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mativa anual de 200 milhões de pessoas usando DEET para se proteger de picadas e doenças (2). Segundo a Agência Americana de Proteção Ambiental (EPA), existem hoje cerca de 140 produtos à base de DEET, com concentrações desse ingrediente ativo variando entre 5 a 100%, registrados por pelo menos 40 empresas do ramo (3,4). São,semdúvida,repel enteseficientes e populares. Apesar de conhecido há muito tempo, um estudo recente indicou que existe ainda um bom debate sobre a maneira como o DEET funciona repelindo insetos hematófagos (5). As hipóteses anteriores sugeriam que não é o DEET, é ele próprio, percebido pelos insetos, mas que funciona porque mascara ou confunde o sistema olfativo dos mosquitos e sua percepção aos odores que normalmente usa para nos encontrar, seja o CO 2 , o ácido lático ou mesmo o 1-octen-3- -ol. O trabalho recente publicado por SYED e LEAL (5) é mais categórico. Eles indicam que DEET funciona como repelente mesmo na ausência do ácido lático, demonstram que os mosquitos conseguem perceber o odor do DEET e que essa é a causa direta da repelência. Nos Estados Unidos da América os produtos comerciais OFF! ® (marca registrada da empresa SC Johnson), podem ser encontrados no mercado em várias apresentações, indicando em seus rótulos concentrações do ingrediente ativo DEET variando desde baixas, entre 5 e 15%, para o “OFF! ® Family CareInsectRepellent” (spray, aerossol e lenços), até concentrações bem altas ou o ingrediente ativo praticamente puro, como o “OFF! Deep Woods ® ” (Sportsmen Insect Repellent I, spray), quepossui 98,11% de DEET (7). A mesma empresa tem no Brasil mais de 50% do mercado de repelentes de mosquito, comercializando seus produtos “OFF! Repelente Aerossol Máxima Duração” (com 14,24% i.a.) e o “Repelente OFF! Kids” (7,12% i.a.), ambos com a quantidade de DEET relaciona no rótulo. A empresa também comercializa os produtos “OFF! Repelente Spray Refrescante”, “OFF! Repelente Loção Hidratante” e “ OFF! Family”, mas esses não apresentam a concentração de DEET no rótulo. No Brasil, os repelentes de insetos são regulamentados como cosméticos e, de acordo com a Câmara Técnica de Cosméticos da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (AN- VISA), os rótulos dos produtos devem conter apenas o tempo necessário para sua reaplicação com base em testes de eficácia, obedecendo sempre, quando for o caso, o número máximo de aplicações. Com relação à concentração de i.a., os rótulos devem apenas conter diferentes instruções de acordo com duas faixas de concentrações: até 10% de i.a. e entre 11% e 30%, mas a concentração exata não precisa ser declarada. Desde 1997 temos avaliado repelentes de mosquitos em nossos laboratórios na Unicamp, padronizando bioensaios com fêmeas de Aedes aegypti (mosquito da dengue) e Ae. albopictus (mosquito tigre asiático), comparando preparados pré-comerciais com o repelente “OFF! Loção Hidratante”, usado como controle positivo padrão, por ter comprovado sucesso comercial. Esse produto, que apresentava em seu rótulo posterior a indicação de possuir “N-N-Dietiltoluamida 7,1%”, foi substituído pelo produto “OFF! Repelente de Insetos, Novo!, Loção Hidratante com Aloe Vera”, que apresenta no rótulo posterior o mesmo ingrediente ativo, com outro nome (DiethylToluamide) e não menciona a sua concentração na fórmula. Mas, de acordo com o Serviço de Atendimento ao Consumidor (SAC) da empresa (0800-7076789), esse novo repelente OFF! possui entre 6% e 9% de DEET. No presente estudo nós avaliamos a eficácia em repelir mosquitos da antiga formulação comparada com a nova. MATERIAIS E MÉTODOS Os testes foram conduzidos em condições controladas de laboratório de 25 ± 2 o C de temperatura e 75 ± 5% de umidade relativa, usando-se fêmeas do mosquito Ae. aegypti de uma colônia mantida desde 1993 (linhagem Rockefeller, CDC, Atlanta, EUA). Os repelentes foram avaliados em dedos humanos segundo metodologia que desenvolvemos anteriormente (9). As mãos dos pesquisadores, protegidas por luvas de látex, exceto por pedaços das luvas cortados na região mediana de três dedos, são oferecidas aos mosquitos em caixas de criação com as dimensões 90x70x65cm. A área dos dedos exposta foi de 16cm 2 de pele. Dois dedos receberam o tratamento com 20µ de cada formulação, volume previamente estabelecido como sendo suficiente para saturar aquela área de pele, e o terceiro dedo permaneceu não tratado. Foram feitas seis réplicas, sendo duas para a mão de cada um dos pesquisadores, em dias diferentes. Foi contado o número de tentativas de picada (quando os mosquitos pousam e iniciam a inserção do aparelho bucal) em cada dedo, para um período de 15 minutos. Não se permitiu que os mosquitos ingerissem sangue, sendo impelidos a voar assim que iniciassem a picada, pelo toque suave de uma pena de ave presa à ponta de um bastão. As avaliações foram feitas em três momentos após a aplicação (AA) dos produtos. A primeira avaliação foi feita poucos minutos após aplicados, logo que os produtos foram absorvidos pela pele, e foi denominada Justamente Após a Aplicação (JAA). A segunda e a terceira avaliações foram feitas respectivamente duas e quarto horas após a aplicação (2hAA e 4hAA), de forma a se verificar o efeito residual dos tratamentos repelentes. Calculou-se um Índice percentual de Proteção (IP) às picadas como sendo IP=((DñP-DP)/DñP)x100, onde DñP é o número de picadas em dedos não protegidos e DP é o número de picadas em dedos protegidos (10). A análise estatística foi feita pelo teste t-Student (p=0,05). Os produtos avaliados foram “OFF! Repelente de Insetos Loção Hidratante” Lote 4173001 e “OFF! Repelente de Insetos Novo! Loção Hidratante” Lote 7089001. O registro da avaliação foi lavrado em Livro Repel-1, páginas 152 a 155 (Série 45/2007). 3
Artigo RESULTADOS E DISCUSSÃO De acordo com a ANVISA (8), as entidades International Union ofPureandAppliedChemistry (IUPAC) e a Chemical Abstract Service (CAS), adotam as designações genéricas para o DEET respectivamente como N,N-dietil-meta-toluamida e N,N-dietil-3-metilbenzamida (sic). De fato, a nomenclatura IUPAC para o DEET é [N-N]-diethyl-m-toluamide, e ambos os rótulos (Tabela 1), tanto para o produto que saiu de linha como para o OFF! Novo! estão, portanto, usando sinonímias. A Tabela 1 mostra os resultados para a comparação entre os repelentes OFF! que saiu de linha e o produto novo. Considerando-se todas as réplicas, a média de tentativas de picadas nos dedos não protegidos por repelentes foi alta (160,4 picadas /15 min; DP = 20,8), indicando uma forte pressão de ataque. Para os dedos protegidos pelos repelentes, o teste estatístico mostrou que não houve diferença significativa entre as avaliações JAA (t = 1; gl = 6; P = 0,1779) e 2hAA (t = -1,6917; gl = 6; P = 0,0708), e que a proteção permitida por ambas as formulações foi praticamente completa, alcançando valores acima de 96%. Para a avaliação 4hAA entretanto, houve diferença estatisticamente significativa (t = -3.0437; gl = 6; P = 0,0113) entre as duas formulações, com o produto OFF! antigo mostrando-se mais eficiente do que o OFF! novo. Tabela 1. Índice de proteção percentual médio (Desvio Padrão) às picadas de Aedes aegypti para os períodos Justamente Após (JAA), 2 horas (2hAA), e 4 horas (4hAA) após a aplicação de duas fórmulas de um repelente à base de DEET. 4 Produto (Ingrediente Ativo)* OFF! Repelente de Insetos (N-N-Dietiltoluamida 7.1%) OFF! Repelente de Insetos Novo! (Diethyl Toluamide) Período após a Aplicação JAA 2hAA 4hAA 100 (0,0)a 99,2 (1,02)a 96,8 (1,53)a 99,8 (0,37)a 96,6 (3,43)a 86,9 (9,01)b *De acordo com o rótulo Para cada coluna, medias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente pelo teste de t de Student. Ao estabelecerem também em gaiolas uma curva dose- -resposta de mosquitos Ae. aegypti ao DEET, para uma série de diluições, Buescheret al. (11) registraram uma curva exponencial negativa, significando que cada incremento na concentração permitia um incremento progressivamente menor na proteção às picadas. Assim, para um aumento ou diminuição em concentrações baixas, podem-se esperar variações maiores do que quando se aumenta ou se diminui concentrações já altas. E de acordo com Fradin (12), os repelentes com altas concentrações de DEET são de fato melhores por oferecerem proteções por períodos de tempo maiores, sendo que modelos matemáticos mostram que a eficiência e persistência em repelir são relacionadas ao logaritmo das doses. CONCLUSÕES Pode-se concluir então que, embora a informação do fabricante pelo serviço de atendimento ao consumidor não tenha sido específica, e foi de que a nova fórmula possui entre 6% e 9% i.a., de fato o produto deve possuir concentração inferior ao produto que saiu de linha (7,1%). R E f E R ê N C I A S CURTIS, C.F. Personal protection methods against vectors of disease.Rev. Med. Vet. Entomol. 80: 543-53, 1992. FRADIN, M.S. Insect repellents.E-medicine (2002).. USA. . Acessoem Nov. 12, 2009. KOREN G.; MATSUI D. & B. BAILEY.DEET-based insect repellents: safety implications for children and pregnant and lactating women. Can. Med. Assoc. J. 169: 209-212, 2003. ANDRADE, C.F.S. Repelentes de Mosquito - Base Técnica para Avaliação (2008). Artigos Técnicos em Ecologia Aplicada - Unicamp. Disponível em: Acesso em Jun. 15, 2011. SYED, Z. & W.S. LEAL. Mosquitoes smell and avoid the insect repellent DEET. Proc. Natl. Acad. Sci.105: 13598–13603. (2008). Disponível em: Acesso em Ag. 22, 2010. PICKETT, J.A.; BIRKETT, M.A. & J.G. LOGAN.DEET repels ORNery mosquitoes. Proc. Natl. Acad. Sci. 105: 13195-13196. (2008). Disponível em: Acesso em Jun. 21, 2011. OFF Insect Repellents. Which OFF! ® product with DEET is right for you? 2009. Available at Acesso em Ag. 22, 2009. ANvISA.Câmara Técnica de Cosméticos – CATEC. Parecer Técnico Nº 2. 2006.Utilização do DEET em preparações de repelentes para insetos. Available at Acessoem Jun. 2011. ANDRADE, C.F.S. & v.S. BUENO.Evaluation of three laboratory methods for the comparative test of mosquito repellents using Aedesalbopictus (Skuse) (Diptera: Culicidae) in Brazil. The Annals of Medical Entomology. 10: 34-40, 2001. COMBEMALE, P.; DERUAZ, D.; vILLANOvA, D. & P. GUILLAUMONT. Lês insectfuges ou lês répellents. Ann. Dermatol. Venereol. 119: 411-434,1992. BUESChER, M.D.; RUTLEDGE, L.C.; WIRTZ, R.A. & J.h. NELSON. The dose-persistence relationship of deet against Aedesaegypti. Mosquito News 43: 364-366, 1983. FRADIN, M.S. Mosquitoes and Mosquito Repellents: A cliniciscian´s guide. Ann. International Medicine. 128: 931-940, 1998.
Page 1: Artigo COMPARAÇÃO POR MEIO DE BIO

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