stesso campione, si contano le cellule dei primitrenta filamenti/colonie, per avere un numero medio di cellule per filamento/colonia chesi moltiplica per il numero di unità precedentemente contate.Nel caso di filamentosi coloniali o colonie di unicellulari con molte cellule, è megliorompere le colonie e contare le singole cellule (diluizione; sonicazione; sonicazione conTriton-X 1%; idrolisi alcalina 80°-90°C 15min).Conta in camere di sedimentazione (3-4 ore sedimentazione per cm di acqua, il doppio incaso di fissazione con formalina; Chorus e Bartram, 1999):Campi randomTransetti (vedi fig. slide successiva)Per la conta dei cianobatteri unicellulari, è meglio filtrare il campione su un filtro amembrana, con porosità fra 0.2 m, nel caso di picocianobatteri, e 1 m, nel caso diunicellulari più grandi. Il filtro, una volta asciugato a temperatura ambiente, su una cartaassorbente, viene appoggiato su un vetrino per microscopia, coperto con una goccia diolio per immersione e il coprioggetto, e analizzato con un microscopio dritto.
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