Avaliação do Comportamento do Ácido Fólico no Processamento de ...

Avaliação do Comportamento do Ácido
Fólico no Processamento de Leites
Enriquecidos
Study of the Behavior of Folic Acid
During the Processing of Enriched Milk
AUTORES
AUTHORS
Juliana Azevedo LIMA-PALLONE
Centro de Ciências Exatas, Ambientais e de Tecnologias,
Faculdade de Química,
Pontifícia Universidade Católica de Campinas
Rod. D. Pedro I, Km 136, Parque das Universidades,
CEP 13086-900, Campinas-SP, Brasil.
Telefone: +55-19- 37567656
FAX: +55-19-37567370
julianalima@puc-campinas.edu.br
Rodrigo Ramos CATHARINO
Helena Teixeira GODOY
Departamento de Ciência de Alimentos,
Faculdade de Engenharia de Alimentos, Unicamp,
CP 6121, CEP 13083-970
Campinas-SP, Brasil.
RESUMO
Recentemente, produtos como o leite, estão sendo enriquecidos com diversas
vitaminas, incluindo o ácido fólico. Muitos estudos apontam a deficiência dessa vitamina
como possível causa de doenças graves. O objetivo desse trabalho foi a determinação da
estabilidade do ácido fólico frente aos processos de adição e homogeneização, esterilização e
fervura, além da avaliação das possíveis perdas da vitamina durante o período de estocagem
de leites enriquecidos. Para a determinação do ácido fólico empregou-se a técnica de CLAE
e solução de hidróxido de potássio para extração. A separação cromatográfica ocorreu em
coluna de C 18 , utilizando solução acidificada e acetonitrila como fase móvel. A detecção foi
feita em detector de arranjo de diodos (290nm) e a quantificação por padronização externa.
As maiores perdas foram observadas nos processos de adição e homogeneização da vitamina
(50%). Nos ensaios realizados, em escala semi-industrial, o ácido fólico mostrou-se bastante
resistente ao processo de esterilização, com perdas inferiores a 10%. Já durante o período de
90 dias estocagem, as perdas ficaram em torno de 16%. Após o processo de fervura do leite
enriquecido, não houve diminuição significativa do valor vitamínico.
SUMMARY
Products such as milk are currently being enriched with many vitamins, including folic
acid. Many studies have indicated the deficiency of this vitamin as a possible cause of serious
diseases. The aim of this study was to evaluate the stability of folic acid when submitted to the
processes of addition, homogenisation, sterilisation and boiling, as well as evaluating possible
losses during the storage of enriched milks. Folic acid was determined using an HPLC technique
and potassium hydroxide used for extraction. The chromatographic separation was carried out
using a C 18 column and an acidifed acetonitrile solution as the mobile-phase. Detection was
carried out using a diode array detector (290nm) and quantification by external standards.
The highest losses occurred during the processes of vitamin addition and homogenisation
(50%). In assays made on a semi-industrial scale, the folic acid was shown to be resistant to
the sterilization process, with losses of less than 10%. However losses of about 16% occurred
during the 90 days of storage. The boiling process did not result in a significant decrease in
the vitamin value.
PALAVRAS-CHAVE
KEY WORDS
Ácido Fólico; Esterilização; Leite Enriquecido; CLAE.
Folic Acid; Sterilization; Enriched Milk; HPLC.
Braz. J. Food Technol., v.9, n.1, p. 57-62, jan./mar. 2006 57
Recebido / Received: 31/03/2005. Aprovado / Approved: 23/05/2006.

LIMA-PALLONE, J. A. et al.
Avaliação do Comportamento do Ácido
Fólico no Processamento de Leites
Enriquecidos
1. INTRODUÇÃO
As vitaminas são micronutrientes essenciais que
contribuem para o desenvolvimento normal e a manutenção
da saúde. Nesse aspecto, o ácido fólico (forma sintética) e os
folatos (naturalmente presentes em alimentos) fazem parte das
vitaminas hidrossolúveis do grupo B, os quais são considerados
formas químicas diferentes da vitamina B 9 . Despertou-se
interesse devido a seus efeitos em relação à prevenção de
doenças como problemas cardíacos, más-formações congênitas,
câncer, mal de Alzheimer e anemia megaloblástica, entre outras
(CZEIZE e DUDAS, 1992; OAKLEY et al.,1995; CRANE et al.,
1995; GIOVANNUCCI et al., 1995; DALY et al., 1997; CLARK
et al., 1998; TSAI et al.,1999; KIM, 1999; SILBERG et al., 2001;
WANG, et al., 2001; BAILEY et al., 2003). Alimentos como
cereais, farinhas, leites, biscoitos, achocolatados, entre outros,
estão sendo enriquecidos com ácido fólico, apontado como
a forma mais estável e mais bioativa da vitamina (GREGORY,
1989). No Brasil, a obrigatoriedade do enriquecimento se aplica
a farinhas de trigo e milho, de acordo com a Resolução 344,
publicada em 2002 (ANVISA, 2005).
O leite é considerado um excelente alimento, composto
por uma mistura de nutrientes essenciais para a alimentação, como
a água, proteínas, carboidratos, lipídeos, minerais e vitaminas,
que juntos, fornecem elementos importantes à manutenção
da saúde. Tratando-se especialmente do conteúdo vitamínico,
ressalta-se que o leite, embora contenha a maioria das vitaminas,
só pode ser considerado uma boa fonte de vitamina A, riboflavina
(B 2 ) e cianocobalamina (B 12 ), classificando-se como deficiente em
vitaminas C e D e nas demais do grupo B (LOBATO, 2000).
O enriquecimento de leites com vitaminas é uma prática
comum para se compensar perdas durante o processamento
ou simplesmente para aumentar seu valor nutritivo. Entretanto,
existe uma preocupação com a estabilidade das vitaminas
adicionadas, já que alguns autores afirmam que as presentes
naturalmente são mais estáveis que as utilizadas para o
enriquecimento (BARTHOLOMEW e OGDEM, 1990; ZAHAR e
SMITH, 1987). Alguns pesquisadores já procuraram determinar
possíveis perdas nos teores de vitaminas do leite após diferentes
tratamentos térmicos, bem como verificar a manutenção desses
teores durante a estocagem (RYLEY e KAJDA, 1994; VIDAL-
VALVERDE et al., 1992). Dessa forma, a avaliação da estabilidade
das vitaminas é importante tanto para assegurar a qualidade
dos produtos, quanto para garantir o cumprimento das normas
legais vigentes para produtos enriquecidos com esses nutrientes
(SCOTT, 1990).
Atualmente, as pesquisas sobre ácido fólico estão
direcionadas em maior parte aos aspectos médicos e
nutricionais, e muito pouco se encontra na literatura sobre
as possíveis perdas ocorridas durante o processamento dos
alimentos. No caso específico de alimentos enriquecidos,
trabalhos apresentados na literatura constataram que essa
substância apresenta instabilidade a fatores como luz,
temperatura, pH, exposição a agentes oxidantes, atividade de
água, entre outros (HAWKES e VILLOTA, 1989; GREGORY, 1989).
Durante a estocagem por 120 dias de leites enriquecidos, LIMA
et al. (2004) encontraram 20% de perda da vitamina. O estudo
foi conduzido utilizando-se amostras encontradas no mercado,
conforme descrito pelos autores e os lotes foram obtidos
com o menor tempo de fabricação possível. Portanto, ainda é
necessário se verificar o comportamento dessa vitamina durante
as fases de produção e estocagem de leites enriquecidos,
imediatamente após sua obtenção.
Existem algumas pesquisas publicadas sobre folatos
naturalmente presentes em leites, entretanto, são relativamente
antigas. Os processos de esterilização e pasteurização, bem
como as técnicas de análise mencionadas nos trabalhos, estão
em sua maioria, já ultrapassados (FORD, 1969; BURTON,
1970; FAVIER, 1987; BAILEY, 1988; GREGORY, 1989; HAWKES
e VILLOTA, 1989). Os dados apontam o 5-metiltetraidrofolato
como o folato majoritário, naturalmente presente em leites
(GREGORY, 1989; RENNER et al., 1989; PARODI, 1997) e,
portanto, os estudos foram baseados nessa forma da vitamina.
DONG et al. (1975) mostraram que leites submetidos à
esterilização e subsequente a estocagem apresentaram uma
taxa de retenção de folatos muito variável, de 0 a 80%,
dependendo da raça e tipo de alimentação do animal, condições
do processo, presença de vitamina C e concentração de
oxigênio dissolvido durante e após o processamento. BURTON
et al. (1970) já haviam relatado perdas diferenciadas quanto
à forma do processo de esterilização, sendo 4% a perda de
folatos quando foi utilizado o processo direto e 10% para
processo indireto, devido principalmente, segundo os autores,
aos níveis de oxigênio. Perdas de folatos durante o processo
UHT são geralmente inferiores a 20%, mas perdas acima de
43% também já foram observadas (KARLIN, 1969; BURTON
et al., 1970; FORD et al., 1969). KARLIN (1969) e FAVIER et al.
(1987) avaliaram a resistência de folatos em leites submetidos
a processos de esterilização e pasteurização, concluindo que
ambos eram responsáveis por perdas da vitamina, inferiores
a 20%. No entanto, FAVIER et al. (1987) observaram que os
leites UHT mostraram uma diminuição significativa do conteúdo
de folatos após 4 meses de estocagem, o que fez com que os
autores sugerissem a fortificação com o ácido fólico, para leites
esterilizados, a fim de compensar as perdas. Em um estudo mais
recente, PARODI (1997) encontrou perdas de folatos maiores
que 20% nos processos de esterilização por UHT.
Uma vez que os dados sobre a eficiência do processo
de adição e homogeneização do ácido fólico adicionado a
leites, a resistência da vitamina ao aquecimento que ocorre
nos procedimentos de esterilização e fervura, bem como a
estabilidade do ácido fólico sintético, desde a fabricação do
produto enriquecido até o prazo final de validade não foram
encontrados na literatura, o presente trabalho tem como
objetivo avaliar as possíveis perdas durante o processamento
industrial e o estudo de vida de prateleira dos leites enriquecidos
produzidos.
2. MATERIAL E MÉTODO
2.1 Produtos avaliados
As amostras analisadas foram obtidas de quatro ensaios
diferentes, objetivando a produção de leites esterilizados
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Enriquecidos
enriquecidos com ácido fólico. O leite cru foi obtido diretamente
do produtor e o processamento térmico foi executado em
planta de esterilização em escala semi-industrial. Para cada
teste foram utilizados 100L de leite. A quantidade de ácido
fólico, a ser adicionada aos leites, foi definida após pesquisa
junto às empresas que comercializam os “premix”, utilizados
no enriquecimento de alimentos. A sugestão foi para que se
adicionasse 100% a mais, do que deveria ser obtido ao final
do processo. Verificou-se que a maioria dos fabricantes que
comercializa leites esterilizados contendo ácido fólico, declara
no rótulo do produto a quantidade de 250µg/100mL, portanto,
aproximadamente 500mg do ácido fólico foram adicionados a
cada 100L de leite, conforme apresentado na Tabela 1.
TABELA 1. Quantidades de ácido fólico, adicionadas ao leite
antes do processamento térmico.
Quantidade de ácido fólico
Ensaio
(mg/100L)
1 505,2
2 488,9
3 518,7
4 506,9
O padrão de ácido fólico foi colocado em um dispersor
e, então, transferido aos 100L de leite, que estava em
tanque homogeneizador com agitador de hélice no fundo. A
homogeneização da vitamina no leite foi efetuada durante 15
minutos. Em seguida, efetuou-se o processo de esterilização,
em equipamento piloto Tetra Sterilab PTD 100, equipado com
trocador de calor do modelo tubular sem regeneração, de
forma indireta, utilizando-se para efetuar a troca térmica, água
aquecida com vapor. As temperaturas de esterilização foram
ligeiramente diferentes para cada um dos quatro diferentes
testes: 141,0, 140,5, 140,2, 140,3°C e o tempo foi de 4
segundos para todos. Ao final do processo o leite enriquecido
produzido foi acondicionado em embalagens tipo “Tetrapak”
de 200mL.
Para cada teste foram realizadas análises, em duplicatas,
do teor de ácido fólico no leite cru e no produto após o
processo de homogeneização da vitamina, através da retirada de
amostra diretamente do tanque agitador e após a esterilização
e envase. A estabilidade do ácido fólico foi acompanhada
durante os três meses de estocagem à temperatura ambiente.
Para o leite cru e logo após a adição e homogeneização da
vitamina, foram retiradas 3 alíquotas de 10 mL. Para o produto
pronto, o conteúdo de duas embalagens foi homogeneizado
previamente.
Ferver o leite antes do consumo é um hábito ainda
conservado por grande parte da população brasileira. O estudo
da resistência da vitamina no leite esterilizado submetido a
posterior fervura, também foi realizado nesse trabalho. Para esse
procedimento, o conteúdo de três embalagens foi misturado,
homogeneizado e dividido em duas porções (A e B). Uma delas
(porção A) foi transferida para uma leiteira de 13 cm de diâmetro
e 13 cm de altura e deixada no fogo direto até levantar fervura.
A tomada de amostra foi feita após o resfriamento do produto
até a temperatura ambiente, aproximadamente por 1 hora.
Avaliou-se a quantidade da vitamina antes (porção B) e após a
fervura do leite enriquecido (porção A).
2.2 Reagentes
O ácido fólico foi doado pela MCassab do Brasil
S.A. (Sigma cód. F-7876, lote 40H321). A acetonitrila grau
cromatográfico, o ácido acético, o ácido fosfórico e o hidróxido
de potássio, grau analítico foram adquiridos da Merck, Brasil.
O ácido tricloroacético, grau analítico, foi adquirido da Synth,
Brasil. A água utilizada no preparo das amostras e das fases
móveis, foi purificada no sistema Milli-Q (Millipore). As fases
móveis foram filtradas em filtros (HAWP e FHLP 04700 Millipore),
com poros de 0,45µm de diâmetro.
2.3 Equipamento
Para a análise por cromatografia líquida de alta eficiência
foi utilizado um cromatógrafo a líquido Agilent Technologies
série 1100, equipado com degaseificador, bomba quaternária,
injetor automático com 100µL de capacidade e detector de
arranjo de diodos (DAD). Para a separação do ácido fólico foi
utilizada uma coluna cromatográfica Microsorb-MV ODS-2,
5µm, 150 X 4,6mm d.i. (Rainin Instrument Company), protegida
por uma coluna de guarda Bondesil, C 18 , 5µm, 10 X 4,6mm d.i.
(VARIAN). Acoplado ao sistema, o software HP-Chemstation
permitiu o melhor tratamento dos dados analíticos, além de
monitorar todos os componentes.
2.4 Determinação do ácido fólico
Para a determinação de ácido fólico utilizou-se a
metodologia desenvolvida e validada por CATHARINO e
GODOY (2003), validada para a análise de leites. Para as
avaliações foi tomada uma alíquota de 1,0 mL e transferida
para um béquer. Adicionou-se, então, 3,0 mL de solução de
hidróxido de potássio (0,1mol/L) à amostra e deixou-se em
banho ultra-sônico por 10 minutos. O extrato foi transferido
quantitativamente para balão volumétrico de 10mL, onde foram
adicionados 3,0 mL de ácido fosfórico (0,1mol/L), 2,0 mL de
tampão fosfato composto por Na 2 HPO 4 (0,25mol/L)/KH 2 PO 4
(0,37mol/L) e 350 µL de ácido tricloroacético, completando-se
o volume com tampão fosfato. Após a homogeneização por
agitação, seguiram-se duas etapas de filtração, a primeira em
papel de filtro qualitativo (J. Prolab) e a segunda em membrana
com poros de 0,45µm (Millipore HAWP 01300). A solução foi
imediatamente analisada por CLAE.
Para a separação do ácido fólico foi utilizado o sistema de
eluição por gradiente, com vazão de 0,5 mL/min. A fase móvel
usada no início da corrida foi composta por 90% de solução
acidificada, contendo 2% de ácido acético (pH 2,8), e 10% de
acetonitrila (v/v), chegando de forma linear a 76% de solução
acidificada e 24% acetonitrila (v/v) em 8,5 minutos, mantendose
a mesma proporção até 9,0 minutos. As condições iniciais
foram retomadas e a coluna re-equilibrada durante 7,0 minutos,
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antes da próxima injeção. Utilizou-se o comprimento de onda
de 290 nm para a detecção da vitamina. A identificação do pico
foi feita por comparação dos tempos de retenção do ácido fólico
obtidos para padrão e amostra nas mesmas condições, por cocromatografia
e pela comparação dos espectros de absorção
obtidos para o padrão e a amostra, com a utilização do detector
de arranjo de diodos (DAD). A pureza do pico foi determinada
utilizando-se o software HP-Chemstation. A quantificação foi
feita por padronização externa, utilizando-se a curva analítica
construída com 7 níveis de concentração (0,01; 0,05; 0,10;
0,15; 0,30; 0,50; 1,00 µg/mL), sendo cada ponto representado
pela média de três determinações.
decantação no fundo do tanque homogeneizador, visualmente
verificada. Esses dados mostram a importância de estudos
referentes a melhor forma de adição do ácido fólico ao leite,
com a utilização de equipamentos mais adequados para esse
fim. Sugere-se o aumento da dimensão e da velocidade de
funcionamento da hélice do tanque homogeneizador, que
proporcionaria maior eficiência ao processo. Além disso, o
procedimento de homogeneização ocorreu em sistema aberto,
favorecendo a oxidação da vitamina pelo oxigênio do ar, que em
muitos estudos mostrou ser o principal promotor da degradação
do ácido fólico (FORD et al., 1969; BURTON et al., 1970; DONG
et al., 1975; GREGORY, 1989).
3. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Foram observadas perdas tanto nas etapas de adição
e homogeneização da vitamina, quanto após o tratamento
térmico. Não foi detectada a presença do ácido fólico nas
amostras de leite cru, avaliadas nesse trabalho. A Figura 1
apresenta o cromatograma obtido para o leite enriquecido. Nas
condições cromatográficas utilizadas, a eluição do ácido fólico
ocorreu em aproximadamente 8,3 minutos.
mAU
80
60
40
20
0
0 2 4 6 8 min
FIGURA 1. Perfil cromatográfico do extrato de leite enriquecido
com ácido fólico. Coluna Microsorb-MV, ODS-2, 5µm,
150X4,6mm. Fase móvel: 10% de acetonitrila e 90% de solução
acidificada (0,166mol/L)(v/v) no início da corrida, chegando em
8,5 minutos a 24% de acetonitrila e 76% de solução acidificada
(0,166mol/L) (v/v), mantendo-se as condições até 9,0 minutos.
Vazão de 0,5mL/minuto. Detecção a 290nm.
A curva analítica traçada por padronização externa,
apresentou boa linearidade na faixa de concentração de 0,01 a
1,00 µg/mL, com coeficiente de correlação de 0,99997.
3.1 Estabilidade do ácido fólico durante o processo
de enriquecimento e esterilização de leites
A Tabela 2 apresenta os teores de ácido fólico adicionados
aos leites utilizados para os ensaios de enriquecimento
e as concentrações obtidas após o processo de adição e
homogeneização, assim como as porcentagens de perdas.
Observou-se uma perda média de 54%, devido, em parte, a
8.278 - FA
TABELA 2. Concentrações de ácido fólico em leite antes e
após a homogeneização.
Concentração de ácido fólico
(µg/100mL)
Perdas
(%)
Ensaios
Adicionada Após homogeneização
M ± DP CV (%)
1 505,2 208,7 ± 0,8 0,3 58,7
2 488,9 219,2 ± 0,5 0,2 55,2
3 518,7 232,2 ± 0,3 0,1 55,2
4 506,9 259,4 ± 0,4 0,1 48,8
Média dos
ensaios
M ± DP -média e estimativa de desvio padrão de determinações em duplicatas.
CV- coeficiente de variação
54 ± 4
Os dados referentes à estabilidade do ácido fólico
frente ao tratamento térmico, estão expressos na Tabela 3.
A perda ocorrida durante o processo foi, em média, de 10%.
Na literatura não foram encontrados dados a respeito do
comportamento do ácido fólico, adicionado no processamento
de leites enriquecidos. Entretanto, a retenção da vitamina foi
maior, quando comparada aos dados obtidos por PARODI
(1997), que encontrou 20% de degradação dos folatos em leites
esterilizados por UHT e mais próxima dos valores mencionados
por BURTON (1970).
TABELA 3. Perdas de ácido fólico no processo de
esterilização*.
Concentração de ácido fólico
(µg/100mL)
Perdas
(%)
Ensaios
Antes do UHT Depois do UHT
M ± DP CV (%) M ± DP CV (%)
1 208,7 ± 0,8 0,3 191,9 ± 0,4 0,1 8,1
2 219,2 ± 0,5 0,2 197,9 ± 0,8 0,4 9,7
3 232,2 ± 0,3 0,1 207,3 ± 0,2 0,1 10,7
4 259,4 ± 0,4 0,1 211,6 ± 0,9 0,4 11,6
Média dos
valores
*Condições: 140°C por 4 segundos.
M ± DP-média e estimativa de desvio padrão de determinações em duplicatas
CV-coeficiente de variação
10 ± 2
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3.2 Estudo de vida de prateleira
A Tabela 4 apresenta a porcentagem de perda do
ácido fólico durante os 90 dias de estocagem. O valor
médio encontrado foi de 16%. Essa porcentagem apesar de
relativamente baixa, acarretaria em diminuição da concentração
da vitamina a valores inferiores ao que, em geral, está declarado
no rótulo dos leites enriquecidos disponíveis no mercado. Esse
valor é inferior, porém próximo da porcentagem de perda do
ácido fólico em leites enriquecidos esterilizados, apresentado
no trabalho de LIMA et al. (2004) que foi de 20%. Esses dados
indicam que para garantir que a concentração do ácido fólico,
disponível para a ingestão em leites enriquecidos, esteja de
acordo com os valores declarados no rótulo do alimento,
recomenda-se uma alteração na quantidade da vitamina
adicionada, considerando-se o processo de degradação que
ocorre durante o armazenamento.
TABELA 4. Porcentagem de perda de ácido fólico durante o
período de estocagem.
Concentração de ácido fólico
(µg/100mL)
Perdas
(%)
Ensaios
Após a fabricação Após 90 dias
M ± DP CV (%) M ± DP CV (%)
2 197,9 ± 0,8 0,4 177,1 ± 0,7 0,4 10,5
3 207,3 ± 0,2 0,1 173,2 ± 0,8 0,5 16,5
4 211,6 ± 0,9 0,4 167,5 ± 0,9 0,5 20,8
Média dos
valores
M ± DP- média e estimativa de desvio padrão de determinações em duplicata.
CV- coeficiente de variação
16 ± 4
Para o teste 1 não foi possível a realização do estudo de
vida de prateleira, devido a problemas relacionados ao lacre da
embalagem, durante o processo de envase. Cinco dias após a
realização do ensaio ocorreu estufamento e rompimento das
embalagens, levando à perda do produto.
3.3 Estudo da estabilidade do ácido fólico após a
“fervura” do leite enriquecido
Na Tabela 5 estão os teores de ácido fólico obtidos após
o procedimento de fervura dos leites enriquecidos, obtidos
nos testes 2, 3 e 4. As diferenças observadas na concentração
de ácido fólico antes da fervura, dentro do mesmo ensaio, se
justificam pela tomada de amostra em diferentes datas, dentro
do período de estocagem. O simples aquecimento do leite até
a fervura, praticamente não promoveu a perda da vitamina, que
em média foi inferior a 1%. Essa observação indica que apesar
do ácido fólico ser mencionado como uma substância instável
a altas temperaturas, o aquecimento doméstico, simulado no
presente estudo, não acarretou em degradação da vitamina.
TABELA 5. Porcentagem de perda de ácido fólico após a
fervura do leite.
Concentração de ácido fólico
(µg/100mL)
Perdas
(%)
Ensaio
Antes da fervura Após fervura
M ± DP CV(%) M ± DP CV(%)
2 193,2 ± 0,4 0,2 192,8 ± 0,7 0,4 0,3
182,5 ± 0,5 0,3 181,1 ± 0,6 0,3 0,8
177,1 ± 0,7 0,4 175,6 ± 0,9 0,5 0,8
3 207,3 ± 0,2 0,1 206,9 ± 0,9 0,4 0,2
197,6 ± 0,6 0,3 197,0 ± 0,1 0,1 0,3
184,5 ± 0,1 0,1 183,6 ± 0,7 0,4 0,5
4 211,6 ± 0,9 0,4 210,3 ± 0,6 0,3 0,6
188,3 ± 0,5 0,3 187,8 ± 0,6 0,3 0,3
181,4 ± 0,1 0,1 180,1 ± 0,3 0,2 0,7
Média dos
valores
M ± DP média e estimativa de desvio padrão de determinações em duplicatas.
CV coeficiente de variação
4. CONCLUSÕES
0,5± 0,1
Concluiu-se que os leites esterilizados podem ser
considerados bons veículos para o enriquecimento, dada a
estabilidade ao processo térmico de esterilização e relativa
resistência durante o armazenamento. Entretanto, são
necessários aprimoramentos dos equipamentos utilizados para
a adição da vitamina e estudos para se avaliar a quantidade ideal
de ácido fólico a ser adicionada, a fim de se garantir a ingestão
da vitamina, nas quantidades mencionadas no rótulo, até o final
do prazo de validade do produto.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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v. 42, p. 206-210, 1988.
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disease and cancer: evolving science. Journal of Nutrition, v. 133,
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v. 37, p. 529-535, 1970.
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