Analytische HPLC

Probenvorbereitung
Informationen zu unseren Produkten erhalten Sie bei Ihrem lokalen VWR-Ansprechpartner,
senden Sie uns eine E-Mail an:
chromjournal@eu.vwr.com
oder besuchen Sie unsere Website www.vwr.com
Flüssig-Flüssig Extraktion in seiner effektivsten Form:
Probenvorbereitung mittels EXtrelut ® NT
EXtrelut ® NT1 1.15094.0001
EXtrelut ® NT3 1.15095.0001
EXtrelut ® NT20 1.15096.0001
EXtrelut ® NT Säulen sind mit einer chemisch
inerten Festphase (Kieselgur) gefüllt. Das Prinzip
der Anwendung ist folgende: die wässrige
Probenlösung wird auf die trockene Säule
aufgetragen und verteilt sich über die
Oberfläche des Kieselgurs als dünner Film.
Eluiert wird mit Hilfe eines organischen
Lösungsmittels, das mit Wasser nicht mischbar
ist. Während die organische Phase durch die
Säule sickert, werden lipohile Substanzen aus der
wässerigen Phase extrahiert. Die im Eluat gelösten
Substanzen können direkt oder nach Eindampfen
des Lösungsmittels analysiert werden.
EXtrelut ® NT kann für die routinemäßig
durchgeführte flüssig-flüssig Extraktion eingesetzt
werden und gewährleistet:
• einen sparsamen Umgang mit Lösungsmittel,
Probenmaterial und Zeit
• eine einfache und reproduzierbare
Durchführung der Extraktion
• hohe Ausbeuten und reine, emulsionsfreie Eluate
Anwendungsbeispiel
Schnelle und effiziente Extraktion von
krebserregenden Aminen mittels
EXtrelut ® NT
Das Interesse an heterozyklischen, aromatischen
Aminen hat in den vergangenen Jahren durch die
sich häufenden Hinweise auf ihre potentiell
krebserregenden Eigenschaften stark
zugenommen. Diese Amine werden in vielen
Probenmaterialien wie gebratenes Fleisch, Fisch
und anderen Nahrungsmitteln sowie als Derivate
in Textilien nachgewiesen. Der Nachweis und die
Analyse lipophiler Substanzen in solchen
komplexen Probenmaterialien bedarf einer
effektiven Probenvorbereitung. Im
Anwendungsbeispiel wird dies für Azo-Farbstoffe
in Textilien gezeigt.
Probenvorbereitung
2 g des Textilgewebes wird mit 25 mL 1N NaOH
für 30 Minuten gekocht. Nach Zugabe von 1 g
Na 2 S 2 O 4 wird die Probe für weitere 30 Minuten
gekocht. Nach Abkühlen werden 20 mL der
wässrigen Lösung auf eine EXtrelut ® NT20 Säule
aufgetragen. Weitere 15 Minuten reichen für eine
homogene Verteilung der wässrigen Probe auf
der Oberfläche des Säulenmaterials aus. Der
schrittweise Auftrag von 40 mL Ethylacetat
eluiert die lipophilen Amine der Probe. Das Eluat
wird auf 0,5 mL Volumen eingeengt, in 15 mL
Acetonitril aufgenommen und nochmals auf 0,5
mL eingeengt. Diese Probe wird mit 1 ml
Acetonitril verdünnt und chromatographisch
analysiert.
Chromatographische Bedingungen
Säule: LiChroCART ® 125-2 Superspher ® 60
RP select B (Cat. No. 1.50197)
Vorsäule: LiChroCART ® 10-2 Superspher ®
RP select B (Cat. No. 1.50205)
Mobile Phase: A: Acetonitrile (LiChrosolv ®
Cat. No. 1.00030); B: 3 mM K 2 HPO 4 pH 4,9
Gradient: 0 min 12% A; 0-5 min linear bis 25% A;
5-20 min isokratisch 25% A; 20-60 min linear bis
50% A; 60-66 min linear bis 95% A; 66-88 min
isokratisch 95% A; 88-90 min linear bis 12% A
Flußrate: 0,23 mL/min
Wellenlänge DAD: 254 nm
Temperatur: 11°C
Probe: 1. 2,4-Toluylendiamin 3,2 ng; 2. 2,4-Diaminoanisol 2,6 ng;
3. o-Anisidin 3,6 ng; 4. o-Toluidin 2,69 ng; 5. 4,4´-Oxydianilin 2 ng;
6. p-Kresidin 2,73 ng; 7. Benzidin 3,44 ng; 8. 4,4´-Diamino-3,3´-
Phenylmethan 2,5 ng; 9. p-Chloranilin 3,4 ng; 10. 2,4,5-
Trimethylanilin 4 ng; 11. 2-Aminonitro-4-toluol 3,46 ng; 12. 3,3´-
Dimethoxybenzidin 3,7 ng, 13. 2-Naphthylamin 2,44 ng;
14. 4-Chlor-o-toluidin 3,84 ng; 15. 3,3-Dimethylbenzidin (o-Toluidin)
2,7 ng; 16. 4,4´-Thiodianilin 2,32 ng; 17. 4,4´-Diamino-3,3-
dimethylphenylmethan 2,82 ng; 18. 3,4-Dichloroanilin (IS) 2,26 ng;
19. 4-Aminobiphenyl 2,5 ng; 20. 4-Aminoazobenzene 3,2 ng;
21. 3,3´-Dichlorbenzidin 2,28 ng; 22. 4,4´-Methylen-bis-2-Chloroanilin
3,22 ng, 23. o-Aminoazotoluol 2,2 ng
VWR ChromJournal Ausgabe 4 April 2008 3