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UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia
Programa de Pós Graduação em Ciência Animal nos Trópicos
SOROEPIDEMIOLOGIA DA LINFADENITE CASEOSA, DOENÇA DA LÍNGUA AZUL E
DA DOENÇA DE MAEDI-VISNA EM OVINOS DE RAÇA DEFINIDA NO ESTADO DA
BAHIA, E CORRELAÇÕES COM ASPECTOS ZOOTÉCNICOS
DAN LOUREIRO NASCIMENTO
Salvador – Bahia
2012

SOROEPIDEMIOLOGIA DA LINFADENITE CASEOSA, DOENÇA DA LÍNGUA AZUL E
DA DOENÇA DE MAEDI-VISNA EM OVINOS DE RAÇA DEFINIDA NO ESTADO DA
BAHIA E CORRELAÇÕES COM ASPECTOS ZOOTÉCNICOS
DAN LOUREIRO NASCIMENTO
Orientador: Prof. Dr. Ricardo Wagner Dias Portela
Salvador – Bahia
2012
Dissertação apresentada à Escola de
Medicina Veterinária da Bahia, como
requisito para a obtenção do título de
Mestre em Medicina Veterinária
Tropical, na área de Saúde Animal.
i

LOUREIRO, Dan.
Soroepidemiologia da Linfadenite caseosa, da Doença da Língua Azul e da Doença de
Maedi-visna em ovinos de raça definida do estado da Bahia e correlações com aspectos
zootécnicos / Dan Loureiro Nascimento – Salvador, 2012. 98p. Dissertação (Mestrado em
Ciência Animal nos Trópicos) – Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade
Federal da Bahia, 2012.
Orientador – Prof. Dr. Ricardo Wagner Dias Portela.
Palavras-chave: Aspectos zootécnicos, Linfadenite caseosa, Língua Azul, Maedi-Visna,
soroepidemiologia.
ii

SOROEPIDEMIOLOGIA DA LINFADENITE CASEOSA, DOENÇA DA LÍNGUA AZUL E
DA DOENÇA DE MAEDI-VISNA EM OVINOS DE RAÇA DEFINIDA NO ESTADO DA
Comissão Examinadora:
BAHIA E CORRELAÇÕES COM ASPECTOS ZOOTÉCNICOS
DAN LOUREIRO NASCIMENTO
Prof. Dr. Ricardo Wagner Dias Portela – UFBA
Orientador
Prof. Dr. Roberto José Meyer Nascimento–UFBA
Profª. Drª. Heloisa Cristina da Silva – UFBA
iii

“Há homens que lutam um dia, e são bons. Há homens que lutam um dia, e são muito bons. Há outros
que lutam um ano, e são melhores. Há aqueles que lutam muitos anos, e são muito bons. Porém há os
que lutam toda a vida, estes são os imprescindíveis” (Albert Einstein).
iv

AGRADECIMENTOS
Agradeço a meus pais pela criação e por sempre me mostrarem, de uma forma ou de outra, que sendo
forte e determinado, posso ir mais além;
A minha irmã Isabela pelo apoio e carinho. Sempre darei o melhor de mim em tudo que fizer, pois para
você tenho que ser, dos exemplos o melhor;
À minha avó Terezinha, Ceceu e “Família Nascimento” por toda dedicação, ajuda e incentivo, e a
minha avó Rery, pela paciência e calma, e toda a “Família Loureiro”;
Agradeço a Raissa Dias por todo amor, apoio, dedicação e resistência nas horas mais difíceis;
Ao Prof. Dr. Roberto Meyer, pela confiança e credibilidade que sempre me dedicou, e pelo apoio
financeiro imprescindível para a realização desse trabalho;
Ao Prof. Dr. Ricardo Portela, exemplo de pessoa e profissional, o qual tentamos seguir sempre, por
acreditar e confiar no meu trabalho e, acima de tudo, pela amizade;
Aos Professores Aurora Gouveia, Andrew Lage, Marcos Heinemann e Zelia Lobato, da Escola de
Veterinária da UFMG, e o Dr. Alessandro Guimaraes da EMBRAPA Gado de Leite, pela colaboração
na realização desse trabalho;
À Tereza Guedes, minha “segunda mãe”, por todo carinho, paciência e dedicação; pela amizade e apoio
em todas as horas;
Aos amigos Bruno Bastos, Ludmilla Sena e Jose Tadeu Raynal, por todos os trabalhos juntos;
Ao Laboratório de Imunologia e Biologia Molecular, em especial a Dona Chica, Zé, Manoel e Seu
Mário, sem os quais jamais teríamos realizado este trabalho;
Ao Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal nos Trópicos da UFBA, em especial a Kátia e
Angélica;
A ACCOBA e ADAB, em especial ao Dr. Antônio Lemos Maia, que não só permitiram, como
contribuíram para o levantamento dos dados necessários;
A CAPES e o CNPQ, pela concessão da bolsa de mestrado;
A meus “Brothers of Metal” (são muitos e vocês sabem quem são) , por todo o apoio e interesse em
meu trabalho, e por sempre estarem ao meu lado quando eu mais precisei;
Aos amigos Patrícia Meira, Paula Daltro, Bianca Cardeal, Thiago Souza, Daniele Dantas, Miriam
Rebouças, Marcos Silva, Milton Galdino, Heidiane Alves, Ricardo Fraga, Paulo Cirino, Yuri Sousa, e
todos os amigos do Labimuno.
A todos que fizeram parte desta jornada e deste trabalho, meus sinceros agradecimentos.
v

ÍNDICE
vi
Páginas
LISTA DE FIGURAS......................................................................................................................... vii
LISTA DE ABREVIATURAS........................................................................................................... ix
RESUMO............................................................................................................................................. xii
SUMMARY........................................................................................................................................... xiii
1. INTRODUÇÃO GERAL............................................................................................................... 1
2. REVISÃO DE LITERATURA...................................................................................................... 3
2.1. Ovinocultura................................................................................................................................. 3
2.1.1. Ovinocultura Brasileira................................................................................................... 3
2.1.2. Ovinocultura na Bahia..................................................................................................... 3
2.2. Linfadenite Caseosa..................................................................................................................... 4
2.2.1. Corynebacterium pseudotuberculosis............................................................................. 4
2.2.2. Patologia e Imunologia................................................................................................... 6
2.2.3. Epidemiologia................................................................................................................. 7
2.2.4. Transmissão..................................................................................................................... 8
2.2.5. Controle........................................................................................................................... 10
2.2.6. Diagnóstico...................................................................................................................... 12
2.3. Maedi-Visna........................................................................................................................... 13
2.3.1. Vírus de Maedi-Visna (VMV).........................................................................................13
2.3.2. Estrutura Viral................................................................................................................. 14
2.3.3. Patologia e Imunologia................................................................................................... 15
2.3.4. Epidemiologia e Transmissão......................................................................................... 16
2.3.5. Controle.......................................................................................................................... 17
2.3.6. Diagnóstico..................................................................................................................... 17
2.4. Língua Azul........................................................................................................................... 18
2.4.1. Vírus da Língua Azul (VLA)......................................................................................... 18
2.4.2. Estrutura Viral................................................................................................................ 18
2.4.3. Patologia e Imunologia................................................................................................... 19
2.4.4. Epidemiologia................................................................................................................. 20

2.4.5. Transmissão..................................................................................................................... 21
2.4.6. Controle........................................................................................................................... 23
2.4.7. Diagnóstico...................................................................................................................... 24
3. ARTIGO CIENTÍFICO 1.............................................................................................................. 25
Resumo...................................................................................................................................... 25
Summary................................................................................................................................... 26
Introdução................................................................................................................................. 26
Materiais e Métodos.................................................................................................................. 27
Resultados e Discussão............................................................................................................. 30
Referências................................................................................................................................ 36
4. ARTIGO CIENTÍFICO 2.............................................................................................................. 40
Resumo...................................................................................................................................... 40
Summary................................................................................................................................... 41
Introdução................................................................................................................................. 41
Materiais e Métodos.................................................................................................................. 43
Resultados e Discussão............................................................................................................. 44
Referências................................................................................................................................ 50
5. CONSIDERAÇÕES FINAIS................................................................................................. 54
6. REFERÊNCIAS...................................................................................................................... 55
7. ANEXOS.................................................................................................................................. 71
7.1. Anexo 1................................................................................................................................... 71
7.2. Anexo 2................................................................................................................................... 76
vii

LISTA DE FIGURAS
FIGURA 1 - Mapa do estado da Bahia seguindo a divisão em 7 mesorregiões como proposto pelo IBGE 28
1- Extremo Oeste; 2- Vale São-Franciscano; 3- Centro Sul; 4- Sul; 5- Centro-Norte; 6- Nordeste Baiano; 7
-Metropolitana de Salvador). Em preto estão marcados os 37 municípios avaliados.
FIGURA 2 - Soroprevalência aparente e real (A) da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis 31
e (B) percentual de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para Linfadenite caseo-
as em função do sexo, da raça e da idade.
FIGURA 3 - Níveis de soroprevalência da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis em função 32
de ações de gerenciamento desenvolvidas para manejo de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia.
FIGURA 4 - Níveis de soroprevalência da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis em função 34
das ações técnicas de manejo aplicadas na criação de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia.
FIGURA 5 - Soroprevalência aparente e real da infecção por VMV. 45
FIGURA 6 - Soroprevalência aparente e real da infecção por VLA (A) e o perfil dos rebanhos soroposi- 46
tivos com relação à importação de animais (B).
FIGURA 7 - Percentual de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para MV em 47
função do sexo, da raça e da idade.
FIGURA 8 - Percentual de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para LA em 47
função do sexo, da raça e da idade.
FIGURA 9 - Níveis de soroprevalência da infecção pelo vírus do Maedi-Visna em função das ações téc- 48
nico-gerenciais desenvolvidas para o manejo de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia.
viii
Página

°C Graus Celsius
°N Norte
°S Sul
µm Micrometro
LISTA DE ABREVIATURAS
ACCOBA Associação dos Criadores de Caprinos e Ovinos da Bahia
ADAB Agência de Defesa Sanitária da Bahia
AGID Agar Gel Immunodiffusion
ARCO Associação Brasileira dos Criadores de ovinos
BHI Brain Heart Infusion
C Citosina
CA Proteína do Cápside
CONAB Companhia Nacional de Abastecimento
DAP Diaminopimélico
DINE Diretoria de Inovação e Empreendimento
ELISA Enzime-Linked Immunosorbent Assay
EV Escola de Medicina Veterinária
FAO Food and Agriculture Organization
G Giros
G Guanina
gp Glicoproteínas
IBGE Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística
ICS Instituto de Ciências de Saúde
ix

IDGA Imunodifusão em Gel de Ágar
IgG Imunoglobulina G
IL Interleucina
LA Língua Azul
LC Linfadenite Caseosa
LVPR Lentivírus de Pequenos Ruminantes
MA Proteína da Matriz
Mg Magnésio
ml Mililitros
MV Maedi-Visna
NC Proteína do Nucleocapsídeo
NEF Proteína Multifuncional de 27 Quilodaltons
nm Nanômetros
OIE Organização Internacional de Epízotias
ORF Open Reading Frame
PBS Solução Fosfato Salina
PBS-T Solução Fosfato Salina com Tween-20
PCR Reação em Cadeia da Polimerase
pH Potencial Hidrogeniônico
RNA Ácido Ribonucleico
RT-PCR Reação em Cadeia da Polimerase – Transcriptase Reversa
SEBRAE Serviço Brasileiro de Apoio às Micro e Pequenas Empresas
x

SU Glicoproteína de Superfície
TAT Gene de Expressão Transativadora
TM Glicoproteína Transmembranária
TNF Fator de Necrose Tumoral
UFBA Universidade Federal da Bahia
UFMG Universidade Federal de Minas Gerais
UFPE Universidade Federal de Pernambuco
VEHD Vírus da Doença Hemorrágica Epizoótica
VIF Fator de Infectividade Viral
VLA Vírus da Língua Azul
VMV Vírus de Maedi-Visna
VPR Proteína Viral R
VPU Proteína Viral U
VPX Proteína de 12 Quilodaltons do Virion
xi

LOUREIRO, D. Soroepidemiologia da Linfadenite Caseosa, da Doença da Língua Azul e da
Doença de Maedi-Visna em ovinos de raça definida do Estado da Bahia e correlação com
aspectos zootécnicos. Salvador, Bahia, 98p. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal nos Trópicos)
– Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia, 2012.
RESUMO
A ovinocultura apresenta importância crescente no cenário econômico brasileiro,
principalmente devido ao alto valor agregado de alguns de seus subprodutos, mas a tecnificação da
criação desses animais ainda enfrenta problemas, como a ocorrência de diversas doenças infecciosas. O
produtor rural é desafiado com o fato de conciliar técnicas de manejo com a prevenção da infecção por
diversos agentes. O presente estudo objetivou a avaliação da situação sorológica de ovinos de raça
definida da Bahia quando testados para presença de anticorpos específicos para Corynebacterium
pseudotuberculosis e os vírus da Língua Azul e de Maedi-Visna, bem como as práticas de manejo
utilizadas pelos criadores e sua correlação com a infecção dos animais. Nos exames diagnósticos foi
utilizado a técnica de ELISA para C. pseudotuberculosis e Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) para
as demais doenças, em 690 amostras de ovinos com raça definida provenientes do estado da Bahia,
Brasil. Um questionário foi aplicado aos criadores com o intuito de obter dados acerca do sistema de
criação para posterior correlação com os dados sorológicos. Os resultados mostraram uma prevalência
real de 22,1% de animais soropositivos para anticorpos anti-C. pseudotuberculosis, e 3,9% e 2,9% de
soropositivos para anticorpos anti-Vírus de Maedi-Visna e anti-Vírus da Língua Azul, respectivamente.
Certas práticas de manejo apresentaram correlação significativa com a sorologia da Linfadenite caseosa
e da doença de Maedi-Visna e a importação de animais se mostrou de extrema importância para a
soropositividade da Língua Azul no estado da Bahia.
Palavras-chave: Bahia, Linfadenite caseosa, Língua Azul, Maedi-Visna, ovinos.
xii

LOUREIRO, D. Seroepidemiology of Caseous Lymphadenitis, Blue-tongue Disease and Maedi-
Visna disease in sheep with defined breed in the state of Bahia and correlations with zootechnical
aspects. Salvador, Bahia, 98p.Dissertation (Master in Animal Science in the Tropics) – Veterinary
Medicine School, Federal University of Bahia, 2012.
SUMMARY
The ovine industry is showing an increasing importance in the Brazilian economy, mainly due
to the high value of some byproducts, but the technical level of these animals breeding still faces
problems, such as some wide spread infectious diseases. Farmers are challenged to reconcile
management techniques with the prevention of the infection by various agents. This study aimed to
assess the serological status of sheep with defined breed from Bahia State for the presence of
Corynebacterium pseudotuberculosis, Maedi-Visna virus and Blue-tongue virus specific antibodies, as
well as the management practices used by farmers and their correlation with the animal infection.
Diagnoses were made using ELISA for C. pseudotuberculosis, and Agar Gel Immunodiffusion(AGID)
test for the other diseases, in 690samplesof sheep with defined breed from Bahia state, Brazil. A
questionnaire was applied to the farmers in order to obtain data about the breeding characteristic sand
for later correlation with the serological data. The results showed 22.1% of seropositive animals for
anti-C. pseudotuberculosis antibodies, and 3.9% and 2.9% were seropositive for antibodies specific to
Maedi-Visna Virus and Virus Bluetongue, respectively. Some management practices were significantly
correlated with Caseous lymphadenitis and Maedi-Visna diseases occurrence, and importation of
animals has proved extremely important for the seroprevalence of Bluetongue in the state of Bahia.
Keywords: Bahia, Bluetongue, Caseous Lymphadenitis, Maedi Visna, sheep.
xiii

1. INTRODUÇÃO
A domesticação dos ovinos e caprinos teve inicio há cerca de 12.000 anos, sendo
provavelmente os primeiros ruminantes a serem domesticados pelo homem. Durante as grandes
migrações, o homem levou consigo seus rebanhos ovinos e caprinos como garantia da manutenção da
disponibilidade de carne, leite, pele, lã e outros subprodutos essenciais. Atualmente são os animais
domésticos de maior distribuição geográfica no planeta (Araújo, 2006).
No Brasil, os pequenos ruminantes constituem a principal fonte de proteína e de renda para a
população rural do Nordeste, que apresenta o maior rebanho ovino do país, sendo a Bahia o estado
mais representativo (IBGE, 2008). A exploração de pequenos ruminantes é muito importante nesta
região, por que abrange desde a agricultura familiar até as empresas rurais organizadas em moldes
empresariais (Araújo, 2006).
A ovinocultura tem se apresentado como atividade econômica de importância crescente,
principalmente no Nordeste do Brasil, e em especial no estado da Bahia (Araújo, 2006). A
possibilidade de utilização de áreas da Região Semi-Árida, associada à adaptação desses animais a esta
região, configura à criação de ovinos uma promessa de melhora da econômica do pequeno e médio
produtor rural (Lobato, 1999). Acompanhando esse processo, há também uma demanda cada vez maior
por subprodutos oriundos dessa criação, o que causa a valorização desses bens (Alves et al., 1997).
Várias endemias estão presentes nos rebanhos brasileiros, entre elas a Linfadenite Caseosa
(LC), doença de Maedi-Visna (MV) e doença da Língua Azul (LA). A Linfadenite Caseosa, doença
provocada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, com alta prevalência no Nordeste
(Meyer, 2004), é uma das maiores preocupações para a ovinocultura, por causar consideráveis perdas
econômicas (Alves et al., 1997).
A virose Maedi-Visna (MV) é provocada pelo vírus Maedi-Visna. É importante doença de
ovinos, resultante de infecção persistente, lenta e progressiva. Os animais acometidos desenvolvem
quadro clínico neurológico degenerativo, inflamatório e/ou pneumonia progressiva após longo período
de incubação do vírus (Fevereiro et al., 1999).
Outra doença que tem se mostrado motivo de preocupação é a doença da Língua Azul (LA),
cujo agente etiológico é um vírus do gênero Orbiviruse da família Reoviridae,o qual apresenta 24
subespécies (Lager et al., 2004). A LA é transmitida por mosquitos do gênero Culicoides e geralmente
se comporta como uma infecção subclínica em bovinos e caprinos (Fauquet et al., 2005). Os ovinos
1

podem apresentar a forma aguda da doença, que se caracteriza por hipertermia, inflamação e erosão da
mucosa bucal, coronite, pododermatite, miosite, pneumonia, emaciação e ocasionalmente cianose
lingual (Obdeyn, 1984; OIE, 2008).
As perdas econômicas causadas por estas enfermidades são consideráveis (Lobato, 1999). A LC
provoca diminuição de peso, redução na lactação, queda do valor comercial das peles e, em alguns
casos, infertilidade (Alves et al., 1997). No caso do VMV observa-se falhas reprodutivas, morte,
diminuição da produção láctea e perda de peso dos animais (Callado et al., 2001). Já a LA causa perdas
diretas nos rebanhos afetados decorrentes da morbidade, e restrições econômicas impostas por países
importadores de animais e sêmen (Erasmus et al., 1975).
A MV e LA são fortes fatores limitadores do comércio internacional devido a barreiras
sanitárias (Ishizuka et al., 2004). Por isso, se faz necessária obtenção de conhecimento, controle e
melhorias nos tratamentos e diagnósticos dessas doenças, desenvolvimento de testes diagnósticos que
apresentem maiores sensibilidade e especificidade, bem como programas de controle e melhorias de
manejo (Dantas, 2004).
A escassez de informações sobre a abrangência da linfadenite caseosa bem como Maedi-Visna
e Língua Azul, e a distribuição e dispersão das mesmas em nosso estado tem contribuído para a falta de
medidas de combate e controle eficazes. O presente trabalho tem como intenção coletar e gerar
informações que auxiliem no combate a estas doenças de importância na ovinocultura, focando-se
principalmente em animais de alto valor genético e econômico, os quais podem, devido ao fato de os
machos serem doadores de sêmen e as fêmeas reprodutoras matrizes, servirem de fatores
disseminadores de diversos agentes infecciosos.
2

2. REVISÃO DE LITERATURA
2.1. Ovinocultura
2.1.1. A Ovinocultura Brasileira
O rebanho mundial de ovinos é estimado em aproximadamente 1,9 bilhões de animais (FAO,
2006). Apesar do vasto território e do clima favorável, o Brasil possui um rebanho ovino pequeno, de
aproximadamente 16.019.170 milhões de animais (IBGE, 2008), sendo que este rebanho está
distribuído pelo país da seguinte forma: 2,8% encontram-se na Região Norte, 49% no Nordeste, 2,8%
no Sudeste, 40% no Sul e 4,9% no Centro-Oeste (Alves et al., 1997).
Com a crescente procura por subprodutos da ovinocultura, há um número maior de empresários
dispostos a investir nessa atividade, o que resulta em uma busca maior por tecnificação dessa cultura e
por medidas de saúde preventivas mais eficazes e de pronto acesso (Alves et al., 1997).
2.1.2. A ovinocultura na Bahia
A produção de ovinos constitui atividade de relevância social e econômica no Nordeste
brasileiro (Araújo, 2006). A Bahia possui atualmente o maior rebanho ovino do país e, segundo o
IBGE (2008), estima-se que até o ano de 2006 o estado da Bahia possuía um rebanho ovino na ordem
de 3.165.757 animais. No entanto, o potencial na área de comercialização é muito pouco explorado
(Dantas, 2004).
A maioria dos rebanhos ovinos na região Nordeste é explorada em sistema extensivo, não sendo
adotadas práticas adequadas de manejo alimentar e sanitário, o que tem contribuído para a baixa
produtividade da ovinocultura de corte (CONAB, 2006). Diversas razões podem ser atribuídas para
explicar esse quadro, especialmente a progressiva espoliação da caatinga (Araújo, 2006). Entretanto, é
certo que enfermidades como a linfadenite caseosa, doenças de Maedi-Visna e Língua Azul, que
possuem significantes prevalências em algumas regiões do país, contribuam de modo significativo para
o referido declínio (Alves et al., 2007).
As perdas econômicas são decorrentes da diminuição da vida produtiva e reprodutiva, da
produção leiteira, predisposição da glândula mamária às infecções bacterianas, retardo no crescimento
das crias, morbidade, desvalorização comercial dos produtos, despesas com programas de controle e
3

estrições de importação (Gonzalezet al., 1987; Petrez & Devillechase, 1993; Concha-Bermejillo, 1997;
Lobato, 1999; Callado et al., 2001).
Os prejuízos gerados por estas endemias são de considerável extensão; por um lado afetam uma
cultura de subsistência básica para o pequeno produtor nordestino, sendo que mais de 50% do rebanho
é criado em áreas que possuem não mais do que 30 hectares (Alves et al., 2007), e por outro chegam a
afetar as importações de animais do país devido a barreiras sanitárias existentes (Ishizuka et al., 2004).
2.2. Linfadenite Caseosa
2.2.1. Corynebacterium pseudotuberculosis
O Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente etiológico da linfadenite caseosa (LC), que
afeta principalmente as populações de pequenos ruminantes em todo o mundo (Arsenault et al., 2003).
Esta bactéria foi descrita pela primeira vez em 1888 pelo veterinário francês Edmound Nocard
(Benham et al., 1962).
Em 1891, Hugo von Preisz isolou uma bactéria semelhante de um abscesso renal ovino. Assim,
esse patógeno foi nomeado bacilo de "Preisz-Nocard”, nome ao qual esteve ligado por décadas (Collett
et al., 1994). Na Austrália, que atualmente é o país com o segundo maior rebanho ovino do mundo, a
LC foi primeiramente descrita em 1934 por Churchward (Benham et al., 1962). A nomenclatura atual
foi adotada em 1948 na sexta edição do Manual Bergey, e a designação Corynebacterium ovis é usada
como sinônimo (Moore et al., 2010).
O gênero Corynebacterium pertence à subordem Corynebacterineae (Actinobactéria:
Actinomycetales) que inclui as famílias Corynebacteriaceae, Mycobacteriaceae e Nocardiaceae e por
isso é comumente designado como o grupo CMN (Stackebrandt et al., 1997). Algumas características
são comuns a esse grupo, como a organização específica da parede celular, composta principalmente
por peptidoglicano, arabinogalactana e ácidos micólicos, bem como a alta concentração de guanina-
citosina (G+C)no genoma (47-74%) (Dorella et al., 2006).
Essa bactéria é classificada em dois biovares (Biberstein et al., 1971), o biovar ovis que afeta
principalmente ovinos e caprinos causando abscessos superficiais e viscerais, e o biovar equi, que afeta
principalmente equídeos, causando linfangite ulcerativa das extremidades distais, abscessos ventral do
tórax e abdômen, e furunculose (Connor et al., 2000). A existência desses dois biovares foi confirmada
por técnicas moleculares (Sutherland et al., 1996; Connor et al., 2007).
4

O C. pseudotuberculosis é um patógeno intracelular facultativo, Gram-positivo, que exibe
formas pleomórficas, de cocóide a hastes filamentosas, medindo cerca de 0,5-0,6 µm de largura e 1,0-
3,0 µm de comprimento, apresenta cápsula, flagelos e fímbrias, mas não esporula (Jolly, 1965). O
peptidoglicano da célula parece ser baseado em acido meso-diaminopimélico (meso-DAP) e os
açúcares arabinose e galactose estão presentes em grandes quantidades. Cadeias curtas de ácidos
micólicos também são encontradas (Selim, 2001).
É anaeróbio facultativo, e as condições ótimas para seu crescimento são temperatura a 37ºC
com pH variando entre 7,0 e 7,2 (Benham et al., 1962; Merchant & Packer, 1975), mas de acordo com
Batey (1986a) pode crescer bem em uma faixa de pH de 7,0-8,0. C. pseudotuberculosis é um
organismo exigente do ponto de vista nutricional, crescendo bem em meios enriquecidos como ágar
sangue, infusão de cérebro e coração (BHI) ou meio ágar enriquecido com soro animal. Seu cultivo em
meio BHI melhora quando é complementado com extrato de levedura, triptona ou lactalbumina
(Cameron & Swart, 1965). Seu crescimento em meio de cultura sólido começa inicialmente na
superfície do ágar e, em seguida, torna-se organizado em grupos ou em paliçada, assumindo uma
coloração creme amarelada; as colônias são secas, opacas e concentricamente aneladas, e após vários
dias de incubação as colônias podem chegar a 3 mm de diâmetro (QUINN et al., 1994).
Essa bactéria é caracterizada bioquimicamente pela produção de catalase, fosfolipase D, ureasee
fermentação de carboidratos, como maltose, glicose, manose e galactose (Merchant & Packer, 1975).
Não fermenta a lactose, não produz gás (Muckle & Gyles, 1982; Songer et al., 1988; Costa et al.,
1998), não tem atividade proteolítica, não apresenta capacidade de hidrolisar gelatina, nem de digerir
caseína, e são oxidase negativos(Merchant & Packer, 1975; Quinn et al., 1994).
Sobre a redução de nitrato, sugere-se que há dois biótipos baseados na produção de nitrato
redutase, demonstrado por análise com enzimas de restrição (Batey, 1986b). A redução de nitrato a
nitrito caracteriza cepas que infectam principalmente cavalos (biovar equi) e apresenta sensibilidade à
estreptomicina, enquanto as cepas que infectam ovinos e caprinos (biovar ovis) são principalmente
negativas para nitrato e resistentes à estreptomicina (Costa et al., 1998); bovinos seriam infectados por
ambas as cepas (Songer et al., 1988; Sutherland et al., 1996).
Dois determinantes de virulência de C. pseudotuberculosis foram bem caracterizados, a
exotoxina fosfolipase D e a parede celular lipídica tóxica (Songer, 1997). A exotoxina conhecida como
Fosfolipase D (PLD) foi caracterizada como sendo um fosfatidilcolina fosfatidilhidrolase de ação
enzimática (Carne, 1939; Onon, 1979). Essa exotoxina funciona como um fator de permeabilidade que
5

promove a disseminação do patógeno a partir do local inicial de infecção a todos os tecidos do corpo do
hospedeiro, causando danos dermo-necróticos e contribuindo para a passagem da bactéria da derme
para pequenos vasos sanguíneos para que ela acesse os vasos linfáticos (Egen et al., 1989). Além disso,
ela é considerada uma exotoxina citotóxica para as células brancas do sangue, promovendo a destruição
dos macrófagos durante a infecção experimental (Tashjian & Campbell, 1983).
2.2.2. Patogenia e Imunologia
C. pseudotuberculosis é uma bactéria intracelular facultativa que se multiplica dentro dos
macrófagos e sobrevive à ação de enzimas fagolisossômicas com ajuda da camada lipídica externada
parede celular (Dorella et al., 2006; Baird & Fontaine, 2007). Após penetrar no hospedeiro através das
mucosas ou deferidas na pele, a bactéria dissemina-se, com tropismo pelo sistema linfático aferente,
linfonodos locais e órgãos internos. Este processo depende da capacidade do agente para infectar os
macrófagos, resistir a fagolisossomos e matar as células, liberando novas bactérias e causando necrose
(Batey, 1986a).
A camada lipídica da parede desta bactéria tem a capacidade de inibir a fagocitose, aumentando
a sua virulência (citotoxicidade) e a sobrevivência no interior dos macrófagos (Dorella et al., 2006).
Abscessos são formados pela liberação de enzimas lisossômicas (Baird & Fontaine, 2007).Além de
participar da patogenicidade, o ácido micólico parece ser importante na sobrevivência dessa bactéria no
ambiente(West et al., 2002).
As fases da infecção por LC têm sido divididas em uma fase inicial (1-4 dias pós-infecção)
caracterizada pelo recrutamento de neutrófilos para o local da inoculação e linfonodos de drenagem;
uma fase de amplificação (5-10 dias pós-infecção) caracterizada pelo desenvolvimento de
piogranuloma, e uma fase de estabilização, caracterizada pela maturação e persistência do
piogranuloma (Pepin et al., 1997).
Alguns fatores bacterianos, como a exotoxina fosfolipase D e os lipídios citotóxicos,
contribuem para a patogênese a nível local, com pouca probabilidade de efeito sistêmico na doença
natural (Songer, 1997). Depois que C. pseudotuberculosis é capturada por células fagocíticas como
neutrófilos e macrófagos, o fagossomo se funde com o lisossomo, formando o fagolisossomo (Batey,
1986b). No entanto C. pseudotuberculosis é um patógeno intracelular facultativo capaz de sobreviver
dentro de macrófagos por mais de 48 horas. Durante esse tempo, as bactérias são liberadas como
6

esultado de um processo que leva os fagócitos à morte, embora esta propriedade varie entre as
diferentes cepas estudadas (Baird & Fontaine, 2007).
Os mecanismos específicos de morte celular causada por C. pseudotuberculosis ainda não estão
claros, mas a capacidade das bactérias de sobreviver dentro de macrófagos é atribuída à incapacidade
de várias populações de macrófagos para a produção de óxido nítrico em resposta a essa bactéria in
vivo (Bogdan et al., 1997). Estes efeitos podem estar associados com a presença da camada lipídica
externa em C. pseudotuberculosis e outros componentes antigênicos, que interromperiam a produção
de óxido nítrico pelos macrófagos (Bastos et al., 2011).
O crescimento descontrolado da bactéria no interior dos macrófagos leva o hospedeiro a tentar
restringir a infecção através da formação de piogranulomas, caracterizados pelo encapsulamento das
células infectadas por C. pseudotuberculosis (Batey, 1986b). A formação de piogranulomas é um
processo complexo e dependente da imunidade adaptativa, que envolve tanto a imunidade humoral
quanto a celular (Paule et al., 2003).
Além da formação de piogranulomas, a infecção por C. pseudotuberculosis leva a formação de
abscessos por via subcutânea localizada, que não provem de lesões primárias nos linfonodos (Paule et
al., 2003). No entanto, alguns abscessos podem ser encontrados em estreita associação com os gânglios
linfáticos, resultado da destruição dos tecidos associados com abscessos, que posteriormente
encapsulam e podem conter pus parcialmente calcificado (Moller et al., 2000).
2.2.3. Epidemiologia
A linfadenite caseosa tem distribuição mundial e geralmente segue a distribuição dos rebanhos
de ovinos e caprinos. A disseminação da doença no mundo provavelmente ocorreu através da
importação de animais infectados (Baird & Fontaine, 2007). Segundo a Organização Mundial de Saúde
Animal, entre os 201 países que relataram suas situações sanitárias, 64 declararam a presença de
animais com linfadenite caseosa dentro de suas fronteiras em 2009 (Ruiz et al., 2011). Estes países são
distribuídos nas Américas (19 de 42países), África (18 de 51), Ásia (11 de 43), Europa (14 de 51) e
Oceania (2 de 14) (OIE, 2009).
Altas prevalências de linfadenite caseosa, 61%,foram encontradas na Austrália (Middleton et
al., 1991); no entanto estudos mais recentes indicam uma prevalência de 20-30% após o início de
programa de vacinação (Paton et al., 2003). Nos EUA prevalências de até 43% foram estimadas
7

(Stoops et al., 1994) e similar intervalo de 21-36% foi encontrado em ovelhas no Quebec, província do
Canadá (Arsenault et al., 2003). Em Alberta, também no Canadá, a vacinação foi eficaz na redução da
prevalência da infecção (Stanford et al., 1997). No Reino Unido, 45% dos produtores que foram
entrevistados relataram abscessos em suas ovelhas (Binns et al., 2002).
No Brasil, o primeiro relatório de linfadenite caseosa foi feito por Duport em 1918 (Garcia et
al., 1987). Um estudo soroepidemiológico ELISA feito no Estado de Minas Gerais encontrou valores
de prevalência de 75,8% para ovinos (Guimarães et al., 2009a).
As perdas econômicas incluem a diminuição da produção de leite, diminuição do ganho de
peso, valor reduzido de peles devido à cicatriz e o custo dos medicamentos e do trabalho necessário
para tratar abscessos superficiais, e quando os linfonodos afetados se encontram em áreas críticas
(região da mandíbula, crural, úbere) podem ser afetadas a locomoção, mastigação e produção de leite e
carne; no entanto as perdas econômicas devido a esta doença ainda não foram devidamente
contabilizadas (Guimarães et al., 2011).
Na indústria as perdas são devido à menor porcentagem de utilização das carcaças de animais
afetados, danos à pele, juntamente com a necessidade de inspeção detalhada das carcaças (Guimarães et
al., 2009b). No Nordeste brasileiro, onde ovelhas são importantes fontes de alimento e renda, a situação
é ainda mais crítica devido ao tipo de vegetação (espinhosa) e ao baixo nível de escolaridade dos
agricultores (Unanian et al., 1985). Também está se tornando um problema para as regiões Sudeste,
Norte e Centro-Oeste, onde esta atividade cresce rapidamente, afetando negativamente a indústria de
processamento de carne (Guimarães et al., 2009a).
Além de todos os riscos e danos à ovinocultura acima apresentados, o potencial zoonótico do C.
pseudotuberculosis vem se tornando uma preocupação entre os profissionais que lidam com animais
que podem ser potencialmente infectados por esta bactéria (Pinheiro et al., 2000). Apesar de casos
humanos de infecção serem relativamente raros, alguns relatos indicam potenciais riscos de infecção
para veterinários e profissionais agrícolas (Peel et al., 1997).
2.2.4. Transmissão
A principal fonte de infecção são os animais acometidos, que contaminam o solo, água,
alimentação, pastagens e instalações com secreções nasais e pus de abscessos que drenam
espontaneamente (Spier et al., 2004). Animais infectados que não apresentam sintomas clínicos podem
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eliminar a bactéria através de suas vias respiratórias; mesmo sendo demonstrado que abscessos
pulmonares têm um coeficiente de transmissão pequena, eles são mais importantes para a manutenção
da infecção no rebanho na fase endêmica (O’reilly et al., 2008; Bastos et al., 2011).
A transmissão pode ocorrer através do contato direto ou indireto com o pus dos abscessos dos
animais doentes (Nairn & Robertson, 1974). Materiais que são utilizados no manejo dos animais, tais
como os usados durante a identificação, a castração, marcadores auriculares, tatuadores, máquinas de
tosquia, drenagem de abscessos, bem como contato com um pedaço não cauterizado do umbigo podem
transmitir o agente (Braverman et al., 1999).
Vetores, tais como insetos, devem ser considerados na transmissão da doença, uma vez que C.
pseudotuberculosis foi isolado a partir da superfície corporal, intestinos e fezes de moscas domésticas.
Essa bactéria também foi isolada de moscas contaminadas com leite de vacas com mastite em Israel
(Yeruham et al., 1996; Spier et al., 2004). Em cavalos, as moscas tem considerável importância
epidemiológica na disseminação de C. pseudotuberculosis, porque a maior frequência de infecção nesta
espécie ocorre durante os períodos em que se registram grandes populações de moscas (Costa et al.,
1998).
O C. pseudotuberculosis sobrevive longos períodos no solo, podendo sobreviver até oito meses
em várias temperaturas (Brown & Olander, 1987). Na palhada “cama” ele pode permanecer viável por
três semanas, durante dois meses no feno, quatro meses em bancas de corte, e foi isolado após cinco
meses em locais onde houve contaminação compus (Nairn & Robertson, 1974). A concentração de
microrganismos viáveis no material purulento é estimada em 106-107 bactérias por grama de pus,
consequentemente a contaminação ambiental devido a um abscesso com vazamento é muito elevada e
persistente (Brown et al., 1987).
O uso de cercas de arame farpado ou calhas e estacas afiadas, com arestas cortantes, pode
causar lesões na pele dos animais, abrindo passagem para a entrada de bactérias (Guimarães et al.,
2009a). No Nordeste brasileiro, as bactérias podem penetrar via transcutânea ou através deferidas na
pele causadas pela vegetação da caatinga da região (Unanian et al., 1985).
Produtores de carne de ovinos tendem a fazer poucas inspeções periódicas de seus rebanhos por
causa do tipo de sistema de criação extensiva, na qual eles não identificam animais individualmente,
argumentando que estes são abatidos dentro de um curto intervalo de tempo (Brown & Olander, 1987).
Por outro lado, os produtores de leite de cabra tendem a identificar individualmente os animais, e é
9

mais provável que detectem abscessos durante o contato diário favorecendo o controle da linfadenite
caseosa no rebanho caprino (Guimarães, 2006).
Mesmo sendo ovinos e caprinos os animais mais comumente infectados por C.
pseudotuberculosis, esta bactéria pode ser considerada como um problema de saúde pública emergente,
pois tem a capacidade de produzir a toxina da difteria como consequência de uma lisogenização com o
fago da difteria, o que levou as autoridades de muitos países a induzir seus serviços de saúde a
considerar as doenças causadas por todas as espécies de Corynebacterium, que incluem C.
pseudotuberculosis e C. ulcerans, no diagnóstico diferencial desta enfermidade (Maximescu et al.,
1974). Por muitos anos foi requerida a notificação de C. pseudotuberculosis toxigênica em qualquer
órgão de controle nacional das doenças transmissíveis (Dewinter et al., 2005).
Além disso, cepas comuns de C. pseudotuberculosis podem infectar os seres humanos e causar
linfadenopatia supurada, evento este tradicionalmente associado com o contato dos animais de criação
e produtos lácteos contaminados (Maximescu et al., 1974). O primeiro caso humano foi descrito em
1966, onde foi observado que o tecido dos gânglios linfáticos infectados são substituídos por
granulomas necróticos, enquanto a aparência histológica geral se assemelha à linfadenite tuberculosa,
doença da arranhadura do gato e linfogranuloma venéreo, que devem ser consideradas para o
diagnóstico diferencial (Lopez et al., 1966).
Apesar de ter sido possível coletar informações sobre os 33 casos de infecção humana por C.
pseudotuberculosis, presume-se que a prevalência da doença em humanos seja possivelmente
subestimada, considerando-se que o número total de 33 casos representa a prevalência de casos para
um período de 42 anos (de 1966 a 2008). Os dados indicam fortemente que a infecção humana por C.
pseudotuberculosis constitui uma zoonose ocupacional (Bastos et al., 2011).
2.2.5. Controle
O tratamento dos animais infectados consiste em drenagem dos abscessos seguido pela limpeza
e cauterização química, geralmente com iodo a 10%, após a remoção do linfonodo superficial afetado
(Nozaki et al., 2000). Embora seja uma medida de controle importante o procedimento não é tão eficaz
como se esperava devido à presença de abscessos internos (Paton et al., 2003). A drenagem do
abscesso deve ser feita de forma que evite a contaminação ambiental, coma desinfecção do material
cirúrgico e incineração dos materiais descartáveis (Guimarães et al., 2011).
10

Outra opção de tratamento é a antibioticoterapia, que não é muito eficiente, apesar de C.
pseudotuberculosis ser sensível in vitro para quase todos os antibióticos que foram testados (Nozaki et
al., 2000). A localização intracelular das bactérias e a formação dedo granuloma limita a eficácia da
droga e sua biodistribuição, tornando os antibióticos ineficientes (Brown & Olander, 1987). Este tipo
de tratamento se torna inviável devido ao alto custo e baixa eficiência (Olson et al., 2002).
Dado que o tratamento da linfadenite caseosa é ineficaz e caro, a melhor estratégia para controle
e prevenção da doença é a vacinação, como foi observado em países com alta prevalência de infecção
(Paton et al., 2003). As vacinas disponíveis no mercado tem diferentes características que devem ser
consideradas para seu uso, e a proteção conferida pela vacinação é apenas parcial (Williamson, 2001).
Para que um programa de controle da linfadenite caseosa seja eficaz ele deve ter como base
exames clínicos e sorológicos periódicos dos animais do rebanho, abate dos animais que apresentem
sinais clínicos e sorologicamente positivos, e educação sanitária dos proprietários de rebanho e do
pessoal técnico. Uma vez infectado, um animal dificilmente elimina o C. pseudotuberculosis
(Campbell et al., 1982).
A principal fonte de infecção para o rebanho é a introdução de animais infectados ou com
abscesso, o que resulta em uma alta frequência de abscessos após dois ou três anos. Isso enfatiza a
importância de empregar técnicas especiais de manejo, principalmente durante a introdução dos
animais (Guimarães et al., 2011).
Medidas destinadas a reduzir o risco de lesões ambientais também devem ser adotadas, como o
uso de cercas de arame liso, cochos e instalações sem arestas cortantes, desinfecção dos marcadores
auriculares e instrumentos de corte, o uso sistemático de agulhas descartáveis individuais, controle
efetivo de insetos, desinfecção de umbigos de recém-nascidos e quaisquer outras feridas com iodo a
10% (Williamson, 2001). Embora não seja recomendado para ser aplicado para os gânglios linfáticos
afetados devido à sua ação irritante e cáustica sobre os tecidos (pele, mucosas e pulmões), formaldeído
a 10% pode ser usado para desinfecção das instalações do rebanho (Brown & Olander, 1987; Baird &
Fontaine, 2007).
Medidas de controle variam de acordo com a prevalência da infecção; em países livres da
doença só e permitida a importação a partir de locais certificados como livres de linfadenite caseosa por
três anos, e todos os animais devem ser testados sorologicamente antes da importação (Collett et al.,
1994). Em países com baixa prevalência da doença, os animais clinicamente afetados devem ser
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separados e submetidos a testes de ELISA, filhotes devem ser criados longe de suas mães e instalações
e equipamentos devem ser bem desinfectados (Williamson, 2001). Em países com alta incidência,
medidas sanitárias rigorosas devem ser implementadas e associadas à vacinação (Brown & Olander,
1987).
2.2.6. Diagnóstico
A fim de atingir um diagnóstico definitivo da linfadenite caseosa, o agente deve ser isolado de
material purulento de abscessos de linfonodos em amostras de animais vivos. Além da punção
aspiratória o material pode ser obtido por excisão após tricotomia e limpeza anti-séptica cuidadosa da
pele (Collett et al., 1994; Smith & Sherman, 1994). A coleta também pode ser feita na necropsia ou
durante o abate, quando abscessos internos que afetam fígado, pulmões, intestino, rins, linfonodos e
outros tecidos internos tornam-se acessíveis (Riet-Correia et al., 2001).
Técnicas moleculares como a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), tem sido usadas para
identificar C. pseudotuberculosis, e são uma alternativa aos métodos convencionais de diagnóstico,
coma vantagem de serem mais rápidos e mais específicos (Çetinkaya et al., 2002). MultiplexPCR
baseado na amplificação do16S rDNA genes, por Be pld, apresentou 94,6% de sensibilidade
diagnóstica para os isolados bacterianos, bem como para material clínico, possibilitando a
diferenciação de outros patógenos correlacionados, principalmente C. ulcerans (Pacheco et al., 2007).
Atualmente o diagnóstico da LC em pequenos ruminantes se baseia em sintomas clínicos
característicos e na identificação microbiológica de C. pseudotuberculosis em material extraído de
abscessos (Williamson, 2001). No entanto o controle eficiente exige diagnóstico sorológico, uma vez
que os animais infectados que não apresentam sintomas aparentes são uma fonte de infecção para os
animais saudáveis (Kaba et al., 2001). Devido ao alto risco de transmissão durante a punção do
abscesso para a retirada do material purulento para cultura, o desenvolvimento de testes
imunodiagnósticos com base na detecção de anticorpos específicos anti-C. pseudotuberculosis no soro
de animais tem sido amplamente promovido em todo o mundo (Baird & Fonaine, 2007).
Vários métodos de diagnósticos têm sido propostos para o diagnóstico da LC, incluindo
hemaglutinação indireta (Shigidi, 1978), fixação do complemento (Shigidi, 1979), imunodifusão
(Burrel, 1980), inibição da hemólise sinérgica (Brown et al., 1986) e PCR (Pacheco et al., 2007).
Atualmente o teste ELISA tem sido frequentemente utilizado para controlar a LC em rebanhos em todo
12

mundo, pois apresenta a capacidade de detectar animais infectados subclinicamente além de apresentar
altos níveis de sensibilidade e especificidade (Dercksen et al., 2000; Guimarães et al., 2009a).
Em 2010 Seyffert et al. utilizaram um ELISA indireto para detecção de imunoglobulinas
específicas totais para antígenos secretados de C. pseudotuberculosis com algumas modificações e
alcançaram 98,5% de especificidade e 93,5% de sensibilidade.
A maioria destes ELISAs ainda não são comercialmente disponíveis e aqueles que estão
disponíveis ainda apresentam um custo relativamente alto (Binns et al., 2007; Kaba et al., 2001;
Dercksen et al., 2000). Nenhum teste foi considerado satisfatório quando aplicado isoladamente (Paton
et al., 1995).
Sensibilidade e especificidade são fatores importantes que devem ser considerados ao selecionar
um teste de diagnóstico para um programa de rastreio. A esta altura uma abordagem alternativa para o
imunodiagnóstico da LC pode ser a avaliação combinada dos testes in vitro da resposta imune celular
aos antígenos de C. pseudotuberculosis com testes de ELISA simultâneos, o que cobriria as
características da resposta imunológica do animal (Bastos et al., 2011).
Recentemente os genomas de duas cepas de C. pseudotuberculosis foram sequenciados pela
Rede Proteômica de Minas Gerais. Os dados do genoma vão ajudar a identificar novos alvos
específicos úteis no diagnóstico, bem como no desenvolvimento de medicamentos e vacinas e na
compreensão dos mecanismos de patogenicidade C. pseudotuberculosis (Guimarães et al., 2011).
2.3. Maedi-Visna
2.3.1. Vírus de Maedi-Visna (VMV)
Maedi e Visna são palavras de origem islandesas e significam, respectivamente, pneumonia
intersticial progressiva crônica e leucoencefalite, que são os principais sinais clínicos que ocorrem nos
ovinos acometidos por esse vírus (Pritchard & Mcconnell, 2007). As primeiras descrições datam de
1915 na África do Sul (Mitchell, 1915) e posteriormente nos Estados Unidos (Marsh, 1923). Entre
1933 e 1944, surgiu na Islândia uma doença de elevada transmissibilidade, denominada MAEDI,
causando elevadas perdas econômicas e comprometendo o comércio de animais (Thormar, 1965b).
As investigações decorrentes destes episódios permitiram verificar que o agente etiológico
apresentava propriedades parecidas com as do vírus da leucoencefalomielite não purulenta também
conhecida como VISNA que acometia ovinos do mesmo país (Thormar, 1965a). Atualmente considera-
13

se que MAEDI e VISNA são causados pelo mesmo vírus diferenciando-se na manifestação clínica
(Thormar & Hellgadottir, 1965). No Brasil, o 1º estudo sorológico de MV foi no Rio Grande do Sul em
1995, e primeiro isolamento viral realizado em 1997 (Ravazzolo et al., 1995).
O VMV é um retrovírus de 60-100nm de diâmetro, com características semelhantes ao
Oncornavírus, pertencente à subfamília Lentivirinae (Thormar, 2005). É um vírus espécie-específico,
com tropismo por células da linhagem monocítica-linfocitária, causando infecção persistente
prolongada (Narayan et al., 1997). Estes vírus revelam prolongada persistência no interior dos
monócitos e macrófagos, e um prolongado intervalo de tempo entre o momento da infecção e o
aparecimento de anticorpos em níveis detectáveis por provas sorológicas (Ishizuka et al., 2004).
2.3.2. Estrutura Viral
Como os demais lentivírus o VMV é uma partícula esférica, envelopada com aproximadamente
100nm de diâmetro, com núcleo cônico e denso no qual estão inseridas moléculas idênticas de RNA
fita simples, uma molécula de transcriptase reversa dependente de Mg 2+ , e proteínas do nucleocapsídeo
(Gonda et al., 1986). O envelope está associado covalentemente com as glicoproteínas
transmembranárias e de superfície. Outra estrutura presente na partícula viral é a matriz, que está
situada entre o capsídeo e o envelope (Pepin et al., 1998).
Os genomas dos lentivírus contém pequenas ORFs que codificam proteínas que regulam a
expressão gênica (TAT e REV), fazem o controle da produção de partículas virais infecciosas (VIF e
VPV) e estão envolvidos na manifestação da doença in vivo (VPR e NEF) (Harmache et al., 1998).
O genoma das lentiviroses contém genes estruturais (gag e env) e genes enzimáticos (pol)
típicos da família Retroviridae (Harmache et al., 1998). Entretanto, o genoma dos lentivírus codifica as
proteínas que regulam a expressão viral (TAT e REV), assim como proteínas auxiliares que tem
funções não completamente elucidadas (VIF, VPR/ VPX, VPV e NEF) (Harmache et al., 1998).
Os genes auxiliares não são rigorosamente requeridos para replicação viral em culturas
celulares, e diferentes sublocações destes genes são encontrados entre as lentiviroses; entretanto, eles
estão atualmente sendo considerados como importantes no desenvolvimento in vivo da doença (Quérat
et al., 1990). A proteína VIF está presente no vírus e facilita a infectividade e disseminação de vírus
particularmente para linfócitos e macrófagos (Clements & Zink, 1996).
14

A proteína VIF (fator de infectividade viral) está presente no vírus aparentemente para facilitar
a infectividade e difusão do mesmo particularmente, em linfócitos primários e macrófagos (Clements
& Payne, 1994).
2.3.3. Patogenia e imunologia
Os lentivírus penetram no organismo dos animais susceptíveis geralmente por via oral ou
respiratória, caem na circulação sanguínea e infectam as células do sistema monocíticofagocitário,
aonde irão realizar uma infecção persistente do hospedeiro (Narayan et al., 1984).
A persistência ocorre porque os monócitos contendo provírus integrado em seu genoma não são
detectados pelo sistema imune, pois a expressão do gene viral só é ativada quando os monócitos
maturam para macrófagos (Brodie et al., 1995); ocorre infecção persistente dos macrófagos, sem causar
lise celular, podendo disseminar o vírus no próprio hospedeiro sem a produção de partículas virais,
através do contato com outras células (Chebloun et al., 1996); a replicação de variantes antigênicos
mesmo na presença de anticorpos neutralizantes (Mcguire et al., 1988; Cheevers et al. 1991) e a
produção insuficiente de anticorpos neutralizantes e de interferon favorece a persistência do agente no
organismo do animal infectado (Klevjer-Anderson & Mcguire, 1982; Cheevers et al. 1993; Bertoni et
al., 1994).
Por outro lado, há presença de ácido siálico na superfície da partícula viral, o que dificulta a
ação dos anticorpos neutralizantes, e a alta mutabilidade do agente pode resultar em variantes
antigênicas, funcionando como mecanismos de escape da resposta celular e humoral (Knowles et al.,
1990; Cheevers et al. 1993; Lichtensteiger et al., 1993).
Anticorpos e citocinas surgem tão logo inicia a replicação e participam diretamente do
desenvolvimento das alterações imunopatológicas observadas nos órgãos de eleição (DeMartini et al.,
1993; Legastelois et al., 1996). A produção contínua de partículas virais e sua interação (na forma de
proteína livre ou expressa na célula) com os anticorpos formando imunocomplexos contribuem para a
evolução da doença (Knowles et al., 1990; Mdurvwa et al., 1994; Brodie et al., 1995; Perry et al.,
1995).
A maioria das alterações patológicas são indiretamente mediadas pela resposta imune do
hospedeiro, resultado da alteração da atividade de citocinas (IL-1 e TNF) pelos monócitos (Werling et
15

al., 1994). A frequência e a severidade das lesões parecem estar associadas a fatores do genoma do
hospedeiro (Dolf & Ruff, 1994; Ruff & Lazary, 1988) e da amostra viral (Lairmore et al., 1988).
O vírus penetra pela mucosa nasal ou oral em aerossóis e colostro/leite, dissemina-se por
diferentes órgãos além dos pulmões e cérebro, como evidenciado pelas reações linfocitárias mais ou
menos extensas (Bertoni et al., 1994). Em órgãos como os pulmões, as lesões são permanentes e
difusas, com proliferação de células linforeticulares chegando a atingir os alvéolos pulmonares
comprometendo as trocas gasosas, e podendo levar a óbito (Ishizuka et al., 2004).
Lentivírus induzem tanto resposta humoral quanto celular de diferentes intensidades, mas que
não protegem contra a infecção (Cheevers et al., 1993; Bertoni et al., 1994). A primeira resposta imune
dirigida para a proteína do cápside (CA) é detectada por volta da terceira semana após a infecção e por
volta da quinta semana são produzidos anticorpos contra as demais proteínas do nucleocápsideo (NC),
matriz (MA), glicoproteína transmembranária (TM) e glicoproteína de superfície (SU) (Concha-
Bermejolli, 1997).
Os anticorpos neutralizantes para SU são produzidos tardiamente, apresentam baixa afinidade
por seu antígeno homólogo e se fazem presentes em quantidade insuficiente, não interrompendo o ciclo
de replicação viral (Kennedy-Stoskipf & Narayan, 1986; Cheevers et al., 1993).
2.3.4. Epidemiologia e Transmissão
A doença inicialmente descrita na Islândia foi posteriormente relatada na França, África do Sul,
Índia, Estados Unidos, Chile, Holanda, Alemanha. No Brasil casos foram relatados no Rio Grande do
Sul, Bahia, Ceará , Pernambuco, São Paulo, Minas Gerais (Castro et al., 1999b), Rio de Janeiro (Cunha
& Nascimento, 1995), Maranhão, Pará, Piauí, Paraná, e na Paraíba (Assis & Gouveia, 1994; Sotomaior
& Milczewski, 1997).
A transmissão dos LVPR ocorre principalmente pela ingestão de colostro e leite de fêmeas
infectadas e por via respiratória, e é mais frequente em períodos de confinamento (Zanoni et al., 1998).
Estudos sugerem que a transmissão vertical deste vírus pode ocorrer em condições naturais, entretanto
o mecanismo e a frequência, não são conhecidos (Castro et al., 1999a).
O sêmen para inseminação artificial e a transferência de embrião não são considerados fatores
de risco importantes para transmissão dos LVPR (Blacklaws et al., 2004). Através de estudos
filogenéticos recentes, tem sido demonstrada a transmissão dos LVPR de ovinos para caprinos e vice
16

versa (Leroux et al., 1997; Shah et al., 2004). Como são vírus espécie-específicos, não ocorre doença
causada por esse vírus em humanos (Thormar, 2005).
2.3.5. Controle
Atualmente programas de controle ou de erradicação da infecção por LVPR têm sido adotados
em vários países, geralmente de adesão voluntária, baseados em testes periódicos dos animais, com
separação e/ou eliminação dos positivos (em teste de Imunodifusão em Gel de Agarose), e uso de
certas práticas de manejo para a prevenção da disseminação do agente (OIE/FAO, 1996).
Recomenda-se, portanto, a separação das crias imediatamente após o nascimento; evitar o
contato com secreções e isolá-las dos adultos; administrar colostro ou leite termicamente tratados ou
alimentar as crias com substitutos do leite; adotar a linha de ordenha; controlar a monta com
reprodutores positivos e usar material estéril (EMBRAPA, 1996; Gouveia et al., 1996; Concha-
Bermejillo, 1997; Rowe & East, 1997).
2.3.6. Diagnóstico
O isolamento e identificação VMV não são realizados na rotina de diagnóstico dessa doença
(Houvers & Shaake, 1987). Em face da natureza de infecção persistente, o estabelecimento da
condição de soro-reagente é suficiente para a identificação de portadores. Ressalte-se que, sendo a
infecção causada por um Lentivírus, a soroconversão é tardia e muitos animais poderão ser falso
negativos (Ishizuka et al., 2004).
A sorologia para detecção de anticorpos é um valioso instrumento de diagnóstico de portadores
por se tratar de infecções causadas por lentivírus (Dawson et al., 1982). Os procedimentos mais usados
são os de Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA) (Simard & Briscoe, 1990) e ELISA (enzyme-linked
immunosorbent assay) (Houwers et al., 1982; Zanoni et al., 1994).
A IDGA é específica, reprodutível e prática, mas exige experiência para realizar a leitura. O
ELISA é econômico e a sensibilidade e especificidade dependem da qualidade do antígeno utilizado,
sendo que o mesmo possui maior sensibilidade que a IDGA (Rimstad et al., 1994). No caso do MV, a
produção de antígeno adequado tem limitado seu uso na rotina de diagnóstico, mas estão surgindo
métodos de ELISA modificados, como aquele que emprega antígeno recombinante (Power et al.,
1995); métodos de ELISA sanduíche e anticorpos monoclonais tem se mostrado promissores para
17

aplicação em larga escala. Mesmo assim, a IDGA permanece sendo a prova mais frequentemente
empregada (Houwers & Shaake, 1987).
Existem dois antígenos virais de MV de importância em sorologia, sendo um deles uma
glicoproteína de envelope viral (gp135), e outro uma nucleoproteína (p28). É importante citar que a
sensibilidade do teste de IDGA para detecção de anticorpos anti-VMV depende do antígeno empregado
(Knowles et al., 1994), assim como ensaios utilizando o antígeno de gp135 apresentam sensibilidade
substancialmente superior aos que empregam p28 (Adams & Gorham, 1986).
2.4. Língua Azul
2.4.1. Vírus da Língua Azul (VLA)
A Língua Azul (LA) é uma doença infecciosa, não contagiosa, de ruminantes, causada por um
vírus (VLA), transmitido por insetos do gênero Culicoides, que foi isolado pela primeira vez em 1952
na América do Norte (McKercher et al., 1953). Já foram identificadas várias subespécies, tais como as
subespécies 2, 10, 11, 13, e 17 (Gibbs et al., 1983), a subespécie 11, no Canadá (Clavijo et al., 2000).
Em 1986, na região do Caribe e América Central, foram identificadas as subespécies 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12,
14 e 17 (Clavijo et al., 2002). No Brasil, potenciais vetores têm sido encontrados em algumas regiões, e
já foram registradas várias espécies de Culicoides em todas as regiões geográficas(Lager, 2004).
2.4.2. Estrutura Viral
O vírus da Língua Azul pertence ao gênero Orbivírus da família Reoviridae, apresenta 24
subespécies (Mertens et al., 2004; Fauquet et al., 2005). O genoma do VLA é formado por dez
segmentos de RNA de fita dupla, que codificam sete proteínas estruturais (VP1 a VP7) e quatro não
estruturais (NS1 a NS3/3A), organizadas em três camadas, sendo a externa constituída pelas proteínas
VP2 e VP5 (Gibbs et al., 1983).
A variabilidade genética e a interação das proteínas VP2 e VP5 são responsáveis pela
diversidade antigênica e a determinação das subespécies do VLA (DeMaula et al., 2000). Por outro
lado, a variabilidade da VP7 do gênero Orbivírus determina a formação de 14 grupos, sendo o vírus da
Doença Hemorrágica Epizoótica (VEHD) e o vírus da Peste Equina Africana (VEHS), juntamente com
o VLA, os mais importantes (Michelsen, 2006; Balasuriya et al., 2008).
18

Estudos filogenéticos recentes, baseados nas sequências do gene S10, que codifica a proteína
NS3 do VLA, de 137 amostras originárias da África, Américas, Ásia, Austrália e Mediterrâneo,
mostrou pequena variação, não permitindo agrupamentos de acordo com o genótipo ou distribuição
geográfica (Fauquet et al., 2005). Os resultados destes estudos indicam, também, que o gene NS3 não
evoluiu por um processo de seleção positiva imposto por algum fator, como vetor, nos diferentes
ecossistemas estudados (Balasuriya et al., 2008).
Este vírus é bastante resistente, podendo ser isolado de diversos materiais biológicos dissecados
ou em putrefação (Michelsen, 2006); é relativamente resistente ao hidróxido de sódio, carbonato de
sódio, álcool etílico, éter e clorofórmio; é inativado a 50ºC por 3 horas e a 60ºC por 15 minutos; é
sensível ao pH menor que 6 e maior que 8; e é inativado na presença de desinfetantes de compostos
fenólicos e iodóforos (Obdeyn, 1987; OIE, 2008).
2.4.3. Patogenia e Imunologia
A instalação cutânea do vírus pela picada do vetor infectado é seguida pela replicação local e
disseminação para os tecidos linfáticos regionais, onde acontece mais um ciclo de replicação (Fauquet
et al., 2005). O vírus dissemina-se para vários tecidos e replica-se principalmente nos fagócitos
mononucleares e células endoteliais.
A replicação continua em sítios de maior afinidade, como endotélio e células periendoteliais,
capilares, arteríolas e vênulas (Elbers et al., 2008). Isso leva à dilatação vascular, necrose, hiperplasia e
hipertrofia das células endoteliais, resultando em trombose, infarto e hipóxia. Essas alterações
endoteliais têm como consequências hemorragia, edema e infarto. Outro sítios de afinidade do VLA e a
musculatura estriada, causando fraqueza generalizada (Obdeyn, 1987).
O ácido nucléico do VLA pode ser detectado no sangue dos ovinos infectados por PCR durante
meses, mesmo que não seja possível fazer o isolamento viral. Isto significa que, apesar da presença do
ácido nucléico no sangue dos animais, eles não são infectantes para o vetor nem para outros ruminantes
(Maclachlan, 2004). A gravidade dos sinais clínicos da LA varia de acordo com a espécie infectada.
Nos ovinos os sinais clínicos desenvolve-se com maior intensidade, com perda da condição corporal e
mortalidade, que varia de 2 a 30%, mas podendo chegar, em casos extremos, a até 70% e 90%
(Obdeyn, 1984; OIE, 2008).
19

Nos ovinos, os sinais clínicos variam de brandos a severos, dependendo da raça, do subespécie
do VLA envolvido e da prevalência da infecção na população. Em áreas endêmicas geralmente não são
observados casos clínicos (Obdeyn, 1984). Quando estes sinais se manifestam, frequentemente
observa-se febre alta, dificuldade de respiração, salivação, descarga nasal, edema dos lábios, face,
língua e espaço intermandibular, congestão e erosão da mucosa bucal, congestão nasal e da banda
coronária dos cascos. Em casos graves pode ocorrer cianose lingual, além de degeneração muscular,
com perda da condição corporal e morte (Erasmus, 1975; Elbers et al., 2008).
Não é possível prever as consequências da infecção pelo VLA em uma população de
ruminantes, visto que ela varia dependendo fortemente da amostra viral, espécie, raça, fatores
ambientais e imunidade dos animais (Walton, 2004).
Nas áreas altamente endêmicas, há alta prevalência de animais soropositivos e de vetores
infectados, com intensa circulação viral (Ravishankar et al., 2005). Os animais se tornam
progressivamente susceptíveis, mas geralmente não desenvolvem a doença, ao contrário de animais
importados de áreas livres que são expostos sem prévia imunidade (Obdeyn, 1984). Em áreas
epidêmicas, há baixa prevalência de animais soropositivos, pois a circulação viral está condicionada a
certos períodos do ano, quando há atividade dos Culicoides, não sendo observados surtos de
intensidade variada (Walton, 2004).
O primeiro registro oficial da doença em nosso país ocorreu em 1978 quando o Brasil reportou-
se oficialmente ao Office Internacional des Epizooties (OIE), relatando evidências sorológicas da
ocorrência da doença (OIE, 2008). Este relato também foi representativo da primeira evidência do VLA
na América do Sul (Lager et al., 2004). A partir daí os vários levantamentos sorológicos realizados em
diversas regiões do país demonstraram que o VLA esta se difundindo silenciosamente pelo Brasil, visto
que os relatos de casos clínicos são escassos (Castro et al., 1992; Lage, 1996; Melo et al., 2000;
Laender, 2002; Costa et al., 2006).
2.4.4. Epidemiologia
A LA tem ampla distribuição, envolvendo África, Ásia, Austrália, Europa, Américas (OIE,
2008), com prevalências variadas, sendo a influência das condições ambientais para o vetor e a
interação entre vírus, vetor e hospedeiro grandes influenciadores da distribuição geográfica do VLA
(Melo et al., 2000). Este vírus era considerado restrito a áreas de latitudes de aproximadamente 40ºN e
20

35ºS, onde há maior atividade do vetor, porém as mudanças climáticas têm afetado sua distribuição
geográfica, cuja ocorrência deslocou-se do Mediterrâneo para países que não tinham relatos anteriores
(Alves et al., 2007).
Em 1999 a LA foi relatada na Grécia e Bulgária, e em 2000 a subespécie 9 se propagou para
Albânia, Bósnia-Hezergovínia, Croácia, Kosovo, República da Macedônia, República Sérvia e
Montenegro. Em 2002 emergiu na França (subespécie 2), Itália (subespécies 2, 4, 9 e 16) e Espanha
(subespécies 2, 4) e em Portugal (subespécie 4). Desde 2006 a subespécie 8 tem se propagado por toda
Europa, atingindo a Áustria, Bélgica, República Tcheca, Dinamarca, França, Alemanha, Grécia,
Hungria, Itália, Luxemburgo, Holanda, Portugal, Espanha, Suécia, Suíça, Grã-Bretanha e Bulgária
(OIE, 2009).
Estudos que determinam a subespécie do VLA circulante são mais restritas devido a
complexidade das técnicas necessárias para tipificação do vírus (Mota, 2009). Em 1980, bovinos
exportados do Brasil para os Estados Unidos desenvolveram anticorpos contra o VLA durante o
período de quarentena, e em um dos animais a subespécie 4 foi isolada (Groocock & Campbell, 1982).
Em 1990 anticorpos contra as subespécies 4, 6, 14, 17 e 19 foram detectados em soros de ruminantes
brasileiros (Cunha, 1990). Em 2001, foi confirmado um foco de LA no estado do Paraná envolvendo
caprinos, ovinos e bovinos, do qual foi isolada a subespécie 12 (Clavijo et al., 2002).
2.4.5. Transmissão
O vírus da Língua Azul é classicamente transmitido por “mosquitos” que pertencem à Ordem
Díptera, família Ceratopogonidae, e estão entre os menores insetos hematófagos, medindo de um a três
milímetros, e seu ciclo de vida é composto de ovos, quatro estágios larvais, pupa e adulto (Wirth &
Hubert, 1989). As fases imaturas requerem certo nível de umidade, sendo encontradas em diversos
ambientes, como lagos, riachos, pântanos, praias, troncos de árvores, áreas de irrigação, esterco, frutas
em putrefação e outros vegetais (Blaton & Wirth, 1979). O ciclo se completa de uma até várias
semanas, dependendo das condições ambientais. Geralmente os Culicoides vivem por 10 a 20 dias, mas
podem viver até 90 dias (Mellor et al., 2000).
São encontradas mais de 1.400 espécies de Culicoides em regiões tropicais e temperadas de
praticamente todo o mundo, com exceção das regiões polares, Nova Zelândia, Patagônia e Ilhas do
Havaí (Tabachnick, 2004). Quase a totalidade (96%) das espécies de Culicoides é hematófaga
21

obrigatória, e a maioria tem maior atividade durante o crepúsculo, possivelmente para se prevenir do
ressecamento consequente à exposição às temperaturas mais elevadas durante o dia (Dijkstra et al.,
2008).
Quando o culicóides se alimenta de sangue em animais virêmicos, contrai a infecção e após a
incubação de aproximadamente 10 dias, passa a transmitir o VLA aos ruminantes, permanecendo com
capacidade infectante por toda vida (Wellby et al., 1996).
Os Culicoides apresentam um divertículo que serve para alojar os líquidos ingeridos, como
açúcares, água e néctar (Wirth & Hubert, 1989).Quando a fêmea ingere sangue, um esfíncter se contrai
levando-o para a porção posterior do divertículo. Neste local, as partículas virais do sangue
contaminado se ligam às células do intestino e se replicam (Dijkstra et al., 2008). Em seguida, as novas
partículas virais são liberadas, atingem a circulação e infectam órgãos secundários como as glândulas
salivares. A replicação nessas glândulas é seguida pela liberação do vírus nos ductos salivares, onde se
acumulam e são transmitidos a próxima alimentação. Não há evidências de transmissão transovariana
(Mellor et al., 2000).
Fatores ambientais afetam a capacidade vetorial, a dinâmica populacional e a interação dos
culicóides com os vertebrados (Wellby et al., 1996). Temperaturas elevadas encurtam as fases de
desenvolvimento dos Culicoides, aumentam as taxas de infecção e de virogênese, e tornam
competentes ou intensificam a competência de certas espécies, por estimularem um fenômeno
conhecido como “leaky gut” (“escape intestinal”) (Mullens et al., 2004).
Mellor et al. (2000), afirma que a sazonalidade de uma espécie de Culicoides parece variar de
lugar para lugar. Estudos da dinâmica populacional de Culicoides imicola apresentam duas situações
quanto ao principal fator determinante da sazonalidade: a temperatura –em áreas onde os invernos são
frios, a população tende a desaparecer ou ser muito reduzida nos meses de inverno; na primavera a
população cresce e atinge o pico de abundância no verão; precipitação pluviométrica – nas áreas
tropicais, a população é reduzida durante o período mais seco e se desenvolve com o aumento da
umidade resultante das chuvas (Dijkstra et al., 2008).
Não se sabe com precisão a distribuição de todas as espécies competentes para transmissão do
VLA. Os principais vetores Culicoides em seus respectivos continentes são: C. sonorensis na América
do Norte; C. insignis na América do Sul e Central; C. imicola e C. bolitinos na África; C. wadai e C.
22

evitarsis na Austrália; C. fulvus e C. schultzei na Ásia; C. chiopterus e C. dewulfi, na Europa
(Tabachnick, 2004; Dijkstra et al., 2008).
2.4.6. Controle
Países que apresentam algumas subespécies em seu território, e alguns países livres, impõem
restrições à importação de animais vivos ou sêmen de países endêmicos (Ishizuka, 2004). Quarentena,
com monitoramento sorológico e PCR, deve ser conduzida para minimizar o risco de disseminação do
VLA pelo movimento de animais entre países (Panagiotatos, 2004).
Em áreas afetadas o controle se baseia na prevenção da transmissão e na identificação de focos.
Os rebanhos devem ser isolados, e os animais mortos e cremados em caso de surtos (Michelsen, 2006).
Animais doentes, áreas atingidas e seus arredores devem ser pulverizados com inseticida. Pesquisas de
detecção de novos casos clínicos em rebanhos próximos de áreas afetadas devem ser feitas,
determinando a circulação do vírus através da soroconversão e a presença e distribuição dos vetores
(Hammami, 2004).
Outra medida é o monitoramento de animais em rebanhos sentinelas, para avaliar a circulação
viral, em conexão com o monitoramento da localização, distribuição e prevalência do vetor em áreas
endêmicas. As medidas de controle incluem: identificação, monitoramento e rastreamento de animais
susceptíveis e potencialmente infectados; quarentena e/ou restrição de movimento de animais durante o
período de atividade dos insetos; identificação de zonas específicas; vacinação; e adoção de medidas de
controle de insetos (OIE, 2008; Savini et al., 2008).
Na prática, é impossível eliminar o vetor de uma região, mas é possível manter os animais em
local fechado durante o pico de atividade do inseto (crepúsculo) para evitar a infecção de animais e a
propagação do VLA. (Mota, 2009). Com a mesma finalidade, devem-se colocar os animais próximos a
áreas alagadas somente nos períodos mais quentes do dia, quando os Culicoides têm atividade mínima.
Adicionalmente, a eliminação de locais propícios aos criatórios do vetor pode ser usada como forma
auxiliar de controle (Obdeyn, 1987; Michelsen, 2006).
A vacinação é usada como a mais prática medida para minimizar as perdas relacionadas com a
LA e potencialmente interromper o ciclo de transmissão do vírus dos animais infectados para o vetor
(Obdeyn, 1987). As vacinas contra LA podem ser usadas para diferentes fins e estratégias, dependendo
da situação epidemiológica da área afetada e da estratégia desejada (Mota, 2009). Os principais
23

objetivos do uso de vacinas são: prevenir a doença clínica; limitar a expansão regional da infecção
através da redução da disseminação do vírus; auxiliar na erradicação em uma região ou país pela
redução da circulação viral; permitir o movimento seguro de animais susceptíveis entre zonas afetadas
e livres (OIE, 2008; Savini et al., 2008).
Têm sido utilizadas em larga escala em alguns países as vacinas com vírus vivos modificados e
vacinas inativadas, desenvolvidas recentemente, e empregadas com sucesso após surtos do VLA na
Europa. As vacinas inativadas são inócuas e eficazes, porém apresentam como desvantagens o alto
custo de produção, pois requerem grande quantidade de antígenos e necessidade de reforços, já que
geralmente induzem a uma imunidade relativamente transitória (Mota, 2009).
As vacinas com vírus atenuados são mais baratas e têm se mostrado protetoras após uma única
inoculação, mostrando-se eficientes na prevenção de casos clínicos de LA, porém apresentam
inconvenientes quando sub-atenuadas, levando a consequências adversas na produção leiteira,
abortamento/mortalidade embrionária e teratogênese, além do risco de disseminação do vírus através
de vetores com eventual reversão da virulência e/ou recombinação com amostras selvagens (OIE, 2008;
Savini et al., 2008).
2.4.7. Diagnóstico
Em ovinos, o diagnóstico diferencial clínico inclui febre aftosa, varíola, ectima contagioso,
febre catarral maligna, dermatite pustular contagiosa, podridão dos cascos e actinobacilose (Obdeyn,
1984; Michelsen, 2006). Devido à extrema semelhança do quadro clínico e epidemiológico da LA com
outras doenças, se faz necessário o diagnóstico laboratorial (Panagiotatos, 2004).
O diagnóstico direto baseia-se no isolamento do vírus por inoculação em ovos de galinha
embrionados, em cultivo celular ou em ovinos susceptíveis. A identificação viral pode ser feita por
imunofluorescência, ELISA e Western-Blot, porém a identificação das subespécies só pode ser feita
por vírus-neutralização e RT-PCR, que tem a vantagem de ser rápida e fornecer informações sobre o
grupo e o tipo viral (Fauquet et al., 2005).
Os testes sorológicos tradicionalmente utilizados são a Imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e
ELISA indireto, que não distinguem anticorpos produzidos contra o VLA e o VEHD (Mota, 2009).
Recentemente foi desenvolvido um ELISA competitivo, que usa anticorpos monoclonais, sendo
altamente específico para detecção de anticorpos contra o VLA (OIE, 2008).
24

3. ARTIGO CIENTÍFICO 1
Soroepidemiologia da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis em ovinos de raça
definida do Estado da Bahia e correlações com aspectos zootécnicos
Seroepidemiology of Corynebacterium pseudotuberculosis infection in sheep with defined breed from
Bahia State and correlations with zootechnical aspects
LOUREIRO 1 , Dan; BASTOS 1 , Bruno Lopes; MAIA 2 , Antônio Lemos; GUEDES 1 , Maria Tereza;
GUIMARÃES 3 , Alessandro de Sá; SENA 1 , Ludmilla; RAYNAL 1 , José Tadeu; GOUVEIA 4 , Aurora
Maria Guimarães; MEYER, Roberto; PORTELA 1 , Ricardo Wagner
1 Laboratório de Imunologia e Biologia Molecular do Instituto de Ciências de Saúde da Universidade Federal da Bahia, Av.
Reitor Miguel Calmon s/n, Vale do Canela, Salvador, Bahia, Brasil, 40110-100
2 Agência de Defesa Agropecuária da Bahia – ADAB, Av. Adhemar de Barros 967, Ondina, Salvador, Bahia, Brasil, 40170-
100
3 EMBRAPA Gado de Leite, Rua Eugênio do Nascimento, 610, Juiz de Fora, MG, 36038-330, Brasil.
4 Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais, Av.
Antonio Carlos 6627, Pampulha, Belo Horizonte, MG, 30123-970
RESUMO
A Linfadenite Caseosa é uma doença infecto-contagiosa que acomete caprinos e ovinos, tendo
como agente etiológico a bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. É uma doença distribuída
mundialmente, e causa significativos prejuízos econômicos na ovinocultura mundial. O objetivo desta
pesquisa foi avaliar a soroepidemiologia em ovinos de raça definida do estado da Bahia quanto à
presença de anticorpos específicos para C. pseudotuberculosis, e correlacionar a infecção pela bactéria
com técnicas de manejo empregadas pelos produtores. Para o diagnóstico sorológico, foi utilizada a
técnica de ELISA em 690 amostras de soro provindas de ovinos de raça definida do estado da Bahia,
com alto valor genético e comercial, para detecção do status de infectividade por C.
pseudotuberculosis. Logo após a colheita um questionário foi aplicado a cada criador com o intuito de
obter dados sobre o sistema de criação para posteriores correlações com a sorologia. Os resultados
mostraram uma prevalência real de 22,1% de animais soropositivos para anticorpos anti-C.
pseudotuberculosis. Certas práticas de manejo apresentaram correlação significativa com a sorologia,
influenciando decisivamente na infectividade pela bactéria. Conclui-se que diversos procedimentos de
25

manejo podem ser empregados com o intuito de diminuir a intensidade de infecção por C.
pseudotuberculosis em um rebanho ovino.
Palavras-chave: Corynebacterium pseudotuberculosis, Linfadenite Caseosa, Bahia, ovinos.
SUMMARY
Caseous lymphadenitis is an infectious disease that affects sheep and goats, having as etiologic
agent the Corynebacterium pseudotuberculosis bacteria. It’s a worldwide distributed disease and cause
significant economic losses in the sheep industry around the world. This research objective was to
evaluate the seroepidemiology of specific antibodies to C. pseudotuberculosis in defined breed sheep
from Bahia State, Brazil, and the possible correlation of the infection by the bacteria and breeding
procedures conducted by farmers. For serological diagnosis, it was used ELISA technique in 690 serum
samples from sheep with defined breed, with high genetic and commercial value, for the detection of C.
pseudotuberculosis infectivity status. Immediately after harvest, a questionnaire was applied to each
farmer in order to obtain data about the breeding system, for further correlations with serology. Results
showed a prevalence of 22.1% seropositive animals, and some management practices were
significantly correlated with serology, decisively influencing the infection by the bacteria. It’s
concluded that several management procedures can be employed in order to decrease the infection by
C. pseudotuberculosis intensity in a sheep herd.
Keywords: Caseous Lymphadenitis, Corynebacterium pseudotuberculosis, Bahia state, sheep.
INTRODUÇÃO
A região Nordeste apresenta o maior rebanho ovino do país, sendo a Bahia o estado mais
representativo (IBGE, 2008); sua exploração atinge os mais distintos segmentos de unidades
produtivas e abrange desde a agricultura familiar até empresas rurais organizadas em moldes
empresariais (Araújo, 2006). A maioria dos rebanhos ovinos nesta região é explorada em sistema
extensivo, não são adotadas práticas adequadas de manejo alimentar e sanitário, o que contribui para a
baixa produtividade da ovinocultura (CONAB, 2006).
26

Várias endemias estão presentes na caprino-ovinocultura baiana, e a Linfadenite Caseosa (LC),
doença provocada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, com prevalência de mais de
50% em algumas regiões nordestinas (Alves et al., 1997; Meyer, 2004), é uma das preocupações da
ovinocultura brasileira. Trata-se de uma doença debilitante que acarreta perda de peso, redução da
lactação e perda do valor comercial das peles. Os prejuízos gerados por esta zoonose são de
considerável extensão (Alves et al., 1997).
A LC se encontra distribuída mundialmente e com alta prevalência em países onde a
ovinocultura é intensa (Williamson, 2001; Dorella et al., 2006). No Brasil, os Estados da Região
Nordeste são os mais afetados, em razão de possuírem a maior concentração de rebanhos ovinos e
caprinos do país, e pelas características intrínsecas de solo, vegetação e clima da região (Alves et al.,
1997; Ribeiro et al., 2001).
O tratamento da LC hoje existente não é eficaz, o que pode ser explicado pelas características
intrínsecas deste patógeno intracelular facultativo (Rebouças et al., 2011), além de ser de alto custo. A
imunização seria a medida de melhor custo-benefício contra a introdução da LC no plantel. Entretanto,
não existe uma vacina eficiente e protetora contra C. pseudotuberculosis. Vários relatos na literatura
mostram diferentes estratégias que vêm sendo testadas na tentativa de desenvolver uma vacina que
apresente imunidade protetora ideal, mas nenhuma ainda alcançou os patamares desejáveis (Dorella et
al., 2006).
A única ferramenta disponível na atualidade é a verificação constante do status sorológico dos
animais, pela detecção de marcadores da imunidade inata e adquirida específica, aliada a técnicas de
manejo que previnam a infecção por C. pseudotuberculosis. Levando em consideração esse aspecto, o
presente trabalho teve como objetivo verificar o status sorológico de ovinos de alto valor genético e
comercial do estado da Bahia com relação à presença de anticorpos anti-C. pseudotuberculosis, e
correlacionar a infectividade com a bactéria com práticas de manejo relatadas pelos produtores.
MATERIAL E MÉTODOS
Uma soroteca com 690 amostras ovinas, coletada no ano de 2008, com o apoio da Associação
de Criadores de Caprinos e Ovinos da Bahia (ACCOBA) e da Agência Estadual de Defesa
Agropecuária da Bahia (ADAB) e com o consentimento dos produtores, foi utilizada nesse trabalho. A
análise dos dados incluíram 37 dos 417 municípios do estado da Bahia, perfazendo um total de seis das
27

sete mesorregiões no qual o IBGE dividiu o estado (Figura 1). Foram amostrados 690 dos 145.438
animais registrados na Associação Brasileira dos Criadores de Ovinos (ARCO), sendo que esses ovinos
em sua maioria eram das raças Dorper e Santa Inês e pertenciam a 54 produtores diferentes. Utilizou-se
o dobro do número amostral proposto pelo cálculo de Callegari-Jaques (2003) para a população de
animais registrados do estado, que é de 145.438 animais, com um erro amostral estabelecido em
máximo de 5% e nível de confiança de 95%.
Figura 1. Mapa do estado da Bahia seguindo a divisão em 7 mesorregiões feita pelo IBGE (1- Extremo Oeste; 2- Vale São-
Franciscano; 3- Centro Sul; 4- Sul; 5- Centro-Norte; 6- Nordeste Baiano; e 7-Metropolitana de Salvador). Em Preto estão
marcados os 37 municípios avaliados neste trabalho. Fonte: IBGE.
As amostras foram coletadas pelos veterinários da equipe do Laboratório de Imunologia e
Biologia Molecular (LABIMUNO), Instituto de Ciências de Saúde (ICS) da Universidade Federal da
Bahia (UFBA), logo após a inspeção clinica realizada pelos veterinários da ADAB. A coleta foi
realizada mediante utilização de tubos a vácuo, agulhas e suportes adequados ao procedimento. Os
tubos receberam a identificação necessária para a distinção de cada animal, a qual incluía não só a
28

tatuagem e o número de registro de cada animal como toda identificação do seu proprietário para
posteriores avaliações.
Todo sangue coletado na entrada do Parque de Exposições foi levado ao LABIMUNO e
centrifugado a 1.500g por 10 minutos para obtenção do soro o qual foi distribuído em alíquotas de 1
ml, acondicionadas em tubos eppendorf, acondicionadas em caixas de papelão e mantidas em freezer a
-4ºC.
Com o apoio da ACCOBA e seguindo os dados anotados durante a coleta, esses animais foram
identificados de acordo com sua raça, sexo, idade e região de proveniência no estado da Bahia. Além
disso, um questionário (Anexo 1) foi aplicado aos 54 produtores, com a finalidade de descrever as
condições de manejo desses animais, sua nutrição e medidas sanitárias preventivas.
Os soros obtidos foram então submetidos ao ELISA (Enzime Linked Imuno Sorbent Assay)
indireto, como forma de detectar a infecção ou não dos animais pelo C. pseudotuberculosis, conforme
descrito por Seyffert et al. (2010), com sensibilidade de 93,5% e especificidade de 98,5%.
Resumidamente, microplacas de poliestireno de 96 cavidades (Nunc-ImmunoTM Plate PolySorpTM
Surface, NUNCTM Brand Products) foram sensibilizadas com antígeno secretado de C.
pseudotuberculosis em meio de cultura BHI (Brain Heart Infusion) diluído 1:100 em tampão
carbonato-bicarbonato pH 9,8, a 4°C, overnight,. As placas foram então lavadas 2 vezes com tampão
fosfato salino pH 7,4 acrescido de Tween 20 0,05% (PBS-T) e bloqueadas com soroalbumina bovina
5% por 2h a 37°C. Após mais 1 lavagem com PBS-T, os soros dos animais mencionados no item
anterior foram diluídos 1:100 em PBS adicionado de albumina 1% e adicionados às placas. As
amostras foram então incubadas por 1 h a 37°C e, após mais 5 lavagens, foi adicionado anticorpo de
asinino anti-IgG de ovinos conjugado com peroxidase (Bethyl) diluído 1:20.000 em PBS albumina 1%,
incubando-se por mais 45 minutos a 37° C. Após mais 5 lavagens com PBS-T, o substrato
Tetrametilbenzidina adicionado de peróxido de hidrogênio (TMB - Radim) foi adicionado e a placa
incubada por 15 minutos a temperatura ambiente em local escuro. A leitura da densidade óptica foi
realizada a 450 – 620 nm em leitor de ELISA Multiskan MCC/340 (Titertek). As amostras de soro de
cada animal foram avaliadas em duplicata no ELISA.
Os resultados obtidos nos ensaios sorológicos, bem como as respostas dos produtores ao
questionário aplicado, foram tabulados no software Excel v. 2007 para posterior utilização em software
de análise estatística. Os dados foram analisados utilizando-se software SPSS ® for Windows v. 12.0, e
foi utilizando o teste do ‘chi’ quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido em p

para avaliação da associação ou não de características de manejo com a ocorrência de anticorpos
específicos contra C. pseudotuberculosis. As prevalências reais foram obtidas conforme metodologia
relatada por Noordhuizen et al. (1997).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
A maior parte dos ovinos no estado da Bahia é criada em sistema extensivo e carece de
alimentação e manejos adequados, o que contribui não só para a baixa produtividade como para a
manutenção de doenças nos rebanhos do estado (CONAB, 2006). A maioria dos estudos de prevalência
realizados em nosso país se utiliza de animais sem raça definida e com técnicas de manejo inadequadas
(Melo et al., 2000; Gouveia et al., 2003; Lombardi et al., 2009).
No presente trabalho foram avaliadas amostras provindas de animais de alto valor genético e
comercial, que recebem considerável aporte financeiro de seus criadores para a manutenção de seu
manejo sanitário e alimentação, colocando-os fora da realidade da grande maioria dos animais do
rebanho do estado, como citado por Araújo (2006). Estes animais estão constantemente viajando, o que
aumenta sua exposição a animais doentes e a disseminação de doenças às quais eles são possíveis
portadores, mesmo não apresentando sintomas clínicos perceptíveis. Deve-se ressaltar também que
grande parte desses animais são reprodutores inseridos em centrais de inseminação ou utilizados em
estação de monta, e matrizes utilizadas para gestações frequentes, o que aumenta a capacidade desses
animais de alto valor genético de disseminar doenças, mesmo para rebanhos novos e em formação.
Foi obtida uma prevalência aparente de 21,8% de ovinos de raça definida soropositivos para
infecção por C. pseudotuberculosis, sendo a prevalência real, calculada segundo Noordhuizen et al.
(1997), de 22,1% de soropositivos, como indicado na Figura 2 - A. A pequena diferença estatística
entre a prevalência obtida e a real se deve ao fato do ELISA utilizado ter alta sensibilidade e
especificidade, o que aproxima os dados obtidos da prevalência real, segundo Noordhuizen et al.
(1997).
30

Figura 2. Soroprevalência aparente e real (A) da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis e (B) percentual de
ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para Linfadenite caseosa em função do sexo, da raça e da
idade. As análises estatísticas entre os percentuais de soroprevalência em cada conduta estudada foram realizadas pelo teste
do Qui-Quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido em p < 0,05.
Assim como relatado por Seyffert et al. (2010) o sexo e a raça dos animais também não foram
significantemente correlacionados com a prevalência da doença analisada no presente estudo. Em
concordância com Alves et al. (1997) a análise dos dados mostrou que a soroprevalência da LC
aumenta com a idade e a frequência dos animais testados positivos para anticorpos anti-C.
pseudotuberculosis foi menor em ovinos com menos de 1 ano (Figura 2 – B).
Considerando que a LC é uma doença crônica, com um grande período de incubação, pode-se
esperar que a prevalência seja maior em animais mais velhos; adicionalmente, quanto mais o animal é
mantido no rebanho, maior é a chance dele ter contato com animais infectados, o que em epidemiologia
é considerado como prevalência acumulativa (Al-Rawashdeh & Al-Qudah, 2000).
As informações obtidas através da utilização de questionários foram divididas em dois grandes
blocos, onde foi analisada a existência de correlação estatística ou não entre práticas de manejo
31

utilizadas e a soropositividade dos animais das respectivas propriedades. Estes blocos foram agrupados
segundo as ações de gerenciamento e as técnicas de manejo aplicadas nas respectivas propriedades,
como demonstrado nas Figuras 3 e 4.
Correlações significativas entre algumas ações de gerenciamento e a soropositividade dos
animais foram estabelecidas com a análise dos dados gerados por esta pesquisa. Ações como a
exploração semi-intensiva, irrigação e descanso de pastagens, suplementação completa dos animais,
incluindo uma dieta baseada em sais, volumoso e concentrado, e a ausência de animais oriundos de fora
do estado, são medidas que, ao menos estatísticamente, contribuem para um menor índice de
soropositividade dos animais. Neste trabalho estão listadas as práticas de manejo que apresentaram
correlações estatisticamente significativas com os níveis de soroprevalência de anticorpos anti-C.
pseudotuberculosis nos animais estudados. Para uma análise mais aprofundada e específica das
características de manejo e criação utilizadas pelos criadores de ovinos de raça definida no estado da
Bahia, no Anexo 2 foram listadas as frequências de respostas para cada item do questionário.
Figura 3. Níveis de soroprevalência da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis em função das ações de
gerenciamento desenvolvidas para o manejo de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia. As correlações estatísticas
entre os percentuais de soroprevalência e as ações de gerenciamento foram obtidas pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson,
com nível de significância estabelecido em p < 0,05.
Segundo Seyffert et al. (2010), o tipo de criação também afeta significativamente a prevalência
da LC, e da mesma forma o presente trabalho apresentou dados significativos de que o manejo animal
em sistema semi-intensivo (curral e aprisco) acarretou em uma menor frequência de infecção por C.
pseudotuberculosis do que animais criados extensivamente. Isso pode estar relacionado com o fato de
que animais criados extensivamente têm a maior probabilidade de desenvolver lesões de continuidade
32

na pele, principalmente pelo contato com a vegetação seca e espinhosa da caatinga e do semiárido;
essas lesões podem servir de porta de entrada da bactéria no organismo do animal (Paton et al., 1988;
Pepin et al., 1994; Williamson, 2001).
Segundo Macedo et al. (2000), a terminação de cordeiros em confinamento é mais rentável, pois
em pastagens diversas verminoses limitaram o ganho de peso dos animais, o que pode contribuir para
uma maior soropositividade, devido ao comprometimento do status imunológico do animal com a
defesa contra helmintos, bem como a um estado geral de saúde debilitado devido a carência nutricional
ocasionada pelas verminoses. Nos sistemas de produção de pequenos ruminantes, a racionalização e a
intensificação da utilização de pastagens são consideradas de extrema importância (Silva et al., 2000).
O descanso das pastagens pode contribuir com uma melhor higienização e menor exposição da
pastagem ao agente infeccioso, o que reduz o contato dos animais com o C. pseudotuberculosis e a
permanência do mesmo no ambiente.
A principal característica do semiárido é a periodicidade de chuvas alternadas com a seca, sendo
que esta última acarreta queda vertiginosa da disponibilidade de nutrientes (Silva et al., 2010). O valor
nutricional da forragem, que inclui proteína bruta, fica diretamente comprometido se houver alteração
da disponibilidade de água (Oliveira et al., 2010). Segundo Huston & Pinchak (1991), a espécie ovina
mantém seu equilíbrio nutricional com dois litros de água para cada quilo de matéria seca ingerido, e
deve ser fornecida sem limitações com a finalidade de atender à necessidade nutricional, que fica mais
intensa durante o período seco (Araújo Filho & Silva, 2000). Além da sazonalidade que caracteriza o
semiárido e que contribui para a diminuição severa nutricional, a grande distância dos animais às fontes
de água podem representar um fator complicador na transmissão e manutenção da LC nos rebanhos,
uma vez que esse esforço por parte do rebanho tem como consequência quedas na produtividade e no
status imunológico do animal, bem como acarreta maior exposição do rebanho a vegetação seca que
pode ocasionar lesões na pele (Lebbie, 2004).
O suplemento mineral equilibra a dieta fornecendo aos ovinos balanceamento necessário à
manutenção da resistência a infecções (Silva et al., 2010), enquanto que o vitamínico é necessário, em
muito pouca quantidade por que os ruminantes sintetizam a maior parte das vitaminas necessárias para
a manutenção plástica do seu corpo e, portanto, da sua saúde (Bechielle et al., 2006). Em concordância
com esses dados, o presente trabalho mostrou que uma alimentação completa, composta de sais
minerais, concentrado e volumoso, bem como a irrigação das pastagens, são práticas que contribuem
33

para uma melhor nutrição animal e influem diretamente na frequência de soropositividade dos animais
estudados, diminuindo a referida frequência.
O comércio de animais fora do estado também é um mecanismo de disseminação do patógeno
devido a falta de exigência de exames sorológicos (Seyffert et al., 2010). Paton (2000) relatou que o
transporte e a comercialização animal pode ser uma das causas da introdução do C. pseudotuberculosis
em áreas livres de LC. Em concordância, nosso trabalho apresentou correlação estatística significativa
entre a soropositividade dos animais e a prática de adquirir animais oriundos de outros estados.
Separar os animais por idade, não fazer estação de monta, manejar os dejetos com esterqueira,
cremar os animais mortos, criar mais de uma espécie na mesma propriedade são práticas de manejo que
mostraram correlação significativa com a diminuição da soropositividade nas propriedades estudadas,
como demonstrado na Figura 4.
Figura 4. Níveis de soroprevalência da infecção por Corynebacterium pseudotuberculosis em função das ações técnicas de
manejo aplicadas na criação de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia. As diferenças estatísticas entre os
percentuais de soroprevalência em cada conduta estudada foram obtidas pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível
de significância estabelecido em p < 0,05.
A prática de separar os animais por idade também mostrou correlação significativa com a menor
soropositividade. Separar os animais por idade dentro da propriedade pode ajudar na diminuição da
soropositividade, pois como já citado acima, os animais mais velhos tem maior probabilidade de serem
34

soropositivos do que os mais novos (Al-Rawashdeh & Al-Qudah, 2000), e, portanto, a falta de contato
entre os mesmos pode ajudar a diminuir a disseminação da bactéria.
A prática da estação de monta baseia-se em agrupar várias fêmeas junto com um macho durante
um determinado período do ano que coincide com o cio das fêmeas. Esta prática aumenta o contato
entre os animais, inclusive de faixas etárias diferentes, o que contribui para a disseminação do C.
pseudotuberculosis no rebanho. Segundo Souza et al. (2011), a principal fonte de infecção é o conteúdo
dos abscessos que, quando supuram, contaminam o meio ambiente. A transmissão ocorre por contato
direto com as secreções dos abscessos.
Outro fator importante observado neste estudo é a relação entre o manejo dos dejetos, com uso
de esterqueiras e a baixa frequência da soropositividade dos animais estudados, visto que apenas
propriedades que possuam apriscos podem se utilizar desta prática. Deve ser considerado que, ao
realizar o tratamento de dejetos, o criador mantém sua propriedade em uma condição de limpeza maior,
o que leva a uma menor contaminação ambiental pela bactéria, além de levar a uma menor atração de
moscas, as quais podem ser vetores de transporte (Pinheiro et al., 2000).
O Manual de Boas Práticas para Ovinos de Corte do Estado de São Paulo do SEBRAE (Dias et
al., 2009) sugere a cremação do material purulento como uma das boas práticas que devem ser adotadas
pelos criadores diante de um caso de LC no rebanho. O C. pseudotuberculosis atinge não só a pele do
animal, como a maioria dos casos se comporta de forma subclínica, afetando os linfonodos e outros
órgãos internos (Guimarães et al., 2011), constituindo assim a carcaça uma fonte de infecção para a
propriedade. Os resultados aqui descritos apontam para uma menor frequência da soropositividade da
LC em propriedades que cremam os animais mortos, o que justifica a recomendação supracitada.
A estratégia de criação de várias espécies animais ao mesmo tempo, conhecida como forma
consorciada (Almeida et al., 2009), é uma das muitas formas de manejo sanitário que beneficia os
rebanhos envolvidos (Carvalho et al, 2005) e vem sendo amplamente praticada, especialmente por
levar a diminuição por infecções parasitárias (Lambert & Guerin, 1989). A criação consorciada de
ovinos com equinos e bovinos se mostrou importante para a diminuição da frequência dos animais
testados positivos para anticorpos anti-C. pseudotuberculosis.
Pode-se concluir que os animais de alto valor genético do estado da Bahia apresentam uma alta
prevalência de anticorpos anti-C. pseudotuberculosis, não apresentando relação com a raça e o sexo dos
animais diagnosticados como positivos. Apesar da rigorosa inspeção clínica realizada pelos veterinários
35

oficiais da ADAB, estes animais se encontram soropositivos para a doença e, mesmo não apresentando
quaisquer sinais clínicos, podem servir de disseminadores da bactéria em uma exposição agropecuária,
por exemplo.
Algumas melhorias nas práticas de manejo e dos sistemas de criação tais como a irrigação e o
descanso de pastagens, separação de animais jovens e adultos, utilização de esterqueiras, cremar os
animais mortos, evitar animais oriundos de outras regiões sem saber sua situação sorológica e alimentar
os animais de forma balanceada, contendo sal, concentrado e volumoso, podem auxiliar no combate a
esta bactéria. Estes animais, e seus subprodutos, estão em constante deslocamento pelo estado, o que
justifica a importância dos sistemas de vigilância epidemiológica para atuar no controle desta infecção,
e a necessidade de um teste de diagnóstico sorológico rápido e eficaz a campo.
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4. ARTIGO CIENTÍFICO 2
Soroepidemiologia da infecção pelos vírus de Maedi Visna e da Língua azul em ovinos de raça
definida do Estado da Bahia e correlações com aspectos zootécnicos
Seroepidemiology of the infection by the Maedi-Visna and Blue-Tongue viruses in sheep with defined
breed from Bahia State and correlations with zootechnical aspects
LOUREIRO 1 , Dan; BASTOS 1 , Bruno Lopes; GUIMARÃES 2 , Alessandro de Sá; MAIA 3 , Antônio
Lemos; SARDI 4 , Silvia Ines; GUEDES 1 , Maria Tereza; SENA 1 , Ludmilla; DALTRO 1 , Paula Braga;
RAYNAL 1 , José Tadeu; GOUVEIA 5 , Aurora Maria Guimarães; MEYER 1 , Roberto; PORTELA 1 ,
Ricardo Wagner
1 Laboratório de Imunologia e Biologia Molecular do Instituto de Ciências de Saúde da Universidade Federal da Bahia, Av.
Reitor Miguel Calmon s/n, Vale do Canela, Salvador, Bahia, Brasil, 40110-100.
2 EMBRAPA Gado de Leite, Rua Eugênio do Nascimento, 610, Juiz de Fora, MG, 36038-330, Brasil.
3 Agência de Defesa Agropecuária da Bahia – ADAB, Av. Adhemar de Barros 967, Ondina, Salvador, Bahia, Brasil, 40170-
100.
4 Laboratório de Virologia do Instituto de Ciências de Saúde da Universidade Federal da Bahia, Av. Reitor Miguel Calmon
s/n, Vale do Canela, Salvador, Bahia, Brasil, 40110-100.
5 Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais, Av.
Antônio Carlos 6627, Pampulha, Belo Horizonte, MG, 30123-970.
RESUMO
A ovinocultura vem apresentando importância crescente no cenário econômico brasileiro,
principalmente devido ao alto valor agregado de alguns de seus subprodutos, mas a tecnificação da
criação desses animais ainda enfrenta problemas, como a ocorrência de diversas doenças infecciosas. O
produtor rural é desafiado com o fato de conciliar técnicas de manejo com a prevenção da infecção por
diversos agentes. O presente estudo objetivou a avaliação da situação sorológica de ovinos de raça
definida da Bahia, quando testados para a presença de anticorpos específicos para os vírus de Maedi-
Visna e da Língua Azul, bem como as práticas de manejo utilizadas pelos criadores e sua correlação
com a infecção dos animais. Nos exames diagnósticos, foi utilizada a técnica de Imunodifusão em Gel
de Ágar (IDGA) em 690 amostras de ovinos com raça definida provenientes do estado da Bahia, Brasil.
Um questionário foi aplicado aos criadores com o intuito de obter dados acerca do sistema de criação,
para posterior correlação com os dados sorológicos. Os resultados mostraram uma prevalência real de
40

3,9% e 2,9% de animais soropositivos para anticorpos anti-Vírus de Maedi-Visna e anti-Vírus da
Língua Azul, respectivamente. Certas práticas de manejo apresentaram correlação significativa com a
sorologia do Maedi-Visna, e a importação de animais se mostrou de extrema importância para a
soropositividade da Língua Azul no estado da Bahia.
Palavras-chave: Doença da Língua Azul, Doença de Maedi Visna, ovinos, Bahia.
SUMMARY
The sheep industry has shown increasing importance at the Brazilian economy due to the high
value of some byproducts, but the technical level of these animals breeding still faces problems, such as
infectious diseases occurrence. The farmer is challenged to reconcile management techniques with the
prevention of the infection by various agents. This study aimed to assess the serological status of sheep
with defined breed from Bahia state, when tested for the presence of Maedi-Visna virus and Blue-
tongue virus specific antibodies, as well as the management practices used by farmers, and the
correlation of these breeding procedures with the infection by these viruses. Diagnoses were made
using the agar gel immunodiffusion (AGID) test in 690 samples of sheep with breed from Bahia state,
Brazil. A questionnaire was applied to the farmers, in order to obtain data about the breeding system,
for later correlation with the serological data. The actual results showed 3.9% and 2.9% prevalence of
animals tested positive for antibodies anti-Maedi-Visna Virus and Bluetongue virus, respectively.
Some management practices were significantly correlated with the serology of Maedi-Visna, and
importation of animals has proved to be extremely important for Bluetongue seroprevalence in the state
of Bahia.
Keywords: Bluetongue disease, Maedi Visna disease, sheep.
INTRODUÇÃO
A região Nordeste apresenta o maior rebanho ovino do país, sendo a Bahia o estado mais
representativo (IBGE, 2008); sua exploração atinge os mais distintos segmentos de unidades
produtivas, e abrange desde a agricultura familiar até empresas rurais organizadas em moldes
empresariais (Araújo, 2006). A maioria dos rebanhos ovinos nesta região é explorada em sistema
41

extensivo, não sendo adotadas práticas adequadas de manejo alimentar e sanitário, o que têm
contribuído para a baixa produtividade da ovinocultura (CONAB, 2006). Várias endemias estão
presentes no rebanho ovino brasileiro, dentre elas as doenças deMaedi-Visna (MV) e da Língua Azul
(LA).
A Doença Maedi-Visna é causada pelo vírus Maedi-Visna (VMV), pertencente ao gênero
Lentivírus, família Retroviridae, e acomete especificamente os ovinos (Salaberry et al., 2010). Causa
infecção persistente, que resulta num quadro clínico lento e progressivo, na qual os animais acometidos
desenvolvem uma doença neurológica degenerativa e inflamatória, e/ou pneumonia progressiva, após
um longo período de incubação (Fevereiro et al., 1999).
Outra enfermidade que vem ganhando importância no cenário da ovinocultura é a doença da
Língua Azul (LA), cujo agente etiológico, o vírus da Língua Azul (VLA) é membro do gênero
Orbivirus, família Reoviridae, apresentando até o momento 24 subespécies descritas (Lager et al.,
2004; Fauquet et al., 2005). A LA é transmitida por mosquitos do gênero Culicoides (Meiswinkel et
al., 2004). Esta doença pode se apresentar nas formas subclínica ou aguda, e se caracteriza por
hipertermia, inflamação, erosão da mucosa bucal, eventual cianose lingual, coronite, pododermatite,
miosite, pneumonia e emaciação (Obdeyn, 1984; OIE, 2008).
As perdas econômicas que podem ser causadas por essas enfermidades são consideráveis; o
VMV causa falhas reprodutivas, morte, diminuição da produção láctea e perda de peso dos animais
infectados (Callado et al., 2001), enquanto a LA é causa de significativas perdas econômicas, seja por
conta da alta taxa de morbidade, seja decorrente das restrições internacionais impostas pelos países
importadores de produtos, subprodutos e sêmen de pequenos ruminantes (Erasmus et al., 1975; Lobato,
1999).
Tanto MV quanto a LA, são fortes fatores limitadores do comércio internacional,
principalmente pela existência de barreiras sanitárias (Ishizuka et al., 2004). Por isso, se fazem
necessários o conhecimento, controle e melhorias nos tratamentos e diagnósticos clínicos e
laboratoriais destas doenças, assim como o desenvolvimento de técnicas que apresentem sensibilidade
e especificidade satisfatórias, bem como programas de controle e melhorias de manejo (Dantas, 2004).
A escassez de informações sobre a abrangência dessas doenças no estado da Bahia tem
contribuído para a falta de medidas de combate e controle eficazes. O presente trabalho teve como
objetivo então determinar a soroprevalência dessas doenças em ovinos de raça definida e alto valor
42

genético e comercial no estado da Bahia, e avaliar a correlação entre diversas metodologias de criação
e manejo dos animais com a infecção dos animais pelos vírus de Maedi-Visna e vírus da Língua Azul.
MATERIAL E MÉTODOS
Uma soroteca com 690 amostras de ovinos de alto valor genético, coletada no ano de 2008, com
o apoio da Associação de Criadores de Caprinos e Ovinos da Bahia (ACCOBA) e da Agência Estadual
de Defesa Agropecuária da Bahia (ADAB) e com o consentimento dos produtores participantes, foi
utilizada nesse trabalho.
Foram analisados 37 dos 417 municípios do estado da Bahia, perfazendo um total de seis das
sete mesorregiões do estado da Bahia, segundo o IBGE (2008) (Figura 1). Foram amostrados 690 dos
145.438 animais registrados na Associação Brasileira dos Criadores de Ovinos (ARCO) para o estado
da Bahia, pertencentes a 54 produtores, sendo que os animais amostrados são animais de grande valor
comercial e genético. As regiões e municípios amostrados correspondem às regiões nas quais se tem
uma maior tradição de criação de ovinos.
Utilizou-se o dobro do numero de animais que seriam necessários para amostragem nesse
estudo, como calculado segundo proposto por Callegari-Jaques (2003), com um erro amostral
estabelecido em 5% e nível de confiança de 95%.
As amostras de sangue foram coletadas pelos veterinários da equipe do Laboratório de
Imunologia e Biologia Molecular (LABIMUNO) - Instituto de Ciências de Saúde (ICS) - Universidade
Federal da Bahia (UFBA), antecedida de inspeção clínica realizada pelos médicos veterinários oficiais
da ADAB. Todas as amostras de sangue foram coletadas diretamente da veia jugular utilizando-se
tubos do tipo vacumtainer. As amostras foram devidamente identificadas de acordo com a tatuagem,
número oficial de registro e identificação de cada proprietário para posteriores avaliações.
Todo sangue coletado foi levado ao LABIMUNO e centrifugado a 1.500g por 10 minutos para
obtenção do soro distribuído em alíquotas de 1 ml, acondicionados em tubos eppendorf, acondicionado
em caixas de papelão e mantidos em freezer a -4ºC.
Com o apoio da ACCOBA e seguindo os dados anotados durante a coleta, esses animais foram
identificados de acordo com sua raça, sexo, idade e região de proveniência no estado da Bahia. Além
disso, um questionário (Anexo I) foi aplicado aos 54 produtores com a finalidade de descrever as
43

condições nutricionais, de manejo sanitário e dos animais. Uma análise mais aprofundada de todas as
respostas aferidas ao questionário pelos produtores pode ser encontrada no Anexo II.
Para detecção de anticorpos anti-vírus de Maedi-Visna realizou-se técnica de Imunodifusão em
Gel de Ágar (IDGA) segundo relatado por Pinheiro et al. (2006), com especificidade de 94,1% e
sensibilidade de 65,6%. Para este trabalho foi utilizado um kit comercial adquirido junto a Biovetech ®
(UFPE/DINE). O Gel de Ágar foi aquecido a 90ºC e distribuído em placas de Petri. Após sua
solidificação foram feitos os poços com equipamento devidamente fornecido pela Biovetech. Foram
adicionados o antígeno sonicado do vírus Maedi-Visna e o controle positivo do próprio kit e as
amostras a serem analisadas, em cada respectivo poço. As placas foram incubadas a 19ºC por 48 horas,
após o que se procedeu a leitura.
Para detecção de anticorpos contra o Vírus da Língua Azul também foi utilizada a técnica de
Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA), segundo técnica descrita por Gouveia et al. (2003), com
sensibilidade de 91,8% e especificidade de 99,14%,cujo antígeno foi produzido pelo Laboratório de
Bacteriologia Aplicada (Departamento de Medicina Veterinária Preventiva. EV - UFMG). Esse
experimento foi realizado no Laboratório de Bacteriologia Aplicada da Escola de Medicina Veterinária
da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG).
Os resultados obtidos nos ensaios sorológicos de cada animal, e as respostas obtidas nos
questionários de cada produtor foram tabulados no software Excel v. 2007 para posterior utilização em
software de análise estatística. Os dados foram analisados utilizando-se software SPSS ® for Windows
v. 12.0, e foi utilizando o teste do ‘chi’ quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido
em p

No presente trabalho foram avaliadas amostras de animais de alto valor genético e comercial,
que usualmente recebem grande aporte financeiro de seus criadores para a manutenção de seu manejo
sanitário e alimentação, o que os coloca fora da realidade da grande maioria dos animais do rebanho do
estado, como citado por Araújo (2006).
Apesar de não apresentarem restrições alimentares, e receberem cuidados intensivos, estes
animais estão constantemente viajando de exposição em exposição, o que aumenta o contato com
animais doentes, e os mesmos podem servir de disseminadores de agentes infecciosos, bem como o
fato de serem reprodutores e matrizes alerta para a possibilidade de disseminação para diversos
rebanhos.
A prevalência aparente obtida foi de 8,2% e 3,5% de animais soropositivos para infecção pelo
vírus de Maedi Visna e da Língua Azul, respectivamente. A prevalência real, calculada segundo
Noordhuizen et al. (1997), foi de 3,9% para MV e 2,9% para LA, conforme indicado nas Figuras 5 e 6.
A grande diferença estatística observada entre a prevalência obtida e a real para MV se deve ao fato de
o IDGA utilizado ter baixa sensibilidade, o que distancia os dados obtidos na prevalência aparente
daqueles caculados para prevalência segundo preconizado por Noordhuizen et al., (1997). O mesmo
não foi observado para LA devido à alta sensibilidade e especificidade do teste.
Figura 5. Soroprevalência aparente e real da infecção por VMV. As diferenças estatísticas entre os percentuais de
soroprevalência em cada conduta estudada foram obtidas pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível de significância
estabelecido em p < 0,05.
As baixas frequências de animais positivos para anticorpos específicos para o Vírus da Língua
Azul (Figura 6 - A) podem ser atribuídas principalmente às condições de temperatura e umidade de boa
parte das regiões do estado da Bahia incluídas nesse estudo (Lobato, 1999; Tomich et al., 2006). Melo
et al.(2000) justificaram que a temperatura e a umidade do semiárido dificultam a proliferação do vetor
Culicoides sp., o que pode contribuir para a baixa prevalência de anticorpos observada no sertão.
Adicionalmente Dias et al. (2007) observaram prevalência sorológica de 27,31% em ovinos de regiões
45

semiáridas do Ceará, diferença esta que pode ser explicada pela diferença do número de animais
estudados, pela falta de manejo adequado ou pelas diferenças climáticas.
Figura 6. Soroprevalência aparente e real da infecção por VLA (A) e o perfil dos rebanhos soropositivos com relação à
importação de animais (B). A diferença estatística entre a prevalência de produtores que realizaram ou não importações de
animais foi obtida pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido em p < 0,05.
A Figura 6 mostra que dos 3,5% dos animais testados positivos para anticorpos anti-VLA,
77,3% são oriundos de propriedades que realizaram importação de ovinos (Erasmus, 1990; Purse et al.,
2005). Em concordância com os resultados obtidos no presente trabalho, Melo et al.(2000) ressaltaram
que a importação e o intenso trânsito de animais infectados desempenham importante papel
epidemiológico na ocorrência do VLA e, provavelmente, contribuem para a presença do VLA em
regiões nordestinas. Silva (2002) ressaltou que um aumento na prevalência pode ocorrer em regiões
cujo fluxo de transporte de animais seja intenso.
Desde o primeiro relato de LA na América do Sul, em 1978 no Brasil, estudos sorológicos tem
determinado a disseminação dessa infecção, a qual apresenta como uma de suas características ausência
de sinais clínicos (Lager, 2004), o que dificulta a detecção da doença. Somado a essa informação,
temos o fato da não exigência de exames sorológicos para a LA em nosso estado, apesar de a mesma
ser de notificação obrigatória pela OIE, o que explica a importação de animais soropositivos oriundos
de países endêmicos.
Não houve correlação significativa entre a prevalência de ambas as infecções para os diferentes
sexos, raças ou idade (Figuras 7 e 8). Nogueira et al. (2009) não encontraram diferença estatística entre
a prevalência da LA e o sexo dos animais, o que corrobora com nossos achados. Da mesma forma, com
46

elação à Maedi-Visna, também não encontramos relação entre essas duas variáveis, conforme o
relatado por Araújo et al., (2004), Christodoulopoulos, (2006) e Oliveira et al., (2006).
Figura 7. Percentual de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para MV em função do sexo, da
raça e da idade. As diferenças estatísticas entre os percentuais de soroprevalência em cada conduta estudada foram obtidas
pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido em p < 0,05.
Figura 8. Percentual de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia soropositivos para LA em função do sexo, da raça
e da idade. As diferenças estatísticas entre os percentuais de soroprevalência em cada conduta estudada foram obtidas pelo
teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível de significância estabelecido em p < 0,05.
Em contraste com os resultados deste trabalho, MacLachlan (2004) encontrou diferença
estatística entre a sopositividade de LA e diferentes raças, e Lobato et al. (2001) e Silva (2002)
47

observaram aumento progressivo do número de animais positivos com a idade. Estas diferenças entre
informações disponíveis em literatura e os presentes dados podem ser consequência do pequeno
número de animais soropositivos, o que dificulta uma análise estatística mais detalhada dos dados
obtidos.
Correlações estatísticamente significativas entre a soropositividade para VMV e algumas ações
técnico-gerenciais de manejo nas respectivas propriedades foram constatadas de acordo os
questionários respondidos pelos proprietários (Figura 9). Serão mostrados neste trabalho somente as
correlações que paresentaram correlações estatisticamente significativas; maiores informações sobre a
situação geral das técnicas de manejo dos animais pode ser conferida no ANEXO II.
Pode ser observado que, em propriedades nas quais os ovinos não conviviam com outras espécies
de animais domésticos, detectou-se menor índice de soropositividade para doença de Maedi-Visna,
correlação essa estatisticamente significativa.
Figura 9. Níveis de soroprevalência da infecção pelo vírus do Maedi-Visna em função das ações técnico-gerenciais
desenvolvidas para o manejo de ovinos de alto valor genético do Estado da Bahia. As diferenças estatísticas entre os
percentuais de soroprevalência em cada conduta estudada foram obtidas pelo teste do Qui-Quadrado de Pearson, com nível
de significância estabelecido em p < 0,05.
A correlação entre soronegatividade e pastagens adubadas e irrigadas se justifica pelo fato de
que uma boa nutrição nos primeiros meses de vida e ao longo dela auxiliam na formação de
48

organismos cujo sistema imunológico estará bem desenvolvido, garantindo a sanidade do rebanho.
Entretanto o clima do semi-árido, determinado pela sazonalidade de período chuvoso alternado com
período seco, faz com que a oferta de nutrientes não seja constante durante o ano (Silva et al., 2010). O
valor nutricional da forragem, que inclui proteína bruta, fica diretamente comprometido se houver
alteração da disponibilidade de água (Oliveira et al., 2006), por isso no período seco os animais podem
ficar mais vulneráveis (Araújo Filho & Silva, 2000).
Em oposição aos achados de Alvarez et al. (2005) e Rosa et al. (2009), a análise dos resultados
dos questionários aplicados aos produtores mostrou que o oferecimento de colostro ovino está
diretamente relacionado com a soronegatividade dos animais. Segundo o que foi descrito por Rimstad
et al. (1993) e Blacklaws et al. (2004) o baixo índice de soropositivos e a possibilidade de
soroconversão tardia podem ter contribuído para estas discrepâncias.
Dentre os métodos de controle da MV, incluem-se o isolamento dos cordeiros ao nascer, não
tendo acesso ao colostro e leite de ovelhas positivas, sendo submetidos a aleitamento artificial (Moojen,
2001). Esta é uma das medidas adotadas pelos programas que visam combater a doença (Blacklaws et
al., 2004; Leginagoikoa et al., 2005), e as informações obtidas, apresentadas na Figura 9,corroboram
com estes relatos.
Um último fator de risco para o VMV, ou qualquer doença infecto-contagiosa, é a higienização,
uma vez que nossos resultados apontam para baixa frequência de soropositividade naquelas
propriedades cujo manejo de dejetos, como o uso de esterqueira, é feito regularmente (Pinheiro et al.,
2000). Além da adoção do sistema de esterqueira, a criação semi-intensiva oferece maior proteção aos
animais por sua própria condição, ou seja, os animais em questão não ficam expostos aos desafios
naturais, tais como verminoses (Carvalho et al., 2005). Nossos achados também estão em concordância,
uma vez que a soronegatividade foi mais prevalente naquelas propriedades que adotam esse tipo de
criação.
Pode-se concluir que os animais de alto valor genético do estado da Bahia apresentam uma
baixa prevalência de anticorpos anti-VLA e anti-VMV, sendo que não foi encontrada relação dessa
prevalência com raça, sexo e idade dos animais com diagnóstico positivo. É importante lembrar que
nenhum desses animais apresentou quaisquer sinais clínicos das viroses estudadas. Algumas melhorias
nas práticas de manejo e dos sistemas de criação, junto à realização de testes periódicos a fim de se
diagnosticar a infecção e o descarte de animais positivos, são fundamentais para o controle da doença.
49

Os dados indicam a circulação destes vírus no estado, mesmo que em baixa escala. Estes
animais, e subprodutos, estão em constante deslocamento pelo estado, o que justifica não só a
realização de estudos mais abrangentes destas endemias, como se ressalta a importância dos sistemas
de vigilância epidemiológica para atuar no controle destas infecções. Os presentes dados levantam
preocupações devido à importância econômica da doença, dos animais e do fato de serem doenças de
notificação obrigatória, sendo sua ocorrência um evento negativo para o comércio de animais e
subprodutos de origem animal.
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53

5. CONSIDERAÇÕES FINAIS
A linfadenite caseosa é uma enfermidade que possui uma alta prevalência no estado da Bahia,
mesmo entre os animais de alto valor genético e comercial, e é de difícil detecção devido ao fato de
ovinos desenvolverem a infecção em linfonodos não-superficiais, dificultando assim o combate a
mesma. Da mesma forma alguns destes animais apresentaram diagnóstico sorológico positivo para
doença de Maedi-Visna e da Língua Azul e não apresentaram quaisquer sinais clínicos, o que também
dificulta a detecção e combate às mesmas.
Estes fatos apontam para a necessidade de métodos de detecção mais eficientes e que possam
ser utilizados de forma rápida e eficaz a campo para um melhor controle e combate a estas doenças.
Neste sentido algumas melhorias nas práticas de manejo e nos sistemas de criação se mostraram
importantes ferramentas para o controle e combate a estas enfermidades.
Os vírus de Maedi-Visna e da Língua Azul se fazem presentes no estado em baixa frequência,
mas são motivo de preocupação e, junto com o C. pseudotuberculosis e outras possíveis enfermidades,
são muito pouco ou não são combatidas de formas eficazes, o que compromete e muito a ovinocultura.
Estes animais, e seus subprodutos, estão em constante deslocamento pelo estado, principalmente
em exposições agropecuárias e em estações de monta, o que ressalta a importância do controle destas
infecções em rebanhos de alto valor genético e comercial. Os presentes dados levantam preocupações
devido à importância econômica da doença, dos animais e do fato de serem doenças de notificação
obrigatória, sendo sua ocorrência um evento negativo para o comércio de animais e subprodutos de
origem animal.
54

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70

7. ANEXOS
7.1. ANEXO 1 – QUESTIONARIO APLICADO AOS PRODUTORES
CARACTERIZAÇÃO DE UNIDADES PRODUTORAS DE OVINOS NO ESTADO DA BAHIA
MUNICÍPIO DA PROPRIEDADE:__________________________________________
NOME DA PROPRIEDADE:___________________________________________
TERRITÓRIO DE IDENTIDADE (A SER PREENCHIDO PELO LABORATÓRIO):
_______________________________________
1. IDENTIFICAÇÃO DO PRODUTOR
Nome:
______________________________________________________________________________________________________________
Endereço do proprietário (para correspondência):
Rua:____________________________________________________________________
Cidade:_______________________________________ UF:________CEP:_______________
DDD/Tel.:______________________________
E-mail (preencher se disponível): _____________________________________________________
Filiado a Associações de Criadores? ( ) Não ( ) Sim: Qual(is)?_____________________________________________
Como se mantém informado sobre caprinos e ovinos:
( ) Livros e Publicações Técnicas ( ) Rádio
( ) Cursos e Palestras: ( ) TV
( ) Dias de Campo: ( ) Internet
( ) Jornal ( ) Outras Criadores
Quem gerencia o Criatório? ( ) Proprietário ( ) Proprietário e gerente técnico ( ) Gerente Técnico
2. PROPRIEDADE
Instalações:
Área Total (ha):________
Possui instalações próprias para caprinos e ovinos? ( ) Não ( ) Sim
Tipo: ( ) Curral de bovinos adaptado ( ) Aprisco construído especificamente para caprinos e ovinos
71

Pedilúvio: ( ) SIM ( ) NÃO.
Tipo de piso: ( ) Chão batido ( ) Ripado ( ) Cimentado ( ) Outro: _______________________
Faz divisão de pastagens? ( ) Não ( ) Sim
Quais espécies são criadas na propriedade para fins de produção? ( ) Caprinos ( ) Ovinos
( ) Bubalinos ( ) Equinos ( ) Suínos ( ) Aves ( ) Bovinos
Alimentação:
Pastagem ( ) Nativa ( ) Cultivada Tipos de forragem_____________________________________
Irrigação: ( ) Não ( ) Sim: ( ) De Pastagens ( ) De Culturas
Adubação de pastagens: ( ) Não ( ) Sim. Tipo de Adubo:__________________________________
Tipo de pastejo: ( ) Rotacionado ( ) Contínuo ( ) Outro: __________________________________
Suplementação: ( ) Silagem. Tipo de forragem: ___________________________________________________
( ) Feno. Tipo de forragem:_________________________________________________
( ) Cana. Com ureia? _____________________
( ) Capineira. Tipo de capim: ________________________________________
( ) Banco de proteína. Tipo(s) de leguminosa: _____________________________________
( ) Concentrado.: ( ) Comercial ( ) Feito na propriedade ( ) Outro: _____________
( ) Sal proteinado ( ) Com Ureia. Proporção____________________________
( ) Sal mineral. Tipo ( ) Sal comum
( ) Sal mineralizado ( ) para ovinos ( ) para caprinos ( ) para bovinos
Existe instalação utilizada para estocar alimentos destinados à suplementação de caprinos e/ou ovinos? ( ) Sim ( )
Não
A água oferecida aos caprinos/ovinos é proveniente de:
( ) Cacimba ( ) Açude ( ) Lagoa ( ) Poço profundo ( ) Cisterna ( ) Poço artesiano
A água é oferecida aos caprinos/ovinos em:
( ) Vasilhames dentro das instalações ( ) Vasilhames fora das instalações ( ) Animais bebem direto na fonte (açude,
barragem, etc.)
72

3. MANEJO DO REBANHO
Se cria caprinos e ovinos, os rebanhos são criados: ( ) Separados ( ) Juntos
Identificação individual dos animais: ( ) Não faz ( ) Brinco ( ) Tatuagem ( ) Medalha ( ) Outro:____
Faz anotação dos partos e nascimentos? ( ) Não ( ) Sim
Corte e cura do umbigo: ( ) Não faz ( ) Com iodo ( ) Com creolina ( ) Outro: ____________________
Tipo de colostro dado aos filhotes: ( ) Colostro de vaca ( ) Colostro artificial ( ) Colostro de ovelha
( ) Colostro de cabra in natura ( ) Colostro de cabra tratado termicamente( ) Outro. Qual? _______________________
Aleitamento: ( ) Natural ( ) Artificial: ( ) Leite de cabra ( ) Leite de ovelha ( ) Leite de vaca
( ) Leite em pó de vaca ( ) Em pó de soja ( ) Outro: _____________________________________
Castra os machos para abate? ( ) Não ( ) Sim Como? ( ) Cirúrgico ( ) Burdizzo ( ) Elastrador ( ) Outra:
_____
Idade de castração: ( ) 10 a 30 dias ( ) 31 a 60 dias ( ) 61 a 90 dias ( ) Mais de 90 dias
Idade da desmama (apartação): ( ) 1 mês ( ) 2 meses ( ) 3 meses ( ) 4 meses ( ) 5 meses ou mais
Separa o rebanho por faixa de idade? ( ) Não ( ) Sim
Separa as fêmeas gestantes? ( ) Não ( ) Sim Separa as fêmeas paridas? ( ) Não ( ) Sim
Separa machos e fêmeas? ( ) Não ( ) Sim
Reprodução: ( ) Monta Natural ( ) Monta Natural Controlada ( ) Inseminação Artificial ( ) Transferência de
embrião
Estação de monta? ( ) Não ( ) Sim. Época : ______________________________________________
Cio: ( ) Natural ( ) Sincronizado com luz ( ) Sincronizado com hormônio ( ) Outro: ____________
Quem seleciona os animais? ( ) Não seleciona ( ) Técnico da ACCOBA ( ) Proprietário
( ) Técnico do Rebanho ( ) Empregado ( ) Outro:____________________
Cães domésticos têm acesso à água e alimentos dos caprinos e/ou ovinos? ( ) Não ( ) Sim ( ) Às vezes
Já foi observado cães se alimentando de restos placentários ou fetos mortos? ( ) Não ( ) Sim ( ) Às vezes
Faz controle de roedores na propriedade? ( ) Não ( ) Sim. Como? _______________________________________
Existem gatos na propriedade? ( ) Não ( ) Sim.
73

De que os gatos se alimentam? ( ) Ração ( ) Caça ( ) Sobra de alimentos
( ) Vísceras de animais abatidos na propriedade ( ) Leite ( ) Outro
( ) Arroz, feijão, farofa, restos de carne, pedaços de pão, etc.
Na área onde está localizada a propriedade, é comum a presença de gatos de outras propriedades? ( ) Não ( ) Sim.
Já foi observado gatos se alimentando de restos placentários? ( ) Não ( ) Sim ( ) Às vezes
Os animais têm contato direto com: ( ) Cães ( ) Gatos ( ) Bovinos ( ) Ovinos ( ) Eqüinos
( ) Suínos ( ) Animais silvestres (especificar):________________________________
Acompanhamento técnico? ( ) Não ( ) Sim. Frequência: ( ) Semanal ( ) Quinzenal ( ) Mensal ( ) Semestral ( ) Se precisar
( ) Médico Veterinário ( ) Zootecnista ( ) Agrônomo ( ) Técnico Agrícola
( ) Particular ( ) Empresa: ___________________________________________
Quando tem algum animal doente, a quem recorre? ( ) Medica por conta própria ( )Veterinário de cooperativas
( ) Veterinário autônomo ( ) Veterinário da ACCOBA ( ) Veterinário da ADAB ( ) Vizinho ( ) Outro.
Qual? _____________ Destino dos animais mortos: ( ) Necropsia ( ) Enterrado ( ) Cremado ( ) Leva para pasto
distante ( ) Outro:________
Se houver BOVINOS na propriedade, quais destes sintomas já foram observados?
( ) Perda de peso ( ) Queda na produção de leite ( ) Lesões na língua, lábios, palato ou gengiva
( ) Secreção do nariz ( ) Feridas nas tetas ( ) Nascimentos de bezerros fracos ou com anomalias
( ) Aborto ( ) Inflamação dos cascos e manqueira ( ) Focinho ressecado com a pele quebradiça
4 . REBANHO OVINO
Tipo e forma de exploração: ( ) Carne ( ) Lã ( ) Leite
( ) Intensiva ( ) Semi-intensiva ( ) Extensiva
Ano de início da criação: ________________ Registra os animais na ACCOBA? ( ) Não ( ) Sim
Tem ou teve animais importados em seu rebanho? ( ) Não ( ) Sim
País(es) de origem:______________________________________________
Reprodutores: ( ) Comprados ( ) Trocados ( ) Emprestados
Participa em leilões e exposições agropecuárias? ( ) Não ( ) Sim. Fora do Estado ( ) Sim ( ) Não
74

Exige documento sanitário para compra de ovinos? ( ) Não ( ) Sim. Qual(is)? _________________________
QUANTIDADE TOTAL DE OVINOS POR RAÇA OU TIPO RACIAL (ordem alfabética)
RAÇA/TIPO QTDE RAÇA/TIPO QTDE RAÇA/TIPO QTDE
Bergamácia Merino Texel
Crioula Morada Nova Mestiça
Dorper Somalis SRD
Hampshire
Down
Suffolk
Ile de France Santa Inês
5.MANEJO SANITÁRIO DOS OVINOS
Outra:
_________
Outra:
_________
Práticas utilizadas: ( ) Troca de pasto após a vermifugação ( ) Troca de pasto antes da vermifugação
( ) Permanência mínima de 12 h após a vermifugação ( ) Esterqueiras
( ) Descanso de pastagens ( ) Separa os animais jovens dos adultos
( ) Vermifuga os animais recém-chegados a propriedade ( ) Quarentena
( ) Piquete/ baia de isolamento de animais doentes ( ) Troca de vermífugo
( ) Piquete/baia maternidade (para partos) ( ) Exames de fezes periódicos
( ) Casqueamento dos animais. Periodicidade: __________________
( ) Tratamento para coccidiose (eimeriose) preventivo ou curativo. Produto(s): __________________________
Alterações que já foram observadas no rebanho OVINO:
( ) Aborto
( ) Nascimento de cordeiros fracos ou com anomalias
( ) Artrites
( ) Bicheira (Miíase)
( ) Ceratoconjuntivite
( ) Língua inchada para fora da boca
75
( ) Língua, lábios ou focinho vermelhos ou roxo-azulados
( ) Cheiro ruim na boca
() Edema de face – inchaços no lábio, língua ou
mandíbula
( ) Ectima contagioso (Boqueira)
( ) Vesículas (bolhas ou aftas) na boca e lábios

( ) Corrimento nasal com aparecimento de crostas
(cascas)
( ) Diarreias frequentes
( ) Oestrus ovis (Bicho de cabeça)
( ) Perda de pêlo ou lã
( ) Linfadenite caseosa (mal do caroço)
( ) Mamites
( ) Pneumonias
( ) Pododermatite – inflamação dos cascos e manqueira
( ) Sintomas nervosos
( ) Carrapatos
( ) Piolhos
( ) Bernes
( ) Fotossensibilização
73

Vermifugação: ( ) Não ( ) Sim. ( ) Frequência: ___________
Produtos:
______________________________________________________________________________
Alternância de produtos: ( ) Não ( ) Sim Periodicidade: ______________________
Exames periódicos
realizados nos ovinos
Brucelose
Leptospirose
Língua Azul
Maedi-Visna
Epididimite
(Brucelose)
Não Sim Local de Realização do Exame Periodicidade
Outro: -
VACINAS UTILIZADAS NOS OVINOS
Doença Frequência Doença Freqüência
6 PRODUÇÃO DE CARNE, PELE E LÃ DE OVINOS
Vende os ovinos: ( ) No próprio município ( ) Para outras cidades ( ) Para outros
Estados
Destino dos ovinos comercializados para abate: ( ) Frigorífico ( ) Intermediário ( ) Mercado local
(ao consumidor)
Venda do animal: ( ) Sozinho ( ) Com outros produtores
Época de maior procura de ovinos para abate: ( ) Início do ano ( ) Meio do ano ( ) Final do
ano
74

Abate em que idade? ( ) Com menos de 3 meses ( ) Entre 3 e 6 meses ( ) Entre 6 e 12 meses (
) Mais de 12 meses
Destino da pele: ( ) Não aproveita ( ) Curtume ( ) Intermediário ( ) Mercado local (ao
consumidor)
Dificuldades na comercialização: ( ) Preço ( ) Falta de frigoríficos ( ) Longa distância dos
frigoríficos
( ) Falta de comprador ( ) Falta de curtumes na região ( ) Outras: _____________
Compra ovinos para: ( ) Recria ( ) Para terminação em confinamento
Observações que queiram ser realizadas pelo proprietário:
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
75

7.2. ANEXO 2
CARACTERÍSTICAS DAS PROPRIEDADES E DACRIAÇAO DE OVINOS DE RACA
DEFINIDA NO ESTADO DA BAHIA OBTIDAS ATRAVÉS DAS RESPOSTAS
1. IDENTIFICAÇÃO DA PROPRIEDADE
FORNECIDAS PELOS QUESTIONÁRIOS
Filiado a associações de criadores?
82,99%
1,01% 6,02%
30,72%
17,01%
Quais associações?
62,25%
Sim
Não
ACCOBA
ARCO
Todas
Sem Resposta
76

7,03% 9,03%
16,07%
Quem gerencia a propriedade?
67,87%
Proprietário
Gerente Técnico
Ambos
Sem Resposta
Como o proprietário se mantém informado sobre ovinocultura?
11,25%
20,03%
12,47%
17,48%
38,77%
Impressos, Palestras,
Rádio, Televisão e
Internet
Impressos, Palestras,
Televisão e Internet
Impressos, Palestras e
Internet
Apenas Impressos e
Palestras
Quais espécies são criadas na propriedade para fins de produção?
65,66%
2,21%
15,66%
14,06%
2,41%
Ovinos e Caprinos
Aves
Ovinos Caprinos e
Bovinos
Ovinos Bovinos e
Equinos
Ovinos e Equinos
77

0,83%
35,80%
10,29%
51,23%
50,79%
Tipo de instalações:
63,37%
Possui Pedilúvio na propriedade?
38,48%
Faz irrigação de Pastagem?
49,21%
Aprisco
Curral
Aprisco e Curral
Não
Sim
Sem Resposta
Não
Sim
78

76,19%
21,24%
18,76%
Faz adubação de Pastagem?
33,81%
Tipo de pastejo?
78,76%
Tipo de Suplementação utilizado:
2,14%
79,10%
Sal
Não
Sim
Rotacionado
Contínuo
Sal + Concentrado +
Volumoso
Sal + Volumoso
79

2. GERENCIAMENTO E MANEJO DO REBANHO
Tipo de colostro oferecido aos burregos:
92,78%
7,22%
Ovino
Artificial e/ou bovino
Tipo de aleitamento oferecido aos animais jovens:
59,79%
19,59%
80,41%
Destino dado aos animais mortos:
40,21%
Natural
Artificial
Crema / Enterra
Necropsia
80

Como os animais são identificados individualmente?
1,28% 2,06%
75,63%
59,18%
9,90%
11,13%
Métodos de reprodução utilizados:
40,82%
Tatuagem e medalha
Brinco, Tatuagem e
Medalha
Brinco e Tatuagem
Apenas Tatuagem
Apenas brinco
Monta Natural
Inseminação
Artificial e/ou
Transferência de
Embrião
Responsável pelo acompanhamento técnico da propriedade:
27,22%
25,57%
15,46%
31,75%
Sem Resposta
Veterinário
Técnico Agrícola
Veterinário e Técnico
Agrícola
81

Forma de exploração do rebanho:
11,16%
67,56%
21,28%
Tem ou teve animais importados no rebanho?
53,10%
46,90%
Intensiva
Semi-Intensiva
Sem Resposta
Exige documento sanitário para compra de ovinos?
83,74%
16,26%
Não
Sim
Não
Sim
82

84,94%
74,64%
Faz uso de Esterqueira?
15,06%
Separa animais por idade?
25,36%
Faz descanso das pastagens?
97,11%
2,89%
Não
Sim
Não
Sim
Não
Sim
83

3,09%
35,88%
Como faz a troca de pasto?
9,48%
13,81%
37,74%
Antes e após a
Vermifugação
Não Faz
Possui área de quarentena na propriedade?
57,73%
Após a vermifugação
por no mínimo 12h
Permanência mínima
de 12h
Após a vermifugação
42,27% Não
39,18%
Faz exames periódicos no rebanho?
60,82%
Sim
Sim
Não
84

Já teve ou tem casos de Linfadenite Caseosa no rebanho?
10,31%
89,69%
Sim
Não
Tem ou teve problemas relativos ao nascimento de animais?
28,64%
30,67%
73,90%
40,69%
Venda de ovinos:
26,10%
Não
Aborto
Animais fracos ou
anômalos
Dentro do Estado
Fora do estado
85