Mikrobiologie Kursablauf - Kantonsschule Wil
Mikrobiologie Kursablauf - Kantonsschule Wil
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<strong>Kantonsschule</strong> <strong>Wil</strong> Biologiepraktikum: 6. Semester<br />
Blutpraktikum Labor<br />
Name Schule Klasse Datum<br />
1. Theorie Biobuch: Kapitel 5.2, Bestandteile des Blutes: Seiten 223 bis 229<br />
2. Ziele<br />
I. Einen selbst hergestellten Blutausstrich färben und mikroskopisch untersuchen<br />
II. Die eigene Blutgruppe bestimmen<br />
3. Material<br />
3.1. Blutentnahme, Blutausstrich, Färbung<br />
Labormaterial<br />
2 Objektträger, fettfrei<br />
Papiertüchlein<br />
Heftpflaster<br />
Färbebank mit 250ml-Deckelgläser<br />
3.2. Bestimmung der Blutgruppe<br />
Labormaterial<br />
Tüpfelplatte<br />
Filzstift<br />
Zahnstocher<br />
4. Versuchsdurchführung<br />
Reagenzien<br />
Alkohol zur Desinfektion<br />
Färbelösungen Diff-Quick 1-4<br />
Dest. Wasser<br />
Menschliches Blut<br />
Reagenzien<br />
4.1. Blutentnahme, Blutausstrich, Färbung<br />
Antiseren:<br />
Anti-A, Anti-B, Anti-D,<br />
Kontrollserum<br />
Menschliches Blut<br />
Geräte/Apparaturen<br />
Accu-Chek-Softclix-Lanzetten<br />
Föhn<br />
Mikroskop<br />
Geräte/Apparaturen<br />
Vorsicht mit Blut!<br />
Blut könnte AIDS Viren enthalten. Ein Kontakt mit körperfremdem Blut ist zu vermeiden! Eine Übertragung<br />
der Viren über Schleimhäute oder offene Wunden wäre denkbar. Softclix-Lanzetten nur einmal verwenden,<br />
nach Gebrauch entsorgen!<br />
Zudem müssen alle Vorsichtsmassnahmen für die Sterilität der Stichstelle gewährleistet sein! Stichstelle mit<br />
Alkohol desinfizieren, anschliessend mit Heftpflaster abdecken.<br />
Hinweis für die Durchführung der Arbeiten: Bereite zuerst die Materialien für beide Arbeiten vor, bevor<br />
Du zur Blutentnahme schreitest.<br />
a) Eine Fingerbeere der linken Hand (Linkshänder rechte Hand) mit alkoholgetränktem Papiertüchlein<br />
desinfizieren.<br />
b) Mit dem Daumen Blut in der Fingerbeere stauen.<br />
c) Rascher Einstich mit dem Softclix (Gebrauchsanleitung beachten!).<br />
d) Blutstropfen (ca. 3 bis 4 mm Durchmesser) auf ein Ende des Objektträger auftragen.<br />
e) Mit der Kante des zweiten Objektträgers gleichmässig, nicht zu langsam ausstreichen,<br />
siehe folgende Abbildungen<br />
Abb. 1: Blut auftragen Abb. 2: Andocken (rückwärts) Abb. 3: Tropfen quer verlaufen lassen<br />
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<strong>Kantonsschule</strong> <strong>Wil</strong> Biologiepraktikum: 3. Semester<br />
Abb. 4: Ausstreichen Abb. 5: Lufttrocknen<br />
f) Ausstrich an der Luft trocknen lassen (in der Zwischenzeit Blutgruppenbestimmung gemäss<br />
Anleitung durchführen).<br />
g) Objektträger 5 mal 1 Sekunde in Fixierlösung tauchen, anschliessend zum Abtropfen auf<br />
Papiertüchlein abklopfen.<br />
h) Objektträger 5 mal 1 Sekunde in Färbelösung 1 (rot) tauchen, zum Abtropfen auf Papiertüchlein<br />
abklopfen.<br />
i) Objektträger 5 mal 1 Sekunde in Färbelösung 2 (blau) tauchen.<br />
j) Objektträger 1 Sekunde ins destillierte Wasser tauchen und auf Papiertüchlein abklopfen.<br />
k) Präparat mit Föhn vorsichtig trocknen.<br />
l) Betrachte dein Präparat unter dem Mikroskop und zeichne je ein rotes Blutkörperchen, ein<br />
Lymphocyt, ein Granulocyt und ein Monocyt. Eventuell entdeckst du noch einige Thrombocyten.<br />
4.2. Bestimmung der Blutgruppe<br />
Die Blutgruppe wird mit Antiseren (Anti-A, Anti-B, Anti-D (für den Rhesusfaktor) und einem Kontrollserum<br />
bestimmt. Damit kann sowohl die Blutgruppe, als auch der Rhesusfaktor bestimmt werden.<br />
Folgende Schritte werden der Reihe nach durchgeführt<br />
a) Je eine Reihe der Tüpfelplatte wird mit den Seren (Anti-A, Anti-B, Anti-D, und Kontrollserum (KS))<br />
angeschrieben.<br />
b) In je einer Vertiefung jeder Reihe wird ein kleiner Tropfen des entsprechenden Serums gegeben<br />
(Seren nicht durchmischen!!)<br />
c) Eine Fingerbeere der linken Hand (Linkshänder rechte Hand) mit alkoholgetränkter Watte abreiben<br />
d) Mit dem Daumen Blut in der Fingerbeere stauen<br />
e) Rascher Einstich mit dem Softclix (Gebrauchsanleitung beachten!)<br />
f) Blutstropfen (3 bis 4 mm) an den Rand der Vertiefung bringen. Darauf achten, dass man das Serum<br />
mit den Antikörpern nicht berührt.<br />
g) Das Blut in den Vertiefungen wird mit einem Zahnstocher während ca. 10 Sekunden gerührt. So<br />
rühren, dass das Blut in der ganzen Vertiefung verteilt wird. Für jede Vertiefung einen eigenen<br />
Zahnstocher verwenden!<br />
Wichtig; Das Blut darf nicht vor dem Umrühren klumpen. Deshalb sollte das Umrühren innerhalb<br />
von 1 Minuten nach der Zugabe des Blutes erfolgen. (zügig arbeiten!)<br />
h) Damit ein optimaler Kontakt zwischen den Blutzellen und den Antikörpern stattfinden kann muss die<br />
Tüpfelplatte während 40 Sekunden mehrmals gewendet werden. Die Tüpfelplatte wird schräg<br />
gestellt und mindestens 10 Sekunden lang in jede Himmelsrichtung gewendet. Innerhalb dieser 10<br />
Sekunden kann beobachtet werden, wie die roten Blutkörperchen langsam nach unten wandern.<br />
i) Die Reaktionen werdend ausgewertet, indem die Verklumpung der roten Blutkörperchen in den<br />
einzelnen Vertiefungen festgestellt wird (Abbildungen unten).<br />
j) Bestimme deine Blutgruppe und deinen Rhesusfaktor anhand deiner Tüpfelplatte. Die Bestimmung<br />
unbedingt direkt vornehmen und nicht erst von der Fotografie!<br />
k) Lasse die Tüpfelplatte von der Lehrkraft fotografieren. Die Bilder sind auf dem Server „vom Lehrer –<br />
Biologie – Blutgruppenbilder – Klasse – Gruppe“ gespeichert.<br />
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<strong>Kantonsschule</strong> <strong>Wil</strong> Biologiepraktikum: 3. Semester<br />
Typische Verklumpung<br />
Schwache Verklumpung aber immer noch auswertbar<br />
Keine Verklumpung<br />
Abb. 6: Verklumpungsmöglichkeiten bei der Serumreaktion<br />
5. Resultate<br />
6. Auswertung<br />
7. Interpretation<br />
8. Zusammenfassung/Schlussfolgerung<br />
9. Quellen<br />
Sy/Zö/Ws/Kn Seite 3 21.02.2013
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