18.09.2013 Views

Rening av proteiner: hur och varför?

Rening av proteiner: hur och varför?

Rening av proteiner: hur och varför?

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Fosfolipid-membran<br />

Fosforylerat protein, potentiellt reglerat.<br />

Antagligen lätt att extrahera, men beroende<br />

<strong>av</strong> <strong>hur</strong> starkt associerat det är med sina<br />

interaktioner.<br />

Proteiner är mycket variabla i sina egenskaper!<br />

Detta påverkar möjligheten att rena....<br />

Glycosylation<br />

Glycosylation(s) (s)<br />

Glycosylation<br />

(s)<br />

Phosphate<br />

<strong>Rening</strong>ar <strong>av</strong> <strong>proteiner</strong> involverar ett antal steg:<br />

Glykosylerat membranprotein.<br />

Svårt att extrahera, svårt att studera.<br />

Phosphate<br />

Protein som binds till membran<br />

<strong>av</strong> lipidsvansar, potentiellt en reglerad<br />

process. Hjälpligt lätt att extrahera.<br />

”idealt” protein,<br />

lätt att extrahera <strong>och</strong> omodifierat!<br />

val <strong>av</strong> källa till proteinet:<br />

- naturliga celler eller vävnad (ni ska använda färs <strong>av</strong> oxhjärta för rening <strong>av</strong> cytokrom C)<br />

- genmanipulerade celler/organismer (ni undersöker en plasmid i DNA-labben)<br />

Provberedning<br />

val <strong>av</strong> renings-metodik:<br />

- olika typer <strong>av</strong> kromatografi eller fällningar<br />

verifiering <strong>av</strong> renhet:<br />

- aktivitet<br />

- absorbans/reagens<br />

- gel-elektrofores<br />

Joakim Norbeck vt-08<br />

Huvudsakliga skäl att rena <strong>proteiner</strong> är att vi vill förstå proteinets egenskaper eller använda det<br />

för att förstå andra system (forskningssyften),<br />

eller så vill vi rena fram industriella mängder <strong>av</strong> protein<br />

för användning i t ex tvättmedel eller som läkemedel...<br />

Joakim Norbeck vt-08<br />

5

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!