You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
„Molekulární mikroskop“ - MALDI-MSI v proteomice motolic<br />
M. Kašný1 , L. Mikeš1 2, 3<br />
, P. Jedelský<br />
1 Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra parazitologie,<br />
Viničná 7, Praha 12844, ČR.<br />
2 Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra buněčné biologie,<br />
Viničná 7, Praha 12844, ČR.<br />
3 Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Laboratoř hmotnostní<br />
spektrometrie, Viničná 7, Praha 12844, ČR.<br />
Nově získaná data z probíhajících geonomových projektů, do nichž jsou zahrnuty<br />
i významné druhy motolic (např. Schistosoma mansoni, S. japonicum, Fasciola<br />
hepatica), nabízejí ve spojení s analytickými metodami hmotnostní spektrometrie<br />
široké využití nejen při identifikaci, ale i při lokalizaci vytipovaných proteinů.<br />
Progresivní metodou je na tomto poli MALDI-MSI (Matrix-assisted laser desorption/ionization<br />
mass spectrometric imaging). Tato metoda umožňuje dvourozměrné<br />
zobrazení distribuce vytipovaných proteinů (biomarkerů) přímo na řezech biologických<br />
vzorků. Široké uplatnění proto MALDI-MSI nalézá zejména v diagnostice nádorových<br />
onemocnění.<br />
Experimentální výzkum v naší laboratoři je mimo jiné zaměřen na proteomickou<br />
charakterizaci proteolytických enzymů (peptidáz) z exkrečně-sekrečních produktů<br />
cerkárií ptačích motolic Trichobilharzia regenti, T. szidati a dospělců jaterní motolice<br />
Fascioloides magna. S využitím hmotnostně spektrometrických metod (MAL-<br />
DI TOF-TOF) a molekulárních metod (PCR) byly získány sekvence tří peptidázovvých<br />
genů – cathepsinů B1/B2 (Trichobilharzia regenti, T. szidati) a cathepsinu<br />
L1 (F. magna). Na základě sekvenčních dat a s pomocí MALDI-MSI je možné na<br />
řezech motolic determinovat oblasti transkripce některých z těchto genů a vyhnout<br />
se tak časově náročným imuno-lokalizačním studiím.<br />
35