Molecular characterisation of SGCE-associated myoclonus-dystonia ...

Zusammenfassung 89
7 ZUSAMMENFASSUNG
In dieser Promotionsarbeit wurden Genotyp-Phänotyp-Beziehungen zweier Bewegungsstörungen
auf Gen-, cDNA-, Protein- und funktioneller Ebene untersucht. Dabei standen die
SGCE-assozierte Myoklonus-Dystonie (M-D – Projekt A) und das PINK1-assoziierter
Parkinson-Syndrom (PS – Projekt B und C) im Mittelpunkt.
Die M-D ist autosomal-dominant vererbt und wird durch Mutationen in SGCE verursacht.
Projekt A befasste sich mit folgenden Hypothesen: (i) Deletionen im SGCE-Gen sind eine
unterschätzte Krankheitsursache. (ii) Es besteht ein Zusammenhang zwischen Genotyp und
Phänotyp bei M-D-Patienten. Zu diesem Zweck wurden 35 M-D-Indexpatienten mittels
multiplex ligation-dependent probe amplification und genomischer Sequenzierung untersucht.
In 26 % aller getesteten Fälle (9/35) wurden Mutationen identifiziert (6/9 Patienten mit
definitiver M-D-Diagnose). Darunter waren zwei heterozygote Deletionsmutationen, die das
komplette SGCE-Gen sowie flankierende DNA-Bereiche beinhalteten, und eine heterozygote
Exon 2-Deletion. Damit stellten sie ein Drittel aller identifizierten Mutationen (3/9). Die
beiden komplexen Deletionen beinhalteten COL1A2 und waren zusätzlich mit einer schweren
Gelenkerkrankung assoziiert. Darüber hinaus wurden eine neue kleine Deletion und vier
bereits bekannte Punktmutationen entdeckt. Bei einer Literaturrecherche in der Medline-
Datenbank wurden 22 Veröffentlichungen zur SGCE-Mutationsanalyse gefunden. Diese
beschrieben 64 nicht verwandte M-D-Patienten mit 41 verschiedenen Mutationen. Außer bei
Patienten mit Deletionen mehrerer Gene bestand keine Verbindung zwischen Genotyp und
Phänotyp. Anhand der Ergebnisse von Projekt A lässt sich schlussfolgern, dass jeder
genetischen Analyse eine sorgfältige klinische Untersuchung der Patienten mit besonderem
Schwerpunkt auf nicht-motorischen Symptomen vorausgehen sollte. Außerdem wäre es
sinnvoll, Genedosisuntersuchungen in die SGCE-Routinediagnostik aufzunehmen.
Die durch Mutationen in PINK1-Gen verursachte Form von PS wird rezessiv vererbt. Trotz
umfangreicher Analysen konnte bei manchen PS-Patienten allerdings nur eine einzelne
heterozygote Mutation gefunden werden. So auch im Fall des häufige auftretenden
Basenaustausches c.1366C>T. Zu dieser Thematik wurden im Projekt B zwei Hypothesen
aufgestellt: (i) Die c.1366C>T-Mutation in PINK1 beeinflusst die Expression des Gens. (ii)
Die Phänotypvarianz bei PS-Patienten mit heterozygoten Mutationen in PINK1 hängt vom
Expressionsniveau des Gens ab. Um diese Annahmen zu hinterfragen, wurden DNA- und
cDNA-Proben von 21 Trägern der c.1366C>T Mutation mit homozygoter (n = 6),
heterozygoter (n = 14) oder compound-heterozygoter (n = 1) Ausprägung untersucht. Bei 17