Aus der Klinik für Urologie - Universität zu Lübeck

Hinzuweisen ist darauf, dass durch die Stimulation mit den 6 verschiedenen BCG-
Stämmen auch 6 unterschiedlich stimulierte BAK-Zell-Spezies verwendet wurden. Mit den
Effektor-Zellen, die mit den 6 verschiedenen Stämmen atypischer Mykobakterien und E.
coli stimuliert worden waren, wurde ebenso verfahren.
Nach der ca. 20 stündigen Koinkubation von Ziel- und Effektorzellen, die zu einer
Zytolyse der Tumorzellen durch die Effektorzellen und somit zu einer Freisetzung des
[ 3 H]-L-Methionin führte, wurden je 100µl Überstand pro well abpipettiert und in mit 2 ml
Szintillationflüssigkeit gefüllte Zählröhrchen (Pony-vials, 6 ml, Canberra Packard,
Frankfurt a. M.) überführt. Nach dem Durchmischen von radioaktivem Überstand und
Szintillationsflüssigkeit wurde die freigesetzte Radioaktivität des [ 3 H]-L-Methionin
(Experimentielle-Freisetzung) in einem Beta-Counter (Tricarb, 460 M, Canberra Packard)
bestimmt. Mit Hilfe der ebenso bestimmten Spontan- und Maximal-Aktivität wurde die
spezifische Lyse je well in Prozent berechnet.
Spezifische Lyse (%) =
EXPERIMENTIELL - SPONTAN
MAXIMAL - SPONTAN
Je triplet wurden der Mittelwert und die Standardabweichung berechnet (Microsoft Excel ® )
und die Werte anschließend graphisch dargestellt. Für einen Teil der gezeigten Grafiken
wurden die Einzelergebnisse je Effektorzellkonzentration (z.B. 40:1), Stimulus (z.B. BCG-
Connaught, IL-2, M. avium) und Tumorzellinie (SBC-7, BT-A, T-24) zusammengefasst.
Die Signifikanzuntersuchungen wurden analog zu früheren Publikationen mit dem
student´s t-test (Microsoft Excel ® ) durchgeführt. Die Normalverteilung der erhobenen
Daten konnte stichprobenartig im Rahmen der Beratung durch das Institut für
Medizinische Biometrie und Statistik des UKL nachgewiesen werden. Auf eine weitere
statistische Analyse der Daten musste verzichtet werden, da es sich bei der Auswertung der
vorliegenden Arbeit um eine explorative Datenanalyse handelt. Eine detaillierte statische
Analyse ist erst nach Auswertung dieser Arbeit über eine gezielte Versuchsplanung bei
zukünftigen Untersuchungen möglich.
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