SODIUM

Quantitative determination of Sodium
IVD
Store at 2-8ºC
INTENDED USE
For the quantitative in vitro determination of Sodium in serum and
plasma.
PRINCIPLE OF THE METHOD (1)
Sodium is determined enzymatically via sodium dependent -
galactosidase activity with ONPG as substrate. The absorbance
at 405 nm of the product O-nitrophenyl is proportional to the
sodium concentration.
ONPG
Na+
o-nitrophenol + galactose
-galactosidase
ONPG = o-nitrophenyl - -D-galactopyranose
CLINICAL SIGNIFICANCE
Sodium measurements are used in the diagnosis and treatment of
aldosteronism, diabetes insipidus, adrenal hyper-tension,
Addison’s disease, dehydration, inappropriate antidiuretic
hormone secretion, or other diseases involving electrolyte
imbalance.
REAGENTS
R 1
Buffer /
Enzymes
R2
Diluent /
Substrate
Tris buffer, pH 9.0
Cryptand
-galactosidase
Tris buffer
O-nitrophenyl galactoside
450 mmol/l
5.4 mmol/l
0.8 U/ml
10.0 mmol/l
5.5 mmol/l
PREPARATION
R1. Buffer/Enzymes
Transfer the contents of one bottle Buffer R1a to one bottle
Enzyme R1b and dissolve by swirling gently, ensuring that the
entire contents are completely dissolved. Transfer the entire
contents to Buffer R1a rinsing vial R1b several times. Avoid the
formation of foam.
R2. Diluent/Substrate
Transfer the contents of one bottle Diluent R2a to one bottle
Substrate R2b and dissolve by swirling gently, ensuring that the
entire contents are completely dissolved . Transfer the entire
contents to Diluent R2a rinsing vial R2b several times. Avoid the
formation of foam.
STORAGE AND STABILITY
R1 is stable for 2 weeks at 2-8 C or 5 days at 15-25 C.
R2 is stable for 4 weeks at 2-8 C or 2 weeks at 15-25 C.
Do not use reagents over the expiration date.
ADDITIONAL EQUIPMENT
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 405 nm.
- Matched cuvettes 1.0 cm light path.
- General laboratory equipment (Note 1) .
SAMPLES
Serum, plasma treated with lithium heparinate.
PROCEDURE
1. Assay conditions:
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405nm
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . 1 cm light path
Constant temperature . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC
2. Adjust the instrument to zero with distilled water.
3. Pipette into a cuvette:
Standard Sample
R1 720 μL 720 μL
R2 290 μL 290 μL
Standard 30 μL ----
Sample ---- 30 μL
SODIUM-d
SODIUM
Enzymatic. Colorimetric
4. Mix and read the absorbance after 60 s (A 1) and 120 s (A 2).
5. Calculate: A= A 2 – A 1.
CALCULATIONS
( A)Sample
x Calibrator conc = mmol/L sodium in the sample
( A)Calibrator
QUALITY CONTROL
Control Sera are recommended to monitor the performance of assay
procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
1002210).
If control values are found outside the defined range, check the instrument,
reagent and calibration for problems.
Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
REFERENCE VALUES (2)
136 - 146 mmol/l (313 - 336 mg/dl)
These values are for orientation purpose; each laboratory should
establish its own reference range.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Linearity: The method is linear between sodium concentrations of 37.3
and 187.8 mmol/L
Sensitivity: The minimum detectable concentration of sodium with an
acceptable level of precision was determined as 37.3 mmol/l.
Precision:
Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Mean (mmol/L) 47.4 124.9 179.8 62.9 125.2 159.6
SD 0.76 1.54 1.08 4.99 2.51 1.94
CV (%) 1.60 1.23 0.60 7.94 2.01 1.21
Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not
show systematic differences when compared with other commercial
reagent (x).
The results obtained using 40 samples spanning the range 119 to 226
mmol/L were the following:
Correlation coefficient (r): 0.98.
Regression equation: y= 1.12x - 13
The results of the performance characteristics depend on the analyzer
used.
NOTES
1. In order to avoid contamination it is recommended to use
disposable material.
2. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
analyzers. Instructions for many of them are available on
request.
BIBLIOGRAPHY
1. Berry, M. N. et al., (1988) Clin. Chem. 34,2295.
2. Tietz, N. W. (1983) Clinical guide to Laboratory Tests, p.384, W.B.
Saunders Co., Philadelphia.
PACKAGING
Ref: 1001385
Cont.
R1a, R1b (Lyo.): 3 x 20 mL,
R2a, R2b (Lyo.): 3 x 9 mL
BSIS81-I 04/01/12 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com

Determinación cuantitativa de Sodio
IVD
Conservar a 2-8ºC
USO PREVISTO
Para determinación cuantitativa in vitro de Sodio en suero y
plasma.
PRINCIPIO DEL METODO (1)
El Sodio se determina enzimáticamente a través de la actividad
de -galactosidasa, usando como sustrato ONPG. La
absorbancia del producto o-nitrofenil a 405 nm es porporcional a
la concentración de sodio.
ONPG
Na+
o-nitrofenol + galactosa
-galactosidasa
ONPG = o-nitrofenil - -D-galactopiranosa
SIGNIFICADO CLINICO
Este test se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de
hiperaldosteronismo, diabetes insípida, hiper-tensión suprarrenal,
enfermedad de Addison, deshidratación, secreción inadecuada
de hormona antidiurética, o de otras enfermedades de
desequilibrio electrolítico
REACTIVOS
R 1
Tampón /
Enzimas
R2
Diluyente/
Sustrato
TampónTris, pH 9.0
Cryptand
-galactosidasa
TampónTris
O-nitrofenil galactosida
450 mmol/l
5.4 mmol/l
0.8 U/ml
10.0 mmol/l
5.5 mmol/l
PREPARACION
R1. Tampón / Enzimas
Transferir el contenido de 1 vial de Tampón R1a a un vial de
Enzima R1b agitando ligeramente, asegurándose que todo el
contenido se disuelve completamente. Transferir el contenido
total al tampón R1a, lavando el vial R1b varias veces. Evitar la
formación de espuma.
R2. Diluyente/ Sustrato
Transferir el contenido de 1 vial de Diluyente R2a a un vial de
Sustrato R2b agitando ligeramente, asegurándose que todo el
contenido se disuelve completamente. Transferir el contenido
total al tampón R2a, lavando el vial R2b varias veces. Evitar la
formación de espuma.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
R1 es estable 2 semanas a 2-8ºC o 5 días a 15-25ºC.
R2 es estable 4 semanas a 2-8ºC o 2 semanas a 15-25ºC.
No usar los reactivos una vez pasada la fecha de
caducidad.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio (Nota 1) .
MUESTRAS
Suero, plasma tratado con heparinato de litio.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . 405 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .1 cm paso de luz
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37ºC / 15-25ºC
SODIUM-d
SODIO
Enzimático. Colorimétrico
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en la cubeta:
Estándar Muestra
R1 720 μL 720 μL
R2 290 μL 290 μL
Estándar 30 μL ----
Muestra ---- 30 μL
4. Mezclar y leer la absorbancia después de 60 s (A1) y 120 s (A2).
5. Calcular: A= A 2 – A 1.
CALCULOS
( A)
Muestra x Conc Calibrador = mmol/L sodio en la muestra
( A)
Calibrador
CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control
valorados:
SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 and 1002210). Si los
valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y
establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan
con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA (2)
136 - 146 mmol/l (313 - 336 mg/dl)
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERISTICAS DEL METODO
Linealidad: El método es lineal entre concentraciones de sodio de
37.3 y 187.8 mmol/L
Sensibilidad: La mínima concentración de sodio detectable con un
nivel de precisión aceptable se determinó a 37.3 mmol/l.
Precisión:
Intraserie (n=20) Interserie(n=20)
Media (mmol/L) 47.4 124.9 179.8 62.9 125.2 159.6
SD 0.76 1.54 1.08 4.99 2.51 1.94
CV (%) 1.60 1.23 0.60 7.94 2.01 1.21
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
comerciales (x).
Los resultados obtenidos con 40 muestras entre 119 y 226 fueron los
siguientes:
Coeficiente de regresión (r): 0.98
Ecuación de la recta de regresión: y= 1.12x – 13
Las características del método pueden variar según el analizador
utilizado.
NOTAS
1. A fin de evitar contaminaciones se recomienda utilizar material de
plástico de un solo uso.
2. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la
aplicación de este reactivo en distintos analizadores.
BIBLIOGRAFIA
1. Berry, M. N. et al., (1988) Clin. Chem. 34,2295.
2. Tietz, N. W. (1983) Clinical guide to Laboratory Tests, p.384, W.B.
Saunders Co., Philadelphia.
PRESENTACION
Ref: 1001385
Cont.
R1a, R1b (Lio.): 3 x 20 mL,
R2a, R2b (Lio.): 3 x 9 mL
BSIS83-E 04/01/12 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com