2 Material und Methoden

2.2 Einteilung der Wirt-Parasit-Systeme für die Aufarbeitung
Für die Aufarbeitung wurde der Parasit mit der Rasierklinge sorgfältig von dem parasitierten
Wirtsgewebe abgetrennt, wobei die Haustorien im Wirtsgewebe verblieben. Die
parasitierten Blattstiele bzw. Sproßachsen und die Cuscuta-Achse wurden anschließend in
definierte Abschnitte zerschnitten. Abbildung 2.2 zeigt die einzelnen Abschnitte für das Wirt-
Parasit-System Pelargonium zonale-Cuscuta reflexa.
Folgende Abschnitte wurden getrennt aufgearbeitet:
− Blattspreite des Wirtes
− Blattstiel oberhalb der Haustorien
− Blattstiel mit Haustorien = parasitierter Blattstiel mit den nach Abtrennung der
haustorienbildenden Cuscuta-Achse verbleibenden apikalen Abschnitte der Haustorien
− Blattstiel unterhalb der Haustorien
− Cuscuta – Haustorialregion = Haustorienbildende Cuscuta-Achse ohne apikale Abschnitte
der Haustorien
− freie Cuscuta-Achse = Bereich zwischen haustorienbildendem Abschnitt und Spitze
− Cuscuta-Spitzenregion = wachsende Spitze und anschließender kontaktreizbarer Bereich
bis 7,5cm
2.3 Applikation der radioaktiv markierten Verbindungen
2.3.1 Applikation von 14 CO 2
Zur Untersuchung der Translokation radioaktiv markierter Assimilate wurden die Spreiten
isolierter, am Blattstiel parasitierter Pelargonium-Blätter mit 14 CO 2 begast.
25 Stunden vor Versuchsbeginn wurden die parasitierten Pelargonium-Blätter von der
Pflanze abgetrennt und mit dem Blattstiel für 30 Minuten in 10mM EDTA in 10mM MES-
NaOH (pH 5,0) gestellt. Dadurch sollte eine Unterbrechung des Phloemstromes durch
Verschließen der verwundeten Siebröhren verhindert werden. Anschließend wurden die
Blätter in 10mM MES-NaOH (pH 5,0) überführt. In dieser Lösung verblieben sie während
des gesamten Versuches.
24 Stunden vor Versuchsbeginn wurden die Spreiten in Assimilationskammern (Volumen ≈
20cm 3 ) eingespannt, die in einem Pflanzenwuchsschrank mit definierten Bedingungen
(Lichtphase 16 Stunden, Lichtintensität 125µE*m -2 *s -1 , Luftfeuchte Tag 60%/Nacht 80%,
Temperatur Tag 22°C/ Nacht 15°C) installiert waren. Mittels Pumpen wurden die Kammern
mit Außenluft versorgt.
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