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Materialien und Methoden
Tabelle 2.1: ISH-Sonden für Sulfatasen.
Name der
ISH-Sonde
Template DNA der ISH-Sonde
Antisense
ArsA
#11
Arylsulfatase A (799 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC 3669438) mit
T7-Pol.
Primer ArsA-F und T7-Primer (Anhang 8.2.4.).
ArsB
#41
Arylsulfatase B (443 bp, CDS+3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (ArsB-
3´UTR clone 5A) mit Primer ArsB-F und M13-21-fwd (Anhang 8.2.5.).
T7-Pol.
ArsC
#04
Arylsulfatase C (622 bp, CDS+3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC
1381235) mit T7-Primer und T3-Primer (Anhang 8.2.6.).
T3-Pol.
ArsE
#43
Arylsulfatase E (256 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (ArsE-3´UTR
clone 8AA) mit Primer ArsE-F und M13-rev (Anhang 8.2.7.).
T3-Pol.
ArsG
#16
Arylsulfatase G (926 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC 5134725)
mit Primer ArsG-F und T7-Primer (Anhang 8.2.8.).
T7-Pol.
ArsI
#47
Arylsulfatase I (885 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC 2802810) mit
Primer ArsI-F und M13-rev (Anhang 8.2.1.).
T7-Pol.
ArsI-intern
#84
Arylsulfatase I (850 bp, CDS) PCR-Produkt vom Plasmid (ArsI-CDS-stop
clone C) mit Primer ArsI-879-F und M13-21-fwd (Anhang 8.2.1.).
T7-Pol.
ArsJ
#52
Arylsulfatase J (645 bp, 5´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (ArsJ-5´UTR
clone C) mit Primer ArsJ-F und M13-rev (Anhang 8.2.9.).
T3-Pol.
ArsK
#20
Arylsulfatase K (795 bp, CDS) PCR-Produkt vom Plasmid (ArsK-3´UTR
clone 20-1) mit Primer ArsK-F und M13-rev (Anhang 8.2.10.).
T3-Pol.
Galns
#13
Galaktosamin (N-Acetyl)-6-Sulfat Sulfatase (1013 bp, 3´UTR) PCR-Produkt
vom Plasmid (IC 3492664) mit Galns-F und T7-Primer (Anhang 8.2.11.).
T7-Pol.
Gns
#54
Glucosamin (N-Acetyl)-6-Sulfat Sulfatase (945 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom
Plasmid (Gns-3´UTR clone E), Primer Gns-F und M13-rev (Anhang 8.2.12.). T3-Pol.
Ids
#03
Iduronat-2-Sulfatase (1504 bp, CDS) PCR-Produkt vom Plasmid (IC
3025090) mit T3-Primer und T7-Primer (Anhang 8.2.13.).
T7-Pol.
Sgsh
#18
N-Sulfoglucosamin Sulfohydrolase (518 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom
Plasmid (Sgsh-3´UTR clone 18-4), Sgsh-F und T3-Primer (Anhang 8.2.14.). T3-Pol.
Sulf1
#14
Sulfatase 1 (1553 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC 4500954) mit
Sulf1-F und T7-Primer (Anhang 8.2.2.).
T7-Pol.
Sulf1-intern
#45
Sulfatase 1 (273 bp, CDS) PCR-Produkt vom Plasmid (Sulf1-intern clone 2)
mit Primer Sulf1-1453-F und M13-rev (Anhang 8.2.2.).
T3-Pol.
Sulf2
#15
Sulfatase 2 (946 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (IC 3155559) mit
Sulf2-F und Sp6-Primer (Anhang 8.2.3.).
Sp6-Pol.
Sulf2-intern
#46
Sulfatase 2 (285 bp, CDS) PCR-Produkt vom Plasmid (Sulf2-intern clone 2)
mit Sulf2-1491-F und M13-21-fwd Primer (Anhang 8.2.3.).
T7-Pol.
Tabelle 2.2: ISH-Sonden für Col2-Sulf1 tg199 deletierte Gene.
Name der
ISH-Sonde
Template DNA der ISH-Sonde
Angpt1 Angiopoietin 1 (760 bp, CDS+3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (Angpt1-
#85 3´UTR clone A) mit Primer Angpt1-F und M13-rev (Anhang 8.2.15)
Eifs6
#86
Elongationinitiation factor 3 subunit 6 (539 bp, CDS) PCR-Produkt vom
Plasmid (Eif3s6-cp clone A) mit den Primer Eif3s6-F und M13-rev (Anhang
8.2.16.).
Rspo2 R-spondin 2 (747 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid (Rspo2-3´UTR
#78 clone 1A) mit den Primer Rspo2-F und Rspo2-R (Anhang 8.2.17.).
Tmem74
#79
Transmembran protein 74 (439 bp, 5´UTR) PCR-Produkt vom Plasmid
(Tmem74-5´UTR clone 2A) mit den Primer Tmem74-F und Tmem74-R
(Anhang 8.2.18.).
Trhr
#87
Thyrotropin-releasing hormone receptor (707 bp, CDS) PCR-Produkt vom
Plasmid (Trhr-cp clone A) mit den Primer Trhr-F und Trhr-R (Anhang
8.2.19.).
Ttc35
#88
Tetratricopeptide repeat domain 35 (330 bp, 3´UTR) PCR-Produkt vom
Plasmid (Ttc35-3´UTR clone 3A) mit den Primer Ttc35-F und Ttc35-R
(Anhang 8.2.20.).
Antisense
T3-Pol.
T3-Pol.
T3-Pol.
T7-Pol.
T3-Pol.
T3-Pol.
24