NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG NHỰA TRAO ĐỔI ION TRONG PHÂN LẬP ACID SHIKIMIC TỪ ĐẠI HỒI [FULL]

www.twitter.com/daykemquynhon
www.google.com/+DạyKèmQuyNhơn
23
www.facebook.com/daykem.quynhon
www.daykemquynhon.blogspot.com
24
www.daykemquynhon.ucoz.com
Produced by Nguyen Thanh Tu
MailBox : tuhoahocqn@hotmail.com
CHƯƠNG 3. THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ
3.1.Xác định hàm lượng acid shikimic có trong dược liệu
- Tiến hành
+ Cân 10g bột Đại hồi gói trong giấy lọc, cho vào bình nón 100mL thêm 50mL
nước cất ngâm trưởng nở 2 giờ. Chiết 3 lần, mỗi lần siêu âm 1 giờ với 50mL nước
cất. Lọc, rửa bỏ bã dược liệu, gộp dịch chiết 3 lần.
+ Chuyển dịch chiết nước thu được vào bình định mức 250mL, thêm nước đến vạch,
lắc đều.
+ Hút 1mL dịch chiết nước vào bình định mức 25mL, thêm nước đến vạch, lắc đều,
lọc qua màng lọc 0,45µm, và tiến hành định lượng bằng sắc ký lỏng.
- Kết quả
Hàm lượng acid shikimic có trong Đại hồi xác định được là 6,3% ± 0,1%. Sắc
ký đồ của mẫu Đại hồi và acid shikimic chuẩn được trình bày trong hình (phụ lục 4).
3.2. Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụacid shikimic trong
dịch chiết dược liệu của nhựa anionit
- Mục đích
+ Cất cô quay dịch acid shikimic/ethanol đến cắn, thêm vừa đủ 50mL nước cất thu
được dung dịch 1.
+ Hút chính xác 1mL dung dịch 1 cho vào bình định mức 100mL thêm nước cất đến
vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45μm, định lượng bằng HPLC xác định được
hàm lượng acid shikimic có trong dịch chiết sau khi xử lý.
Hấp phụ
+ Nạp 2g nhựa anionit lên cột sắc ký. Chuyển lượng còn lại lên cột sắc ký. Điều
chỉnh tốc độ dòng 0,5 mL/phút.
+ Sau khi dịch chiết chảy hết qua cột.
Thêm 20mL nước cất rửa cột sắc ký. Gộp
dịch sau hấp phụ và dịch rửa cột, hút
chính xác 1mL dung dịch này cho vào
bình định mức 100mL, thêm nước đến
vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45μm,
định lượng acid shikimic có trong dung
dịch sau hấp phụ này bằng HPLC, từ đó
tính được dung lượng hấp phụ acid
shikimic bởi nhựa anionit từ dịch chiết
Xác định dung lượng hấp phụ, hiệu suất phản hấp phụacid shikimic trong dịch chiết
dược liệu.
của Diaion SA12A, Trilite SAR-20 từ đó thiết kế thí nghiệm ứng dụng nhựa anionit
Phản hấp phụ
trong phân lập acid shikimic từ đại hồi.
+ Phản hấp phụ bằng dung dịch NaCl
- Tiến hành
0,9M đến khi acid shikimic được rửa giải
Tạo dịch chiết dược liệu
hết (khoảng 50mL), điều chỉnh tốc độ chảy: 0,5 mL/phút.Hình 3.1.Cột sắc ký
+ Cân 10g bột dược liệu gói trong giấy lọc, cho vào bình nón 100mL thêm 50mL
15×300 (mm)
nước cất ngâm trưởng nở 2 giờ. Chiết 3 lần, mỗi lần siêu âm 1 giờ với 50mL nước
cất. Lọc, rửa bỏ bã dược liệu, gộp dịch chiết 3 lần, thu được dịch chiết nước cho vào
+ Thu dịch sau khi phản hấp phụ. Hút chính xác 1mL dịch này vào bình định mức
bình cầu 250mL, cất quay áp suất giảm thu được cao mềm.
100mL, thêm nước đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45µm, định lượng bằng
+ Thêm 40 ml ethanol 96% vào cao mềm, siêu âm, lặp lại 3 lần. Lọc lấy dịch trong
HPLC từ đó tính được lượng acid shikimic được phản hấp phụ.
thu được dịch acid shikimic/ ethanol.
Tinh chế
+ Chuẩn bị 1 bình cầu khô 250mL. Cân bình thu được m b .
DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN
Sưu tầm bởi GV. Nguyễn Thanh Tú
www.facebook.com/daykemquynhonofficial
www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial