ภาคผนวก ก การเตรียมสารเคมี
ภาคผนวก ก การเตรียมสารเคมี
ภาคผนวก ก การเตรียมสารเคมี
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
96<br />
5. วิธีเตรียม 50x TAE buffer<br />
Tris 242 <strong>ก</strong>รัม<br />
Glacial acetic acid 57.1 <strong>ก</strong>รัม<br />
0.5 M EDTA, pH 8.0 100 มิลลิลิตร<br />
เติมน้ํา<strong>ก</strong>ลั่นจนครบ<br />
1 ลิตร<br />
6. วิธีเตรียม 1 M Tris-HCl, pH 8.0<br />
Tris 121.1 <strong>ก</strong>รัม<br />
เติมน้ํา<strong>ก</strong>ลั่น<br />
800 มิลลิลิตร<br />
** ปรับ pH ดวย HCl (ปลอยใหสารละลายเย็นตัวลงแลววัด pH อี<strong>ก</strong>ครั้ง)<br />
เติมน้ํา<strong>ก</strong>ลั่นจนครบ<br />
1 ลิตร<br />
** นําไป autoclave ที่อุณหภูมิ<br />
121 องศาเซลเซียส และความดัน 15 psi เวลา 15 นาที<br />
7. วิธีเตรียม 500 mM EDTA, pH 8.0<br />
EDTA 186.1 <strong>ก</strong>รัม<br />
น้ํา<strong>ก</strong>ลั่น<br />
800 มิลลิลิตร<br />
NaOH 20 <strong>ก</strong>รัม<br />
** ปรับ pH ดวย 5 N NaOH<br />
เติมน้ํา<strong>ก</strong>ลั่นจนครบ<br />
1 ลิตร<br />
** นําไป autoclave ที่อุณหภูมิ<br />
121 องศาเซลเซียส และความดัน 15 psi เวลา 15 นาที<br />
8. วิธีเตรียม DEPC (diethylpyrocarbonate)-treated water<br />
น้ํา<strong>ก</strong>ลั่น<br />
100 มิลลิลิตร<br />
DEPC 100 มิลลิลิตร<br />
** ควรสวมถุงมือขณะเตรียม เนื่องจา<strong>ก</strong>เปนสาร<strong>ก</strong>อมะเร็ง<br />
(carcinogen) และปอง<strong>ก</strong>ัน<strong>ก</strong>าร<br />
ปนเปอน<br />
นําไป incubate ที่อุณหภูมิ<br />
37 องศาเซลเซียสเปนเวลา 2 ชั่วโมง<br />
(เขยาขวดบอยๆ เพื่อให<br />
RNase ในขวดเสียสภาพไป) จา<strong>ก</strong>นั้นนําไป<br />
autoclave ที่อุณหภูมิ<br />
121 องศาเซลเซียส และความดัน<br />
15 psi เวลา 20 นาที เพื่อระเหย<br />
DEPC ออ<strong>ก</strong>ใหหมด (ถายังได<strong>ก</strong>ลิ่น<br />
DEPC ใหนําไป autoclave อี<strong>ก</strong><br />
ครั้ง)<br />
หอดวยพลาสติ<strong>ก</strong>ใสแลวเ<strong>ก</strong>็บไวที่อุณหภูมิหอง<br />
9. วิธีเตรียม ethidium bromide ความเขมขน 10 mg/ml<br />
ethidium bromide 1 <strong>ก</strong>รัม<br />
น้ํา<strong>ก</strong>ลั่น<br />
100 มิลลิลิตร
Change language