Dr Sanja Davidović Mrsić - Klinički zavod za kemiju
Dr Sanja Davidović Mrsić - Klinički zavod za kemiju
Dr Sanja Davidović Mrsić - Klinički zavod za kemiju
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
MOLEKULARNA<br />
CITOGENETIKA U<br />
OTKRIVANJU BOLESTI<br />
<strong>Dr</strong> <strong>Sanja</strong> <strong>Davidović</strong> <strong>Mrsić</strong><br />
<strong>Klinički</strong> bolnički centar Zagreb<br />
<strong>Klinički</strong> <strong><strong>za</strong>vod</strong> <strong>za</strong> laboratorijsku dijagnostiku<br />
Laboratorij <strong>za</strong> imunocitogenetiku<br />
Gregor Mendel (1822-1884)<br />
Hibridna<br />
1884)<br />
znanost koja<br />
se koristi<br />
dostignućima<br />
citologije<br />
i<br />
genetike
AML-M2<br />
M2<br />
AML-M2a<br />
M2a<br />
AML-M2 M2 (mpo(<br />
mpo)<br />
AML-M4<br />
M4<br />
CITOGENETIKA<br />
MORFOLOGIJA KROMOSOMA<br />
DINAMIKA KROMOSOMA<br />
ZAKONITOSTI I BIOLOŠKO ZNAČENJE
PEDIJATRIJA
ZA DANAŠNJE<br />
SUTRA,<br />
SUTRA KAŽU<br />
DANAS.
KINETIKA<br />
TUMORA<br />
NEKONTROLIRANE DIOBE STANICA<br />
VELIKE RAZLIKE U BRZINI PROLIFERACIJE<br />
PROMJENE GENOMA<br />
VIDLJIV KLINIČKI ? !<br />
UZORAK<br />
REPREZENTATIVAN !
UZORAK<br />
Tumorsko tkivo<br />
Limfni čvor<br />
Punktat<br />
Koštana srž<br />
Periferna krv<br />
Otisak tkiva<br />
Citološki preparati<br />
Parafinski rez ............<br />
UZORAK<br />
STANIČNA KULTURA<br />
24 h KULTURA<br />
48 h KULTURA<br />
72 h KULTURA<br />
DIREKTNA ANALIZA
METODA<br />
ŠTO PRIJE<br />
ŠTO BOLJE<br />
ŠTO TOČNIJE
ŠTO TRAŽIMO ?<br />
BIOKEMIJSKA<br />
KARTA<br />
GENSKA<br />
KARTA<br />
LIM TUMFOM<br />
OR<br />
IMUNOLOŠKA<br />
KARTA<br />
BIOLOŠKA<br />
KARTA<br />
PROŠIRENOST TUMORA KOŠTANA SRŽ<br />
LIMFNI ČVOR<br />
PERIFERNA KRV<br />
KLON<br />
2 – 3 METAFAZE
PROMJENE<br />
GENOMA<br />
PRIMARNE<br />
SEKUNDARNE<br />
STRUKTURNE<br />
NUMERIČKE<br />
CITOGENETSKA ANALIZA<br />
METODE PRUGANJA<br />
G i R pruganje<br />
METODE MOLEKULARNE BIOLOGIJE<br />
I - FISH<br />
M - FISH<br />
Praćenje kimerizma nakon transplantacije koštane srži (alfa satelitna proba)
VAŽNOST CITOGENETIKE U<br />
ONKOLOGIJI<br />
dijagnostika<br />
praćenje MRB<br />
terapija<br />
progno<strong>za</strong><br />
? !<br />
DIJAGNOZA
I S T I N A<br />
GENOMA<br />
KLASIČNA<br />
CITOGENETIKA<br />
INFORMATIVNE ?<br />
BROJ METAFAZA<br />
KVALITETA METAFAZA<br />
KVALITETA PRUGANJA<br />
VELIKE PROMJENE GENOMA<br />
KLASIČNA<br />
CITOGENETIKA<br />
G i R - PRUGE
METAFAZNA<br />
CITOGENETIKA<br />
Haploidni genom = 2 000 pr.<br />
Vizuali<strong>za</strong>cija = 800 pr.<br />
Jedna pruga = 50 gena<br />
KLASIČNA<br />
CITOGENETIKA<br />
Patološki nalaz<br />
Uredan nalaz
CITOGENETIKA<br />
KLASIKA<br />
FISH<br />
OSJETLJIVOST I SPECIFIČNOST<br />
10 -5<br />
10 -3<br />
10 -2<br />
10 -1
MAPIRANJE<br />
JUPI...<br />
JUPI<br />
METAFAZNI<br />
F I S H
S K Y<br />
S K Y<br />
Kompleksni kariotip
M- band<br />
?<br />
Specifične regije<br />
kromosoma
Kompleksni kariotip<br />
SKY
Nalaz kariograma u bolesnice s RARS<br />
(45,xx, -5)<br />
-t
C G H<br />
Komparativna Genomska Hibridi<strong>za</strong>cija<br />
Identifikacija<br />
VIŠAK ili MANJAK DNA<br />
AMPLIFIKACIJA
C G H<br />
NEMA<br />
MITOZA<br />
LOŠE<br />
KVALITETE
INTERFAZNI<br />
F I S H<br />
INTERFAZNE JEZGRE<br />
300 – 500 i.j.<br />
SAMO TRAŽENA PROMJENA<br />
OSTATAK GENOMA NEPOZNAT<br />
PRAČENJE
M R B<br />
PRAĆENJE ( terapija,TKS .... )<br />
Molekularna ( I-FISH )<br />
Klasična citogenetika ?<br />
ARHIVIRANI<br />
UZORCI<br />
Citološki preparati<br />
Amplifikacija Parafin - amplifikacija<br />
parafin
+Y u bolesnika s KLL-B fenotipa<br />
AMPLIFIKACIJA - c-myc<br />
AMPLIFA
50 000<br />
klonalnih<br />
kromosomskih pro.<br />
2 / 3 promjene broja<br />
1 / 3 strukturne promj.<br />
PRVA KLONALNA PROMJENA<br />
1985 god.<br />
C M L<br />
t (9;22)(q34;q22)
100<br />
80<br />
PATOLOGIJA<br />
71%<br />
C M L<br />
97%<br />
99%<br />
60<br />
%<br />
40<br />
20<br />
0<br />
G-pruge FISH PCR<br />
CITOGENETSKO O PRAĆENJE MALIGNOG<br />
KLONA<br />
100<br />
90<br />
80<br />
70<br />
60<br />
% 50<br />
40<br />
30<br />
20<br />
10<br />
0<br />
KLON Ph+ + Ph- / -<br />
DG 3 mj. 6mj. 9mj. 12mj.
PATOLOGIJA<br />
AKUTNIH LEUKEMIJA<br />
100<br />
80<br />
+<br />
= 73%<br />
%<br />
60<br />
40<br />
43%<br />
30%<br />
20<br />
0<br />
G-pruge FISH Ukupno<br />
METODE KLASIČNE CITOGENETIKE I<br />
METODE MOLEKULARNE BIOLOGIJE U<br />
BOLESNIKA S AKUTNOM LEUKEMIJOM<br />
Patološki nalaz<br />
67%<br />
Uredan nalaz<br />
33%<br />
AML<br />
Patološki nalaz<br />
53%<br />
Uredan nalaz<br />
40%<br />
ALL
t (8;21)<br />
t (15;17)<br />
inv (16)<br />
trisomija 21<br />
- promjene kromosoma 5 i/ili 7<br />
- trisomija 8<br />
- promjene kromosoma 11<br />
Uredan<br />
kariogram ili<br />
druge neklasificirane<br />
kromosomske<br />
promjene
HER - 2<br />
SPECIFIČNOST i OSJETLJIVOST > 95%
HER - 2<br />
TUMORI<br />
MJEHURA<br />
I – F I S H<br />
CEP- 3, 7 i 17
TERAPIJA BUDUĆNOSTI<br />
TUMOR<br />
Ponovna uspostava normalne funkcije<br />
i<br />
Ponovna uspostava normalnih kontrolnih<br />
mehani<strong>za</strong>ma<br />
Da li je to moguće ? !<br />
KUD IDAH MAŠTOM TI ĆEŠ<br />
NOGOM PROĆI<br />
ŠTO DIRAH MAŠTOM TI ĆEŠ TAČI<br />
RUKOM<br />
ŠTO SANJAH TI ĆEŠ I<br />
URADIT MOĆI<br />
VJERUJEM U TO !
F I S H<br />
T I M<br />
IVANA FRANIĆ –ŠIMIĆ<br />
ANA MIHALJEVIĆ<br />
SANJA KEKELJ<br />
SANJA MRSIĆ
Change language