Exazerbation!
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Stiftung TiHo<br />
Hannover<br />
KLINIK<br />
FÜR PFERDE<br />
Laboruntersuchungen bei<br />
Atemwegserkrankungen<br />
Bernhard Ohnesorge 2012<br />
Arterielle Blutentnahme<br />
- rechte A. carotis<br />
- handbreit über Brustapertur<br />
Nr. 12 (� 0,7 mm)<br />
Arterielle Blutgasanalyse<br />
Referenzbereiche (1010 mbar, Normo-Ventilation)<br />
p aO 2<br />
p aCO 2<br />
pH<br />
BE<br />
HCO 3 -<br />
95 - 105<br />
35 - 45<br />
7,36 - 7,44<br />
0 � 3<br />
22 - 26<br />
[mm Hg]<br />
[mm Hg]<br />
[mmol/l]<br />
[mmol/l]<br />
Laboruntersuchungen - Atemwege<br />
Beispiele<br />
� Blutuntersuchungen<br />
- Differential-Blutbild, Serologie<br />
- Blutgasanalyse<br />
� Sekretuntersuchungen<br />
- (Nasentupfer)<br />
- Pharynx- bzw. Luftsackspülprobe<br />
- Tracheal-Spülprobe, TBS, BAL<br />
� Punktion<br />
- Abszess, Paranasalzyste, Neoplasie<br />
- Thoraxpunktat<br />
� Biopsie<br />
- Lungenbiopsie (transthorakal, endoskopisch)<br />
Arterielle Blutgasanalyse<br />
� Stationärer Analysenautomat<br />
- erfordert hohe Probenzahl<br />
� Transportables Kleingerät<br />
� Nahegelegenes Krankenhaus<br />
gekühlt (3-7°C)<br />
Partialdrücke P aO 2 und P aCO 2 bei COB<br />
Deegen et al.
Klinisch<br />
lungenkrankes Pferd<br />
� pB: 772,0 mm Hg<br />
� paCO2: 31,1 mm Hg<br />
� paO2: 99,6 mm Hg<br />
O 2 in:<br />
47<br />
H2O ?<br />
gegeben<br />
?<br />
Klinisch<br />
lungengesundes Pferd<br />
� pB: 740,0 mm Hg<br />
� paCO2: 44,9 mm Hg<br />
� paO2: 90,5 mm Hg<br />
Inspiration Alveole (A) Arterie (a)<br />
N 2<br />
p I O 2<br />
47<br />
p A CO 2<br />
über p a CO 2<br />
berechnet<br />
N 2<br />
p A O 2<br />
(p BARO – 47) x 0,21 - p a CO 2 - p a O 2 = p (A-a) O 2<br />
47<br />
p a CO 2<br />
gemessen<br />
N 2<br />
p a O 2<br />
Alveolo-arterielle O 2 -Differenz<br />
� Maß für den Übergang von O 2<br />
aus Alveole in Lungenkapillare<br />
� A-aDO 2 berücksichtig Höhenlage und Wetter<br />
(P BARO ) und Ventilation (P a CO 2)<br />
Alveolo-arterielle O 2 -Differenz Arterielle Blutgasanalyse<br />
Klin. lungenkrankes Pferd<br />
(Ventilation �)<br />
� p B : 772,0 mmHg �<br />
� p a CO 2 : 31,1 mmHg �<br />
� p a O 2 : 99,6 mmHg<br />
� p (A-a) O 2 : 21,2 mmHg<br />
noch physiol.<br />
(bis 10 mmHg)<br />
deutlich erhöht<br />
Klin. lungengesundes Pferd<br />
(in völliger Ruhe)<br />
� p B : 740,0 mmHg �<br />
� p a CO 2 : 44,9 mmHg �<br />
� p a O 2 : 90,5 mmHg<br />
� p (A-a) O 2 : 9,8 mmHg<br />
p aO 2<br />
p aCO 2<br />
p (A-a)O 2<br />
pH<br />
BE<br />
HCO 3 -<br />
Referenzbereiche<br />
95 - 105<br />
35 - 45<br />
0 - 10<br />
7,36 - 7,44<br />
0 � 3<br />
22 - 26<br />
Arterielle Blutgasanalyse<br />
[mm Hg]<br />
[mm Hg]<br />
[mm Hg]<br />
[mmol/l]<br />
[mmol/l]<br />
Effekt der Haltungsoptimierung auf p aO 2<br />
Deegen et al.
Blutgaseanalyse -Gutachten<br />
• streitbefangenes Pferd (COB ?)<br />
• eingestellt aus optimierter Haltung (Angabe des Klägers)<br />
→ haltungsabhängige Erkrankung wahrscheinlich<br />
→ Zweifel an optimierter Haltung beim Kläger<br />
Datum<br />
04.05.<br />
06.05.<br />
09.05.<br />
Sekret - Beurteilung<br />
Normal<br />
dünner Film,<br />
einzelne Flocken<br />
hgr.<br />
M<br />
e<br />
n<br />
g<br />
e<br />
ggr.<br />
P aO 2 [mmHg]<br />
86<br />
90<br />
107<br />
ggr. hgr.<br />
wässrig<br />
P aCO 2 [mmHg]<br />
37<br />
41<br />
40<br />
Viskosität sehr zäh,<br />
dorsal klebend<br />
Tracheobronchialsekret (TBS)<br />
� Zytologie<br />
� Mikrobiologie (Bakterien, Pilze)<br />
- Direktausstrich<br />
-kulturell<br />
� Muzin-Analyse<br />
� Erregernachweise (z.B. mittels PCR)<br />
Blutgasverlauf nach Belastung<br />
� Maßgeblich beeinflusst durch Atemfrequenz,<br />
Atemzugvolumen und Hämatokrit<br />
� In der Praxis diagnostisch ohne Aussage<br />
Tracheobronchialsekret (TBS)<br />
� endoskopische Probenentnahme<br />
TBS - Ausstrichverfahren<br />
� 1 Tropfen pro Objektträger<br />
� „Quetschpräparat“<br />
mit zweitem Objektträger vorsichtig abziehen<br />
� lufttrocknen ! nativ<br />
� versenden in geeignetem Container<br />
Rotilabo®<br />
� Färbung: Labor Pferdeklinik: May-Grünwald + verdünnte Giemsa
Mikroskopische Untersuchung<br />
� meanderförmiges Ablesen<br />
� Art und Anzahl der Zellen / Strukturen erfassen<br />
- Auswertung von 10 Geraden<br />
- Auswertung bei 500 x Vergrößerung<br />
→ semiquantitatives Ergebnis<br />
TBS - Ergebnisbeispiel<br />
TBS- neutrophile Granulozyten<br />
bei chronischer Bronchitis<br />
� Anzahl = Maß für Grad der COB<br />
Lyse, Pyknose<br />
� lange Verweildauer<br />
� Mediatorwirkung<br />
ggr. hgr.<br />
mgr.<br />
Zählen von Zellen u. Strukturen<br />
semiquantitativ<br />
- keine im gesamten Untersuchungspfad<br />
+ einige im gesamten Untersuchungspfad<br />
++ auf jeder Geraden einzelne<br />
+++ auf jeder Geraden häufig auftretend<br />
++++ das Zellbild dominierend<br />
TBS- neutrophile Granulozyten<br />
� physiol: - bis vereinzelt<br />
� �� akute Bronchitis<br />
� �� bis ��� COB<br />
„eitrige Bronchitis“<br />
≠ bakterielle Infektion !<br />
Eosinophiler Granulozyt<br />
� physiol: vereinzelt<br />
� ��� Lungenwurmbefall<br />
� � allergische Bronchitis ?<br />
� � wandernde Parasitenlarven<br />
Granula → Charcot-Leyden Kristalle<br />
zytolog. Bilder:<br />
- Labor Pferdeklinik<br />
- Deconto, Diss, 1983
Mastzellen<br />
� physiol: vereinzelt<br />
� � Hyperreagibilität<br />
� � IAD (Inflammatory Airway Disease)<br />
Ziliozytophtoria<br />
� physiol: -<br />
� Zelldeformation<br />
� abgelöste Zilienkappen<br />
� � akuter Epithelschaden<br />
Makrophagen<br />
� Immer im TBS vorhanden<br />
� Besondere Formen<br />
- schaumige Makrophagen<br />
- Hämosiderophagen<br />
→ Lungenbluten<br />
Flimmerepithel-Zelle<br />
� physiol: - bis ggr.<br />
� � entnahmebedingt<br />
� � (akute) Bronchitis<br />
Basalzellen<br />
� physiol: -<br />
� kleine rundliche Zellen<br />
� � tiefer (chron.)<br />
Epithelschaden<br />
(Remodeling)<br />
Riesenzellen<br />
� physiol: - bis ggr.<br />
� Phagozytose<br />
� � Partikelfehldeposition
Curschmann-Spiralen<br />
� physiol.: -<br />
� � Bronchialobstruktion<br />
- Bronchiolitis<br />
- Dyskrinie<br />
- Clearancestörung<br />
TBS: Mikrobiologie<br />
� Bakterien (Pilzsporen)<br />
- Kontamination<br />
(obere Atemwege, Pseudomonas)<br />
- Erhöhte inhalative Belastung<br />
(Pilzsporen)<br />
- Dysphagie (z.B. nach Kehlkopf - Op.)<br />
- Bakterielle Infektion ?<br />
Nur wenn weitere Symptome<br />
Nur dann Antibiotika!<br />
Bronchoalveoläre Lavage (BAL)<br />
� Sedation<br />
� Endoskop oder Katheter<br />
• max. Ø 13 mm<br />
• 2,20 m bis 2,50 m<br />
� (Lokalanästhesie)<br />
� Bolus-Instillation<br />
• (250-500 ml)<br />
� sofortige Aspiration<br />
� 1 Tag kein Training<br />
Bronchopneumonie - TBS<br />
� Infektionserreger<br />
frei im TBS intrazellulär<br />
(Makrophagen)<br />
Tracheal-Spülprobe<br />
� transtracheal oder endoskopisch<br />
� ca. 10 - 20 (60) ml phys.<br />
NaCl-Lösung instillieren<br />
und aspirieren<br />
� unkontrollierte Verdünnung<br />
→ keine Aussage über Sekretmenge<br />
� gut geeignet für Erregernachweis<br />
Bronchoalveoläre Lavage (BAL)<br />
� Differenzialzellbild<br />
Eq Vet Educ 2003;15:61-63<br />
� Spezialfärbungen<br />
• Hämosiderophagen<br />
• Mastzellen<br />
• Pneumocystis carinii<br />
� Weitere Zellanalytik<br />
� Weitere Analytik des<br />
Überstands<br />
Foto: M. Venner
Bronchoalveoläre Lavage (BAL) BAL - Ergebnisbeispiel<br />
� Qualitativ und quantitativ<br />
auswertbar<br />
(mind. 400 Zellen<br />
differenzieren)<br />
� normal:<br />
ca. 60 % Makrophagen<br />
ca. 35 % Lymphozyten<br />
< 5 (10) % neutrophile Gran. Eq Vet Educ 2003;15:61-63<br />
= <strong>Exazerbation</strong>!<br />
Bewertung – TBS/BAL: was geht ?<br />
� Makrophagen (häufig vorhanden)<br />
• schaumig → Clearance-Störung<br />
• Riesenzellen → fehlerhafte Partikeldeposition<br />
• Hämosiderin → Lungenbluten (Bronchitis, Herz ?)<br />
� Mastzellen → Hyperreagibilität, IAD<br />
� Eosinophile Gran. → Allergie, Parasitose<br />
Bewertung – TBS/BAL: was geht ?<br />
� vermehrt neutrophile Granulozyten<br />
• entzündliche Atemwegserkrankung<br />
→ Bronchitis: akut oder chronisch<br />
infektiös oder nicht infektiös<br />
• mit Fieber und Bakterien → infektiös<br />
• bei chronischem Krankheitsverlauf<br />
� bis �� IAD (ggr. COB)<br />
���� RAO (hgr. COB)<br />
Bewertung – TBS/BAL: was geht ?<br />
� Bakterien<br />
• frei im TBS → Infektion vs. Kontamination ?<br />
• phagozytiert → Infektion (intrazellulär ?)<br />
• kulturell, unspezifisch → Kontamination ?<br />
• kulturell, spezifisch → Infektion (bei entsprechender Klinik)<br />
� Hyphen und Conidien → inhalative Belastung<br />
� Curschmann-Spiralen<br />
- nach Therapie/Belastung → Bronchodilatation
Bewertung – TBS/BAL: was geht ? Bewertung aus Labor – was geht nicht ?<br />
� Epithelien (grundsätzlich: Befunde entnahmebedingt ?)<br />
- Ziliozytophtoria → akuter Epithelschaden<br />
- Basalzellen → tiefe (chronische) Schädigung<br />
� Creolakörper (Epithelverbände) → Remodeling<br />
� Becherzellen, schleimproduzierende Zellen<br />
Stiftung TiHo<br />
Hannover<br />
KLINIK<br />
FÜR PFERDE<br />
- Dyskrinie<br />
- Schleimhautmetaplasie<br />
Laboruntersuchungen bei<br />
Atemwegserkrankungen<br />
Mit Dank an unsere VMTA<br />
A. Seemann-Jensen u. Ch. Richter<br />
Bernhard Ohnesorge<br />
� Diagnose nur aus TBS/BAL ohne Klinik<br />
� Diagnose einer Infektion ohne Klinik<br />
� Diagnose der COB in der Eliminationsphase<br />
• cave: Therapieempfehlung nur nach Laborbefund<br />
� Rückdatierung nur aus TBS/BAL<br />
• mit Klinik: evtl. max. 6 bis 8 Wochen<br />
• keine gesicherten Studien beim Pferd