Nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện và định lượng một số paraben trong mỹ phẩm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO 

BỘ Y TẾ 

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI 

NGUYỄN THỊ VIỆT ÁI 

NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH 

PHÁT HIỆN VÀ ĐỊNH LƯỢNG MỘT SỐ 

PARABEN TRONG MỸ PHẨM 

LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC 

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT 

daykem<strong>quy</strong>nhonbusiness@gmail.com 

HÀ NỘI - 2018

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO 

BỘ Y TẾ 

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI 

NGUYỄN THỊ VIỆT ÁI 

NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH 

PHÁT HIỆN VÀ ĐỊNH LƯỢNG MỘT SỐ 

PARABEN TRONG MỸ PHẨM 

LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC 

CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT 

MÃ SỐ: 8720210 

Người hướng dẫn khoa học: TS. Lê Thị Hường Hoa 

GS. TS. Thái Nguyễn Hùng Thu 



HÀ NỘI - 2018 

`

LỜI CẢM ƠN 

Tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến tập thể thầy hướng dẫn, TS. Lê Thị 

Hường Hoa <strong>và</strong>GS.TS. Thái Nguyễn Hùng Thu - những người thầy đã không quản 

ngại khó khăn, dành nhiều thời gian quý báu <strong>và</strong> giúp đỡ tận tình cho tôi hoàn thành 

luận văn này. 

Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện kiểm nghiệm thuốc Trung 

ương, Khoa kiểm nghiệm Mỹ phẩm đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành 

việc học <strong>và</strong> làm đề tài. 

Tôi xin chân thành cảm ơn trường Đại học Dược Hà Nội, Bộ môn Hóa phân 

tích đã cho tôi <strong>một</strong> môi trường học tập nghiêm túc, giúp tôi bồi đắp kiến thức <strong>và</strong> 

hoàn t<strong>hiện</strong> bản thân. 

Không thể nói hết sự cảm kích của tôi đối với đồng nghiệp <strong>và</strong> gia đình đã 

luôn yêu thương, động viên, nhường nhịn để tôi đi đến chặng cuối của chương <strong>trình</strong> 

học Thạc sĩ. 

Tôi xin chân thành cảm ơn! 

Hà Nội, ngày 15 tháng 03 năm 2018 

Học viên 

Nguyễn Thị Việt Ái 


daykem<strong>quy</strong>nhonbusiness@gmail.com

MỤC LỤC 

Lờ i cả m ơn 

Danh mu ̣c cá c kí hiêụ, cá c từ viết tắ t 

Danh mu ̣c cá c bảng 

Danh mu ̣c cá c hiǹh 

CHƯƠNG 1 ..................................................................................................................... 3 

TỔNG QUAN .................................................................................................................. 3 

1.1. TỔNG QUAN VỀ PARABEN ................................................................................. 3 

1.1.1. Đặc điểm chung ...................................................................................................... 3 

1.1.2. Tác dụng kháng khuẩn của <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> viê ̣c sử duṇg <strong>paraben</strong> trong thực tiễn 

sản xuất ............................................................................................................................. 5 

1.1.3. Sự <strong>hiện</strong> diện của <strong>paraben</strong> trong môi trường ........................................................... 7 

1.1.4. Tác động của <strong>paraben</strong> đối với cơ thể con người .................................................... 8 

1.1.5. Một <strong>số</strong> phương pháp phân tích <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm ..................................... 12 

1.2. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP HPLC .......................................................... 25 

1.2.1. Nguyên tắc của sắc ký lỏng hiệu năng cao .......................................................... 25 

1.2.2. Cấu tạo máy HPLC .............................................................................................. 25 

1.2.3. Detector <strong>và</strong> bộ phận ghi tín hiệu .......................................................................... 26 

1.2.4. Các thông <strong>số</strong> đặc trưng của quá <strong>trình</strong> sắc kí......................................................... 26 

1.2.5. Ứng dụng HPLC .................................................................................................. 27 



CHƯƠNG 2 ................................................................................................................... 31 

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ................................................... 31 

2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU ................................................................................ 31 

2.2.THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT ..................................................................................... 31 

2.2.1. Thiết bị <strong>và</strong> dụngcụ ................................................................................................ 31 

2.2.2. Dung môi <strong>và</strong> hóa chất .......................................................................................... 31 

2.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU ................................................................................... 32 

2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........................................................................... 32 

2.5. XỬ LÝ THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM ............................................... 35

CHƯƠNG 3 ................................................................................................................... 36 

THỰC NGHIỆM VÀ KẾ T QUẢ .................................................................................. 36 

3.1. XỬ LÝ MẪU .......................................................................................................... 36 

3.1.1. Điều kiện xử lý mẫu ............................................................................................. 36 

3.1.2. Cách chuẩn bị mẫu ............................................................................................... 36 

3.2. XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ......................... 37 

3.2.1. Điều kiện sắc kí .................................................................................................... 37 

3.2.2. Thẩm <strong>định</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> ............................................................................................. 40 

3.3. ÁP DỤNG KIỂM TRA MẪU TRÊN THỊ TRƯỜNG ........................................... 67 

CHƯƠNG 4 ................................................................................................................... 72 

BÀN LUẬN ................................................................................................................... 72 

4.1. VỀ CÁC PARABEN NGHIÊN CỨU .................................................................... 72 

4.2. VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .................................................................... 72 

4.2.1. Về phương pháp xử lý mẫu .................................................................................. 74 

4.2.2. Về <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích .......................................................................... 75 

4.2.3. Về thẩm <strong>định</strong> phương pháp .................................................................................. 75 

4.3. VỀ KIỂM TRA CÁC MẪU MỸ PHẨM ................................................................ 76 

KẾT LUẬN .................................................................................................................... 77 

KIẾN NGHỊ ................................................................................................................... 77 

Tài liêụ tham khảo 

Phu ̣lu ̣c 



Phu ̣ lu ̣c 1: Các mẫu mỹ phẩm được sử dụng để xác <strong>định</strong> sự có mặt của 5 <strong>paraben</strong> 

cấm 

Phụ lục 2: Các phương pháp phân tích xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm 

Phu ̣ lu ̣c 3: Thườ ng <strong>quy</strong> kĩ thuât ̣ - Điṇh tińh và điṇh lươṇg 5 chất bảo quản 

isopropyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> 

trong sữa rử a măt ̣ và nướ c súc miêṇg bằng HPLC-DAD 

Phụ lục 4: Một <strong>số</strong> sắc kí đồ phân tích 5 <strong>paraben</strong> IPP, PheP, BzP, IBP, PeP

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 

Viết tắt 

Tên tiếng Việt (tiếng Anh) 

ACN 

AOAC 

BP 

BzP 

cs 

EP 

HL 

HPLC 

IBP 

IPP 

LOD 

LOQ 

MeOH 

MP 

PeP 

PheP 

PP 

ppm 

r 

RSD 

UV-VIS 

Acetonitril 

Hiệp hội các nhà hóa học phân tích chính thức (Association of Official 

Analytical Chemists) 

Butyl<strong>paraben</strong> 

Benzyl<strong>paraben</strong> 

cộng sự 

Ethyl<strong>paraben</strong> 

Hàm <strong>lượng</strong> 

Sắc kí lỏng hiệu năng cao (High performance liquid chromatography) 

Isobutyl<strong>paraben</strong> 

Isopropyl<strong>paraben</strong> 

Giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> (Limit of Detection) 

Giới hạn <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> (Limit of Quantification) 

Methanol 

Methyl<strong>paraben</strong> 



Pentyl<strong>paraben</strong> 

Phenyl<strong>paraben</strong> 

Propyl<strong>paraben</strong> 

Phần triệu (parts per million) 

Hệ <strong>số</strong> tương quan (Relative coefficient) 

Độ lệch chuẩn tương đối (Relative standard deviation) 

Tử ngoại- khả kiến (Ultraviolet-visible)

DANH MỤC CÁC BẢNG 

Bảng 1. 1. Một <strong>số</strong> tính chất vật lý, hóa học 5 <strong>paraben</strong> bị cấm dùng trong mỹ phẩm. 4 

Bảng 2. 1. Các mẫu nền được sử dụng để xác <strong>định</strong> phương pháp phân tích. ........... 31 

Bảng 3. 1. Độ thích hợp của hệ thống sắc kí của IPP, PheP và BzP ........................ 40 

Bảng 3. 2. Độ thích hợp của hệ thống sắc kí của IBP và PeP ................................... 41 

Bảng 3. 3. Thời gian lưu của IPP, PheP, BzP trên các loại mẫu thử khác nhau. ...... 46 

Bảng 3. 4. Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính của IPP, PheP, BzP. ....................... 46 

Bảng 3. 5. Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính của IBP <strong>và</strong> PeP. .............................. 47 

Bảng 3. 6. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IPP trên nền sữa rửa 

mặt. ............................................................................................................................ 49 

Bảng 3. 7. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PheP trên nền sữa rửa 

mặt. ............................................................................................................................ 50 

Bảng 3. 8. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với BzP trên nền sữa rửa 

mặt. ............................................................................................................................ 50 

Bảng 3. 9. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IBP trên nền sữa rửa 

mặt. ............................................................................................................................ 51 

Bảng 3. 10. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PeP trên nền sữa rửa 

mặt. ............................................................................................................................ 52 



Bảng 3. 11. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IPP trên nền nước 

súc miệng................................................................................................................... 53 

Bảng 3. 12. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PheP trên nền nước 

súc miệng................................................................................................................... 53 

Bảng 3. 13. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với BzP trên nền nước 

súc miệng................................................................................................................... 54 

Bảng 3. 14. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IBP trên nền nước 

súc miệng................................................................................................................... 54

Bảng 3. 15. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PeP trên nền nước 

súc miệng................................................................................................................... 55 

Bảng 3. 16. Kết quả khảo sát độ lặp lại của phương pháp đối với IPP, PheP, BzP 

trên nền sữa rửa mặt. ................................................................................................. 56 

Bảng 3. 17. Kết quả khảo sát độ lặp lại của phương pháp đối với IBP <strong>và</strong> PeP trên 

nền sữa rửa mặt. ........................................................................................................ 57 


trên nền nước súc miệng. .......................................................................................... 58 


nền nước súc miệng. .................................................................................................. 59 

Bảng 3. 20. Kết quả khảo sát độ chính xác trung gian của phương pháp đối với IPP, 

PheP, BzP trên nền sữa rửa mặt. ............................................................................... 60 

Bảng 3. 21. Kết quả khảo sát độ chính xác trung gian của phương pháp đối với IBP 

<strong>và</strong> PeP trên nền sữa rửa mặt. ..................................................................................... 61 


PheP, BzP trên nền nước súc miệng. ........................................................................ 62 


<strong>và</strong> PeP trên nền nước súc miệng. .............................................................................. 63 

Bảng 3. 24. LOD <strong>và</strong> LOQ của IPP, PheP, BzP, IBP và PeP .................................... 66 

Bảng 3. 25. Kết quả phân tích các <strong>paraben</strong> cấm. ...................................................... 71 



DANH MỤC CÁC HÌNH 

Hình 1. 1. Cấu trúc chung của <strong>paraben</strong> ....................................................................... 3 

Hình 1. 2. Phương pháp phân tích chính thức do liên minh châu Âu ban hành để 

<strong>định</strong> tính <strong>và</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. ..................................................... 14 

Hình 1. 3. Sơ đồ nguyên lý của máy HPLC. ............................................................. 25 

Hình 1. 4. Cấu tạo detector mảng diod (DAD). ........................................................ 30 

Hình 3. 1. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn 5 <strong>paraben</strong> bi ̣cấm (trái) và hôñ hợp 

chuẩn 9 <strong>paraben</strong> (phải) với pha động ACN - nước (40 : 60). ................................. 38 

Hình 3. 2. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn IPP, PheP, BzP (a), hỗn hợp chuẩn 

IBP và PeP (b) và hôñ hợp 9 <strong>paraben</strong> (c) trên cột Luna với pha động ACN - nước 

(35 : 65). .................................................................................................................... 39 

Hình 3. 3. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn 9 <strong>paraben</strong> trên cột Luna với pha động 

ACN - nước (45 : 55). ............................................................................................. 40 

Hình 3. 4. Sắc kí đồ đánh giá độ đặc hiệu với 3 <strong>paraben</strong> IPP, PheP, BzP trên nền 

mẫu sữa rửa mặt so với mẫu chuẩn. .......................................................................... 42 

Hình 3. 5. Sắc kí đồ đánh giá độ đặc hiệu với 3 <strong>paraben</strong> nghiên <strong>cứu</strong> trên nền mẫu 

nước súc miệng so với mẫu chuẩn. ........................................................................... 43 

Hình 3. 6. Sắc kí đồ đánh giá độ đặc hiệu với 2 <strong>paraben</strong> IBP <strong>và</strong> PeP trên nền mẫu 

sữa rửa mặt so với mẫu chuẩn. .................................................................................. 44 




nước súc miệng so với mẫu chuẩn. ........................................................................... 45 

Hình 3. 8. Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích píc <strong>và</strong> nồng độ của ....... 47 

Hình 3. 9. Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích píc <strong>và</strong> nồng độ .............. 48 

Hình 3. 10. Sắc kí đồ xác <strong>định</strong> LOD của PheP <strong>và</strong> BzP. ........................................... 64 

Hình 3. 11. Sắc kí đồ thể <strong>hiện</strong> LOD của IPP. ........................................................... 65 

Hình 3. 12. Sắc kí đồ thể <strong>hiện</strong> LOD của IBP, PeP .................................................... 66 

Hình 3. 13. So sánh phổ UV-VIS của các píc trên mẫu thử 48L02 <strong>và</strong> 48L01. ........ 68 

Hình 3. 14. Sắc kí đồ <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> các <strong>paraben</strong> trong 48L07 ........................................ 69



ĐẶT VẤN ĐỀ 

Sự kỳ vọng về thời hạn sử dụng lâu dài <strong>và</strong> các sản phẩm tiêu dùng không 

chứa vi sinh vật đòi hỏi phải sử dụng chất bảo quản. Lý tưởng nhất là chất bảo quản 

hoạt động ở nồng độ thấp mà có tác dụng với nhiều loại vi sinh vật khác nhau <strong>và</strong> 

không ảnh hưởng đến các thành phần khác trong sản phẩm, đồng thời không gây 

độc cho người <strong>và</strong> có giá rẻ cho các nhà sản xuất. Paraben đã được sử dụng gần 100 

năm làm chất bảo quản, chủ yếu là trong các sản phẩm chăm sóc cá nhân, dược 

phẩm <strong>và</strong> thực phẩm. Chúng đã từng được coi là <strong>một</strong> trong những chất bảo quản an 

toàn nhất <strong>và</strong> được dung nạp tốt nhất. Việc sản xuất <strong>và</strong> sử dụng rộng rãi <strong>paraben</strong> 

trong thời gian dài trên toàn cầu đã dẫn đến sự xuất <strong>hiện</strong> của chúng ở nhiều nơi 

trong môi trường. Paraben đã được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong nước mặt, đất <strong>và</strong> trầm tích, sinh 

vật, cũng như trong không khí <strong>và</strong> bụi trong nhà. Tuy nhiên, nguồn phơi nhiễm chính 

với <strong>paraben</strong> của con người là các sản phẩm chăm sóc cá nhân <strong>và</strong> dược phẩm. Phơi 

nhiễm <strong>paraben</strong> liên tục ngay cả ở nồng độ thấp có thể dẫn đến sự tồn tại lâu dài <strong>và</strong> 

tích tụ. Tác động <strong>và</strong> sự an toàn của <strong>paraben</strong> đã được các báo cáo khoa học đề cập 

đến khả năng tiềm tàng gây rối loạn nội tiết <strong>và</strong> mối liên hệ có thể có với ung thư vú. 

Những <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> này cũng chỉ ra tác động tiềm ẩn có hại đối với việc dùng các mỹ 

phẩm có chứa <strong>paraben</strong> trên da người, đặc biệt khi tiếp xúc với ánh sáng mặt trời. 

Khi con người có thể liên tục tiếp xúc với nhiều <strong>paraben</strong> khác nhau <strong>và</strong> nhiều chất 

gây rối loaṇ nội tiết khác thì mặc dù ở các nồng độ dưới mức tác dụng quan sát 

được, hỗn hợp các chất này có thể gây tác dụng bất lợi tiềm tàng không thể bỏ qua. 



Các nước châu Âu <strong>và</strong> ASEAN đã đưa ra những <strong>quy</strong> <strong>định</strong> nhằm quản lý việc 

sử dụng <strong>paraben</strong>. Trong số chiń <strong>paraben</strong> được sử duṇg trong thực tế thì 

methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong> và butyl<strong>paraben</strong> được phép sử duṇg 

trong mỹ phẩm ở những giớ i haṇ nhất điṇh. Năm chất còn lai ̣ là isopropyl<strong>paraben</strong>, 

isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> do thiếu dữ liêụ 

về giớ i haṇ và tính an toàn, không đánh giá được nguy cơ đối vớ i con ngườ i nên bi ̣ 

đưa vào danh mu ̣c các chất bi ̣cấm sử duṇg trong mỹ phẩm. 

1

Công văn <strong>số</strong> 6577/QLD-MP của Cục quản lý dược (Bộ Y tế) ban hành ngày 

13 tháng 4 năm 2015 về việc <strong>quy</strong>ết <strong>định</strong> ngừng lưu hành các sản phẩm mỹ phẩm 

chứa các <strong>paraben</strong> sử duṇg không đú ng <strong>quy</strong> điṇh là <strong>một</strong> trong nhiều động thái của 

các nước ASEAN trong tiến <strong>trình</strong> <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> cộng đồng chung, nhằm bảo vệ sức 

khỏe của người dân trong khu vực. Do đó, <strong>một</strong> phương pháp phân tích sử dụng thiết 

bị vốn phổ biến ở nhiều phòng thí nghiệm là sắc kí lỏng hiệu năng cao với detector 

mảng diod cần được <strong>phát</strong> triển để xác <strong>định</strong> các <strong>paraben</strong> này trong các sản phẩm mỹ 

phẩm. 

Trên cơ sở đó, nghiên <strong>cứu</strong> này được tiến hành nhằm <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> 

<strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> <strong>và</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> những <strong>paraben</strong> bị cấm trong mỹ phẩm với các mục tiêu: 

1. Xây <strong>dựng</strong> được <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích các <strong>paraben</strong> isopropyl<strong>paraben</strong>, 

isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm 

dạng sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước súc miệng. 

trường. 

2. Áp dụng phương pháp <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> để kiểm tra <strong>một</strong> <strong>số</strong> mẫu mỹ phẩm trên thị 



2

CHƯƠNG 1 

TỔNG QUAN 

1.1. TỔNG QUAN VỀ PARABEN 

1.1.1. Đặc điểm chung 

Paraben được biết đến là tên gọi chung của nhóm chất bảo quản hóa học 

được sử dụng trong nhiều loại mỹ phẩm, dược phẩm <strong>và</strong> <strong>một</strong> <strong>số</strong> sản phẩm thực 

phẩm. Paraben được tạo ra từ phản ứng ester hóa acid p-hydroxybenzoic. Cấu trúc 

hóa học chung của <strong>một</strong> <strong>paraben</strong> là para –hydroxybenzoat trong đó R có thể là <strong>một</strong> 

nhóm alkyl hay aryl. Trong <strong>số</strong> đó methyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> propyl<strong>paraben</strong> được sử dụng 

phổ biến nhất <strong>và</strong> chúng thường được dùng kết hợp với nhau trong các sản phẩm . 

Hình 1. 1. Cấu trúc chung của <strong>paraben</strong> 

Ở điều kiện bình thường các <strong>paraben</strong> là những tinh thể không màu hoặc tinh 

thể màu trắng, không có mùi, vị. Paraben tan trong các dung môi như methanol, 

ethanol, ete, glycerin, propylen glycol <strong>và</strong> tan ít hoặc gần như không tan trong nước. 

Paraben tan tốt hơn trong nước nóng. Mặc dù ít tan trong nước nhưng độ tan trong 

nước của <strong>paraben</strong> là vừa đủ để cho phép tạo được nồng độ có tác dụng. Khi tăng 

chiều dài chuỗi alkyl, độ tan trong nước giảm. Paraben hút ẩm <strong>và</strong> có hệ <strong>số</strong> phân bố 

dầu / nước cao. Bảng 1.1 tóm tắt <strong>một</strong> <strong>số</strong> tính chất vật lý <strong>và</strong> hóa học của <strong>paraben</strong>. 

Trong thương mại, <strong>paraben</strong> được sản xuất bằng ester hóa acid p- 

hydroxybenzoic với <strong>một</strong> alcol thích hợp với sự có mặt của <strong>một</strong> chất xúc tác (ví dụ 

acid sulfuric đậm đặc hoặc acid p-toluenesulfonic). Trong môi trường acid thì 

<strong>paraben</strong> ổn <strong>định</strong>. Trong dung dịch kiềm, <strong>paraben</strong> được thủy phân thành acid p- 

hydroxybenzoic <strong>và</strong> alcol tương ứng. Nói chung, với sự gia tăng chiều dài chuỗi 

alkyl, tính kháng của dung dịch <strong>paraben</strong> đối với sự thủy phân tăng lên. 



3

Methyl<strong>paraben</strong> được báo cáo là bị thủy phân cho acid p-hydroxybenzoic 

trong nước, với thời gian bán hủy (t1/2) <strong>và</strong>i chục giờ đối với sự phân hủy sinh học, 

đến <strong>và</strong>i chục ngày đối với sự thủy phân phi sinh học [11]. Paraben đã được mô tả là 

dễ phân huỷ sinh học trong điều kiện hiếu khí, với khả năng phân huỷ sinh học 

khoảng 90% nhu cầu oxy lý thuyết (đối với methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> 

propyl<strong>paraben</strong>) [11]. Tuy nhiên, González-Mariño <strong>và</strong> cộng sự (2011) lại cho rằng 

việc phân hủy sinh học bùn hoạt tính được thực <strong>hiện</strong> dễ hơn là các quá <strong>trình</strong> phi 

sinh học hoặc hấp phụ [18]. Các <strong>paraben</strong> đã nghiên <strong>cứu</strong> (methyl<strong>paraben</strong>, 

ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong>, butyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>) gần như hoàn toàn 

phân hủy sinh học (99%) trong vòng dưới 5 ngày, với thời gian bán hủy không quá 

3 ngày. Độ bền của các hợp chất tăng nhẹ với chiều dài của chuỗi alkyl <strong>và</strong> mức độ 

clo hóa. Thời gian bán hủy của dẫn chất halogen hóa của methyl<strong>paraben</strong> lên đến 10 

ngày [18]. 

Bảng 1. 1. Một <strong>số</strong> tính chất vật lý, hóa học 5 <strong>paraben</strong> bị cấm dùng trong mỹ phẩm. 

Tên <strong>paraben</strong> 

Alkyl 4-hydroxybenzoat 

Isopropyl Phenyl Isobutyl Benzyl Pentyl 

Công thức phân tử C10H12O3 C13H10O3 C11H14O3 C14H12O3 C12H16O3 

Khối <strong>lượng</strong> mol 180,22 214,22 194,25 228,25 208,25 

Nhiệt độ nóng 

chảy/điểm đông ( o C) 

Độ tan trong nước ở 

25 o C (g/100ml) 

Hệ <strong>số</strong> phân tán 

octanol/nước (log kow) 

- - 110-112 

- 0,01 



2,91 3,2 3,4 3,56 3,8 

Chlorin ở nồng độ thấp khi dùng để xử lý nước có thể phản ứng với <strong>paraben</strong> 

để tạo ra dẫn xuất clo [6]. Canosa <strong>và</strong> cộng sự (2006) quan sát thấy rằng ngay cả <strong>và</strong>i 

phút tiếp xúc giữa mỹ phẩm có chứa <strong>paraben</strong> (ví dụ: gel tắm) <strong>và</strong> nước máy có 

chlorin sẽ tạo thành các sản phẩm phụ có chứa clo <strong>và</strong> brom. Tỉ lệ phản ứng tăng 

theo nhiệt độ. Hiện tượng này là đáng báo động do sự ổn <strong>định</strong> cao của dẫn xuất diclo 

<strong>và</strong> tiềm ẩn tác dụng estrogen chưa được xác <strong>định</strong> rõ [6]. Hơn nữa, các dẫn xuất 

4

clo có độc tính đáng kể đối với các sinh vật thủy sinh so với các hợp chất mẹ tương 

ứng. 

1.1.2. Tác dụng kháng khuẩn của <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> viê ̣c sử duṇg <strong>paraben</strong> trong thực 

tiễn sản xuất 

Các <strong>paraben</strong> có tác dụng chống lại nhiều loại vi khuẩn, nấm men <strong>và</strong> nấm 

mốc nên thường được sử dụng làm chất bảo quản. Cơ chế hoạt động của các 

<strong>paraben</strong> <strong>hiện</strong> vẫn chưa được xác <strong>định</strong> rõ. Paraben được cho là phá vỡ quá <strong>trình</strong> vận 

chuyển chất qua màng hoặc ức chế tổng hợp ADN <strong>và</strong> ARN hay <strong>một</strong> <strong>số</strong> enzym quan 

trọng. Khả năng ức chế sự tăng trưởng vi khuẩn của <strong>paraben</strong> tăng lên cùng với sự 

gia tăng chiều dài của chuỗi alkyl. Tuy nhiên, cùng với sự gia tăng chiều dài của 

chuỗi alkyl, giá trị của hệ <strong>số</strong> phân tán octanol-nước tăng lên, dẫn đến giảm độ tan 

trong nước. Chính vì vậy để vừa đảm bảo hoạt tính kháng khuẩn lại vừa tan tốt, có 

thể thấy trong thực tế methyl<strong>paraben</strong> kết hợp với propyl<strong>paraben</strong> được sử dụng rộng 

rãi trong hoạt động bảo quản. Hoạt tính kháng khuẩn của <strong>paraben</strong> mạnh nhất với vi 

khuẩn Gram (+) <strong>và</strong> kém nhất đối với Pseudomonas [14]. 

Paraben có tính ổn <strong>định</strong> hóa học cao trong <strong>một</strong> khoảng biến thiên nhiệt độ 

rộng <strong>và</strong> dải pH từ 3 đến 8 [14]. Do có tính trơ về mặt hóa học, nó ít khi phản ứng 

với các thành phần trong sản phẩm. Paraben không có mùi hay vị, không gây ra sự 

thay đổi trong tính đồng nhất <strong>và</strong> màu sắc của sản phẩm. Sự kết hợp của các tính 

chất này làm cho việc tìm kiếm chất bảo quản thay thế thỏa đáng cho <strong>paraben</strong> sẽ là 

tương đối khó khăn. Các loại mỹ phẩm không chứa <strong>paraben</strong> thường có giá thành đắt 



<strong>và</strong> thời hạn sử dụng ngắn. Một <strong>số</strong> chất bảo quản thông dụng khác bao gồm 

formaldehyd (dung dịch trong nước còn gọi là fooc-môn), quaternium-15, 

imidazolidinyl urê, diazolidinyl urê <strong>và</strong> dimethyloldimethyl hydantoin [54]. Nhưng 

các chất bảo quản này thường gây phản ứng dị ứng <strong>và</strong> <strong>một</strong> <strong>số</strong> gây ra những ảnh 

hưởng nghiêm trọng đến sức khoẻ, như formaldehyd <strong>và</strong> mối liên hệ nhân quả với 

ung thư [54]. Việc sử dụng các chất bảo quản tự nhiên đã được ủng hộ, bao gồm 

chiết xuất từ hạt nho (GSE) [39]. Thật không may, GSE có thể tương tác với các 

thuốc do khả năng ức chế CYP3A4, <strong>một</strong> enzym quan trọng liên quan đến sự chuyển 

5

hóa của thuốc [39]. Các chất bảo quản tự nhiên khác bao gồm thymol, 

cinnamaldehyd, allyl isothiocyanat, acid citric, acid ascorbic <strong>và</strong> chiết xuất thảo mộc 

[39]. Các chất bảo quản tự nhiên này ức chế sự <strong>phát</strong> triển của vi sinh vật trong ống 

nghiệm, tuy nhiên <strong>một</strong> <strong>và</strong>i nghiên <strong>cứu</strong> về hoạt tính kháng khuẩn trong các sản phẩm 

thực phẩm đã mang lại kết quả không rõ ràng [39]. Vì vậy hiệu quả, an toàn <strong>và</strong> độc 

tính của chúng cần được bảo đảm trước khi sử dụng rộng rãi. 

Paraben từng được phân loại là hợp chất "thường được coi là an toàn" 

(GRAS) <strong>và</strong> được chấp thuận sử dụng trong thực phẩm bởi Cục quản lý thực phẩm 

<strong>và</strong> dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) <strong>và</strong> Liên minh châu Âu (EU). Paraben được sử dụng 

lần đầu tiên <strong>và</strong>o giữa những năm 1920 dưới dạng chất bảo quản trong dược phẩm. 

Sau này chúng được sử dụng rộng rãi làm chất bảo quản, phổ biến nhất là trong mỹ 

phẩm, rồi đến dược phẩm, ngoài ra còn dùng trong các mặt hàng thực phẩm <strong>và</strong> các 

sản phẩm công nghiệp. Một nghiên <strong>cứu</strong> đã xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> có trong 44 % mỹ 

phẩm được thử nghiệm [64]. Trong các sản phẩm chăm sóc cá nhân được thử 

nghiệm tại Hoa Kỳ, nồng độ methyl<strong>paraben</strong> lên đến 1,0%, với son môi chứa nồng 

độ cao nhất từ 0,15% đến 1,0%. Các <strong>paraben</strong> khác được sử dụng ở nồng độ thấp 

hơn methyl<strong>paraben</strong>. Methyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> propyl<strong>paraben</strong> là những chất <strong>paraben</strong> được 

sử dụng phổ biến nhất trong các sản phẩm dược phẩm với nồng độ lên đến 20% [9]. 

Cả hai chất bảo quản này cũng được sử dụng trong các sản phẩm thực phẩm như 

mứt, thạch, chất độn <strong>và</strong> các lớp phủ với nồng độ lên đến 0,1% [39]. Trong mỹ 

phẩm, <strong>paraben</strong> được coi là thành phần phổ biến nhất, chỉ sau nước. Ước tính khác 



cho thấy butyl<strong>paraben</strong> có trong 13% mỹ phẩm <strong>và</strong> các sản phẩm chăm sóc cá nhân 

trong khi vớ i propyl<strong>paraben</strong> và methyl<strong>paraben</strong> con số này là 48% [40]. Thời kì 

chuyển giao thiên niên kỉ, khi đã có <strong>một</strong> <strong>số</strong> nghiên <strong>cứu</strong> được công bố cho thấy hoạt 

tińh estrogen của <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> khả năng có thể gây ung thư thì các nhà sản xuất đã 

thay đổi thành phần của các sản phẩm mỹ phẩm của họ bằng cách thay <strong>paraben</strong> 

bằng các hệ bảo quản khác <strong>và</strong> đưa ra các công thức được gọi là "không <strong>paraben</strong>". 

Măt ̣ khác, theo báo cáo của Ủ y ban đánh giá thành phần mỹ phẩm [8] trên cơ sở dữ 

liệu của FDA, <strong>số</strong> <strong>lượng</strong> các công thức mỹ phẩm trong đó có sử duṇg <strong>paraben</strong> năm 

2006 cao hơn 1,7 lần so với năm 1981. Cụ thể, việc sử dụng năm 1981 là 13.200 

6

[32], trong khi năm 2006 nó đã lên đến 22.000 [8]. Tuy nhiên, hàm <strong>lượng</strong> <strong>paraben</strong> 

trong mỹ phẩm dường như giảm. Theo báo cáo tự nguyện nộp cho FDA năm 1981, 

nồng độ cho <strong>một</strong> <strong>paraben</strong> duy nhất lên đến 25% đối với methyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> 

propyl<strong>paraben</strong>, 5% đối với butyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> 1% đối với ethyl<strong>paraben</strong>. Hàm lươṇg 

các <strong>paraben</strong> thông thườ ng lên đến 1% [32]. Khoảng 14 năm sau, hàm lươṇg <strong>paraben</strong> 

trong 215 sản phẩm thử nghiệm trên thị trường Đan Mạch dao động từ 0,01% đến 

0,87% [48]. 

1.1.3. Sự <strong>hiện</strong> diện của <strong>paraben</strong> trong môi trường 

Việc sử dụng rộng rãi <strong>paraben</strong> trên toàn cầu đã dẫn đến sự xuất <strong>hiện</strong> của 

chúng ở nhiều nơi trong môi trường. Paraben đã được tìm thấy trong các dòng chảy 

của nhà máy xử lý nước thải [11]. Do đó, các hợp chất này đã được xác <strong>định</strong> trong 

các dòng sông <strong>và</strong> các nguồn nước uống [11]. Paraben đã được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong đất từ 

các cánh đồng nông nghiệp, có thể từ phương pháp tưới tiêu hoặc bón phân [11]. 

Bụi trong nhà cũng được tìm thấy chứa <strong>paraben</strong> [65]. Nồng độ <strong>paraben</strong> <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 

trong không khí trong nhà lên đến 21 ng/m 3 đối với methyl<strong>paraben</strong>, 4,0 ng/m 3 đối 

với ethyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> 3,2 ng/m 3 đối với butyl<strong>paraben</strong> [65]. Đáng ngạc nhiên là nồng 

độ <strong>paraben</strong> trong bụi cao hơn nhiều so với các chất <strong>paraben</strong> <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong bùn thải 

[65]. Mặc dù <strong>paraben</strong> được sử dụng thương mại có nguồn gốc tổng hợp, <strong>một</strong> <strong>số</strong> 

<strong>paraben</strong> được sinh ra từ các sinh vật <strong>số</strong>ng, cụ thể là do thực vật <strong>và</strong> vi khuẩn, <strong>một</strong> 

chủng vi khuẩn biển thuộc chi Microbulbifer. Các loại cây như việt quất, cà rốt, ô 

liu, dâu tây <strong>và</strong> các loại khác tạo ra <strong>paraben</strong> (chủ yếu là methyl<strong>paraben</strong>) giúp cho 



hoạt động kháng khuẩn của chúng [11]. Paraben có ở khắp mọi nơi <strong>và</strong> có thể nguồn 

ô nhiễm chính là các nhà máy xử lý nước thải. Mặc dù tỉ lệ loại bỏ <strong>paraben</strong> trong 

các công <strong>trình</strong> xử lý nước thải là cao (trung bình là 96,1-99,9%) [18] nhưng các chất 

gây ô nhiễm vẫn tồn tại trong nước thải (ở nồng độ lên đến 4000 ng/L) [86] dẫn đến 

rò rỉ <strong>và</strong>o môi trường. Tuy nhiên, các giá trị nồng độ quan sát thấy trong môi trường 

tự nhiên có vẻ như quá thấp để tạo ra các phản ứng phụ. Các nguồn chính mà con 

người tiếp xúc với <strong>paraben</strong> là các sản phẩm chăm sóc cá nhân <strong>và</strong> dược phẩm. Mức 

độ tiếp xúc được phản ánh qua việc thường xuyên <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> các hợp chất <strong>paraben</strong> 

trong nước tiểu, kể cả ở phụ nữ mang thai <strong>và</strong> trẻ em. Methyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> 

7

propyl<strong>paraben</strong> được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong hầu hết các mẫu nước tiểu được phân tích 

(trong đó methyl<strong>paraben</strong> xấp xỉ 100%, propyl<strong>paraben</strong> trên 80%) [11]. Hơn nữa, các 

chất bảo quản đã được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong huyết thanh, sữa mẹ, mô nhau thai, tinh dịch, 

đáng lưu ý nhất là <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> ở mô vú từ những bệnh nhân ung thư vú [3], [10]. Tuy 

nhiên, cần phải xem xét liệu nồng độ <strong>paraben</strong> mà chúng ta tiếp xúc đã đủ cao để gây 

ra <strong>một</strong> mối đe dọa đối với sức khoẻ con người hay chưa. 

1.1.4. Tác động của <strong>paraben</strong> đối với cơ thể con người 

1.1.4.1. Dược động học của <strong>paraben</strong> 

Paraben có thể xâm nhập <strong>và</strong>o cơ thể người qua da <strong>và</strong> qua đường tiêm. Nồng 

độ phơi nhiễm <strong>paraben</strong> trung bình hàng ngày ước tính khoảng 76 mg trong đó 50 

mg từ mỹ phẩm <strong>và</strong> các sản phẩm chăm sóc cá nhân, 25 mg từ các sản phẩm dược 

phẩm, <strong>và</strong> 1 mg từ thực phẩm [54]. Vì độ tan trong nước thấp, các <strong>paraben</strong> dễ dàng 

xâm nhập qua lớp sừng của da, <strong>và</strong> sau đó được giữ lại trong các lớp biểu bì. Paraben 

dùng cho da được chuyển hóa bằng enzym carboxylesterase của tế bào sừng, ở mức 

độ thấp hơn nhiều so với gan <strong>và</strong> các chất chuyển hóa liên hợp được bài tiết qua 

nước tiểu <strong>và</strong> mật. Paraben đường uống hoặc tiêm tĩnh mạch được chuyển hóa bởi 

các enzym esterase trong ruột <strong>và</strong> gan [9]. 

Sản phẩm chính của quá <strong>trình</strong> thủy phân <strong>paraben</strong> là acid hydroxybenzoic 

(pHBA). Các thử nghiệm trong phòng thí nghiệm trên chuột cho thấy trên 50% liều 

<strong>paraben</strong> không bị hấp thu sau khi dùng qua da [11]. Paraben uống hoặc tiêm dưới da 

chủ yếu được bài tiết qua nước tiểu, chủ yếu trong 24 giờ đầu. Tuy nhiên, 2% liều 



được áp dụng đã được giữ lại trong các mô, trong khi chưa tới 4% được thải trừ với 

phân [11]. Paraben <strong>và</strong> sản phẩm thủy phân của chúng được bài tiết qua nước tiểu 

dưới dạng tự do hoặc dạng liên hợp glycin, glucuronid <strong>và</strong> sulfat. Hiệu quả <strong>và</strong> mô 

hình thủy phân <strong>paraben</strong> trong cơ thể thay đổi đáng kể tùy thuộc <strong>và</strong>o độ dài chuỗi 

xoắn <strong>và</strong> mô [11]. Mặc dù da người chứa các chất đồng phân carboxylesterase, 

chúng có khả năng chuyển hóa <strong>paraben</strong> thành pHBA, nhưng mức độ thủ y phân liên 

kết ester có thể không đủ để thủy phân hoàn toàn <strong>paraben</strong> được sử dụng trong cơ 

thể. Thật thú vị, các nghiên <strong>cứu</strong> in vitro cho thấy <strong>paraben</strong> chịu sự thủy phân chậm 

8

hơn nhiều trong da người so với gan người, gan chuột <strong>và</strong> da chuột [33]. Sau khi 

tiêm dưới da, <strong>một</strong> phần của methyl<strong>paraben</strong> không bị thủy phân <strong>và</strong> do đó <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> 

hợp chất chưa được chuyển hóa có thể vẫn còn có sẵn trong cơ thể [45]. Ngoài ra, 

tổn thương da có thể dẫn đến tăng tỉ lệ hấp thụ methyl<strong>paraben</strong>. Pažoureková <strong>và</strong> các 

cộng sự (2013) ước tính rằng sau khi dùng nhũ tương có chứa <strong>paraben</strong> trên da bị tổn 

thương thì lươṇg methyl<strong>paraben</strong> không bị thủy phân tićh lũy trong cơ thể có thể lên 

tới 923 μg/kg/ngày [45]. Hơn nữa, phơi nhiễm <strong>paraben</strong> liên tục có thể dẫn đến sự 

tồn tại lâu dài <strong>và</strong> tích tụ [23]. 

1.1.4.2. Mẫn cảm <strong>paraben</strong> 

Ở những người có làn da bình thường, <strong>paraben</strong> hầu như không gây kích ứng. 

Tuy nhiên, <strong>paraben</strong> có thể gây kích ứng da, viêm da <strong>và</strong> gây bệnh rosacea ở những 

người dị ứng <strong>paraben</strong> (chiếm <strong>một</strong> tỉ lệ nhỏ trong dân <strong>số</strong>) . Tỉ lệ báo cáo nhạy cảm 

đối với <strong>paraben</strong> dao động từ 0,5% đến 3,5% [39]. Tỉ lệ nhạy cảm này là thấp nhất 

trong <strong>số</strong> các chất bảo quản [54]. Ngoài ra, có các báo cáo về phản ứng dị ứng quá 

mẫn tức thời với <strong>paraben</strong> dẫn đến nổi mày đay, trong <strong>một</strong> trường hợp dẫn đến co 

thắt phế quản. Tuy nhiên, các phản ứng dị ứng tức thời là rất hiếm. 

1.1.4.3. Paraben <strong>và</strong> <strong>hiện</strong> tượng lão hóa da 

Đáng chú ý là methyl<strong>paraben</strong> vốn được coi là chất ít có khả năng gây ra phản 

ứng bất lợi đã được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> thấy có ảnh hưởng không tốt đối với tế bào sừng của 

da người trong điều kiện kết hợp với tiếp xúc ánh sáng (UVB) [21]. Sự sản sinh các 



gốc tự do ôxy hóa (ROS) <strong>và</strong> nitric oxyd (NO) do UVB, cũng như hoạt hóa các nhân 

tố phiên mã nhaỵ cảm ôxy hóa (NFκB <strong>và</strong> AP-1) trong tế bào sừng đã được tăng lên 

đáng kể bởi methyl<strong>paraben</strong>. Hơn nữa, sự gia tăng đáng kể peroxid hóa lipid của tế 

bào sừng HaCaT đã xảy ra sau khi kết hợp UVB <strong>và</strong> tiếp xúc methyl<strong>paraben</strong>. Sự thay 

đổi của các yếu tố này có thể góp phần làm tăng sự chết tế bào [21]. Những <strong>phát</strong> 

<strong>hiện</strong> này chỉ ra tác động tiềm ẩn có hại đối với việc dùng các mỹ phẩm có chứa 

<strong>paraben</strong> trên da người, đặc biệt khi tiếp xúc với ánh sáng mặt trời. 

9

1.1.4.4. Paraben tiềm ẩn khả năng gây rối loạn nội tiết <strong>và</strong> ung thư vú 

Các nghiên <strong>cứu</strong> trên người <strong>và</strong> động vật đã không chứng minh được rằng 

<strong>paraben</strong> có bất kỳ mức độ độc tính cấp tính nào theo các đường dùng khác nhau. Vì 

vậy, nhiều nghiên <strong>cứu</strong> kiểm tra độc tính <strong>paraben</strong> đã tập trung <strong>và</strong>o các tác động lâu 

dài của tiếp xúc mạn tính. 

Hoạt tính estrogen của <strong>paraben</strong> lần đầu tiên được xác <strong>định</strong> <strong>và</strong>o năm 1998 <strong>và</strong> 

đã được xác nhận in vitro <strong>và</strong> in vivo [9], [49]. Paraben gắn với các thụ thể estrogen 

của con người, mặc dù có sự tương đồng kém hơn từ 10.000 đến 1.000.000 lần so 

với estradiol [49]. Butyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> propyl<strong>paraben</strong> có hoạt tính estrogen cao hơn 

methyl<strong>paraben</strong> hoặc ethyl<strong>paraben</strong>, nhưng butyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> propyl<strong>paraben</strong> được <strong>phát</strong> 

<strong>hiện</strong> có nồng độ thấp hơn methyl<strong>paraben</strong> ở người từ 10 đến 1000 lần [17]. Các tác 

dụng estrogen ở cơ thể đã được chứng minh bằng thử nghiệm tăng trưởng tử cung 

(uterine growth) ở chuột cống <strong>và</strong> chuột nhắt [9], [56]. Tuy nhiên, hiệu ứng này 

không ngăn được sự hình thành trứng thụ tinh, được coi là biện pháp nhạy nhất về 

độc tính của estrogen [56]. 

Mặc dù nhiều báo cáo đã xác nhận rằng <strong>paraben</strong> chịu sự thủy phân trong sinh 

vật [11], chúng được tìm thấy là hoàn toàn ổn <strong>định</strong> trong các tế bào ung thư vú 

MCF7 đồng nhất. Sự ổn <strong>định</strong> của <strong>paraben</strong> có thể dẫn đến sự tích tụ của chúng trong 

mô khối u vú. Tuy nhiên, Barr <strong>và</strong> cộng sự (2012) đã không tìm thấy bất kỳ mối 

tương quan đáng kể giữa mức <strong>paraben</strong> trong mô vú <strong>và</strong> tuổi của bệnh nhân [3]. 

Paraben đã được tìm thấy trong các mẫu mô của khối u vú ở người. Giá trị trung 



bình của nồng độ tổng <strong>paraben</strong> trong mô khối u của vú tương ứng là 20,6 ± 4,2 ng/g 

(n = 20) <strong>và</strong> 9.794 ng/g (n = 9) đối với các mẫu từ Anh <strong>và</strong> Ấn Độ [10], [55]. Nồng 

độ <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> cao nhất trong khối u là 26.469 ng/g đối với butyl<strong>paraben</strong> [55]. Darbre 

<strong>và</strong> cộng sự (2004) cho rằng sự <strong>hiện</strong> diện của <strong>paraben</strong> trong mô khối u vú có thể liên 

quan đến sự sinh ung thư [10]. Một <strong>số</strong> nhà khoa học cũng đã tranh luận về sự <strong>hiện</strong> 

diện của <strong>paraben</strong> trong mô ung thư vú <strong>và</strong> tác động có hại của <strong>paraben</strong> [17]. Dữ liệu 

về ung thư vú của <strong>paraben</strong> cho thấy không có hoặc có nồng độ thấp <strong>paraben</strong> ở <strong>một</strong> 

nhóm nhỏ các bệnh nhân <strong>và</strong> không có sự so sánh với các kiểm soát thông thường 

10

[3], [10]. Cũng không thể nhận dạng được nguồn <strong>paraben</strong> ở 7/40 bệnh nhân được 

xác <strong>định</strong> có nhiễm <strong>paraben</strong> nhưng lại chưa bao giờ sử dụng mỹ phẩm. Cũng không 

có mối tương quan giữa nồng độ <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> tuổi bệnh nhân (37-91 tuổi), thời gian 

cho bú sữa (0-23 tháng), vị trí khối u hoặc bản chất thụ thể estrogen khối u [3]. Do 

đó, không có mối liên hệ rõ ràng, rất khó để đưa ra mối quan hệ nhân quả giữa 

<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> sự <strong>phát</strong> triển của ung thư vú. 

Một hướng nghiên <strong>cứu</strong> khác là ảnh hưởng của <strong>paraben</strong> đối với hệ thống sinh 

sản nam giới, nhưng các <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> cũng mâu thuẫn [26]. Một nghiên <strong>cứu</strong> in vitro 

cho thấy tinh trùng người không thể <strong>số</strong>ng được khi tiếp xúc với <strong>paraben</strong> ở nồng độ 1 

mg/mL [57]. Các nghiên <strong>cứu</strong> in vivo ở chuột cống lại cho thấy không có tác dụng 

gây độc tinh trùng ở nồng độ <strong>paraben</strong> 1% [43]. Các kết quả trái ngược nhau cũng 

được báo cáo ở chuột nhắt, <strong>một</strong> nghiên <strong>cứu</strong> cho thấy <strong>số</strong> <strong>lượng</strong> <strong>và</strong> hoạt động tinh 

trùng giảm xuống, còn <strong>một</strong> nghiên <strong>cứu</strong> khác cho thấy không có tác dụng phụ về 

sinh sản [26]. Ở những người đàn ông có vấn đề về khả năng sinh sản bao gồm <strong>số</strong> 

<strong>lượng</strong> tinh trùng thấp <strong>và</strong> khả năng di chuyển của tinh trùng giảm được khảo sát phơi 

nhiễm <strong>paraben</strong> bằng đo nồng độ <strong>paraben</strong> trong nước tiểu [11]. Không tìm thấy sự 

tương quan giữa <strong>lượng</strong> tinh trùng hoặc tính di động với nồng độ <strong>paraben</strong>. 

Nồng độ <strong>paraben</strong> ở liều thấp khoảng 10 mg/kg/ngày gây stress ôxy hóa thông 

qua peroxid hóa lipid [11], làm thay đổi trọng <strong>lượng</strong> tử cung chuột cái [11] <strong>và</strong> thay 

đổi việc sản sinh tinh trùng hàng ngày ở chuột đực [43]. Hơn nữa, việc tiếp xúc của 

chuột mẹ với isobutyl<strong>paraben</strong> liều thấp có thể ảnh hưởng không tốt đến sự <strong>phát</strong> triển 

của con đực ở tuổi trưởng thành liên quan đến trạng thái lo âu <strong>và</strong> hành vi ở chuột 

[11]. 



Một <strong>và</strong>i nghiên <strong>cứu</strong> liên quan đến quần thể con người đã tìm ra mối liên hệ 

yếu giữa nồng độ <strong>paraben</strong> trong nước tiểu <strong>và</strong> gen chỉ thị stress oxy hóa, suy giảm 

ADN tinh trùng hay các hoóc môn tuyến giáp trong huyết thanh [11]. Mặc dù sự 

tương quan có thể là ngẫu nhiên, nhưng dường như không hợp lý để loại trừ giả 

thiết rằng <strong>paraben</strong>, thậm chí ở nồng độ thấp, ảnh hưởng đến sự cân bằng nội môi 

của cơ thể. Hơn nữa, <strong>paraben</strong> ở nồng độ <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> trong mô vú của con người đã 

11

được tìm thấy gây ra sự gia tăng các tế bào trong ống nghiệm, đặc biệt khi đấy là 

hỗn hợp các <strong>paraben</strong> [7]. Khi con người có thể liên tục tiếp xúc với <strong>một</strong> <strong>số</strong> <strong>paraben</strong> 

khác nhau, tác động bất lợi tiềm tàng của chất bảo quản là đáng nghi ngại. Rối loạn 

nội tiết ở môi trường thường là <strong>một</strong> ảnh hưởng của việc tiếp xúc không phải chỉvới 

<strong>một</strong> hợp chất đơn lẻ, mà thường là với <strong>một</strong> <strong>số</strong> chất ở nồng độ thấp. Mặc dù ở các 

nồng độ dưới mức tác dụng quan sát được (được gọi là nồng độ không quan sát 

được tác dụng - NOEC), <strong>một</strong> hỗn hợp các chất gây gián đoạn nội tiết (EDCs) có thể 

gây phản ứng estrogen [4]. Darbre (2009) đã kiểm tra tác động của <strong>paraben</strong> đối với 

sự gia tăng tế bào ung thư vú MCF 7. Kết quả cho thấy <strong>paraben</strong> hỗn hợp ở nồng độ 

NOEC có thể tạo phản ứng estrogen bằng cách gia tăng sự tăng trưởng tế bào trong 

các tế bào ung thư vú MCF 7. Hơn nữa, phản ứng estrogen của hỗn hợp <strong>paraben</strong> có 

thể được tăng cường tại thời điểm nồng độ estradiol có mặt ở mức thấp. Trong cơ 

thể, điều này có thể xảy ra trong chu kỳ kinh nguyệt, trước tuổi dậy thì hoặc sau khi 

mãn kinh. Kim <strong>và</strong> cộng sự (2012) cho biết ảnh hưởng của sự kết hợp bisphenol A 

(BPA) <strong>và</strong> isobutyl<strong>paraben</strong> (IBP). Kết quả cho thấy rằng BPA <strong>và</strong> IBP có thể có thêm 

<strong>một</strong> tiềm năng tăng estrogen thông qua con đường thụ thể trung gian estrogen [27]. 

Các hiệu ứng bổ sung <strong>và</strong> hiệp đồng có thể có của <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> EDCs khác sẽ là vô 

cùng quan trọng, bởi vì con người thường là tiếp xúc với <strong>một</strong> hỗn hợp các chất chứ 

không phải là <strong>một</strong> hợp chất duy nhất. 

Do đó, không thể bỏ qua vai trò có thể có của <strong>paraben</strong> trong quá <strong>trình</strong> gây 

ung thư. Cần phải nghiên <strong>cứu</strong> thêm, bao gồm các nghiên <strong>cứu</strong> về cỡ mẫu lớn liên 



quan đến con người để đánh giá những tác động bất lợi của <strong>paraben</strong>. Ngoài ra, cần 

phải kiểm tra ảnh hưởng của <strong>paraben</strong> trên các mô nhạy cảm steroid khác, đặc biệt ở 

những người có vấn đề về hệ miễn dịch <strong>và</strong> hệ thần kinh trung ương. 

1.1.5. Một <strong>số</strong> phương pháp phân tích <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm 

Một <strong>số</strong> phương pháp phân tích để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> có thể được tìm thấy 

trong cuốn sách do Salvador <strong>và</strong> Chisvert biên soạn từ năm 1980 đến năm 2006 [2]. 

Wang <strong>và</strong> Liu tổng hợp <strong>và</strong> đánh giá cách xử lý mẫu <strong>và</strong> phương pháp phân tích dụng 

cụ được sử dụng trong việc xác <strong>định</strong> các chất bảo quản khác nhau trong mỹ phẩm 

12

[44]. Trong những năm qua, các đánh giá khác nhau liên quan đến chủ đề này đã 

được công bố. Nhìn chung, sự phức tạp của các nền mẫu mỹ phẩm <strong>và</strong> các trạng thái 

thể chất khác biệt của chúng đã dẫn đến sự <strong>phát</strong> triển của rất nhiều các phương pháp 

phân tích khác nhau. Chiết pha rắn (SPE) rồi sắc kí lỏng hiệu năng cao với detector 

UV (HPLC-UV) hoặc sắc kí khí với detector quang phổ khối (GC-MS) thường 

được sử dụng rộng rãi để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. 

Phương pháp chính thức để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm thì chỉ có 

phương pháp do EU thiết lập (Hình 1.2). Quy <strong>trình</strong> này phải qua nhiều khâu cho cả 

<strong>định</strong> tính <strong>và</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> <strong>paraben</strong>. Mặc dù vậy, trong <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> <strong>định</strong> tính thì acid 4- 

hydroxybenzoic, methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong> benzyl<strong>paraben</strong> là không tách biệt. 

Ngoài ra sự đồng tan của nhiều chất bảo quản khác <strong>và</strong> phụ gia mỹ phẩm là có thể 

ảnh hưởng đến việc <strong>định</strong> <strong>lượng</strong>. Như vậy cần phải cải tiến phương pháp xử lý mẫu 

sao cho đơn giản, giảm thời gian xử lý, <strong>và</strong> để thu được các thông <strong>số</strong> phân tích tốt 

hơn. Mục tiêu chính là nhằm đơn giản hóa việc chuẩn bị mẫu khi không gă ̣p vấn đề 

về nền mâũ. 



13

MẪU MỸ PHẨM (1g) 

ĐỊNH TÍNH 

Acid hóa bằng 4 giọt HCl 

ĐỊNH LƯỢNG 

Thêm 1 ml H 2SO 4 2M <strong>và</strong> 50 ml 

EtOH/H 2O (10:1) 

Chiết (40 ml Aceton, 60°C) 

Thêm 10 ml chuẩn nội 

Điều chỉnh pH đến 3 

Lắc (1 phút) 

Lắc 1 phút 

Làm lạnh 

Đun nóng 60°C (5 phút) 

Thêm 60 ml nước <strong>và</strong>o 20 ml dịch chiết mẫu 

Điều chỉnh pH đến 10 

Thêm 1g CaCl 2. 2H 2O, lắc 

Làm nguội 

Để trong tủ lạnh 1 giờ 



Lọc 

Chiết bằng 75 ml diethyl ether, lắc 1 phút 

Lọc 

Điều chỉnh pH của lớp nước tới 2 

(HCl)Chiết bằng diethyl ether trong 10phút, 

lắc 1 phút 

TLC 

14 

HPLC-UV 

Cột Nucleosil C18 hoặc tương 

đương 

Hình 1. 2. Phương pháp phân 

tích chính thức do liên minh 

châu Âu ban hành để <strong>định</strong> tính 

<strong>và</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> <strong>paraben</strong> trong 

mỹ phẩm.

1.1.6. Cá c phương phá p xử lý mẫu 

Một <strong>số</strong> <strong>lượng</strong> lớn các phương pháp dựa trên sự pha loãng đơn giản và đồng 

nhất của dung môi pha loãng vớ i mẫu thử đã được công bố. Tuy nhiên, nhiễu nền có 

thể xảy ra do không có sự loại bỏ nền mẫu trong các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> này. Pha loãng mẫu 

được thực <strong>hiện</strong> với dung môi, chẳng hạn như methanol [51], [62], ethanol [5], n- 

propanol [25], ethyl acetate [30], hoặc thậm chí là nước [46]. Đồng nhất mẫu pha 

loãng thường được thực <strong>hiện</strong> bằng lắc xoáy, khuấy trộn hoặc siêu âm [5]. 

Trong hầu hết các trường hợp, pha loãng mẫu <strong>và</strong> đồng nhất hóa được thêm 

các bước tách bổ sung, ly tâm hoặc lọc, để loại bỏ <strong>một</strong> tỉ lệ lớn nền mẫu [62], [51]. 

Các quá <strong>trình</strong> khác, như đun nóng, có thể là cần thiết khi mẫu có chứa <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> 

lớn các thành phần tan trong chất béo [25], [12]. Nói chung, thời gian chuẩn bị mẫu 

từ 3-75 phút. Các kỹ thuật phân tách như sắc kí lỏng (LC) [62], [25], [12], điện di 

mao quản (CE) [51], [46], [5] hoặc ít gặp hơn - sắc kí khí (GC) [30] là cần thiết để 

giúp tránh các nhiễu còn lại. Kỹ thuật điện hóa hầu như không được sử dụng cho 

mục đích này. 

Một <strong>số</strong> vấn đề có thể gặp phải như ảnh hưởng nền mẫu với propyl<strong>paraben</strong> 

hoặc methyl<strong>paraben</strong> [62], sự tuyến tính kém trong việc <strong>dựng</strong> đường chuẩn đối với 

methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong>, butyl<strong>paraben</strong> [51]. Phương pháp thêm 

chuẩn là cần thiết để <strong>dựng</strong> đường chuẩn trong nhiều trường hợp [5]. Ngoài ra, trực 

tiếp tiêm mẫu có thể làm giảm tuổi thọ của cột sắc kí. Ví dụ, Sottoffatori và côṇg sự 

[12] đã báo cáo sự xuống cấp của cột trong sắc kí lỏng sau 100 lần tiêm. Do đó, cần 



sử dụng các phương pháp thích hợp để chiết xuất <strong>paraben</strong> trước khi tách sắc kí để 

loại trừ nhiễu nền. Một loạt các phương pháp chiết xuất đã được công bố trong 

những năm gần đây:chiết pha rắn (SPE), chiết xuất pha rắn với sợi (SPME), vi 

chiết pha lỏng (LPME), chiết xuất siêu tới hạn (SFE) <strong>và</strong> chiết lỏng cao áp (PLE)… 

để cải t<strong>hiện</strong> việc tách các nhiễu nền. Số <strong>lượng</strong> các ứng dụng của các phương pháp 

này đang ngày càng gia tăng. Tuy nhiên, <strong>một</strong> <strong>số</strong> vấn đề còn tồn tại, cụ thể là: 

(1) SFE có thể được sử dụng để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm mà không 

cần tiền xử lý mẫu, nhưng điều chỉnh độ phân cực <strong>và</strong> áp lực vận hành cao là cần thiết; 

15

(2) Không thể được loại bỏ hoàn toàn việc tiền xử lý mẫu khi SPE <strong>và</strong> SPME, 

đặc biệt trong pha loãng mẫu là cần thiết, tuy nhiên lại làm giảm độ nhạy; 

(3) Mặc dù các chất hấp thụ liên kết hóa học silica như C18 hoặc C8 được 

dùng phổ biến trong xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong>, nhưng vấn đề chọn lọc sử dụng các pha cần 

được quan tâm; 

(4) Các mẫu mỹ phẩm có thể gây tắc nghẽn các cột SPE <strong>và</strong> rút ngắn tuổi thọ 

sợi trong SPME. 

Các cách tiền xử lý mâũ đơn giản như chiết lỏng lỏng - LLE thông thường 

hiếm khi được sử dụng để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm, do môṭ số vấn đề <strong>phát</strong> 

sinh [41], đặc biệt là sự hình thành nhũ tương ổn <strong>định</strong>. Garcia Jimenez và côṇg sự 

[24] đã trộn mẫu với 1 mL HCl (1: 1) <strong>và</strong> 10 mL NaCl bão hòa, 50 mL dietyl ether 

được sử dụng làm pha hữu cơ để chiết <strong>paraben</strong> từ keo bọt <strong>và</strong> gel làm sạch. Sau ba 

lần chiết liên tiếp, dịch chiết đã được xử lý qua các bướ c sau đây: (1) Làm sạch với 

NaCl bão hòa <strong>và</strong> dung dịch NaHCO3; (2) Làm khô bằng Na2SO4; (3) Lọc; (4) Bốc 

hơi đến khô; (5) Hòa tan với acetonitrile (ACN). Một cột sắc ký nguyên khối trong 

ống phân tićh dòng chảy (FI) phân tách MP, EP, PP <strong>và</strong> BP trong các dich ̣ chiết này. 

Khả năng tự động hóa được coi là <strong>một</strong> ưu điểm, nhưng khả năng tách các <strong>paraben</strong> 

khác nhau đã bi ḥạn chế bở i chiều dài cột. 

1.1.6.1. Chiết pha rắn – kĩ thuật mới để chiết <strong>paraben</strong> từ mỹ phẩm 

Như đã đề cập ở trên, việc sử dụng chiết lỏng lỏng đặt ra các vấn đề thực tế 



khi phân tích các mẫu mỹ phẩm, đặc biệt là sự hình thành nhũ tương, các bước bổ 

sung <strong>và</strong> tốn nhiều dung môi hữu cơ [41]. Chiết pha rắn cải t<strong>hiện</strong> các vấn đề này, do 

đó rất nhiều ứng dụng của chiết pha rắn để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> đã được công bố. 

Một <strong>số</strong> bướ c tiền xử lý mẫu là bắt buộc trước SPE, vì các mẫu mỹ phẩm có 

thể làm tắc cột. Bao gồm các cách pha loãng, đồng nhất <strong>và</strong> ly tâm/lọc. Ví dụ, Han et 

al. [15] đã phân tích các loại kem, gel hoặc lotion có dầu, sau khi khuấy chúng với 

ethanol, lọc, rửa với hỗn hợp đệm natri tetraborat <strong>và</strong> ACN, pha loãng với nước <strong>và</strong> 

đuổi khí. Sau đó, việc chiết xuất <strong>paraben</strong> được thực <strong>hiện</strong> bằng cách sử dụng cột C8 

16

trên <strong>một</strong> hệ thống sắc ký điện động micell SPE phân tích dòng phun (FIA-SPE- 

MEKC). Mặc dù vậy, nó không ngăn cản sự hình thành các bong bóng trong quá 

<strong>trình</strong> rửa giải với loại mẫu này. 

Vì các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> SPE phụ thuộc rất nhiều <strong>và</strong>o tính chất của chất hấp thụ, nên 

việc lựa chọn chất hấp thu ̣rất quan trọng đối với việc xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong>. Các phân tử 

<strong>paraben</strong> có pKa gần 8, viê ̣c điều chỉnh pH mẫu cho phép sử dụng các pha không 

phân cực <strong>và</strong> phân cực để xác <strong>định</strong> chúng. Các chất hấp thụ liên kết hoá học có chứa 

silica, chẳng hạn như C18 hoặc C8 (pha đảo để chiết xuất chất không phân cực đến 

các hợp chất trung bình), là phổ biến nhất trong xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong>. Tuy nhiên, <strong>một</strong> 

<strong>số</strong> vấn đề chọn lọc liên quan đến việc sử dụng các pha này đã được nhấn mạnh [20], 

vì vậy có thể cần các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> bổ sung, như làm khô <strong>và</strong> pha loãng, lọc <strong>và</strong> siêu âm 

sau khi SPE để cải t<strong>hiện</strong> việc tách sắc ký khi sử dụng HPLC. 

Để tăng tính chọn lọc, các chất hấp thụ mới đã được đề xuất, như là các ống 

nano cacbon (CNTs), graphene <strong>và</strong> các hạt từ được chức hóa. Các loại CNT đa vách 

(MWCNTs), với bề mặt có tính kị nước cao, tạo thuận lợi cho việc hấp thụ <strong>paraben</strong> 

theo cách chọn lọc, có thể tái tạo được khi sử dụng <strong>một</strong> pH thích hợp để tránh ion 

hóa <strong>paraben</strong> (trong trường hợp này là pH3). Các mẫu mỹ phẩm đã được pha loãng 

với nước để giảm thiểu sự chồng chéo lên nhau các tín hiệu sắc ký của MP, EP <strong>và</strong> 

các thành phần nền nhất <strong>định</strong>. Bước clean-up giữa các mẫu cho phép tái sử dụng 

cùng <strong>một</strong> cột lên đến 200 lần. Gần đây, <strong>một</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> chiết pha rắn dựa trên 



graphene đã được <strong>phát</strong> triển cho phân tićh MP, EP, PP <strong>và</strong> BP trong các mẫu mỹ 

phẩm, xác <strong>định</strong> bởi điêṇ di mao quản. Độ thu hồi từ 62,6 đến 100,4% [42]. 

Các hạt nano từ tính bề mặt được chức hóa (NPs) cũng được sử dụng để 

chiết xuất ba <strong>paraben</strong> trong mẫu anion (pH> 8) từ kem <strong>và</strong> các mẫu kem đánh răng 

[13]. Các NPs Fe3O4 tổng hợp đã được phủ polyaniline pha tạp sunfat bằng phương 

pháp trùng hợp anilin với sự <strong>hiện</strong> diện của NPs <strong>và</strong> môi trường sulfuric. Các NPs 

điện tích dương có thể giữ lại <strong>paraben</strong> bằng tương tác tĩnh điện, nhưng phải cần đến 

tiền xử lý mẫu trước đó (siêu âm với methanol, pha loãng nước, ly tâm, lọc <strong>và</strong> pha 

loãng nước). Những NPs này có thể được sử dụng cho bốn lần chiết xuất liên tiếp 

17

<strong>và</strong> tái tạo bởi ACN. Nhìn chung, <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> SPE này được đặc trưng bởi thời gian 

chiết ngắn <strong>và</strong> không cần bước ly tâm hoặc lọc. 

1.1.6.2. Phân tán pha rắn - Matrix solid-phase dispersion (MSPD) 

MSPD được sử dụng thành công cho các mẫu nhớt, rắn hoặc bán rắn, vì vậy 

nó rất phù hợp với các mẫu mỹ phẩm. Trong các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> MSPD, mẫu được phân 

tán lên chất hấp thụ rắn <strong>và</strong> sau đó được đưa <strong>và</strong>o <strong>một</strong> cột để phân tách. Phương thức 

SPE này đã được đề xuất để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong nhiều loại mỹ phẩm, chẳng hạn 

như các sản phẩm lưu lại trên da <strong>và</strong> sản phẩm rửa trôi (ví dụ kem dưỡng thể, kem 

dưỡng ẩm, kem chống rạn da, kem bôi tay, make-up, kem chống nắng, thuốc khử 

mùi, dầu gội đầu, xà phòng nước <strong>và</strong> xà phòng rửa tay) [28]. Mẫu mỹ phẩm trộn với 

chất làm khô (Na2SO4) <strong>và</strong> <strong>một</strong> chất phân tán (Florisil, alumina trung tính, C18, 

silica gel hoặc cát) <strong>và</strong>o <strong>một</strong> cối thủy tinh. Tính chất của chất phân tán có tầm quan 

trọng đặc biệt đối với việc chiết xuất <strong>paraben</strong>. Hỗn hợp đã được chuyển <strong>và</strong>o <strong>một</strong> cột 

với Florisil, <strong>và</strong> hexane / axeton (1: 1) để lấy <strong>một</strong> dịch chiết 5 mL. Tạo dẫn xuất với 

anhydrit axetic <strong>và</strong> GC-MS được sử dụng để xác <strong>định</strong>. Đây là <strong>một</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> nhanh 

gọn <strong>và</strong> chi phí thấp có thể được thực <strong>hiện</strong> dễ dàng trong các phòng thí nghiệm thông 

thường. 

1.1.6.3. Vi chiết xuất pha rắn ở dạng phân tán - Dispersive micro-solid-phase 

extraction (D-SPE) 

Trong khi sử dụng cột có thể hạn chế áp dụng SPE cho mỹ phẩm thì các chế 



độ SPE thay thế có thể tạo điều kiện cho việc phân tích loại mẫu này. D-SPE là <strong>một</strong> 

lựa chọn thú vị, vì nó chỉ đòi hỏi <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> nhỏ chất hấp thụ rắn để khai thác. Nói 

chung, các vấn đề liên quan đến sự tắc nghẽn cột <strong>và</strong> sự chậm trễ của các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> 

vận hành được loại bỏ. Kỹ thuật này đã được sử dụng để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong 

dung dịch nước súc miệng <strong>và</strong> kem rửa tay, sử dụng các NPs từ tính chức hóa 

aminopropyl bằng GC với detector ion hoá ngọn lửa (GC-FID) [33]. Chỉ có 5 mg 

NPs được sử dụng cùng với 10 mL dung dịch mẫu. Mặc dù vậy, tiền xử lý mẫu là 

cần thiết. Mẫu nước súc miệng được pha loãng hai lần với nước <strong>và</strong> kem tay đã được 

18

pha loãng 5000 lần, siêu âm trong 30 phút <strong>và</strong> ly tâm trước khi chiết. Các NPs từ tính 

được thu lại <strong>một</strong> cách dễ dàng ở đáy của ống hình nón bằng cách sử dụng từ trường 

bên ngoài. Độ thu hồi từ 87 đến 100%. 

1.1.6.4. Chiết xuất pha rắn với sợi - Solid-phase microextraction with 

fibers (SPME) 

SPME được <strong>phát</strong> triển như <strong>một</strong> giải pháp thay thế nhỏ gọn cho SPE, do chỉ 

sử dụng <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> nhỏ chất hấp thụ. Cấu hình phổ biến nhất của SPME bao gồm 

các sợi silica nung chảy phủ polymer phù hợp như chất hấp thụ. Có thể sử dụng hai 

chế độ SPME với sợi (SPME trực tiếp <strong>và</strong> SPME không gian hơi). Do tính chất 

không bay hơi của <strong>paraben</strong> nên trong phần lớn các trường hợp thườ ng sử dụng 

SPME trực tiếp, tuy nhiên SPME không gian hơi cũng đã được áp dụng cho xác 

<strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. Việc xử lý làm giàu mẫu trước là cần thiết cho việc 

áp dụng SPME trực tiếp <strong>và</strong>o mỹ phẩm. Mặc dù SPME không gian hơi có thể thuận 

lợi do không tiếp xúc với mẫu nhưng các <strong>paraben</strong> phải được dâñ xuất hóa khi sử 

dụng chế độ này. 

Như trong SPE, độ phân cực của <strong>paraben</strong> xác <strong>định</strong> loại lớp phủ được sử 

dụng. Các sợi silica thương mại phủ polyacrylate (PA) thường được sử dụng để 

chiết xuất các hợp chất này ở dạng ion hóa. Đặc biệt, Tsai và côṇg sự [59] đánh giá 

các sợi thương mại khác nhau được phủ PA polydimethylsiloxane (PDMS), 

polydimetylsiloxan / divinylbenzen (PDMS / DVB), carboxen / polydimetyl-siloxan 



(CAR / PDMS) <strong>và</strong> Carbowax / divinylbenzene (CW / DVB). Việc xử lý mẫu trước 

là cần thiết. Do đó, ethanol được sử dụng để pha loãng <strong>và</strong> cải t<strong>hiện</strong> sự phân tán của 

mẫu (0,1g mâũ trong 2 mL ethanol) <strong>và</strong> cần phải pha loãng với nước. PA cho hiệu 

quả khai thác lớn nhất đối với <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. 

Các chất hấp thụ mới cũng đã được đề xuất để đạt được tính chọn lọc, độ lặp 

lại <strong>và</strong> hiệu suất chiết cao hơn. C iuvašovaitea và côṇg sự [61] đã sử dụng <strong>một</strong> lớp 

polyaniline-polypyrrole lắng đọng bằng điện hóa cho việc chiết xuất MP, EP <strong>và</strong> PP 

trong các loại nước dưỡng trên mặt đã được pha loãng 10 lần trước khi phân tích. 

19

Sự chọn lọc của lớp phủ là chìa khóa trong công việc này, ưu tiên là các 

hydrocarbon thơm trong sự có mặt alcol mạch ngắn <strong>và</strong> ceton. Lớp phủ này có hiệu 

quả để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm có chứa ethanol bằng GC-FID. Phương 

pháp thêm chuẩn là cần thiết để lập đường chuẩn. 

Fei và côṇg sự [16] đã sử dụng quá <strong>trình</strong> trùng hợp gây ra bởi tia cực tím của 

diacrylate poly (ethylene glycol) để có được các sợi thích hợp nhằm xác <strong>định</strong> 

<strong>paraben</strong> không anion trong mỹ phẩm. Tính ổn <strong>định</strong> <strong>và</strong> khả năng tái lặp tốt, diện tích 

bề mặt có nhiều nếp <strong>và</strong> hiệu suất chiết cao. Để tiền xử lý mâũ, các loại mỹ phẩm 

khác nhau, chẳng hạn như kem chống nắng, kem/ nước thoa tay đã được pha loãng 

với dung dịch NaCl ở pH 5 (tỷ lệ pha loãng 1:25) <strong>và</strong> siêu âm trong 10 phút. Ở đây 

có thể sử dụng phương pháp tiền xử lý đơn giản nhờ đặc tính không tắc nghẽn của 

các sợi này. 

Chỉ có <strong>một</strong> ứng dụng của SPME không gian hơi đã được công bố để xác <strong>định</strong> 

<strong>paraben</strong>. Yang <strong>và</strong> cộng sự [60] kết hợp chiết xuất siêu tới hạn, dẫn xuất hóa tại chỗ 

<strong>và</strong> SPME không gian hơi đối với GC-MS để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> các chất chống 

oxy hoá polyphenolic trong mỹ phẩm. Silylate hóa với N, O-bis (trimethylsilyl) 

trifluoroacetamid <strong>và</strong> sản phẩm sau đó được hấp phụ trên sợi PA. 

1.1.6.5. Chiết xuấ t hấ p thu ̣ trên thanh khuấ y - Stir-bar sorptive extraction 

(SBSE) 

Trong SBSE, sơị hấp thu ̣ được thay thế bằng <strong>một</strong> thanh khuấy được phủ vật 



liệu hấp thu ̣. SBSE cho phép <strong>một</strong> lớp phủ lớn hơn nhiều so với SPME, vì vậy việc 

chiết tách chất phân tích được tăng cường. Quy triǹh SBSE rất đơn giản. Mặc dù có 

những lợi thế như vâỵ nhưng chỉ có Melo và côṇg sự [31] đã dùng SBSE để xác 

<strong>định</strong> MP, EP, PP <strong>và</strong> BP trong mỹ phẩm bằng LC-UV. Một thanh khuấy thương mại 

có phủ sẵn PDMS được đưa <strong>và</strong>o lọ được đun nóng ở 40°C với 50 mg mẫu trước đó 

pha loãng với 100 mL đệm phosphate (pH 5, <strong>paraben</strong> không ion hóa). Giải hấp thu ̣ 

với 1 ml pha động (methanol / nước) trong 20 phút. Hơn 100 dich ̣ chiết xuất với 

thanh khuấy đã được xác nhận. 

20

Như trong SPE <strong>và</strong> SPME, cần thiết phải pha loãng mẫu đáng kể để tránh các 

hiệu ứng nền gây ra bởi việc chiết tách các thành phần không phân cực <strong>và</strong> phân cực 

thấp từ mỹ phẩm. SBSE có giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> (LOD) tương tự như thu được trong 

SPE hoặc SPME trong xác điṇh <strong>paraben</strong>. Ngoài ra, do chỉ các thanh PDMS có khả 

năng thương mại hóa nên đã hạn chế viê ̣c sử dụng kỹ thuật này. 

1.1.6.6. Kỹ thuật dựa trên vi chiết pha lỏng - Liquid-phase microextractionbased 

techniques (LPME) 

Sự thu goṇ quá <strong>trình</strong> chiết dung môi cổ điển đã thúc đẩy <strong>phát</strong> triển các 

phương pháp khác nhau nhằm giảm thiểu việc sử dụng các dung môi độc hại <strong>và</strong> tích 

hợp lấy mẫu, chiết tách, tạo tiền chất <strong>và</strong> thậm chí taọ dẫn xuất. Mặc dù sử dụng haṇ 

chế LPME cho các nền mâũ phức tạp, <strong>một</strong> <strong>số</strong> cách tiếp cận của nó đã được sử dụng 

để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong các mẫu mỹ phẩm, chẳng hạn như vi chiết đơn gioṭ 

(single-drop microextraction - SDME), vi chiết pha lỏng sơị rỗng (hollow-fiber 

liquid-phase microextraction - HF-LPME) <strong>và</strong> vi chiết lỏng – lỏng phân tán 

(dispersive liquid-liquid microextraction - DLLME). Gần đây hơn là các kĩ thuât ̣ vi 

chiết gioṭ hữu cơ đông đă ̣c (solidified floating organic-drop microextraction - 

SFODME) hoặc vi chiết nhũ tương có hỗ trợ siêu âm (ultrasound-assisted 

emulsification microextraction - USAEME), dựa trên nguyên tắc SDME <strong>và</strong> 

DLLME, cũng được đề xuất để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. 

SDME theo sau dẫn xuất hóa trong ống tiêm đã được báo cáo bởi Saraji <strong>và</strong> 



Mirmahdieh [36] để xác <strong>định</strong> MP, EP, BP, PP <strong>và</strong> iso-propyl-<strong>paraben</strong> trong <strong>một</strong> <strong>số</strong> 

mỹ phẩm nền nước (nước súc miệng, tẩy trang <strong>và</strong> gel tóc) bằng GC -MS. Với sự 

tiếp xúc trực tiếp của giọt (3 µL hexyl axetat) vớ i mẫu, cần pha loãng đáng kể mẫu 

(lên đến 1200 lần). Khi độ nhạy được so sánh với các phương pháp khác (SPE-GC- 

MS, SPME-GC-MS, SPME-IMS, HPLC-UV hoặc SFE-LC-MS) thì LOD đat ̣ được 

là thấp. Tuy nhiên, dưṇg đườ ng chuẩn theo phương pháp thêm chuẩn là rất cần 

thiết, do việc làm sạch mẫu bi ̣hạn chế. SDME không gian hơi phù hợp hơn cho các 

mẫu bẩn, chẳng hạn như mỹ phẩm, nhưng tính không bay hơi của <strong>paraben</strong> đã giới 

hạn khả năng ứng dụng của nó nên chưa được áp dụng. 

21

SFODME đã được sử dụng để phân tích kem chống nắng, gel sau cạo râu <strong>và</strong> 

các loại kem bằng HPLC-UV [34]. Trong trường hợp này, 30 µL dung môi siêu 

phân tử có điểm nóng chảy là 10°C, các túi của axit decanoic <strong>và</strong> tetra-butyl amoni 

hydroxit, được đặt trên mẫu đã pha loãng (5 mg mẫu trong 150 mL của <strong>một</strong> dung 

dịch nước chứa methanol <strong>và</strong> HCl). Sau khi khuấy, lọ mẫu được làm lạnh để làm rắn 

chất chiết xuất, dễ dàng tách ra bằng cách ly tâm. Sau đó, nó đã tan chảy trước khi 

đo. LOD tương tự hoặc thậm chí tốt hơn so với các phương pháp chiết xuất khác. 

Tuy nhiên, các vấn đề liên quan đến sự mất ổn <strong>định</strong> gioṭ đã được báo cáo. 

Ngược lại với SDME, HF-LPME cho phép ổn <strong>định</strong> dung môi. Msagati et al. 

[58] đề xuất xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong các sản phẩm chăm sóc da, gel sửa chữa tóc <strong>và</strong> 

dung dịch xà phòng làm sạch bằng HPLC-UV sau HF-LPME. Trong trường hợp 

này, dung môi hữu cơ (di-n-hexyl ether) được cố <strong>định</strong> trong các lỗ rỗng của <strong>một</strong> sợi 

rỗng, bên trong có <strong>một</strong> dung dịch tiếp nhận (pH 11,8). Chiết xuất trong 30 phút với 

0,5 g mẫu pha loãng với 50 ml nước <strong>và</strong> chuẩn từ ng <strong>paraben</strong> thêm vào trong phương 

pháp thêm chuẩn. Việc sử dụng thể tićh dich ̣ chiết cao hơn so với SDME (lên đến 

30 µL) <strong>và</strong> độ nhạy cao hơn là đáng chú ý. 

DLLME sử dụng <strong>một</strong> mũi tiêm dung dịch chiết <strong>và</strong> dung môi phân tán <strong>và</strong>o 

<strong>một</strong> mẫu nước để tạo thành <strong>một</strong> dung dịch vẩn đu ̣c cho phép chuyển khối nhanh 

giữa các pha. Các <strong>quy</strong> triǹh khác nhau dựa trên DLLME đã được <strong>phát</strong> triển để xác 

<strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm. Farajzadeh và côṇg sự [37] đã sử dụng 20 µL octanol 



làm dung môi <strong>và</strong> 0,5 mL aceton làm chất phân tán để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong dung 

dịch súc miệng bằng GC-FID mà không cần taọ dẫn xuất. Như trong các chế độ 

LPME khác, pha loãng mẫu là cần thiết (ví dụ: pha loãng 1: 100 với nước khử ion). 

Một ống mao quản được sử dụng để lấy mẫu pha hữu cơ sau 10 phút ly tâm. 

DLLME với dẫn xuất hóa đồng thời đã được sử dụng để xác <strong>định</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> 

MP, EP, PP <strong>và</strong> BP trong các mẫu khác nhau, bao gồm mỹ phẩm bằng GC-FID. 

Isobutyl chloroformate được sử dụng làm thuốc thử taọ dẫn xuất, ethanol làm chất 

phân tán <strong>và</strong> chloroform làm dung môi chiết xuất [47]. Một tiền xử lý đầy đủ cho các 

22

mẫu mỹ phẩm là cần thiết, cụ thể là, chiết xuất ethanol, lắc xoáy siêu âm, ly tâm, 

dich ̣ lo ̣c phiá trên đem lọc pha loãng với ethanol. 

Như đã đề cập, UAEME là <strong>một</strong> cách tiếp cận với DLLME sử dụng năng 

<strong>lượng</strong> siêu âm để thúc đẩy nhũ tương hóa. Yamini và côṇg sự [63] đã sử dụng 

UAEME để xác <strong>định</strong> MP, EP <strong>và</strong> PP với 40 µL octanol bằng HPLC-UV. Dung môi 

được tiêm từ từ <strong>và</strong>o <strong>một</strong> lọ ly tâm chứa mẫu nước, sau đó được đặt bên trong bồn 

nước siêu âm <strong>và</strong> nhũ tương hình thành được ly tâm để tách pha hữu cơ. Nói chung, 

DLLME cung cấp các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> nhanh hơn, nhạy hơn so với SDME <strong>và</strong> HF-LPME 

trực tiếp để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong>. Tuy nhiên, pha loãng mẫu đáng kể <strong>và</strong> / hoặc làm 

sạch mẫu là cần thiết trong mọi trường hợp. 

1.1.6.7. Chiết xuất siêu tới hạn - Chiết xuất siêu tới hạn (SPE) 

SFE đã được sử dụng để xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm mà không cần 

tiền xử lý mẫu [38], [52], [53]. Khi kỹ thuật này được xem xét để chiết xuất 

<strong>paraben</strong>, nên tính tới độ phân cực <strong>paraben</strong> vì nó có thể ảnh hưởng đến việc chiết 

xuất với cacbon điôxit tinh khiết. Scalia và côṇg sự [52] đã sử dụng SFE với CO2 

siêu tới hạn trước khi xác <strong>định</strong> MP, EP, PP <strong>và</strong> BP bằng phương pháp HPLC. Các 

mẫu mỹ phẩm đã được cân trực tiếp trên <strong>một</strong> mảnh giấy lọc <strong>và</strong> sau đó chèn <strong>và</strong>o cell 

chiết xuất. Thời gian chiết xuất 7 phút <strong>và</strong> nhiệt độ 60 ° C đủ để thu hồi <strong>lượng</strong> 

<strong>paraben</strong>. Tuy nhiên, cần phải có áp lực vận hành cao (khoảng 27.500 kPa). 



Bên cạnh áp lực gia tăng, bổ sung <strong>một</strong> <strong>số</strong> chất nền (ví dụ, methanol, 

ethanol, ACN hoặc axit axetic) có thể làm tăng tính hòa tan của CO2, vì vậy nó 

phù hợp hơn cho <strong>paraben</strong>. Như vậy, Wang <strong>và</strong> cộng sự [53] đã sử dụng CO2 

siêu tới hạn với 0.05% ACN để chiết MP, EP, PP <strong>và</strong> BP trước khi tách bằng 

điện di mao quản vùng. Với <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> nhỏ ACN việc chiết xuất <strong>paraben</strong> thực 

hiêṇ ở áp suất thấp (12,100 kPa). 

Lee <strong>và</strong> cộng sự [38] đã sử dụng <strong>một</strong> hỗn hợp của mẫu mỹ phẩm <strong>và</strong> cát biển 

(nền trơ) để làm đầy lớp vỏ chiết. Bằng cách này, bề mặt mẫu tăng lên, cho phép 

chiết xuất <strong>paraben</strong> được thực <strong>hiện</strong> trong 5 phút ở chế độ tĩnh <strong>và</strong> 20 phút ở chế độ 

23

động ở 14.000 kPa <strong>và</strong> 65 °C. LC-MS được sử dụng để xác <strong>định</strong> bốn <strong>paraben</strong>. SFE 

cũng đã được sử dụng trực tuyến với headspace SPME <strong>và</strong> GC-MS [60]. Các mẫu 

mỹ phẩm được chiết xuất với CO2 siêu tới hạn ở mức 13.840 kPa <strong>và</strong> 55°C trong 

thời gian chiết tĩnh 10 phút, sau đó là 15 phút chiết động. 

1.1.6.8. Chiết lỏng cao áp - Pressurized liquid extraction (PLE) 

PLE sử dụng dung môi lỏng ở nhiệt độ <strong>và</strong> áp suất cao, do đó tăng khả năng 

chiết xuất các chất phân tích. Sánchez-Prado và côṇg sự [29] đã kết hợp PLE với 

GC-MS bởi để chiết xuất các chất bảo quản khác nhau (bao gồm <strong>paraben</strong>) trong 

kem, kem dưỡng da <strong>và</strong> các sản phẩm chăm sóc tóc. Viê ̣c chiết xuất được thực <strong>hiện</strong> 

trong 15 phút ở 120 °C <strong>và</strong> 1500 psi với hỗn hợp hexane <strong>và</strong> axeton (1: 1). Việc tách 

đồng thời <strong>một</strong> <strong>số</strong> thành phần không liên quan từ nền mỹ phẩm đã được giảm thiểu 

với <strong>một</strong> giai đoạn bổ sung. Lipid được hấp thụ bởi chất hấp thụ phân tán (Na2SO4 

<strong>và</strong> Florisil). Có thể taọ dẫn xuất acetyl hóa bằng cách thêm thuốc thử taọ dẫn xuất 

<strong>và</strong>o tế bào PLE. Không có ảnh hưởng nền được quan sát thấy trong những điều 

kiện này. 

Mặc dù sự <strong>phát</strong> triển của các chiến lược nhằm đơn giản hóa <strong>và</strong> đẩy nhanh 

việc chuẩn bị mẫu cần được theo đuổi, điều này không phải lúc nào cũng khả thi 

do tính chất phức tạp của nền mẫu mỹ phẩm. Xu hướng tương lai trong lĩnh vực 

này sẽ tập trung <strong>và</strong>o việc <strong>phát</strong> triển các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> khai thác mới cho phép làm 

sạch các mẫu mỹ phẩm, do đó tránh nhiễu mà không mất độ nhạy. Các vật liệu 

nano có thể đóng góp <strong>và</strong>o việc đạt được các mục tiêu này, vì chúng có thể được 

sử dụng trong chiết xuất pha rắn (SPE), vi chiết <strong>và</strong> cả lọc. Các máy nano đã cho 

thấy khả năng trích xuất nhiều loại hợp chất vì bề mặt của chúng được phủ các 

phân tử chức năng, polyme hoặc các hạt nâng cao tính chọn lọc <strong>và</strong> hiệu quả làm 

giàu mẫu. 



24

1.2. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP HPLC 

1.2.1. Nguyên tắc của sắc ký lỏng hiệu năng cao 

Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) là kỹ thuật phân tích dựa trên cơ sở của 

sự phân tách các chất trên <strong>một</strong> pha tĩnh chứa trong cột, nhờ dòng di chuyển của pha 

động lỏng dưới áp suất cao. Tốc độ di chuyển khác nhau liên quan đến hệ <strong>số</strong> phân 

bố của chúng giữa hai pha tức là liên quan đến ái lực tương đối của các chất này với 

pha tĩnh <strong>và</strong> pha động. Thứ tự rửa giải các chất ra khỏi cột phụ thuộc <strong>và</strong>o các yếu tố 

đó. Các chất sau khi ra khỏi cột sẽ được <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> bởi detector <strong>và</strong> được ghi lại nhờ 

máy ghi <strong>và</strong> bộ phận xử lý <strong>số</strong> liệu thành sắc kí đồ với các thông tin về pic của chất 

phân tích. 

Tùy thuộc <strong>và</strong>o cơ chế của quá <strong>trình</strong> tách sắc ký mà ta có những kỹ thuật sắc 

ký khác nhau: sắc ký phân bố, sắc ký hấp phụ, sắc ký trao đổi ion, sắc ký loại cỡ, 

sắc ký ái lực, sắc ký các đồng phân quang học [2]. 

1.2.2. Cấu tạo máy HPLC 

Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao bao gồm các bộ phận sau: Bình chứa pha 

động, bơm đẩy pha động qua hệ thống sắc ký ở áp suất cao, hệ tiêm mẫu để đưa 

mẫu <strong>và</strong>o pha động, cột sắc ký, detector, hệ thu nhận <strong>và</strong> xử lý dữ liệu. 

. 

Hệ thống cấp 

dung môi 

Bơm 

Bộ phận 

tiêm 

mẫu 



Hệ thu nhận xử lý dữ 

liệu (máy ghi, máy tính) 

Detector 

Cột sắc ký 

Thải 

Hình 1. 3. Sơ đồ nguyên lý của máy HPLC. 

25

1.2.3. Detector <strong>và</strong> bộ phận ghi tín hiệu 

Detector là bộ phận quan trọng <strong>quy</strong>ết <strong>định</strong> độ nhạy của phương pháp. Tuỳ 

thuộc bản chất lí hoá của chất phân tích mà lựa chọn detector cho phù hợp. 

- Detector quang phổ hấp thụ phân tử UV-VIS: áp dụng cho các chất có khả 

năng hấp thụ ánh sáng trong vùng tử ngoại (UV) hoặc vùng khả kiến (VIS). 

huỳnh quang. 

- Detector huỳnh quang: sử dụng để <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> các chất có khả năng <strong>phát</strong> 

- Detector độ dẫn: phù hợp với các chất có hoạt tính điện hoá: Các cation, 

anion, các hợp chất có tính dẫn điện… 

- Detector khối phổ: thường được dùng để nhận biết <strong>và</strong> xác <strong>định</strong> các hợp chất 

khi chúng rất khó tách bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ, chẳng hạn như các 

chất có khối <strong>lượng</strong> phân tử lớn, các hợp chất không bền nhiệt <strong>và</strong> các hợp chất phân 

cực. 

Bộ phận ghi tín hiệu gồm có máy ghi, máy phân tích, máy tính. 

1.2.4. Các thông <strong>số</strong> đặc trưng của quá <strong>trình</strong> sắc kí 

1.2.4.1. Thời gian lưu 

Khoảng thời gian từ lúc tiêm mẫu <strong>và</strong>o cột đến khi píc đến detector được gọi 

là thời gian lưu tR. Đối với những chất không lưu giữ thì tốc độ di chuyển của nó 

bằng tốc độ di chuyển trung bình của các phân tử pha động. Thời gian tM của chất 

không lưu gọi là thời gian chết. 

1.2.4.2. Đô ̣phân giải 

sắc ký: 



Độ phân giải của cột đánh giá khả năng tách hai chất trong hỗn hợp trên cột 

Rs = = 

trong đó: 

RS : độ phân giải 

(tR)1, (tR)2: thời gian lưu chất 1, 2 

W1, W2 : lần lượt là độ rộng pic 1, 2 ở các đáy pic 

26

W1/2 1, W1/2 2 : lần lượt là độ rộng pic đo ở nửa chiều cao pic 

RS ≥ 1,5 thì 2 pic coi như tách được hoàn toàn. 

1.2.4.5. Tính đối xứng của píc sắc kí 

- Hệ <strong>số</strong> bất đối: AF = b a 

- Hệ <strong>số</strong> kéo đuôi: As = a+b 

2a 

b: nửa chiều rộng phía sau píc. 

a: nửa chiều rộng phía trước píc 

1.2.4.6. Số đĩa lý thuyết <strong>và</strong> chiều cao đĩa lý thuyết 

Cột sắc kí được coi là có N lớp mỏng, ở mỗi lớp, sự phân bố chất tan <strong>và</strong>o hai 

pha được coi là đạt đến trạng thái cân bằng. Những lớp mỏng này được gọi là đĩa lý 

thuyết. 

Số đĩa lý thuyết là đại <strong>lượng</strong> biểu thị hiệu năng của cột trong <strong>một</strong> điều kiện 

sắc kí nhất <strong>định</strong>. Cột có <strong>số</strong> đĩa lý thuyết lớn sẽ có hiệu lực cao, khi đó độ doãng píc 

nhỏ. 

1.2.5. Ứng dụng HPLC 

Sắc kí nói chung <strong>và</strong> HPLC nói riêng có 3 ứng dụng chính: <strong>định</strong> tính, <strong>định</strong> 

<strong>lượng</strong> <strong>và</strong> điều chế. 

1.2.5.1. Định tính 

Người ta có thể dùng HPLC để <strong>định</strong> tính bằng <strong>một</strong> <strong>số</strong> cách sau [2]: 

- So sánh thời gian lưu của các chất phân tích trong dung dịch thử với thời gian lưu 

của chất chuẩn chạy cùng điều kiện sắcký. 

- So sánh sắc ký đồ của mẫu phân tích với sắc ký đồ của mẫu phân tích đã thêm 

chuẩn đối chiếu. 



- So sánh phổ UV-Vis (chồng phổ) giữa phổ mẫu thử với phổ chất đối chiếu bằng 

DAD thông qua hệ <strong>số</strong>Match. 

27

- Có thể kết nối HPLC – phổ IR hoặc HPLC – MS <strong>định</strong> tính dựa <strong>và</strong>o nhóm chức 

(IR) hoặc <strong>số</strong> khối (MS). 

1.2.5.2. Phân tích <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> 

Tất cả các phương pháp <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> bằng sắc ký đều dựa trên nguyên tắc [2]: 

nồng độ của chất tỷ lệ với chiều cao hoặc diện tích pic của nó. 

Có 4 phương pháp <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> thường được sử dụng trong sắc ký: 

‣ Phương pháp chuẩn ngoại 

‣ Phương pháp chuẩn nội 

‣ Phuơng pháp thêm chuẩn 

‣ Phương pháp chuẩn hóa diện tích 

Trong luận văn này phương pháp chuẩn ngoại được chọn sử dụng. Đây là 

phương pháp <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> cơ bản, trong đó cả 2 mẫu chuẩn <strong>và</strong> thử đều được tiến hành 

trong cùng điều kiện. So sánh diện tích (hoặc chiều cao) pic của mẫu thử với diện 

tích (hoặc chiều cao) của mẫu chuẩn sẽ tính được nồng độ của các chất trong mẫu 

thử. 

Có thể sử dụng chuẩn hóa 1 điểm hoặc nhiều điểm. 

❖ Chuẩn hóa 1 điểm 

Chọn nồng độ của mẫu chuẩn xấp xỉ với nồng độ của mẫu thử. Tính nồng độ 

của mẫu thử theo công thức: 

CX =CS ( ) 



trong đó: 

CX: nồng độ chấtthử 

CS: nồng độ chất chuẩn 

SX: diện tích (chiều cao) của pic mẫu thử 

SS: diện tích (chiều cao) của pic mẫu chuẩn 

❖ Chuẩn hóa nhiều điểm 

28

Cách tiến hành: Chuẩn bị <strong>một</strong> dãy chuẩn với các nồng độ tăng dần rồi tiến 

hành sắc ký. Các đáp ứng thu được là diện tích hoặc chiều cao pic ở mỗi điểm 

chuẩn. Vẽ đồ thị chuẩn biểu diễn sự tương quan giữa diện tích S (hoặc chiều cao H) 

pic với nồng độ của chất chuẩn (C). Sử dụng đoạn tuyến tính của đường chuẩn để 

tính toán nồng độ của chất cần xác <strong>định</strong>. Có thể tính theo 2 cách: 

- Áp dữ kiện diện tích (hoặc chiều cao) pic của chất thử <strong>và</strong>o đường chuẩn sẽ suy ra 

được nồng độ của nó. 

- Xây <strong>dựng</strong> đường hồi <strong>quy</strong> tuyến tính mô tả quan hệ giữa diện tích (hoặc chiều cao) 

pic với nồng độ chất cần xác <strong>định</strong>. 

S = a x C + b 

S: Diện tích pic 

a: Độ dốc của đường chuẩn 

b: Giao điểm của đường chuẩn với trục tung 

C: Nồng độ của chất thử 

Dựa <strong>và</strong>o phương <strong>trình</strong> hồi <strong>quy</strong> này ta tính được nồng độ chất thử: 

C = (S-b)/a 

Chú ý: Độ lớn của diện tích (hoặc chiều cao) pic mẫu thử phải nằm trong 

khoảng nồng độ tuyến tính của đường chuẩn. 

1.2.6. Kỹ thuật HPLC với detector DAD (diod array detector) 

Detector mảng diod (DAD) là <strong>một</strong> loại detector hấp thụ UV – Vis, được dùng 

phổ biến trong sắc ký lỏng dựa trên sự hấp thụ bức xạ UV – Vis (trong khoảng 190 

– 800 nm) của các chất phân tích. Một chùm sáng có phổ rộng đi qua mẫu, sau đó 

được tách ra thành các bước sóng đơn. Detector có mảng diod để nhận bức xạ đã 

tán sắc từ <strong>một</strong> cách tử. Mỗi diod nhạy với <strong>một</strong> bước sóng nhất <strong>định</strong>, do đó detector 

DAD cho phép đo nhiều bước sóng khác nhau cùng <strong>một</strong> lúc. Thông thường, chỉ có 

<strong>một</strong> hoặc hai bước sóng được theo dõi trong quá <strong>trình</strong> chạy sắc ký. Phổ DAD của 

các pic có thể cung cấp thông tin về độ tinh khiết của pic. 



29

Hình 1. 4. Cấu tạo detector mảng diod (DAD). 

Quang phổ <strong>và</strong> sắc ký đồ có thể được biểu thị trên màn hình nhờ phần mềm 

của hệ thống xử lý tín hiệu bằng máy tính. Có thể gọi DAD là detector sóng quét 

bên cạnh detector đo ở bước sóng cố <strong>định</strong> hoặc thay đổi. Mặt khác, hệ thống này có 

thể cho đồ thị 3D: độ hấp thụ, bước sóng <strong>và</strong> thời gian. 

Ứng dụng: Đầu dò DAD giúp lựa chọn bước sóng phù hợp cho phân tích, có 

khả năng vẽ phổ UV – Vis của pic chuẩn <strong>và</strong> pic thử rồi chồng hai phổ với nhau để 

thấy sự giống nhau về dạng phổ thông qua hệ <strong>số</strong> Match. 

Khi hệ <strong>số</strong> match xấp xỉ 1 chỉ ra <strong>một</strong> phổ <strong>định</strong> tính giống nhau hoàn toàn. Hệ 

<strong>số</strong> match trên 0,90 thì chỉ ra hai phổ tương tự. Hệ <strong>số</strong> match càng gần 1 thì sự tương 

tự của hai phổ càng cao. Hệ <strong>số</strong> match dưới 0,90 chỉ ra hai phổ khác nhau. 



30

CHƯƠNG 2 

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 

2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 

5 <strong>paraben</strong> trong danh mục các chất không được dùng trong mỹ phẩm bao 

gồm: Isopropyl<strong>paraben</strong> (IPP), Phenyl<strong>paraben</strong> (PheP), Benzyl<strong>paraben</strong> (BzP), 

Isibutyl<strong>paraben</strong> (IBP), Pentyl<strong>paraben</strong> (PeP). 

Bảng 2. 1. Các mẫu nền được sử dụng để xác <strong>định</strong> phương pháp phân tích. 

STT Tên mẫu Nơi sản xuất Thành phần 

Dầu rửa mặt, tẩy trang 

1 

dạng bọt 2 trong 1 Naive 

Nước súc miệng Colgate 

2 

Plax peppermint fresh 

Kracie home products, 

Ltd., Nhật Bản 

Thái Lan 

Không có chất bảo 

quản nhóm <strong>paraben</strong> 

Không có chất bảo 

quản nhóm <strong>paraben</strong> 

Thông tin về các mẫu mỹ phẩm trên thị trường dùng để xác <strong>định</strong> sự có mặt 

của 5 <strong>paraben</strong> bị cấm xem chi tiết trong Phụ lục1. 

2.2.THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT 

2.2.1. Thiết bị <strong>và</strong> dụngcụ 

Đề tài được thực <strong>hiện</strong> từ tháng 12/2017 đến tháng 2/2018 tại Khoa Kiểm 

nghiệm Mỹ phẩm - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương với các thiết bị được <strong>định</strong> 

kỳ hiệu chuẩn đạt yêu cầu ISO/IEC 17025. 

- Máy sắc kí lỏng Shimadzu LC - 2030C 3D (L21455502327) gồm module 

điều khiển, bơm gradient 4 kênh, bộ tiêm mẫu tự động, detector UV - UV 2600, 

buồng điều nhiệt, tích hợp đuổi khí. 

- Cân phân tích chính xác tới 0,1 mg. 

- Máy lắc siêu âm. 

- Dụng cụ thủy tinh: Bình <strong>định</strong> mức, cốc thủy tinh, đũa thủy tinh. 

2.2.2. Dung môi <strong>và</strong> hóa chất 

- Chất chuẩn IPP (Canada) <strong>số</strong> lô: 2-PLL-65-3, HL: 98%. 

- Chất chuẩn PheP (Nhật) <strong>số</strong> lô: PEJFB-LM, HL: 99,0%. 



31

- Chất chuẩn BzP (Canada) <strong>số</strong> lô:4-JTN-11-1, HL: 98%. 

- Chất chuẩn IBP(Canada) <strong>số</strong> lô:3-SCC-165-1, HL: 98%. 

- Chất chuẩn PeP (Canada) <strong>số</strong> lô:10-RCD-146-5, HL: 97%. 

- Methanol HPLC (Merck). 

- Acetonitril HPLC (Merck). 

- Nước tinh khiết (DĐVN IV). 

2.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 

• Xây <strong>dựng</strong> phương pháp <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 5 <strong>paraben</strong> cấm: IPP, PheP, BzP, IBP, 

PeP có mặt trái phép trong mỹ phẩm với ba <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>: 

- Quy <strong>trình</strong> xử lý mẫu; 

- Quy <strong>trình</strong> phân tích, <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 3 <strong>paraben</strong> cấm IPP, PheP, BzP bằng HPLC; 

- Quy <strong>trình</strong> phân tích, <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 2 <strong>paraben</strong> cấm IBP, PeP bằng HPLC. 

• Đánh giá phương pháp đã <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong>: 

- Tính đặc hiệu; 

- Độ chính xác của phương pháp (gồm độ đúng <strong>và</strong> độ lặp lại); 

- Khoảng tuyến tính; 

- Giới hạn <strong>định</strong> <strong>lượng</strong>, giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong>. 

• Áp dụng phương pháp đã <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> để <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 5 <strong>paraben</strong> cấm: IPP, 

PheP, BzP, IBP <strong>và</strong> PeP trong <strong>một</strong> <strong>số</strong> chế phẩm mỹ phẩm đang lưu hành trên thị 

trường. 

2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 

Sử dụng là 2 mẫu đại diện cho các nhóm sản phẩm: sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước 

súc miệng để <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> <strong>và</strong> thẩm <strong>định</strong> phương pháp phân tích với HPLC. Tiến hành 

thực nghiệm để tìm ra điều kiện sắc kí thích hợp, sau đó xử lý các kết quả thu được 

bằng thuật toán thống kê. 



❖ Xây <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> xử lý mẫu: 

Chọn dung môi <strong>và</strong> phương pháp chiết sao cho chiết được hoàn toàn chất 

phân tích từ nền mẫu, loại bỏ tối đa ảnh hưởng của nền mẫu, chất phân tích bên 

32

trong môi trường pha mẫu (dựa <strong>và</strong>o 3 yếu tố: tính tan của chất phân tích, đặc điểm 

nền mẫu, phương pháp phân tích). 

❖ Lựa chọn điều kiện sắc kí phù hợp: 

Tiến hành khảo sát chọn cột sắc kí, nhiệt độ cột, pha động, tốc độ dòng, bước 

sóng phân tích với detector PDA, thể tích tiêm mẫu. Định tính bằng so sánh thời 

gian lưu, độ tinh khiết píc <strong>và</strong> chồng phổ UV-VIS, so sánh hệ <strong>số</strong> tương đương của 

píc nghi ngờ thu được từ mẫu thử với píc thu được từ mẫu chuẩn. Định <strong>lượng</strong> bằng 

cách so sánh diện tích hoặc chiều cao píc thu được từ mẫu thử với mẫu chuẩn. 

Cách tiến hành:Tiêm riêng biệt dung dịch thử, dung dịch chuẩn <strong>và</strong>o hệ thống 

sắc kí lỏng sử dụng các điều kiện ở trên. Tiến hành sắc kí khoảng 40-60 phút. Ghi 

lại sắc kí đồ. 

Cách đánh giá kết quả: 

- Dựa <strong>và</strong>o thời gian lưu: thời gian lưu của píc thu được từ dung dịch thử 

phải giống với thời gian lưu của píc thu được từ dung dịch chuẩn. 

- So sánh phổ UV-VIS của píc thu được từ dung dịch thử có thời gian lưu 

tương ứng với píc thu được từ dung dịch chuẩn <strong>và</strong> hệ <strong>số</strong> chồng phổ của các píc này 

phải đạt từ 0,99 trở lên. 

❖ Độ đặc hiệu: 

Tiến hành sắc kí các loại mẫu: mẫu nền (mẫu mỹ phẩm không có chất cần 

phân tích); mẫu chuẩn; mẫu tự tạo (mẫu mỹ phẩm không có chất cần phân tích đã 



được cho thêm chất chuẩn cần phân tích <strong>và</strong> được chuẩn bị theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>) <strong>và</strong> mẫu 

thử được chuẩn bị theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>. 

Yêu cầu: Trên sắc kí đồ của mẫu thử/mẫu tự tạo: píc của chất cần phân tích 

phải tách hoàn toàn khỏi các píc khác (nếu có trong nền mẫu), píc của chất cần phân 

tích có thời gian lưu khác nhau không có ý nghĩa thống kê với píc của chất chuẩn 

thu được từ mẫu chuẩn. Sắc kí đồ của mẫu trắng, dung dịch mẫu nền không xuất 

<strong>hiện</strong> píc ở trong khoảng thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của chất chuẩn. 

Nếu có đáp ứng píc phải không quá 1,0% so với đáp ứng píc của mẫu chuẩn. Píc 

của chất cần phân tích trong sắc kí đồ dung dịch thử phải tinh khiết. Hệ <strong>số</strong> chồng 

33

phổ UV-VIS của píc hoạt chất cần phân tích thu được trong sắc kí đồ của dung dịch 

thử/tự tạo với píc tương ứng trong sắc kí đồ dung dịch chuẩn phải đạt từ 0,99 trở 

lên. 

❖ Khoảng nồng độ tuyến tính: 

Tiến hành sắc kí các dung dịch chuẩn (5 dung dịch). Xác <strong>định</strong> phương <strong>trình</strong> 

hồi <strong>quy</strong> tuyến tính, hệ <strong>số</strong> tương quan giữa nồng độ chất chuẩn có trong mẫu <strong>và</strong> đáp 

ứng píc thu được trên các sắc kí đồ bằng phương pháp bình phương tối thiểu. Yêu 

cầu: Hệ <strong>số</strong> tương quan (r) phải ≥ 0,997 (hay R 2 ≥ 0,995). Trường hợp r < 0,997 phải 

có sự giải thích phù hợp. 

❖ Độ đúng: 

Xác <strong>định</strong> trên các mẫu tự tạo. Chuẩn bị 03 loại mẫu tự tạo bằng cách thêm 

chính xác <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> chất chuẩn chất cần phân tích <strong>và</strong>o các nền mẫu không có chất 

cần phân tích. Với phép thử <strong>định</strong> <strong>lượng</strong>, <strong>lượng</strong> chất chuẩn thêm <strong>và</strong>o tương ứng với 3 

mức nồng độ. Tại mỗi mức nồng độ, thực <strong>hiện</strong> ít nhất 03 mẫu độc lập. Tính kết quả 

thu hồi theo dung dịch chuẩn hoặc phương <strong>trình</strong> hồi <strong>quy</strong> tuyến tính. Tính <strong>lượng</strong> thu 

hồi theo công thức: 

Tỉ lệ thu hồi (%) = 

Lượng chất phân tích tìm lại 

Lượng chất chuẩn thêm <strong>và</strong>o 

x100 

Tham khảo hướng dẫn của ICH, ASEAN <strong>và</strong> AOAC, yêu cầu với phép thử 

<strong>định</strong> <strong>lượng</strong>: Tỉ lệ thu hồi 95,0-105,0% <strong>và</strong> RSD của tỉ lệ thu hồi không quá 2,0% ở 

mỗi mức nồng độ. 

❖ Xác <strong>định</strong> giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> (LOD) <strong>và</strong> giới hạn <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> (LOQ): 

Có thể tiến hành theo cách pha loãng hoặc dựa <strong>và</strong>o đường tuyến tính <strong>và</strong> độ 

lệch chuẩn của đáp ứng. Giá trị LOD = (3,3 x δ)/a, trong đó: δ: Độ lệch chuẩn đáp 

ứng của mẫu nền (placebo), a: Hệ <strong>số</strong> góc của đường hồi <strong>quy</strong> tuyến tính (y = ax +b) 

giữa nồng độ <strong>và</strong> đáp ứng píc của chất cần phân tích. LOQ = 3,3 x LOD (kl/tt). 



34

2.5. XỬ LÝ THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 

Các kết quả thực nghiệm được tính toán <strong>và</strong> xử lý thống kê trên Microsoft 

Excel 2003với các hàm thống kê thông dụng như: 

- Hàm tính trung bình cộng AVARAGE. 

- Hàm tính độ lệch chuẩn STDEV. 



35

CHƯƠNG 3 

THỰC NGHIỆM VÀ KẾ T QUẢ 

3.1. XỬ LÝ MẪU 

3.1.1. Điều kiện xử lý mẫu 

Qua tổng quan tài liệu cho thấy methanol là dung môi được sử dụng nhiều 

nhất trong việc chiết xuất <strong>paraben</strong> từ các nền mẫu [19]. W. Gao, C. Legido-Quigley 

cũng đã đưa ra kết quả nghiên <strong>cứu</strong> khi so sánh hiệu quả chiết xuất 4 <strong>paraben</strong> 

(methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong>, butyl<strong>paraben</strong>) bằng các tỉ lệ 

methanol: nước khác nhau (60:40, 70:30, 80:20) trong báo cáo <strong>và</strong>o năm 2011 khi 

phân tích chất bảo quản trong kem mỹ phẩm bằng phương pháp HPLC [62]. Kết 

quả cho thấy với sự gia tăng hàm <strong>lượng</strong> methanol, chiều cao píc của các thành phần 

không thay đổi. Methanol cũng là dung môi phổ biến, dễ kiếm, vì vậy methanol đã 

được lựa chọn làm dung môi chiết mẫu. 

3.1.2. Cách chuẩn bị mẫu 

3.1.2.1. Chuẩn bị mẫu thử 

Cân chính xác khoảng 0,5 g chế phẩm, phân tán mẫu trong khoảng 25 ml 

methanol, cho <strong>và</strong>o bình <strong>định</strong> mức 50 ml, lắc siêu âm 10 phút sau đó pha loãng tớ i 

đinh ̣ mứ c bằng cùng dung môi. Lọc qua màng lọc 0,45 µm. 

3.1.2.2. Chuẩn bị mẫu chuẩn 



- Cân chính xác khoảng 20,0 mg từ ng chất chuẩn isopropyl<strong>paraben</strong>, 

isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong>o các bình <strong>định</strong> 

mức 100,0 ml , thêm 30 ml methanol, lắc cho tan. Thêm methanol vừa đủ đến vạch, 

lắc đều. Hút chính xác 2,0 ml từ ng dung dịch trên cùng vào môṭ biǹh điṇh mứ c 50,0 

ml, pha loãng bằng methanol. Lọc qua màng lọc 0,45 µm. 

- Dung dịch chuẩn đánh giá (QC): cân chính xác khoảng 0,5 g chế phẩm <strong>và</strong>o 

bình <strong>định</strong> mức 50 ml, thêm <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> mẫu chuẩn sao cho đạt nồng độ 100-120% 

36

của <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích <strong>và</strong> xử lý giống như mẫu thử (Dùng trong <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> thường 

<strong>quy</strong> để kiểm tra mẫu). 

3.2. XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 

3.2.1. Điều kiện sắc kí 

Qua tham khảo tài liêụ được biết các <strong>paraben</strong> có thể được phân tićh trên 

HPLC pha đảo côṭ C18, pha đôṇg Acetonitril : Nướ c. Chúng tôi đã tiến hành thử 

nghiêṃ và lưạ choṇ được điều kiêṇ tối ưu như sau: 

- Cột Luna C18, (250 x 4,6 mm), 5 µm có sử dụng tiền cột thép không gỉ (3 

cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh C18 (5 µm); 

- Nhiệt độ cột: 40 o C; 

- Pha động: Acetonitril - nước (40:60); 

- Tốc độ dòng: 1,0 ml/ phút; 

- Bước sóng <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong>: 254 nm; 

- Thể tích tiêm: 10 µl. 

Mă ̣c dù trong đề tài này chỉ tiến hành phân tích năm <strong>paraben</strong> cấm IPP, IBP, 

PheP, BzP và PeP. Tuy nhiên cũng phải quan tâm đến thực tế trong chế phẩm có thể 

sử duṇg các chất bảo quản thuô ̣c nhóm <strong>paraben</strong> mà không bi ̣cấm. Đă ̣c biêt ̣ là PP có 

thờ i gian lưu rất gần vớ i PP, BP có thờ i gian lưu rất gần vớ i IBP và BzP…Nếu điều 

kiêṇ sắc kí chỉ tâ ̣p trung vào tối ưu năm <strong>paraben</strong> bi ̣cấm mà không quan tâm đến 

bốn <strong>paraben</strong> trong nhóm có giớ i haṇ sử duṇg thì có thể xảy ra viê ̣c IPP có thờ i gian 



lưu trùng vớ i PP, IBP có thờ i gian lưu trùng vớ i BP. Thâṃ chí ba pic IBP, BP và 

BzP trùng làm môṭ. Măt ̣ khác các chất trong nhóm <strong>paraben</strong> có hiǹh dáng phổ rất 

giống nhau, vớ i các điểm cực đai ̣ và cực tiểu gần như nhau thì khi đó chồng phổ 

cũng sẽ cho hê ̣số tương đồng rất cao. Viê ̣c kết luâṇ nhầm lâñ giữa <strong>paraben</strong> có giớ i 

haṇ và <strong>paraben</strong> cấm sẽ kéo theo nhiều vấn đề hê ̣ luỵ. Vì vâỵ khi thực hiêṇ đề tài 

này, trong quá triǹh khảo sát điều kiêṇ sắc kí, tác giả đã luôn quan tâm cả chuẩn hỗn 

hợp 5 <strong>paraben</strong> và chuẩn hôñ hợp 9 <strong>paraben</strong>. 

37

Hình 3. 1. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn 5 <strong>paraben</strong> bi ̣cấm (trá i) và hôñ hợp 

chuẩn 9 <strong>paraben</strong> (phải) với pha động ACN - nước (40 : 60). 

Với điều kiện phân tích như trên thì 45 phút cả 5 píc được rửa giải, các píc 

IPP, PheP, IBP, BzP, PeP đều cân đối (hệ <strong>số</strong> kéo đuôi xấp xỉ 1,1) <strong>và</strong> các <strong>paraben</strong> 

tách tốt (độ phân giải xấp xỉ 3,0). Cùng điều kiện như vậy mà thay đổi tỉ lệ pha 

động acetonitril - nước (35 : 65) thì các píc cân đối hơn (hệ <strong>số</strong> kéo đuôi xấp xỉ 1,0) 

nhưng thời gian phân tích lại kéo dài hơn đáng kể (BzP ra ở 45 phút <strong>và</strong> 75 phút mới 

xuất <strong>hiện</strong> píc PeP) như ở hình 3.3. Còn ở tỉ lê ̣pha động acetonitril - nước (45 : 55) 

thì chỉ 28 phút là rử a giải hết cả 5 chất, nhưng BzP và BP – môṭ <strong>paraben</strong> có giớ i haṇ 

sử duṇg trong số 9 <strong>paraben</strong> - trùng làm môṭ, cù ng ra ở thờ i gian lưu 17 phút. Như 

vâỵ tỉ lê ̣pha động acetonitril - nước (40 : 60) là tỉ lê ̣tối ưu được lưạ choṇ. 

Các <strong>paraben</strong> có bướ c sóng hấp thu ̣ cực đai ̣ gần giống nhau 254, 255, 256, 

257 nm. Phenylparben có cực đai ̣ hấp thu ̣ là 261 nm. Chúng tôi lưạ choṇ detector 

diod mảng (DAD) vớ i bướ c sóng 254 nm để phát hiêṇ các <strong>paraben</strong>. DAD cho phép 

quét phổ UV-VIS trong môṭ khoảng bướ c sóng, như vâỵ có thể quan sát hiǹh daṇg 

phổ của chất nghi ngờ so vớ i chuẩn. Nếu thờ i gian lưu của thử và chuẩn gần nhau, 

trong trườ ng hợp đó ngườ i phân tićh có thể chồng phổ để củng cố cho kết luâṇ của 

mình. 



38

a) 



Hình 3. 2. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn IPP, PheP, BzP (a), hôñ hợp chuẩn 

IBP và PeP (b) và hôñ hợp 9 <strong>paraben</strong> (c) trên cột Luna với pha động ACN - nước 

(35 : 65). 

b) 

c) 

39

Hình 3. 3. Sắc kí đồ phân tích hôñ hợp chuẩn 9 <strong>paraben</strong> trên cột Luna với pha 

động ACN - nước (45 : 55). 

Đánh giá phương pháp <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> các nhóm <strong>paraben</strong> nghiên <strong>cứu</strong> trên điều 

kiện sắc kí đã chọn bao gồm các nội dung: độ thích hợp của hệ thống sắc kí, tính 

đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ lặp lại, độ đúng. 

3.2.2. Thẩm <strong>định</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> 

3.2.2.1. Đánh giá độ thích hợp hệ thống 



Tiêm 6 lần dung dịch đối chiếu hỗn hợp có nồng độ từng <strong>paraben</strong> khoảng 8 

µg/ml <strong>và</strong>o hệ thống sắc kí, ghi lại sắc kí đồ, kết quả thu được như ở bảng 3.1. 

Bảng 3. 1. Độ thích hợp của hệ thống sắc kí của IPP, PheP và BzP 

TT 

Thời gian lưu (phút) 

Diện tích píc (mAU.s) 

IPP PheP BzP IPP PheP BzP 

1 13,870 21,156 26,252 499897 447480 409679 

2 13,870 21,150 26,250 499215 445136 409923 

3 13,873 21,167 26,267 498638 444797 409357 

4 13,874 21,172 26,281 501902 448175 411805 

5 13,879 21,171 26,278 503341 449656 412951 

40

6 13,870 21,149 26,241 499924 446507 409856 

Trung bình 13,8722 21,1610 26,2610 500486,2 446958,5 410595,2 

RSD % 0,03 0,05 0,06 0,36 0,42 0,35 

Số đĩa lý thuyết 12670 13014 13656 

Hệ <strong>số</strong> đối xứng 1,16 1,12 1,10 

Độ phân giải - 11,80 6,22 

Bảng 3. 2. Độ thích hợp của hệ thống sắc kí của IBP và PeP 

STT Thời gian lưu (phút) Diện tích píc (mAU.s) 

IBP PeP IBP PeP 

1 23,795 43,647 385092 361498 

2 23,641 43,323 387541 363715 

3 23,638 43,327 384997 361505 

4 23,673 43,378 385518 362442 

5 23,636 43,317 386248 362858 

6 23,627 43,310 385468 361772 

Trung bình 23,6683 43,3837 385810,7 362298,3 

RSD % 0,27 0,30 0,25 0,24 

Số đĩa lý thuyết 14178 14181 

Hệ <strong>số</strong> đối xứng 1,07 1,06 

Độ phân giải - 17,51 

Vậy hệ thống đạt yêu cầu về độ thích hợp hệ thống: Độ lặp lại tốt với RSD 

của thời gian lưu nhỏ hơn 1,0% <strong>và</strong> diện tích píc nhỏ hơn 2,0%; <strong>số</strong> đĩa lý thuyết trên 

2500, hệ <strong>số</strong> bất đối nhỏ hơn 2,0 <strong>và</strong> độ phân giải trên 1,5. Do vậy đáp ứng yêu cầu 

phân tích cho cả 5 <strong>paraben</strong> IPP, PheP, BzP, IBP và PeP. 

3.2.2.2. Độ đặc hiệu 

Tiến hành sắc kí theo điều kiện đã chọn các mẫu sau đây <strong>và</strong> kết quả được thể 

<strong>hiện</strong> ở hình 3.1 (mẫu sữa rửa mặt), hình 3.2 (mẫu nước súc miệng). 

- Dung dịch mẫu placebo: Cân chính xác khoảng 0,5 g chế phẩm, phân tán 

mẫu trong khoảng 25 ml methanol, cho <strong>và</strong>o bình <strong>định</strong> mức 50 ml, lắc siêu âm 10 

phút sau đó pha loãng tớ i điṇh mứ c bằng cù ng dung môi. Lọc qua màng lọc 0,45 

µm. 



41

- Dung dịch mẫu tự tạo hoặc mẫu thử, dung dịch chuẩn được xử lý theo mục 

3.1.2.1 <strong>và</strong> 3.1.2.2. 

a) c) 

b) d) 

Hình 3. 4. Sắc kí đồ đánh giá độ đặc hiệu với 3 <strong>paraben</strong> IPP, PheP, BzP trên nền 

mẫu sữa rửa mặt so với mẫu chuẩn. 

a) Dung môi b) Placebo mẫu sữa rửa mặt 

c) Chuẩn hỗn hợp IPP, PheP, BzP d) Mẫu tự tạo nền sữa rửa mặt 



42

a) c) 

b) d) 

Hình 3. 5. Sắc kí đồ đánh giá độ đặc hiệu với 3 <strong>paraben</strong> nghiên <strong>cứu</strong> trên nền mẫu 

nước súc miệng so với mẫu chuẩn. 

a) Dung môi b) Placebo mẫu nước súc miệng 

c) Chuẩn hỗn hợp IPP, PheP, BzP d) Mẫu tự tạo nền nước súc miệng 



43

a) 

c) 

b) d) 


sữa rửa mặt so với mẫu chuẩn. 

a) Dung môi b) Placebo sữa rửa mặt 

c) Mẫu tự tạo nền sữa rửa mặt d) Dung dịch chuẩn hôñ hợp IBP <strong>và</strong> PeP 



44

a) 

b) d) 


nước súc miệng so với mẫu chuẩn. 

a) Dung môi b) Placebo mẫu nước súc miệng 

c) Chuẩn hỗn hợp IBP, PeP d) Mẫu tự tạo nền nước súc miệng 

Kết quả thu được như ở hình 3.6 <strong>và</strong> 3.7 cho thấy: Trên sắc kí đồ mẫu placebo 

không xuất <strong>hiện</strong> píc ở thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu bất kỳ chất nào 

trong <strong>số</strong> 5 <strong>paraben</strong> IPP, PheP, BzP, IBP và PeP. Trên sắc kí đồ của dung dịch mẫu 

tự tạo cho các píc chińh có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của 5 píc thu 

được từ sắc kí đồ của dung dịch hỗn hợp chuẩn. 

Thứ tự rửa giải <strong>và</strong> thời gian lưu của các chất trong các mẫu khác nhau thể 

<strong>hiện</strong> trên bảng 3.2. 



c) 

45

Bảng 3. 3. Thời gian lưu của IPP, PheP, BzP trên các loại mẫu thử khác nhau. 

Mẫu thử 

Thời gian lưu (phút) 

IPP PheP IBP BzP PeP 

Mẫu sữa rửa mặt 13,55 20,52 23,24 25,42 42,45 

Mẫu nước súc miệng 13,51 20,44 23,44 25,27 42,82 

Mẫu chuẩn 13,51 20,45 23,67 25,57 43,38 

3.2.2.3. Khảo sát khoảng tuyến tính 

Với các <strong>lượng</strong> cân chuẩn là 19,82 mg IPP; 19,85 mg PheP <strong>và</strong> 19,97 mg BzP 

chuẩn bị các dung dịch chuẩn như ở mục 3.1.2.2. 

Bảng 3. 4. Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính của IPP, PheP, BzP. 

STT IPP PheP BzP 

C (µg/ml) 

S 

S 

S 

C (µg/ml) 

C (µg/ml) 

píc(mAu.s) 

píc(mAu.s) 

píc(mAu.s) 

1 1,982 101082 1,985 89402 1,997 81070 

2 3,964 204304 3,970 181344 3,994 165783 

3 5,946 302429 5,955 269202 5,991 247316 

4 9,910 500486 9,925 446959 9,985 410595 

5 15,856 809500 15,880 724190 15,976 666392 

6 19,820 1032011 19,850 923160 19,970 849330 

7 29,730 1551625 29,775 1387297 29,955 1277920 

8 39,640 2093010 39,700 1886779 39,940 1738009 



46

Hình 3. 8. Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích píc <strong>và</strong> nồng độ của 

IPP, PheP, BzP 



Bảng 3. 5. Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính của IBP <strong>và</strong> PeP. 

STT 

IBP 

PeP 

C (µg/ml) S píc(mAu.s) C (µg/ml) S píc(mAu.s) 

1 

2,020 93328 2,140 81950 

2 4,040 189667 4,280 174173 

3 8,080 386019 8,560 362554 

4 12,120 573392 12,840 541891 

5 16,160 769358 17,120 729976 

6 20,200 960011 21,400 912595 

7 32,320 1533885 34,240 1462059 

8 40,400 1971842 42,800 1879917 

47

Hình 3. 9. Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích píc <strong>và</strong> nồng độ 

của IBP <strong>và</strong> PeP 

Kết quả khảo sát cho thấy có sự tương quan tuyến tính chặt chẽ giữa diện 

tích pic <strong>và</strong> nồng độ chất phân tích trong khoảng nồng độ khảo sát. 

3.2.2.4. Đánh giá độ đúng 

Thêm chính xác <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> chất chuẩn <strong>paraben</strong> <strong>và</strong>o nền mẫu placebo, xử lý 

theo qui <strong>trình</strong> phân tích. Tiến hành ở 3 mức nồng độ khác nhau: 4, 8, 12 µg/ml, mỗi 

nồng độ thực <strong>hiện</strong> 3 lần. Dựa <strong>và</strong>o diện tích píc của chất tương ứng trong dung dịch 

chuẩn hỗn hợp để tính ra <strong>lượng</strong> chất chuẩn tìm thấy. 



48

❖ Kết quả khảo sát độ đúng của 5 <strong>paraben</strong> trên nền sữa rửa mặt 

Thực <strong>hiện</strong> khảo sát độ đúng trên nền sản phẩm rửa mặt, tẩy trang dạng bọt 2 

trong 1 Naive với IPP, PheP, BzP, IBP và BzP thu được kết quả như ở các bảng 3.6, 

3.7, 3.8, 3.9 và 3.10. 

Bảng 3. 6. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IPP trên nền sữa rửa 

mặt. 

S 

T 

T 

Nồng 

độ 

(µg/ml) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn 

IPP 

thêm 

(mg) 

S píc 

IPP 

(mAu.s) 

Lượng 

IPP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5106 0,2000 202271 0,2000 100,0 

2 4 0,5199 0,2000 198724 0,1965 98,2 

3 4 0,5106 0,2000 201864 0,1996 99,8 

4 8 0,5061 0,4000 412522 0,4078 102,0 

5 8 0,5108 0,4000 407814 0,4032 100,8 

6 8 0,5175 0,4000 406409 0,4018 100,4 

7 12 0,5018 0,5946 628217 0,6026 101,4 

8 12 0,5025 0,5946 628159 0,6026 101,3 

9 12 0,5165 0,5946 623510 0,5981 100,6 



Trung 

bình 

RSD 

(%) 

99,33 0,97 

101,06 0,78 

101,1 0,43 

49

S 

T 

T 

S 

T 

T 

Bảng 3. 7. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PheP trên nền sữa 

Nồng 

độ 

(µg/ml) 

Lượng cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

PheP 

thêm 

(mg) 

rửa mặt. 

Diện tích 

píc PheP 

(mAu.s) 

Lượng 

PheP 

tìm lại 

(mg) 

% 

thu 

hồi 

1 4 0,5106 0,203 182404 0,2023 99,6 

2 4 0,5199 0,203 179118 0,1986 97,8 

3 4 0,5106 0,203 181353 0,2011 99,1 

4 8 0,5061 0,406 373946 0,4146 102,1 

5 8 0,5108 0,406 369665 0,4099 101,0 

6 8 0,5175 0,406 368577 0,4087 100,7 

7 12 0,5018 0,5955 562138 0,6045 101,5 

8 12 0,5025 0,5955 563078 0,6055 101,7 

9 12 0,5165 0,5955 557962 0,6000 100,8 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

98,84 0,93 

101,25 0,77 

101,31 0,49 

Bảng 3. 8. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với BzP trên nền sữa rửa 

mặt. 

Nồng độ 

(µg/ml) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn 

BzP 

thêm 

(mg) 

Diện tích 

píc BzP 

(mAu.s) 

Lượng 

BzP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5106 0,2010 168313 0,2044 101,7 



2 4 0,5199 0,2010 165258 0,2007 99,9 

3 4 0,5106 0,2010 167901 0,2039 101,5 

4 8 0,5061 0,402 347625 0,4222 105,0 

5 8 0,5108 0,402 342539 0,4160 103,5 

6 8 0,5175 0,402 342195 0,4156 103,4 

7 12 0,5018 0,5991 519177 0,6112 102,0 

8 12 0,5025 0,5991 518283 0,6102 101,9 

9 12 0,5165 0,5991 511905 0,6027 100,6 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

101,00 0,99 

103,97 0,88 

101,49 0,77 

50

Thực <strong>hiện</strong> khảo sát độ đúng trên nền rửa mặt, tẩy trang dạng bọt 2 trong 1 

Naive với IBP <strong>và</strong> PeP thu được kết quả như ở các bảng 3.18, 3.19. 

Bảng 3. 9. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IBP trên nền sữa rửa 

mặt. 

S 

T 

T 

Nồng độ 

(µg/ml) 

Lượng 

cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

IBP 

thêm 

(mg) 

S píc 

IBP 

(mAu.s) 

Lượng 

IBP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5112 0,2030 189481 0,2054 101,2 

2 4 0,5025 0,2030 187205 0,2030 100,0 

3 4 0,5113 0,2030 188236 0,2041 100,5 

4 8 0,5066 0,4060 390755 0,4164 102,6 

5 8 0,5050 0,4060 378745 0,4036 99,4 

6 8 0,5043 0,4060 382359 0,4074 100,4 

7 12 0,5113 0,6090 580943 0,6299 103,4 

8 12 0,5057 0,6090 577895 0,6266 102,9 

9 12 0,5217 0,6090 577118 0,6257 102,7 



Trung 

bình 

RSD 

(%) 

100,57 0,61 

100,77 1,60 

103,02 0,35 

51

S 

T 

T 

Bảng 3. 10. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PeP trên nền sữa 

Nồng 

độ 

(µg/ml) 

Lượng cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn PeP 

thêm (mg) 

1 4 0,5112 0,2100 

2 4 0,5025 0,2100 

3 4 0,5113 0,2100 

4 8 0,5066 0,4200 

5 8 0,5050 0,4200 

6 8 0,5043 0,4200 

7 12 0,5113 0,6300 

8 12 0,5057 0,6300 

9 12 0,5217 0,6300 

rửa mặt. 

Diện tích Lượng 

% 

píc PeP PeP tìm 

(mAu.s) lại (mg) 

thu hồi 

171415 0,2088 99,4 

170074 0,2072 98,7 

171824 0,2093 99,7 

361883 0,4295 102,3 

353689 0,4198 100,0 

355376 0,4218 100,4 

542976 0,6614 105,0 

538589 0,6561 104,1 

538464 0,6559 104,1 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

99,25 0,54 

100,88 1,21 

104,41 0,48 

Kết quả cho thấy phương pháp có độ đúng tốt với nền mẫu sữa rửa mặt (Tỉ lệ 

thu hồi cao, từ 98,84 đến 103,97 %). 

❖ Kết quả khảo sát độ đúng của 5 <strong>paraben</strong> trên nền nước súc miệng. 

Thực <strong>hiện</strong> khảo sát độ đúng trên nền nước súc miệng Colgate Plax 

peppermint fresh(48L10)với IPP, PheP, BzP, IBP và PeP thu được kết quả như ở 

các bảng 3.11, 3.12 <strong>và</strong> 3.13. 



52

Bảng 3. 11. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IPP trên nền nước 

S 

T 

T 

Mức 

nồng độ 

(µg/ml) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn IPP 

thêm (mg) 

súc miệng. 

Diện tích 

píc IPP 

(mAu.s) 

Lượng 

IPP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5079 0,2000 200590 0,1984 99,2 

2 4 0,5064 0,2000 204747 0,2025 101,3 

3 4 0,5184 0,2000 202120 0,1999 100,0 

4 8 0,5102 0,4000 410101 0,4057 101,4 

5 8 0,5044 0,4000 408944 0,4046 101,1 

6 8 0,5266 0,4000 409020 0,4046 101,2 

7 12 0,5064 0,5946 617008 0,5919 99,5 

8 12 0,5148 0,5946 629134 0,6035 101,5 

9 12 0,5213 0,5946 628188 0,6026 101,4 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

100,16 1,04 

101,24 0,16 

100,80 1,08 

Bảng 3. 12. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PheP trên nền nước 

súc miệng. 

S 

T 

T 

Mức 

nồng 

độ 

(ppm) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn 

PheP thêm 

(mg) 

Diện tích 

píc PheP 

(mAu.s) 

Lượng 

PheP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5079 0,2030 181637 0,2016 99,3 

2 4 0,5064 0,2030 184942 0,2053 101,1 

3 4 0,5184 0,2030 182633 0,2027 99,9 

4 8 0,5102 0,4060 372679 0,4137 101,9 

5 8 0,5044 0,4060 370551 0,4113 101,3 



6 8 0,5266 0,4060 370337 0,4111 101,3 

7 12 0,5064 0,5955 553650 0,5953 100,0 

8 12 0,5148 0,5955 563483 0,6059 101,8 

9 12 0,5213 0,5955 564158 0,6066 101,9 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

100,11 0,93 

101,49 0,35 

101,20 1,05 

53

Bảng 3. 13. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với BzP trên nền nước 

S 

T 

T 

Mức 

nồng 

độ 

(µg/ml) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn 

BzP thêm 

(mg) 

súc miệng. 

Diện 

tích píc 

BzP 

(mAu.s) 

Lượng 

BzP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 4 0,5079 0,2010 167995 0,2044 101,7 

2 4 0,5064 0,2010 171133 0,2082 103,6 

3 4 0,5184 0,2010 169056 0,2057 102,3 

4 8 0,5102 0,4020 345257 0,4201 104,5 

5 8 0,5044 0,4020 344061 0,4187 104,1 

6 8 0,5266 0,4020 344037 0,4186 104,1 

7 12 0,5064 0,5991 508521 0,5987 99,9 

8 12 0,5148 0,5991 518296 0,6102 101,9 

9 12 0,5213 0,5991 518286 0,6102 101,9 

TB 

RSD 

(%) 

102,55 0,94 

104,26 0,20 

101,21 1,10 

Bảng 3. 14. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với IBP trên nền nước 

S 

T 

T 

Mức 

nồng độ 

(µg/ml) 

Lượng cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn IBP 

thêm (mg) 

súc miệng. 

Diện tích 

píc IBP 

(mAu.s) 

Lượng 

IBP tìm 

lại (mg) 

1 4 0,5097 0,2030 189897 0,2059 101,4 

2 4 0,5166 0,2030 186406 0,2021 99,6 

3 4 0,5200 0,2030 190182 0,2062 101,6 

4 8 0,5094 0,4060 380148 0,4097 100,9 

5 8 0,5029 0,4060 379171 0,4087 100,7 

6 8 0,5135 0,4060 373755 0,4028 99,2 

7 12 0,5043 0,6090 

565788 0,6134 100,7 

8 12 

0,5137 0,6090 

573075 0,6213 102,0 

9 12 0,5151 0,6090 

565138 0,6127 100,6 

% 

thu 

hồi 



Trung 

bình 

RSD 

(%) 

100,85 1,11 

100,27 0,91 

101,12 0,78 

54

Bảng 3. 15. Kết quả khảo sát độ đúng của phương pháp đối với PeP trên nền nước 

súc miệng. 

S 

T 

T 

Mức 

nồng 

độ 

(ppm) 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn PeP 

thêm (mg) 

1 4 0,5097 0,2100 

2 4 0,5166 0,2100 

3 4 0,5200 0,2100 

4 8 0,5094 0,4200 

5 8 0,5029 0,4200 

6 8 0,5135 0,4200 

7 12 0,5043 0,6300 

8 12 0,5137 0,6300 

9 12 0,5151 0,6300 

Diện tích 

píc PeP 

(mAu.s) 

Lượng 

PheP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

171088 0,2084 99,2 

168958 0,2058 98,0 

171279 0,2086 99,3 

352101 0,4224 100,6 

354754 0,4256 101,3 

363510 0,4361 103,8 

527899 0,6430 102,1 

535124 0,6518 103,5 

526872 0,6418 101,9 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

98,86 0,76 

101,92 1,67 

102,47 0,85 

Kết quả cho thấy phương pháp có độ đúng tốt với nền nước súc miệng (Tỉ lệ 

thu hồi cao, từ 98,86 đến 104,26 %). 

3.2.2.5. Độ lặp lại 

Độ lặp lại được tiến hành thử nghiệm trên 6 mẫu tự tạo. Cân 0,5 g mẫu nền 



rồi tiến hành theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> xử lý mẫu tự tạo như trong mục “Độ đặc hiệu”. Kết quả 

thể <strong>hiện</strong> ở bảng 3.16, bảng 3.17, bảng 3.18 và bảng 3.19. 

55


trên nền sữa rửa mặt. 

IPP 

PheP 

BzP 

S 

T 

T 

Lượng 

cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

hoạt 

chất tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5061 0,4000 412522 0,4078 102,0 

2 0,5108 0,4000 407814 0,4032 100,8 

3 0,5175 0,4000 406409 0,4018 100,4 

4 0,5053 0,4000 413435 0,4087 102,2 

5 0,5423 0,4000 409936 0,4052 101,3 

6 0,5038 0,4000 413186 0,4085 102,1 

1 0,5061 0,4060 373946 0,4146 102,1 

2 0,5108 0,4060 369665 0,4099 101,0 

3 0,5175 0,4060 368577 0,4087 100,7 

4 0,5053 0,4060 373954 0,4147 102,1 

5 0,5423 0,4060 371539 0,4120 101,5 

6 0,5038 0,4060 375208 0,4160 102,5 

1 0,5061 0,4020 347625 0,4222 105,0 

2 0,5108 0,4020 342539 0,4160 103,5 

3 0,5175 0,4020 342195 0,4156 103,4 

4 0,5053 0,4020 346784 0,4212 104,8 

5 0,5423 0,4020 343820 0,4176 103,9 

6 0,5038 0,4020 347309 0,4218 104,9 



Trung 

bình 

RSD 

(%) 

101,46 0,72 

101,64 0,71 

104,25 0,72 

56


nền sữa rửa mặt. 

IBP 

PeP 

S 

T 

T 

Lượng 

cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

hoạt 

chất tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5066 0,4060 390755 0,4164 102,6 

2 0,5050 0,4060 378745 0,4036 99,4 

3 0,5043 0,4060 382359 0,4074 100,4 

4 0,5030 0,4060 378402 0,4032 99,3 

5 0,5174 0,4060 372012 0,3964 97,6 

6 0,5019 0,4060 389328 0,4149 102,2 

1 0,5066 0,4200 361883 0,4295 102,3 

2 0,5050 0,4200 353689 0,4198 100,0 

3 0,5043 0,4200 355376 0,4218 100,4 

4 0,5030 0,4200 349976 0,4154 98,9 

5 0,5174 0,4200 346158 0,4109 97,8 

6 0,5019 0,4200 361318 0,4288 102,1 



Trung 

bình 

RSD 

(%) 

100,24 1,87 

100,25 1,75 

57


trên nền nước súc miệng. 

IPP 

PheP 

BzP 

S 

T 

T 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn IPP 

thêm (mg) 

S píc 

IPP 

(mAu.s) 

Lượng 

IPP tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5102 0,4000 410101 0,4057 101,4 

2 0,5044 0,4000 408944 0,4046 101,1 

3 0,5266 0,4000 409020 0,4046 101,2 

4 0,515 0,4000 407327 0,4030 100,7 

5 0,5058 0,4000 406686 0,4023 100,6 

6 0,5071 0,4000 401444 0,3971 99,3 

1 0,5102 0,4060 372679 0,4137 101,9 

2 0,5044 0,4060 370551 0,4113 101,3 

3 0,5266 0,4060 370337 0,4111 101,3 

4 0,515 0,4060 369360 0,4100 101,0 

5 0,5058 0,4060 368310 0,4088 100,7 

6 0,5071 0,4060 364167 0,4042 99,6 

1 0,5102 0,4020 345257 0,4201 104,5 

2 0,5044 0,4020 344061 0,4187 104,1 

3 0,5266 0,4020 344037 0,4186 104,1 

4 0,515 0,4020 343061 0,4174 103,8 

5 0,5058 0,4020 341431 0,4155 103,4 

6 0,5071 0,4020 337335 0,4105 102,1 



TB 

RSD 

(%) 

100,72 0,76 

100,95 0,78 

103,68 0,83 

58


IBP 

PeP 

S 

T 

T 

Lượng 

cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

nền nước súc miệng. 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

tìm lại 

(mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5073 0,4060 377708 0,4071 100,3 

2 0,5250 0,4060 381734 0,4114 101,3 

3 0,5155 0,4060 393516 0,4241 104,5 

4 0,5094 0,4060 380148 0,4097 100,9 

5 0,5029 0,4060 379171 0,4087 100,7 

6 0,5135 0,4060 373755 0,4028 99,2 

1 0,5073 0,4200 352101 0,4224 100,6 

2 0,5250 0,4200 354754 0,4256 101,3 

3 0,5155 0,4200 363510 0,4361 103,8 

4 0,5094 0,4200 353181 0,4237 100,9 

5 0,5029 0,4200 352205 0,4226 100,6 

6 0,5135 0,4200 345354 0,4144 98,7 

Trung 

bình 

RSD 

(%) 

101,15 1,76 

100,99 1,66 

Kết quả độ lặp lại đối với mẫu tự tạo trên 2 nền mẫu sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước súc 

miệng cho giá tri ̣RSD lớ n nhất là 1,87%, phương pháp có độ lặp lại tốt. 

3.2.2.6. Độ chính xác trung gian 

Độ chính xác trung gian được tiến hành thử nghiệm trên 6 mẫu tự tạo được 



chuẩn bị giống phần độ lặp lại nhưng thực <strong>hiện</strong> khác ngày <strong>và</strong> khác kiểm nghiệm 

viên. Kết quả thể <strong>hiện</strong> ở bảng 3.12 <strong>và</strong> bảng 3.13 cho thấy phương pháp có độ chính 

xác tương đối cao trên cả nền mẫu sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước súc miệng. 

59


PheP, BzP trên nền sữa rửa mặt. 

IPP 

PheP 

BzP 

Lượng Lượng 

Lượng 

S 

cân chuẩn S píc hoạt chất % 

T 

mẫu giả thêm (mAu.s) tìm lại thu hồi 

T 

dược (g) (mg) 

(mg) 

1 0,5016 0,4060 418281 0,4173 102,8 

2 0,5108 0,4060 416775 0,4158 102,4 

3 0,5004 0,4060 418091 0,4172 102,8 

4 0,5044 0,4060 415903 0,4150 102,2 

5 0,5009 0,4060 418355 0,4174 102,8 

6 0,5105 0,4060 417589 0,4167 102,6 

Trung bình (n=6) 102,72 

RSD % (n=6) 0,13 

1 0,5016 0,4020 368716 0,4125 102,6 

2 0,5108 0,4020 367900 0,4116 102,4 

3 0,5004 0,4020 369072 0,4129 102,7 

4 0,5044 0,4020 367058 0,4107 102,2 

5 0,5009 0,4020 369418 0,4133 102,8 

6 0,5105 0,4020 368892 0,4127 102,7 


RSD % (n=6) 0,10 

1 0,5016 0,4100 348968 0,4207 102,6 

2 0,5108 0,4100 346998 0,4183 102,0 

3 0,5004 0,4100 349479 0,4213 102,8 

4 0,5044 0,4100 347092 0,4185 102,1 

5 0,5009 0,4100 349654 0,4215 102,8 

6 0,5105 0,4100 348723 0,4204 102,5 


RSD % (n=6) 0,19 



Trung RSD 

bình (n=12) 

(n=12) (%) 

102,09 0,87 

102,19 0,76 

103,47 1,07 

60


<strong>và</strong> PeP trên nền sữa rửa mặt. 

IBP 

PeP 

STT 

Lượng 

cân 

mẫu giả 

dược (g) 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

hoạt 

chất tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5050 0,4040 385497 0,4045 100,1 

2 0,5206 0,4040 383489 0,4024 99,6 

3 0,5092 0,4040 382120 0,4009 99,2 

4 0,5159 0,4040 383537 0,4024 99,6 

5 0,5033 0,4040 391209 0,4105 101,6 

6 0,5089 0,4040 380250 0,3990 98,8 


RSD % (n=6) 0,98 

1 0,5050 0,4300 355373 0,4299 100,0 

2 0,5206 0,4300 353312 0,4274 99,4 

3 0,5092 0,4300 353075 0,4272 99,3 

4 0,5159 0,4300 354630 0,4290 99,8 

5 0,5033 0,4300 361885 0,4378 101,8 

6 0,5089 0,4300 351244 0,4249 98,8 


RSD % (n=6) 1,04 

Trung 

bình 

(n=12) 

RSD 

(n=12) 

(%) 

100,03 0,30 

100,06 0,28 



61


PheP, BzP trên nền nước súc miệng. 

S 

T 

T 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

hoạt chất 

tìm lại 

(mg) 

% 

thu hồi 

Trung 

bình 

(n=12) 

RSD 

(n=12) 

(%) 

IPP 

PheP 

BzP 

1 0,5163 0,4060 412067 0,4111 101,3 

2 0,504 0,4060 414297 0,4134 101,8 

3 0,5308 0,4060 410236 0,4093 100,8 

4 0,5118 0,4060 412651 0,4117 101,4 

5 0,5048 0,4060 415717 0,4148 102,2 

6 0,5004 0,4060 412608 0,4117 101,4 


RSD % (n=6) 0,46 

1 0,5163 0,4020 364530 0,4078 101,5 

2 0,504 0,4020 366675 0,4102 102,1 

3 0,5308 0,4020 361958 0,4050 100,7 

4 0,5118 0,4020 365019 0,4084 101,6 

5 0,5048 0,4020 367328 0,4110 102,2 

6 0,5004 0,4020 364606 0,4079 101,5 


RSD % (n=6) 0,52 



1 0,5163 0,4100 344477 0,4153 101,3 

2 0,504 0,4100 346984 0,4183 102,0 

3 0,5308 0,4100 342975 0,4135 100,9 

4 0,5118 0,4100 345829 0,4169 101,7 

5 0,5048 0,4100 347116 0,4185 102,1 

6 0,5004 0,4100 345843 0,4170 101,7 


RSD % (n=6) 0,46 

101,10 0,53 

101,27 0,45 

102,65 1,43 

62


IBP 

PeP 

STT 

Lượng 

cân mẫu 

giả dược 

(g) 

<strong>và</strong> PeP trên nền nước súc miệng. 

Lượng 

chuẩn 

thêm 

(mg) 

S píc 

(mAu.s) 

Lượng 

hoạt 

chất tìm 

lại (mg) 

% 

thu hồi 

1 0,5021 0,4040 389269 0,4084 101,1 

2 0,5360 0,4040 387333 0,4064 100,6 

3 0,5121 0,4040 381105 0,3999 99,0 

4 0,5232 0,4040 383669 0,4026 99,6 

5 0,5017 0,4040 380182 0,3989 98,7 

6 0,5041 0,4040 378985 0,3976 98,4 


RSD % (n=6) 1,08 

1 0,5021 0,4300 360486 0,4361 101,4 

2 0,5360 0,4300 358056 0,4332 100,7 

3 0,5121 0,4300 350784 0,4244 98,7 

4 0,5232 0,4300 354041 0,4283 99,6 

5 0,5017 0,4300 351605 0,4254 98,9 

6 0,5041 0,4300 349461 0,4228 98,3 


RSD % (n=6) 1,23 

Trung 

bình 

(n=12) 



RSD 

(n=12) 

(%) 

100,37 1,11 

100,31 0,97 

Kết quả phân tićh giữa 2 kiểm nghiêṃ viên cho giá tri ̣ RSD lớ n nhất là 

1,43%, phương pháp có đô ̣chuṃ đat ̣ yêu cầu. 

3.2.2.7. Giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> (LOD), giới hạn <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> (LOQ) 

Pha loãng dần dung dịch thử <strong>và</strong> dung dịch chuẩn đến nồng độ thấp nhất mà 

tín hiệu của máy vẫn đáp ứng được (gấp 3 lần so với nhiễu đường nền) để xác <strong>định</strong> 

giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong>. Các sắc kí đồ thu được như ở hình 3.8 <strong>và</strong> 3.9. Giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> 

xác <strong>định</strong> được như ở bảng 3.14. 

63

0.20 

0.15 

mAU 

254nm,4nm 

/2.062 

/1.780 

/2.575 

/2.931 

/5.416 

Datafile Name:LOD 200 + 48L03.lcd 

IsoPropyl PB/14.112 

Phenyl PB/21.689 

Benzyl PB/26.976 

Hỗn hợp chuẩn trong 

nền mẫu sữa rửa mặt 

0.10 

0.05 

/3.685 

(trong đó PheP 0,05 

ppm; BzP 0,05 ppm) 

0.00 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 

0.35 mAU 

254nm,4nm 

0.30 

0.25 

0.20 

0.15 

0.10 

0.05 

0.00 

0.15 

0.10 

0.05 

0.00 

-0.05 

-0.10 

/2.587 

/2.939 

Datafile Name:LOD 200.lcd 


/13.755 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 

mAU 

254nm,4nm 

0.20 

/1.510 

/2.552 

/2.302 

/2.911 



0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 







Dung dịch chuẩn hỗn 

hợp (trong đó PheP 

0,05 ppm; BzP 0,05 

ppm) 


nền mẫu nước súc 

miệng (trong đó PheP 

0,05 ppm; BzP 0,05 

ppm) 

Hình 3. 10. Sắc kí đồ xác <strong>định</strong> LOD của PheP <strong>và</strong> BzP. 

64

mAU 

254nm,4nm 

0.25 

0.20 

0.15 

0.10 

/2.041 /1.793 

/2.563 

/2.297 

/2.941 /2.760 

/5.415 






nền mẫu sữa rửa mặt 

(trong đó IPP 0,025 

0.05 

/3.552 

/3.620 

ppm) 

0.00 

0.150 

0.125 

0.100 

0.075 

0.050 

0.025 

0.000 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 

0.175 mAU 

254nm,4nm 

0.20 

0.15 

0.10 

0.05 

0.00 

-0.05 

/2.574 

/2.946 

/2.143 

/2.358 

/3.667 

Datafile Name:LOD 400.lcd 


0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 

mAU 

254nm,4nm 

/1.512 

/2.547 

/2.294 

/2.902 

/7.151 



0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min 

Hình 3. 11. Sắc kí đồ thể <strong>hiện</strong> LOD của IPP. 







Dung dịch chuẩn hỗn 

hợp (trong đó IPP 

0,025 ppm) 


nền nước súc miệng 

(trong đó IPP 0,025 

ppm) 

65

IBP/23.276 

PeP/42.558 

/0.927 

/2.915 

/3.508 

/7.073 

IBP/23.639 

/4.767 

/2.274 /2.196 

/2.581 

/3.238 

PeP/43.281 

/1.902 

/2.891 

/3.089 /4.028 

IsoButyl PB/23.700 

0.150 

0.125 

0.100 

mAU 

254nm,4nm 

Datafile Name:LOD 0.03 ppm + 48L03.lcd 

0.150 

0.125 

0.100 

0.075 

mAU 

254nm,4nm 

/2.312 /2.573 

Datafile Name:LOD 0.03 ppm + 48L10.lcd 

0.075 

0.050 

0.050 

0.025 

0.025 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0 min 

a) 

0.000 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0 min 

c) 

0.10 

0.05 

0.00 

-0.05 

mAU 

254nm,4nm 

/2.921 

Datafile Name:LOD 2PB 0.03ppm.lcd 

IBP/23.312 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0 min 

PeP/42.749 

b) 

0.20 mAU 

254nm,4nm 

0.15 

0.10 

0.05 

0.00 

Datafile Name:LOD 2PB 0.04ppm.lcd 

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0 min 

Hình 3. 12. Sắc kí đồ thể <strong>hiện</strong> LOD của IBP, PeP 

a) Hỗn hợp chuẩn trong nền mẫu sữa rửa mặt (trong đó IBP 0,03 ppm) 

b) Dung dịch chuẩn hỗn hợp (trong đó IBP 0,03 ppm) 

c) Hỗn hợp chuẩn trong nền mẫu nước súc miệng (trong đó IBP 0,03 ppm) 

d) Dung dịch chuẩn hỗn hợp (trong đó PeP 0,04 ppm) 

Bảng 3. 24. LOD <strong>và</strong> LOQ của IPP, PheP, BzP, IBP và PeP 



STT Tên chất phân tích LOD (µg/ml) LOQ (µg/ml) 

d) 

1 IPP 0,025 0,09 

2 PheP 0,05 0,20 

3 BzP 0,05 0,20 

4 IBP 0,03 0,10 

5 PeP 0,04 0,15 

66

3.3. ÁP DỤNG KIỂM TRA MẪU TRÊN THỊ TRƯỜNG 

Xem xét mỹ phẩm là <strong>một</strong> đối tượng có nền mẫu phức tạp <strong>và</strong> không phải 

thành phần nào cũng được công bố trên nhãn sản phẩm. Vì vậy khi phân tích thực tế 

sẽ thường xuyên bắt gặp trong mẫu những píc có thời gian lưu trùng với thời gian 

lưu của chuẩn chất cần phân tích. Tuy nhiên nếu quan sát phổ UV thì sẽ loại thô 

được những chất không thuộc nhóm chất đang phân tích. Dưới đây là <strong>một</strong> <strong>số</strong> trường 

hợp cần được xem xét trong <strong>số</strong> 10 mẫu mỹ phẩm thử nghiệm được mua từ thị 

trường. Tất cả đều là các sản phẩm mỹ phẩm mới, còn hạn sử dụng <strong>và</strong> lớp bề mặt đã 

được loại bỏ trước khi cân (trừ nước súc miệng). 

Trong mẫu 48L01 <strong>và</strong> 48L02 tại vị trí 25,0 phút có píc, đây là vị trí của BzP 

trong chuẩn hỗn hợp, nhưng píc này có phổ UV hoàn toàn khác so với phổ của 

nhóm <strong>paraben</strong>. Chính vì vậy kết quả chồng phổ cho hệ <strong>số</strong> tương đồng thấp (0,76; 

0,77). 



67

a) a) 

b) c) 

Hình 3. 13. So sánh phổ UV-VIS của các píc trên mẫu thử 48L02 <strong>và</strong> 48L01. 

a) Sắc kí đồ <strong>và</strong> phổ UV của píc BzP trong chuẩn hỗn hợp IPP, PheP, BzP. 



b) Sắc kí đồ <strong>và</strong> phổ UV của píc tại tR = 25,0 phút trong mẫu 48L01. 

c) Sắc kí đồ <strong>và</strong> phổ UV của píc tại tR = 25,0 phút trong mẫu 48L02. 

Trường hợp phức tạp hơn, trong mẫu xuất <strong>hiện</strong> píc có thời gian lưu gần với 

thời gian lưu của chất phân tích <strong>và</strong> có phổ UV hoàn toàn giống với nhóm chất phân 

tích. Lúc này chồng phổ UV sẽ cho hệ <strong>số</strong> tương đồng xấp xỉ 1. Người phân tích cần 

sử dụng cách thêm chuẩn <strong>và</strong>o nền mẫu trước khi kết luận. 

68

a) b) 

c) d) 



Hình 3. 14. Sắc kí đồ <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> các <strong>paraben</strong> trong 48L07 

a)Dung dịch chuẩn hỗn hợp IPP, PheP, BzP 

b) Mẫu 48L07 có thêm chuẩn IPP c) Mẫu 48L07 

d) Mẫu 48L07 có thêm chuẩn PP e) Dung dịch chuẩn hỗn hợp IPP + PP 

e) 

Ví dụ trong 10 mẫu được kiểm tra trong đề tài này, mẫu 48L07 có píc gần với 

IPP (tR thử = 14,5 phút; tR chuẩn IPP = 13,6 phút). Tiến hành chồng phổ thử <strong>và</strong> 

chuẩn cho hệ <strong>số</strong> tương đồng Similarity = 0,9999. Tuy nhiên giá trị này cũng chưa 

69

đủ để khẳng <strong>định</strong> píc có trong thử là IPP. Mặt khác quan sát chuẩn hỗn hợp 9 

<strong>paraben</strong> trong cùng điều kiện phân tích thấy píc IPP <strong>và</strong> PP gần nhau (IPP = 13,8 

phút; PP = 14,7 phút; Rs = 1,9). 

Trong thực tế có trường hợp khi cho chuẩn <strong>và</strong>o nền mẫu thì thời gian lưu của 

píc chuẩn bị trôi đi so với dung dịch mẫu chuẩn trong dung môi. Vì vậy cần thiết 

phải tiến hành phân tích mẫu thêm chuẩn IPP <strong>và</strong> mẫu thêm chuẩn PP. Kết quả như 

hình 3.15, trên sắc kí đồ của mẫu thêm chuẩn IPP xuất <strong>hiện</strong> 2 píc ngay cạnh nhau 

trong đó 1 píc là IPP <strong>và</strong> píc còn lại có vị trí giống PP trong chuẩn hỗn hợp (IPP = 

13,5 phút; píc 2 = 14,3 phút). Mặt khác trên sắc kí đồ của mẫu thử thêm chuẩn PP 

chỉ xuất <strong>hiện</strong> duy nhất 1 píc (PP = 14,3 phút). Chồng phổ thử <strong>và</strong> chuẩn hỗn hợp 9 

<strong>paraben</strong> tại vị trí PP cho hệ <strong>số</strong> tương đồng Similarity = 0,9999. 

Như vậy rất có thể píc xuất <strong>hiện</strong> trong mẫu 48L07 là PP. Để khẳng <strong>định</strong> chắc 

chắn thì cần chạy lại bằng <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> PP trong mỹ phẩm. 

Phân tích chất cấm trong mỹ phẩm thật sự không đơn giản. Việc khẳng <strong>định</strong> 

chất cấm cần có sự so sánh giữa các phương pháp. Phương pháp HPLC với detector 

DAD có vai trò sàng lọc hiệu quả, đơn giản <strong>và</strong> nhanh chóng. Nhưng cần thiết phải 

có kết quả đối chứng bằng phương pháp khác đối với những mẫu <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> chất 

cấm (như phân tích khối phổ). Bởi kết quả này liên quan đến pháp lý <strong>và</strong> có thể <strong>phát</strong> 

sinh rất nhiều vấn đề hệ lụy khi kết luận không chính xác. 

Áp dụng <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> để kiểm tra trên 10 mẫu mỹ phẩm, kết quả thu được như ở 

bảng 3.27. DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT 


70

Mã 

<strong>số</strong> 

Bảng 3. 25. Kết quả phân tích các <strong>paraben</strong> cấm. 

Tên mẫu 

Số 

ĐKKN 

1 Nước rửa tay bảo vệ khỏi vi khuẩn 48L01 - 

2 Nước rửa tay bảo vệ khỏi vi khuẩn Lifeboy 48L02 - 

3 Dầu rửa mặt, tẩy trang dạng bọt 2 trong 1 Naive 48L03 - 

4 Sữa rửa mặt lá đào Naive 48L04 - 

5 Sữa rửa mặt trắng da Nivea 48L05 - 

6 Sữa rửa mặt Pond's pure white 48L06 - 

7 Sũa rửa mặt Benew snail 48L07 - 

8 Nước súc miệng Listerine total care 48L08 - 

9 Nước súc miệng Listerine natural green tea 48L09 - 

10 Nước súc miệng colgate plax peppermint fresh 48L10 - 



Kết 

quả 

71

4.1. VỀ CÁC PARABEN NGHIÊN CỨU 

CHƯƠNG 4 

BÀN LUẬN 

Paraben là ester của acid p-hydroxybenzoic <strong>và</strong> theo Cục Quản lý Thực phẩm 

<strong>và</strong> Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA), chúng là chất bảo quản được sử dụng rộng rãi nhất 

trong các sản phẩm mỹ phẩm. Trong thực tiễn công nghiệp thường người ta sử 

dụng hỗn hợp các <strong>paraben</strong> <strong>và</strong> trong <strong>một</strong> <strong>số</strong> trường hợp kết hợp với các loại chất bảo 

quản khác để bảo vệ chống lại <strong>một</strong> loạt các vi sinh vật. Trong <strong>và</strong>i năm gần đây diễn 

ra cuộc tranh luận về sự an toàn <strong>và</strong> nguy cơ ung thư tiềm tàng từ việc sử dụng các 

sản phẩm chứa <strong>paraben</strong>. Thêm <strong>và</strong>o đó, chất <strong>paraben</strong> trong các sản phẩm chăm sóc 

cá nhân như dung dịch súc miệng có phản ứng với clo tự do thường chứa trong 

nước máy tạo ra <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> đáng kể các sản phẩm phụ clo hóa của chúng sau <strong>và</strong>i 

phút. Cần có những nghiên <strong>cứu</strong> sâu hơn để đánh giá những nguy cơ tiềm ẩn về sức 

khoẻ <strong>và</strong> hoạt động phá hoại nội tiết có thể có của sản phẩm <strong>paraben</strong> halogen hóa. 

Do vậy cần có các phương pháp phân tích mới cho việc kiểm soát chất <strong>lượng</strong> đối 

với mỹ phẩm <strong>và</strong> các công thức chứa <strong>paraben</strong>. Việc phân tích các chất phụ gia này 

trong mỹ phẩm rất quan trọng không chỉ cho mục đích đảm bảo chất <strong>lượng</strong> mà còn 

vì bảo vệ lợi ích người tiêu dùng 

4.2. VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 

Để phân tích các <strong>paraben</strong> có các phương pháp phổ biến như: phương pháp 

sắc kí lỏng (sắc kí lỏng hiệu năng cao ghép nối detector UV-VIS; sắc kí lỏng khối 

phổ LC-MS/MS; sắc kí lỏng siêu hiệu năng kết hợp đầu dò khối phổ UPLC- 

MS/MS, phương pháp sắc kí khí khối phổ GC-MS, phương pháp điện di mao quản 

(CE). 



Phương pháp điện di mao quản có ưu điểm là tiết kiệm, <strong>lượng</strong> hóa chất sử 

dụng rất ít, có thể phân tích được nhiều nhóm chất khác nhau vớ i tốc độ và hiệu suất 

cao. Tuy nhiên, tính ổn <strong>định</strong> không cao, thiết bị không phổ biến cho các phòng thí 

nghiệm. Phương pháp sắc kí khí khối phổ GC-MS là phương pháp có độ nhạy <strong>và</strong> độ 

tin cậy cao, tuy nhiên cũng có nhược điểm là sự khiếm khuyết của việc xác <strong>định</strong> 

72

trực tiếp <strong>một</strong> <strong>số</strong> chất do tính bất ổn, phân cực <strong>và</strong> sự không ổn <strong>định</strong> nhiệt của chúng. 

Phương pháp HPLC với độ lặp lại tốt là <strong>một</strong> kỹ thuật lý tưởng để phân tích tồn dư 

của các thành phần này. Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao với detector UV- 

VIS có <strong>một</strong> nhược điểm là có thể có sự chồng chéo các píc khi phân tích <strong>paraben</strong> 

trong nền mẫu phức tạp. Những hạn chế này có thể được khắc phục khi kết hợp sắc 

kí lỏng với đầu dò khối phổ. Tuy nhiên kỹ thuật này giá thành cao hơn đáng kể <strong>và</strong> 

thiết bị vẫn chưa có ở nhiều phòng thí nghiệm. Dựa <strong>và</strong>o tham khảo tài liệu, kết hợp 

với điều kiện thực tế của phòng thí nghiệm, chúng tôi lựa chọn phương pháp HPLC- 

UV/VIS để phân tích <strong>paraben</strong>. Đây là thiết bị khá phổ biến ở các phòng phân tích, 

kiểm nghiệm. 

Phần lớn các phương pháp LC xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> được báo cáo là sử dụng các 

cột dựa trên hạt thông thường. Các cột như vậy nói chung có hai hạn chế chính. Sự 

chuyển khối chậm giữa các pha động <strong>và</strong> pha tĩnh <strong>và</strong> gia tăng áp suất ở tốc độ cao. 

Các vật liệu đơn khối mới được thương mại hóa gần đây có thể là <strong>một</strong> sự lựa chọn 

thú vị <strong>và</strong> thuận lợi mang lại các đặc tính thuận lợi cho việc tách nhanh chóng <strong>và</strong> 

hiệu quả cao, như giảm áp suất trên cột, động học chuyển khối nhanh <strong>và</strong> khả năng 

liên kết cao. Chính vì những đặc tính đó mà các nguyên liệu đồng nhất đã được đưa 

<strong>và</strong>o danh sách đóng gói L1 của Dược điển Mỹ. Như vậy có thêm <strong>một</strong> sự lựa chọn 

nữa để các nhà phân tích cân nhắc khi phân tích <strong>paraben</strong>. 

Một gợi ý mới cho phân tích <strong>paraben</strong> trong các sản phẩm mỹ phẩm đấy là 

phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao với detector huỳnh quang (FD) lần đầu tiên 



được công bố <strong>và</strong>o năm 2016 trong nghiên <strong>cứu</strong> của AgnieszkaZgoła-Grześkowiak 

<strong>và</strong> cộng sự [64]. FD đưa ra cả độ chọn lọc <strong>và</strong> độ nhạy cao hơn nhiều so với UV. 

Do đó, <strong>một</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> chuẩn bị mẫu đơn giản với độ pha loãng mẫu 1000 lần đã 

được <strong>phát</strong> triển thành công trong nghiên <strong>cứu</strong> này. Thời gian chuẩn bị không mất 

hơn 2 phút cho mỗi mẫu. Hơn nữa, tiêm mẫu pha loãng nhiều làm tăng tuổi thọ cột 

HPLC bởi vì nó ít bị tắc bởi các thành phần nền mẫu hấp phụ cao. 

73

4.2.1. Về phương pháp xử lý mẫu 

Nhìn chung, sự phức tạp của các nền mẫu mỹ phẩm <strong>và</strong> các trạng thái thể chất 

khác biệt của chúng đã dẫn đến sự <strong>phát</strong> triển của rất nhiều các phương pháp phân 

tích khác nhau. Trong hầu hết các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> <strong>trình</strong> bày trong phụ lục 2, việc bổ sung 

dung môi <strong>và</strong> lắc siêu âm đã được sử dụng. Trong khoảng <strong>một</strong> nửa các nghiên <strong>cứu</strong> là 

việc làm giàu mẫu <strong>và</strong> làm sạch được thực <strong>hiện</strong> bằng cách sử dụng chiết xuất pha 

rắn, vi chiết đơn giọt, vi chiết pha rắn, chiết xuất hấp phụ trên thanh khuấy <strong>và</strong> các 

kỹ thuật khác. Các phương pháp chuẩn bị phức tạp đã được sử dụng ngay cả đối với 

các nền mẫu tương đối đơn giản như gel tẩy trang, dung dịch nước súc miệng <strong>và</strong> gel 

tóc [35]. Trong bối cảnh này, với việc lựa chọn sự đơn giản của phương pháp <strong>phát</strong> 

triển chúng tôi mong muốn rằng sẽ ít khả năng dẫn đến sai sót hơn. 

Cũng đễ dàng nhận thấy <strong>một</strong> <strong>số</strong> <strong>lượng</strong> lớn các phương pháp dựa trên sự pha 

loãng đơn giản <strong>và</strong> sự đồng nhất của dung môi pha loãng <strong>và</strong> mẫu thử đã được công 

bố [62], [30], [51], ... Trong đó methanol là dung môi được sử dụng nhiều nhất 

trong việc chiết xuất <strong>paraben</strong> từ các nền mẫu. Methanol cũng là dung môi phổ biến, 

dễ kiếm, vì vậy trong nghiên <strong>cứu</strong> này cũng đã lựa chọn dung môi chiết mẫu là 

methanol. 

Mặt khác, các <strong>paraben</strong> là chất bảo quản, nồng độ sử dụng rất nhỏ <strong>và</strong> không 

xác <strong>định</strong> được trước, vì vậy <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> xử lý mẫu trong đề tài chúng tôi đưa ra có tính 

chất thăm dò tạm thời. Lượng dung môi chiết sử dụng có thể thay đổi tùy thuộc <strong>và</strong>o 

mẫu thử sau khi đã xác <strong>định</strong> sơ bộ trước nồng độ của <strong>paraben</strong> có trong mẫu để đưa 



nồng độ phân tích <strong>và</strong>o trong khoảng nồng độ đã khảo sát. 

Các ảnh hưởng nền mẫu quan trọng nhất đã được báo cáo đối với 

propyl<strong>paraben</strong> hoặc methyl<strong>paraben</strong> [62]. Sự tuyến tính kém đã được quan sát thấy 

trong việc <strong>dựng</strong> đường chuẩn đối với methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong>, 

butyl<strong>paraben</strong> [51]. Như vậy có thể thấy vấn đề bị ảnh hưởng bởi nền mẫu mới chỉ 

được báo cáo ở nhóm <strong>paraben</strong> có giới hạn về nồng đô ̣sử duṇg (MP, EP, PP, BP). 

Mặc dù trên hai nền mẫu trong đề tài cho thấy sự thu hồi có thể chấp nhận 

được (ngay cả khi không có tinh chế chiết pha rắn), nhưng thiết nghĩ những dịch 

74

chiết này nên được tinh chế thêm để bảo vệ cột sắc kí khỏi sự lắng đọng dầu, nhằm 

kéo dài tuổi thọ của cột. Có thể nghĩ đến kỹ thuật chiết xuất pha rắn (SPE) <strong>và</strong> chiết 

xuất pha rắn với sợi (SPME), tuy nhiên tiền xử lý mẫu không thể được loại bỏ hoàn 

toàn cho hai kĩ thuật này mà như thế lại giảm độ nhạy. Các vật liệu nano có thể là 

<strong>một</strong> hướng khai thác trong tương lai cho phép làm sạch nền mẫu mỹ phẩm, vừa 

tránh nhiễu mà không giảm độ nhạy. Các máy nano đã cho thấy khả năng trích xuất 

nhiều loại hợp chất vì bề mặt của chúng được phủ các phân tử chức năng, polyme 

hoặc các hạt nâng cao tính chọn lọc <strong>và</strong> hiệu quả làm giàu mẫu. 

4.2.2. Về <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích 

Xây <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích trong mỹ phẩm rất phức tạp, không thể chỉ tiến 

hành dựa trên mẫu chuẩn mà <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> bị ảnh hưởng rất nhiều bởi nền mẫu. Vì vậy 

<strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> được <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> bước đầu nhưng khi tiến hành <strong>và</strong>o mẫu thử đã phải có 

những thay đổi để phù hợp với từng nền mẫu khác nhau. Trong nền mẫu có nhiều 

chất chưa xác <strong>định</strong> được trước (có những chất được ghi trên nhãn <strong>và</strong> những chất 

không được công bố) gây khó khăn trong quá <strong>trình</strong> <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích. 

Thậm chí trong cùng <strong>một</strong> dạng nền mẫu (son, phấn, kem bôi da...), <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân 

tích cũng có thể phải thay đổi theo từng nhà sản xuất khác nhau. Qua khảo sát, 

chúng tôi đã <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> chương <strong>trình</strong> sắc kí để <strong>định</strong> tính <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> 5 <strong>paraben</strong> (IPP, 

PheP, IBP, BzP, PeP) trong 2 nền mẫu sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước súc miệng. 

4.2.3. Về thẩm <strong>định</strong> phương pháp 

Xây <strong>dựng</strong> <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> phân tích trong mỹ phẩm bị ảnh hưởng rất nhiều bởi nền 



mẫu. Vì vâỵ trong quá triǹh áp duṇg <strong>quy</strong> triǹh kiểm tra mâũ sẽ có khi gă ̣p những 

mâũ cá biêt ̣ không thể áp duṇg nguyên xi <strong>quy</strong> trình như đề tài đưa ra mà cần có 

những điều chỉnh hợp lý. Khi đó cần thiết phải thẩm điṇh lai ̣ trên nền mâũ đó. 

Do các <strong>paraben</strong> bị cấm là chất bảo quản không được phép sử dụng, không 

biết chính xác hàm <strong>lượng</strong> nên để thẩm <strong>định</strong> phương pháp chúng tôi chủ yếu thực 

<strong>hiện</strong> trên mẫu tự tạo ở hàm <strong>lượng</strong> nhỏ. Nồng độ khảo sát <strong>paraben</strong> cũng rất nhỏ, 

<strong>lượng</strong> chuẩn thêm <strong>và</strong>o chỉ đến cỡ microgram, với <strong>lượng</strong> nhỏ như vậy chúng thôi 

không thể cân cho từng mẫu được nên <strong>lượng</strong> hoạt chất thêm <strong>và</strong>o bằng cách thêm 

75

các thể tích đã tính toán của dung dịch chuẩn <strong>paraben</strong>. Mặc dù được tiến hành ở 

nồng độ rất thấp nhưng kết quả thu được đã cho thấy phương pháp đã đáp ứng được 

yêu cầu <strong>định</strong> tính, <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> đồng thời <strong>paraben</strong> trong nền mẫu sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước 

súc miệng (Theo khuyến cáo của các nhà phân tích hóa học AOAC). Cụ thể: 

- Độ thích hợp hệ thống: Độ lặp lại tốt với RSD của thời gian lưu nhỏ hơn 

1,0 % <strong>và</strong> diện tích píc nhỏ hơn 2,0 %, <strong>số</strong> đĩa lý thuyết trên 2500, hệ <strong>số</strong> bất đối nhỏ 

hơn 2,0 <strong>và</strong> độ phân giải lớn hơn 1,5. 

- Độ đặc hiệu: Trên sắc kí đồ của mẫu tự tạo: píc của chất cần phân tích tách 

hoàn toàn khỏi các píc khác. Sắc kí đồ của mẫu trắng, dung dịch mẫu placebo: 

không xuất <strong>hiện</strong> píc ở trong khoảng thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của 

chất chuẩn. Hệ <strong>số</strong> chồng phổ UV-VIS tại đỉnh píc chất cần phân tích thu được trong 

sắc kí đồ của dung dịch mẫu tự tạo với píc tương ứng trong sắc kí đồ dung dịch 

chuẩn đạt trên 0,99. 

- Độ tuyến tính: Hệ <strong>số</strong> tương quan giữa nồng độ <strong>và</strong> diện tích píc của các 

<strong>paraben</strong> đều có r ≥ 0,997 (hay R 2 ≥ 0,995). 

105,0%. 

- Độ đúng: Tỉ lệ thu hồi của tất cả các mẫu đều nằm trong khoảng 95,0 – 

- Giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong>, giới hạn <strong>định</strong> <strong>lượng</strong>: Vì nền mẫu phức tạp chúng tôi 

xác <strong>định</strong> LOD, LOQ theo phương pháp pha loãng. Kết quả LOD với các <strong>paraben</strong> 

nghiên <strong>cứu</strong> đều nhỏ hơn 0,1 µg/ml <strong>và</strong> LOQ đều nhỏ hơn 0,4 µg/ml. 

4.3. VỀ KIỂM TRA CÁC MẪU MỸ PHẨM 



Đề tài đã tiến hành kiểm tra 10 mẫu mỹ phẩm bằng phương pháp HPLC đã 

<strong>xây</strong> <strong>dựng</strong>. Kết quả không <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> mẫu nào có chứa <strong>paraben</strong> bị cấm. Do <strong>số</strong> <strong>lượng</strong> 

mẫu làm được quá ít nên kết quả này chưa có ý nghĩa phản ánh tình hình sử dụng 

<strong>paraben</strong> trong thực tế. Chúng tôi sẽ tiếp tục thu thập mẫu <strong>và</strong> thực <strong>hiện</strong> công việc này 

trong thời gian sắp tới. Việc kiểm tra <strong>và</strong> <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> các chất bị cấm này là rất cần 

thiết cho cả nhà quản lý <strong>và</strong> các doanh nghiệp. Đây cũng là phương pháp để giúp các 

doanh nghiệp có thể dùng để kiểm tra nguyên liệu bán thành phẩm đầu <strong>và</strong>o để lưạ 

choṇ các nguyên liêụ không chứ a các <strong>paraben</strong> bi ̣cấm sử duṇg. 

76

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 

KẾT LUẬN 

Qua triển khai nghiên <strong>cứu</strong>, chúng tôi có <strong>một</strong> <strong>số</strong> kết luận sau: 

1. Đã <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> được phương pháp cho phép phân tích các <strong>paraben</strong> cấm IPP, 

PheP, BzP, IBP <strong>và</strong> PeP bằng HPLC. 

2. Kết quả thẩm <strong>định</strong> trên 2 nền mẫu là sữa rửa mặt <strong>và</strong> nước súc miệng cho 

thấy phương pháp có độ lặp lại cao, độ đúng tốt, khoảng tuyến tính khá rộng <strong>và</strong> có 

giới hạn <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> với cả 5 <strong>paraben</strong> bị cấm là IPP, PheP, BzP, IBP <strong>và</strong> PeP đều dưới 

0,05 µg/ml. 

3. Áp dụng phương pháp <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> được để phân tích 10 mẫu mỹ phẩm trên 

thị trường <strong>và</strong> không <strong>phát</strong> <strong>hiện</strong> mẫu nào chứa các <strong>paraben</strong> bi ̣cấm trên. 

KIẾN NGHỊ 

1. Thẩm <strong>định</strong> các <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> <strong>xây</strong> <strong>dựng</strong> được trên các nền mẫu mỹ phẩm khác. 

2. Cần triển khai rộng hơn việc kiểm tra sự có mặt <strong>paraben</strong> bị cấm trong các 

sản phẩm mỹ phẩm trên thị trường để có kết luận chính xác về việc lạm dụng chất 

này trong mỹ phẩm <strong>và</strong> có biện pháp quản lý chất <strong>lượng</strong> mỹ phẩm phù hợp. 



77

TÀI LIỆU THAM KHẢO 

Tài liệu tiếng Việt 

1. Trần Tử An, Thái Nguyễn Hùng Thu (2006), Hóa phân tích II, NXB Y học, 

tr.168-200. 

Tài liệu tiếng Anh 

2. A. Salvador, A. Chisvert (2007), Analysis of Cosmetic Products, Elsevier, 

Netherlands, 2007. 

3. Barr L, Metaxas G, Harbach CA, et al (2012), “Measurement of <strong>paraben</strong> 

concentrations in human breast tissue at serial locations across the breast 

from axilla to sternum”, J Appl Toxicol, 32(3), 219- 232. 

4. Brian JV, Harris CA, Scholze M, Backhaus T, Booy P, Lamoree M, et al 

(2005), “Accurate predictionof the response of freshwater fish to a mixture 

of estrogenic chemicals”, EnvironHealth Perspect, 113, 721–728. 

5. C. Cruces-Blanco, A. Segura-Carretero, L. Galvez-Mata, A. Fernandez- 

Gutierrez (2001), “Simultaneous determination, by capillary zone 

electrophoresis, of multiple components of different industrial products”, 

Chromatographia, 53, 414–418. 

6. Canosa P, Rodríguez I, Rubí E, Negreira N, Cela R. (2006),“Formation of 



halogenated by-products of<strong>paraben</strong>s in chlorinated water”, Anal Chim Acta, 

575, 106–113. 

7. Charles AK, Darbre PD (2013), “Combinations of <strong>paraben</strong>s at 

concentrations measured in humanbreast tissue can increase proliferation of 

MCF-7 human breast cancer cells”, J ApplToxicol, 33, 390– 398. 

8. CIR Cosmetic Ingredient Review Expert Panel (2008), “Final amended 

report on the safety assessment of methyl<strong>paraben</strong>, ethyl<strong>paraben</strong>, 

propyl<strong>paraben</strong>, isopropyl<strong>paraben</strong>, butyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>, and

enzyl<strong>paraben</strong> as used in cosmetic products”, Int J Toxicol, 27(Suppl. 4):1– 

82. 

9. Cosmetic Ingredient Review Expert Panel (2008), “Final amended report on 

the safety assessment of Methyl<strong>paraben</strong>, Ethyl<strong>paraben</strong>, Propyl<strong>paraben</strong>, 

Isopropyl<strong>paraben</strong>, Butyl<strong>paraben</strong>, Isobutyl<strong>paraben</strong>, and Benzyl<strong>paraben</strong> as 

used in cosmetic products”, Int J Toxicol, 27(Suppl 4), 1- 82. 

10. Darbre PD, Aljarrah A, Miller WR, et al (2004), “Concentrations of 

<strong>paraben</strong>s in human breast tumours”, J Appl Toxicol, 24(1), 5-13. 

11. Dorota Błędzka, Jolanta Gromadzińska, WojciechWąsowicz (2014), 

“Parabens. From environmental studies to human health”, Environment 

International, 67,27–42. 

12. E. Sottofattori, M. Anzaldi, A. Balbi, G. Tonello (1998), “Simultaneous 

HPLC determination of multiple components in a commercial cosmetic 

cream”, J. Pharm. Biomed. Anal., 18: 213–217. 

13. E. Tahmasebi, Y. Yamini, A. Mehdinia, F. Rouhi (2012), Polyanilinecoated 

Fe3O4 nanoparticles: an anion exchange magnetic sorbent for 

solid-phase extraction, J. Sep. Sci., 35(17), 2256–2265. 

14. Ethyl<strong>paraben</strong> P. (1984), "Final report on the safety assessment of 

methyl<strong>paraben</strong>, ethyl <strong>paraben</strong>, propyl <strong>paraben</strong>, and butyl<strong>paraben</strong>", Journal 



of the American College of Toxicology, 3(5), 147-209. 

15. F. Han, Y.Z. He, C.Z. Yu (2008), On-line pretreatment and determination of 

<strong>paraben</strong>s in cosmetic products by combination of flow injection analysis, 

solid-phase extraction and micellar electrokinetic chromatography, 

Talanta, 74(5), 1371–1377. 

16. Fei T, Li H, Ding M, Ito M, Lin JM (2011), “Determination of <strong>paraben</strong>s in 

cosmetic products by solid-phase microextraction of poly(ethylene glycol) 

diacrylate thin film on fibers and ultra high-speed liquid chromatography

with diode array detector”, J Sep Sci., 34,1599-1606. 

17. Golden R, Gandy J, Vollmer G (2005), A review of the endocrine activity of 

<strong>paraben</strong>s and implicationsfor potential risks to human health, Crit Rev 

Toxicol, 35, 435–458. 

18. González-Mariño I, Quintana JB, Rodríguez I, Cela R (2011), “Evaluation 

of the occurrence andbiodegradation of <strong>paraben</strong>s and halogenated byproducts 

in wastewater by accuratemass liquid chromatography quadrupole 

time-of-flight mass spectrometry (LC–QTOF-MS)”, Water Res, 45, 6770– 

6780. 

19. Guo, Y., Wang, L., Kannan, K. (2014),“Phthalates and <strong>paraben</strong>s in personal 

care products from China: concentrations and human exposure”, Arch. 

Environ. Contam. Toxicol., 66, 113–119. 

20. H.Y. Shen, H.L. Jiang, H.L. Mao, G. Pan, L. Zhou, Y.F. Cao. (2007), 

“Simultaneous determination of seven phthalates and four <strong>paraben</strong>s in cosmetic 

products using HPLC-DAD and GC-MS methods”,J. Sep. Sci., 30 (1), 48-54. 

21. Handa O, Kokura S, Adachi S, Takagi T, Naito Y, Tanigawa T, et al. 

(2006), “Methyl<strong>paraben</strong> potentiatesUV-induced damage of skin 

keratinocytes”, Toxicology, 227,62–72. 

22. Harville HM, Voorman R, Prusakiewicz JJ (2007), “Comparison of <strong>paraben</strong> 

stability in human andrat skin”, Drug Metab Lett, 1, 17–21. 

23. Ishiwatari S, Suzuki T, Hitomi T, Yoshino T, Matsukuma S, Tsuji T, et al 

(2007), “Effects of methyl<strong>paraben</strong> on skin keratinocytes”, J Appl Toxicol, 

27, 1– 9. 

24. J.F. García-Jiménez, M.C. Valencia, L.F. Capitán-Vallvey (2007), 

Simultaneous determination of antioxidants, preservatives and sweetener 

additives in food and cosmetics by flow injection analysis coupled to a 



monolithic column, Anal. Chim. Acta, 594(2), 226–233. 

25. J.F. Noguera-Orti, R.M. Villanueva-Camanas, G. Ramis-Ramos (1999), 

“Determination of <strong>paraben</strong>s in cosmetics without previous extraction by 

micellar liquid chromatography”, J. Chromatogr. Sci., 37, 84–87. 

26. Kang KS, Che JH, Ryu DY, et al (2002), “Decreased sperm number and 

motile activity on the F1 offspring maternally exposed to butyl p- 

hydroxybenzoic acid (butyl <strong>paraben</strong>)”, J Vet Med Sci, 64(3), 227- 235. 

27. Kim S, Jung EM, An BS, Hwang I (2012), “Additional effects of bisphenol 

A and <strong>paraben</strong> on the inductionof calbindin-D (9K) and progesterone 

receptor via an estrogen receptor pathwayin rat pituitary”, J Physiol 

Pharmacol, 63, 445–55. 

28. L. Sánchez-Prado, G. Álvarez-Rivera, J.P. Lamas, M. Lores, C. García-Jares, 

M. Llompart (2011), Analysis of multi-class preservatives in leave-on and 

rinse-off cosmetics by matrix solid-phase dispersion, Anal. Bioanal. Chem., 

401(10), 3293–3304. 

29. L. Sánchez-Prado, J.P. Lamas, M. Lores, C. García-Jares, M. Llompart 

(2010), Simultaneous in-cell derivatization pressurized liquid extraction 

for the determination of multiclass preservatives in leave-on cosmetics, 

Anal. Chem., 82(22) 9384–9392. 

30. L. Sanchez-Prado, M. Llompart, J.P. Lamas, C. Garcia-Jares, M. Lores 

(2011), “Multicomponent analytical methodology to control phthalates, 

synthetic musks, fragrance allergens and preservatives in perfumes”, 

Talanta, 85, 370–379. 

31. L.P. Melo, M.E.C. Queiroz (2010), Simultaneous analysis of <strong>paraben</strong>s in 

cosmetic products by stir bar sorptive extraction and liquid 

chromatography, J. Sep. Sci., 33(12), 1849–1855. 



32. Liebert NA (1984), “Final report on the safety assessment of methyl<strong>paraben</strong> 

ethyl<strong>paraben</strong>, propyl<strong>paraben</strong> and butyl<strong>paraben</strong>”, J Am Coll Toxicol, 3:147–209. 

33. M. Abbasghorbani, A. Attaran, M. Payehghadr (2013), Solvent-assisted 

dispersive micro-SPE by using aminopropyl-functionalized magnetite 

nanoparticle followed by GC-PID for quantification of <strong>paraben</strong>s in 

aqueous matrices, J. Sep. Sci., 36(2), 311–319. 

34. M. Moradi, Y. Yamini (2012), Application of vesicular coacervate 

phase for microextraction based on solidification of floating drop, J. 

Chromatogr. A, 1229, 30–37. 

35. M. Saraji, S. Mirmahdieh (2009), “Single-drop microextraction followed by 



in-syringe derivatization and GC-MS detection for the determination of 

<strong>paraben</strong>s in water and cosmetic products”, J. Sep. Sci., 32, 988–995. 

36. M. Saraji, S. Mirmahdieh (2009), Single-drop microextraction followed by 

in-syringe derivatization and GC-MS detection for the determination of 

<strong>paraben</strong>s in water and cosmetic products, J. Sep. Sci., 32(7), 988–995. 

37. M.A. Farajzadeh, D. Djozan, R.F. Bakhtiyari (2010), Use of a capillary 

tube for collecting an extraction solvent lighter than water after 

dispersive liquid–liquid microextraction and its application in the 

determination of <strong>paraben</strong>s in different samples by gas chromatographyflame 

ionization detection, Talanta, 81(4-5), 1360–1367. 

38. M.R. Lee, C.Y. Lin, Z.G. Li, T.F. Tsai (2006), Simultaneous analysis of 

antioxidants and preservatives in cosmetics by supercritical fluid 

extraction combined with liquid chromatography–mass spectrometry, J. 

Chromatogr. A, 1120, 244–251. 

39. Mark G. Kirchhof, Gillian C. de Gannes (2013), “The Health Controversies 

of Parabens”, Skin Therapy Lett., 18(2), 5-7.

40. Masten SA (2005), “Butyl<strong>paraben</strong> review of toxicological literature 

butyl<strong>paraben</strong> (CAS no. 94-26-8)”, Rev Toxicol Lit, 1–64. 

41. N. Cabaleiro, I. de La Calle, C. Bendicho, I. Lavilla (2013), Current trends 

in liquid– liquid and solid–liquid extraction for cosmetic analysis: a 

review, Anal. Methods, 5(2), 323–340. 

42. N. Ye, P. Shi, J. Li, Q. Wang (2013), Application of graphene as solid phase 

extraction absorbent det <strong>paraben</strong>s in cosmetic products by capillary 

electrophoresis, Anal. Lett., 46, 1991–2000. 

43. Oishi S (2002), “Effects of butyl <strong>paraben</strong> on the male reproductive system in 

mice”, Arch Toxicol, 76(7), 423- 9. 

44. P. Wang, Y. Liu (2007), “Cosmetic preservatives and analysis methods used 

in China”, J.Environ. Health, 24, 557–559. 

45. Pažoureková S, Hojerová J, Klimová Z, Lucová M (2013), “Dermal 

absorption and hydrolysis of methyl<strong>paraben</strong> in different vehicles through 

intact and damaged skin: using a pig-earmodel in vitro”, Food Chem 

Toxicol, 59, 754-765. 

46. R. Bodor, M. Zuborova, E. Olvecka, V. Madajova, M. Masar, D. Kaniansk, 

B. Stanislawski (2001), “Isotachophoresis and isotachophoresis-zone 

electrophoresis of food additives on a chip with column-coupling separation 



channels”, J. Sep. Sci., 24, 802–809. 

47. R. Jain, M.K. Mudiam, A. Chauhan, R. Ch, R.C. Murthy, H.A. Khan (2013), 

Simultaneous derivatization and preconcentration of <strong>paraben</strong>s in food and 

other matrices by isobutyl chloroformate and dispersive liquid-liquid 

microextraction followed by gas chromatographic analysis, Food Chem., 

141(1), 436–443. 

48. Rastogi SC, Schouten A, de Kruijf N, Weijland JW (1995), “Contents of 

methyl-, ethyl-, propyl-, butyl- and benzyl<strong>paraben</strong> in cosmetic products”,

Contact Dermatitis, 32: 28–30. 

49. Routledge EJ, Parker J, Odum J, Ashby J, Sumpter JP (1998), “Some alkyl 

hydroxy benzoate preservatives (<strong>paraben</strong>s) are estrogenic”, Toxicol Appl 

Pharmacol, 153, 12–9. 

50. Rudel RA, Camann DE, Spengler JD, Korn LR, Brody JG (2003), 

“Phthalates, alkylphenols, pesticides,polybrominated diphenyl ethers and 

other endocrine-disrupting compounds inindoor air and dust”, Environ Sci 

Technol, 37, 4543–4553. 

51. S. He, Y. Zhao, Z. Zhu, H. Liu, M. Li, Y. Shao, Q. Zhuang (2006), 

“Comparative study for the analysis of <strong>paraben</strong>s by micellar electrokinetic 

capillary chromatography with and without large-volume sample stacking 

technique”, Talanta, 69, 166–171. 

52. S. Scalia, D.E. Games (1992), Determination of <strong>paraben</strong>s in cosmetic 

products by supercritical fluid extraction and high-performance liquid 

chromatography, The Analyst, 117(5), 839–841. 

53. S.P. Wang, C.L. Chang (1998), Determination of <strong>paraben</strong>s in cosmetic 

products by supercritical fluid extraction and capillary zone 

electrophoresis, Anal. Chim. Acta, 377, 85–93. 

54. Sasseville D (2004), Hypersensitivity to preservatives, Dermatol Ther, 



17(3), 251-263. 

55. Shanmugam G., Ramaswamy B. R., Radhakrishnan V., et al. (2010), "GC– 

MS method for the determination of <strong>paraben</strong> preservatives in the human 

breast cancerous tissue", Microchemical Journal, 96(2), 391-396. 

56. Shaw J, deCatanzaro D (2009), “Estrogenicity of <strong>paraben</strong>s revisited: impact 

of <strong>paraben</strong>s on early pregnancy and an uterotrophic assay in mice”, Reprod 

Toxicol, 28(1), 26- 31.

57. Song BL, Li HY, Peng DR (1989), “In vitro spermicidal activity of <strong>paraben</strong>s 

against human spermatozoa”, Contraception, 39(3), 331- 5. 

58. T.A.M. Msagati, T. Barri, N. Larsson, J.Å. Jönsson (2008), Analysis and 

quantification of <strong>paraben</strong>s in cosmetic products by utilizing hollow fibresupported 

liquid membrane and high performance liquid 

chromatography with ultraviolet detection, Int. J. Cosmet. Sci., 30(4), 

297–307. 

59. T.F. Tsai, M.R. Lee (208), “Determination of antioxidants and 

preservatives in cosmetics by SPME combined with GC–MS”, 

Chromatographia, 67, 425–431. 

60. T.J. Yang, F.J. Tsai, C.Y. Chen, T.C.C. Yang, M.R. Lee (2010), Determination 

of additives in cosmetics by supercritical fluid extraction on-line 

headspace solid-phase microextraction combined with gas 

chromatography–mass spectrometry, Anal. Chim. Acta, 668 (2), 188– 

194. 

61. V. Cˇiuvašovaité, E. Adomavicˇi~uté, V. Vicˇkacˇkaité (2007), Solid-phase 

microextraction of <strong>paraben</strong>s by polyaniline–polypyrrole coating, Chemija, 

18(3), 11–15. 

62. W. Gao, C. Legido-Quigley (2011), “Fast and sensitive high performance 



liquid chromatography analysis of cosmetic creams for hydroquinone, 

phenol and six preservatives”, J. Chromatogr. A, 4307–4311. 

63. Y. Yamini, A. Saleh, M. Rezaee, L. Ranjbar, M. Moradi (2012), Ultrasound 

assisted emulsification microextraction of various preservatives from 

cosmetics, beverages and water samples, J. Liq. Chromatogr. Relat. 

Technol., 35(18), 2623–2642. 

64. Yazar K, Johnsson S, Lind ML, et al (2011), “Preservatives and fragrances 

in selected consumer-available cosmetics and detergents”, Contact

Dermatitis, 64(5), 265-272. 

65. Yu Y, Huang Q, Wang Z, Zhang K, Tang C, Cui J, et al (2011), 

“Occurrence and behavior of pharmaceuticals, steroid hormones, and 

endocrine-disrupting personal care products in wastewater and the recipient 

river water of the Pearl River Delta, South China”, J Environ Monit,13, 

871–878. 



PHỤ LỤC 

Phụ lục 1: Các mẫu mỹ phẩm được sử dụng để xác <strong>định</strong> sự có mặt của 5 

<strong>paraben</strong> cấm 

Số ĐKKN Tên sản phẩm Nhà sản xuất Thông tin chung Mô tả Công thức 

48L01 

Nước rửa tay 

bảo vệ khỏi vi 

khuẩn 

Procter & 

Gamble (P&G), 

China 

Lô: 70861864AD 

NSX: 27/3/2017 

HD: 24 tháng 

Chế phẩm màu 

trắng dạng lỏng, 

sệt, có mùi thơm. 

Không có 

<strong>paraben</strong> 

48L02 

48L03 

48L04 

48L05 

48L06 

48L07 

Nước rửa tay 

bảo vệ khỏi vi 

khuẩn Lifeboy 

Dầu rửa mặt, 

tẩy trang dạng 

bọt 2 trong 1 

Naive 

Sữa rửa mặt lá 

đào Naive 

Sữa rửa mặt 

trắng da Nivea 

Công ty TNHH 

quốc tế Unilever 

VN 

Kracie home 

Products, Ltd, 

Japan 

Kracie home 

Products, Ltd, 

Japan 

Thái Lan, Phân 

phối: Công ty 

TNHH DKSH 

Việt Nam 

Lô: 36 

NSX: Không có 

HD: 26/04/2020 

Lô: 7HN7 

NSX: 31/3/2017 

HD: 3 năm 

SCB: 

100404/14/CBMP - 

QLD 

Lô: 7HPC 

NSX: 03/04/2017 

HD: 3 năm 

SCB: 

24735/16/CBMP - 

QLD 

Lô: 73513877 

NSX:02/09/2017 

HSD: 30 tháng 

Chế phẩm màu 

trắng dạng lỏng, 

sệt, có mùi thơm 

Dung dịch không 

màu, có mùi thơm. 

Kem màu trắng có 

mùi thơm. 


mùi thơm. 




Pond's pure 

white 


Benew snail 

PT Unilever 

Indonesia Tbk, JI, 

Jatabeka. Phân 

phối : Công ty 

TNHH quốc tế 

Unilever VN 

Hàn Quốc Phân 

Phối: CTY 

TNHH quốc tế 

Thiên Anh 

Lô: 312 

NSX: 15/10/2017 

HSD: 15/09/2020 

Lô: QF131 

NSX: Không có 

HSD: 21/07/2020 

SCB: 4/8/15/CBMP 

- QLD 

Kem màu ghi xám, 

có mùi thơm. 


mùi thơm. 

Không có 


Không có 


Không có 

thông tin 

Methyl 


Không có 


Methyl 

<strong>paraben</strong>, 

Propyl 

<strong>paraben</strong>

Số ĐKKN Tên sản phẩm Nhà sản xuất Thông tin chung Mô tả Công thức 

48L08 

48L09 

48L10 

Nước súc miệng 

Listerine total 

care 

Nước súc miệng 

Listerine natural 

green tea 



TNHH Johnson 

and Johnson VN 



TNHH Johnson 

and Johnson VN 

Nước súc miệng Thái Lan 

colgate plax Phân phối: Cty 

peppermint TNHH colgate 

fresh 

Pamonive VN 

Lô: P145L 

NSX: 25/05/2017 

HSD: 05/2020 

SCB: 

67046/12/CBMP- 

QLD 

Lô: M282L 

NSX: 08/10/2016 

HSD: 10/2019 

SCB: 

77498/13/CBMP- 

QLD 

Lô: 7188TH1123 

NSX: không có 

HSD: 07/2019 

Dung dịch trong 

suốt, màu tím, có 

mùi bạc hà. 


suốt, màu <strong>và</strong>ng 

chanh, có mùi bạc 

hà. 


suốt, màu xanh 

nước biển, có mùi 

bạc hà. 



Không có 


Không có 


Không có 

<strong>paraben</strong>

Phụ lục 2: Các phương pháp phân tích xác <strong>định</strong> <strong>paraben</strong> trong mỹ phẩm 

Stt 

Các Nền mẫu 


1. Phân tích trực tiếp 

1 MP, EP, 

PP, BP 

2. Đồng nhất hóa 

2 MP, EP, 

PP, BP 

3 MP, EP, 

PP, BP 

4 MP, EP, 

PP, BP 

5 MP, EP, 

PP, BP, 

IBP 

6 MP, EP, 

PP, BP 

7 MP, EP, 

PP, BP, 

BzP 

8 MP, EP, 

PP, BP 

9 MP, 

EP, PP, 

BP, 

Dầu rám 

nắng, kem 

rám nắng, 

sữa, lotion, 

kem che 

khuyết điểm 

Kem, lotion, 

dầu gội, dầu 

xả tóc, xà 

phòng nước 

Sữa tắm, 

lotion, kem 

dưỡng em 

bé, kem 

dưỡng móng, 

gel, dầu gội, 

dầu xả tóc, 

khử mùi 

Kem, lotion 

Lotion, kem 

<strong>và</strong> các loại 

mỹ phẩm 

khác 

Kem, lotion 

Nhận xét về chuẩn bị mẫu 

Một que thủy tinh Dip-IT đã được 

nhúng <strong>và</strong>o mẫu, nhẹ nhàng lau bằng 

vải không có xơ <strong>và</strong> đặt trực tiếp <strong>và</strong>o 

nguồn ion DART. 

0,5 g mẫu <strong>và</strong> 2 mL methanol. Lắc xoáy 

(2 phút). Lắc siêu âm (5 phút) <strong>và</strong> ly 

tâm (10 phút). 500 μL của dịch trong 

trên mặt được pha loãng đến 5 mL với 

dung dịch natri lauryl sulfat. Lọc. 

0,1 g mẫu với 3 mL methanol. Lắc 

xoáy (3 phút). Lắc siêu âm (20 phút). 

Ly tâm (10 phút). Lọc. 

0.2 g mẫu với 60% (v / v) methanol. 

Lắc siêu âm (30 phút). Ly tâm <strong>và</strong> lọc. 

0,3 g mẫu với 800 µl methanol. Lắc 

xoáy (1 phút) <strong>và</strong> ly tâm (10 phút). Dịch 

trong được làm khô <strong>và</strong> hòa tan lại 

trong 200 µl nước. 

Thêm 5 mL methanol / nước <strong>và</strong>o 0,2 g 

mẫu <strong>và</strong> lắc siêu âm (30 phút). Ly tâm 

(10 phút) <strong>và</strong> lọc. 

Các tỉ lệ pha loãng khác nhau với ethyl 

acetate (1:10, 1: 100 hoặc 1: 1000). 



Nước hoa 

Mỹ phẩm 

Lotion 

dưỡng mặt 

<strong>và</strong> dưỡng thể 

0,5 g mẫu với 10 mL ethanol. Lắc siêu 

âm (10 phút). Pha loãng với 0,2 M 

đệm muối phosphat (pH 6,5) đến 500 

mL. 

Pha loãng mẫu với methanol. Lắc xoáy 

(3 phút) <strong>và</strong> để yên (3 phút). Lắc xoáy 

(3 phút) <strong>và</strong> ly tâm (10 phút). Dịch 

Kĩ thuật <strong>phát</strong> 

<strong>hiện</strong> 

DART-MS 

(Phân tích trực 

tiếp - Sắc kí 

khối phổ) 

LOD 

Bán 

<strong>định</strong> 

<strong>lượng</strong> 

HPLC-UV-vis 0.04– 

0.1 

µM 

GC-MS/MS 0.05– 

0.5 µg 

/g 1 

HPLC-UV-vis 0.015– 

0.2 µg 

/mL 

CE-UV (Điện 

di mao quản 

với detector 

UV) 

0.005– 

2 µg 

/mL 

HPLC-UV 0.2 µg 

/mL 

GC-MS 1.6 10 - 

SWV (Kĩ thuật 

vôn-ampe 

sóng vuông) 

UHPLC-UV 

6 

–5 10 - 

6 

% 

(w/v) 

0.2–0.4 

µM 

Không 

có 

thông

Stt Các 


IPP, 

IBP 

10 MP, EP, 

PP, BP 

11 MP, EP, 

PP, BP 

12 MP, EP, 

PP, BP 

13 MP, EP, 

PP, BP 

14 MP, EP, 

PP, BP 

15 MP, EP, 

PP, BP 

16 MP, EP, 

PP, BP 

17 MP, EP, 

PP, BP, 

BzP 

18 MP, EP, 

PP, BP 

Nền mẫu 


tạo bọt 

Lotion 

dưỡng thể, 

gel tắm, dầu 

thơm bôi tóc, 

kem 

Lotion 



Nước vệ 

sinh, sữa rửa 

mặt, gel tắm 


trong được pha loãng <strong>và</strong> lọc. 

Mẫu trộn với 5 ml methanol. Lắc siêu 

âm (10 phút) <strong>và</strong> lọc. Dung dịch được 

pha loãng đến 10 ml. 

2 g mẫu với 5 mL methanol. Lắc siêu 

âm (10 phút). Lắc xoáy (1 phút) <strong>và</strong> pha 

loãng với methanol. Lọc. 

0.2 g mẫu với 10 mL methanol. Lắc 

siêu âm (30 phút) <strong>và</strong> ly tâm (20 phút). 

Dịch trong đem lọc. 

0,5 g mỹ phẩm <strong>và</strong> methanol. Lắc siêu 

âm (20-30 phút). Ly tâm <strong>và</strong> chuyển lớp 

chất hữu cơ. Lặp đi lặp lại 3 lần. Trộn 

tất cả dịch trong <strong>và</strong> pha loãng với 

methanol. Lọc lại. 

Các mẫu được phân tán trong ACN. 

Lotion dạng dầu (0,1 g) được phân tán 

với 0,9 ACN, Lắc siêu âm (30 phút). 

Ly tâm (10 phút). 

1 g mẫu với 5 ml methanol. Lắc siêu 

âm (10 phút), pha loãng <strong>và</strong> lọc. Pha 

loãng với nước. 

Hai bọt cạo Mẫu trong 20 ml nước. Khuấy <strong>và</strong> pha 

râu <strong>và</strong> <strong>một</strong> loãng với pha động. Lọc. Thuốc khử 

thuốc khử mùi (1 mL) được lắc siêu âm (15 

mùi phút), pha loãng <strong>và</strong> lọc. 

Dầu gội đầu 0,5-1 g mẫu với 1 mL H 2SO 4 2M , 

40ml EtOH-H 2O <strong>và</strong> 10 mL chuẩn nội. 

Lắc (1 phút). Gia nhiệt (5 phút, 60 ° 

C). Làm mát <strong>và</strong> lưu trữ tủ lạnh (1 giờ). 

Lọc. 

Lotion 1 g mẫu với 6 mL ethanol. Lắc siêu âm 

(10 phút). Ly tâm. 





LP-LC-CD 

(sắc kí lỏng áp 

suất thấp với 

detector <strong>phát</strong> 

quang hóa 

học) 

LOD 

tin 

9.2 x 

10 -3 – 

4.8 x 

10 -2 

µM 

UPLC-UV 2.25 

10 -3 – 

4.82 

10 -3 

µg/mL 

UPLC-UV 0.05 – 

0.95 

µg/mL 

MEKC (Sắc kí 

điện động 

micell) 

0.3 

µM 

CE-UV 0.06 – 

0.15 

µg/mL 

HPLC-CL 

(HPLC 

detector huỳnh 

quang) 

1.9 10 - 

3 

–5.3 

10 -3 

µg/ 

mL 

HPLC-UV 0.014– 

0.053 

µg/ 

mL 

HPLC-UV Not 

given 

MEKC-UV 0.04– 

0.77 

µg/ 

mL 

0.13– 

1.49 

µg/

Stt 

Các 


19 MP, EP, 

PP, BP, 

BzP 

20 MP, EP, 

PP, BP 

21 MP, EP, 

PP, BP 

22 MP, EP, 

PP, BP 

23 MP, EP, 

PP, BP, 

IBP, BzP 

24 MP, EP, 

PP, BP 

Nền mẫu 

Kem bôi tay, 

phấn nền 

Lotion bôi da 

Nước hoa 

hồng 

Gội đầu dạng 

bọt 

Kem bôi da 


Thêm 25 µL chuẩn nội . Bổ sung 1 mL 

ACN <strong>và</strong> Lắc siêu âm (1 giờ, 30°C). 

Lọc <strong>và</strong> pha loãng với nước. 

Pha loãng mẫu với nước. Bổ sung bistris 

propan <strong>và</strong> điều chỉnh pH đến 9. 

Mẫu được hòa tan trong ethanol <strong>và</strong> pha 

loãng với nước cất. 

Thêm 10 mL ether-acid acetic (1%) 

<strong>và</strong>o mẫu. Lắc siêu âm (5 phút), khuấy 

(2 phút). Lặp đi lặp lại. Bay hơi. Đối 

với CZE, chất chiết xuất hoà tan trong 

methanol: đệm borat <strong>và</strong> lọc. Đối với 

HPLC, chất chiết xuất hòa tan trong 

methanol, pha loãng với pha động <strong>và</strong> 

lọc. 

Phương pháp <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> chính thức 

của châu Âu. 

Bọt tắm, sữa 

tắm, kem 

nền, kem tay, 

dầu gội đầu 

0.2 mẫu với 25 g n-propanol . Lắc. 

Đun nóng. Pha loãng 5,0 ml dung dịch 

đến 50 ml với 0,1 M SDS hoặc n- 

propanol. Nếu mẫu chứa nhiều tá dược 

tan trong dầu, <strong>một</strong> nhũ tương được tạo 

thành bằng pha loãng với 0,1 M SDS. 

Sau đó, pha loãng với n-propanol. 

25 MP, EP, Mỹ phẩm Mẫu với H 2SO 4 <strong>và</strong> methanol. Lắc siêu 

PP 

âm (30 phút). Đối với mỹ phẩm có 

chứa - hòa tan chất béo, đun nóng 

(60°C) <strong>và</strong> Lắc siêu âm. Ly tâm (10 

phút). Lặp lại <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>. Dịch chiết 

được tập hợp <strong>và</strong> vừa đủ 10 mL với 

methanol. 

26 MP, PP Mỹ phẩm Acid hóa mẫu (10% m / v H 2SO 4). 

Thêm 10mL IS. Lắc, đun nóng (60 ° 

C) <strong>và</strong> lọc / ly tâm. Đối với sản phẩm 

hỗn dịch, thêm 10 mL IS <strong>và</strong> 30 mL 

ethanol đến 10 g mẫu. Khuấy (10 phút) 

<strong>và</strong> lọc. 

27 MP, EP, 

PP, BP 



Kem 

1 g kem được pha loãng 1:10 với THFđệm 

phosphat (3: 7 (v / v) (pH 3,5)). 

Lắc xoáy <strong>và</strong> làm nóng nhẹ. 



CEC-UV (Sắc 

kí điện di mao 

quản với 

detector UV) 

ITP-ZE (Điện 

di mao quản 

vùng đẳng 

dòng) 

CZE-UV 

(Điện di mao 

quản vùng 

detector UV) 

HPLC-UV 

/CZEUV 

LOD 

mL 

1.25– 

2.50 

µg/ 

mL 

Cỡ 

µM 

0.65– 

0.92 

µg/ 

mL 

0.05– 

0.21 

µg/ 

mL 

HPLC-UV 5–30 

µg/ 

mL 

Sắc kí lỏng 

điện động 

(MLC) 

HPLC-UV 

HPLC-UV 

HPLC-DAD 

0.03– 

0.3 ng 

Không 

đưa ra 

Không 

đưa ra 

Không 

đưa ra

Stt Các 


Nền mẫu 

3. Chiết lỏng - lỏng 

28 MP, EP, Bọt vuốt tóc, 

PP, BP gel làm sạch 

29 MP, EP, 

PP, BP 

30 MP, EP, 

PP, BP 

Kem đánh 

răng, keo bọt 


4. Chiết pha rắn 

31 MP, EP, 

PP 

Dầu gội đầu 

32 MP, EP, 

PP, BP, 

IBP 

33 MP, EP, 

PP, BP 

34 MP, EP, 

PP 

Kem đánh 

răng 

Dầu gội đầu, 

kem đánh 

răng, gel 

dưỡng da sau 

cạo râu, kem 

dưỡng da. 

Lotion nền 

nước <strong>và</strong> 

Lotion nền 

dầu, gel <strong>và</strong> 


Bọt vuốt tóc: 1 mL HCl 50% (v / v) <strong>và</strong> 

10 mL NaCl bão hòa được thêm <strong>và</strong>o 

15 g mẫu. Chiết xuất với 50 mL ether 

diethyl (3 lần,10 phút mỗi lần). Dịch 

chiết được tập trung <strong>và</strong> xử lý với NaCl 

bão hòa <strong>và</strong> 3 lần với 30 mL 0,02 g / 

mL NaHCO 3. Chiết xuất khô với 10g 

Na 2SO 4. Lọc, bốc hơi <strong>và</strong> tái hòa tan 

trong 50 mL ACN. 

Gel làm sạch : 1 g được pha loãng với 

5 mL MeOH. Lắc siêu âm (10 phút). 

Lọc. Pha loãng. 

15 g mẫu với 1 mL HCl 1: 1 <strong>và</strong> 10 mL 

dung dịch nước NaCl bão hòa. Trích 

xuất bằng 50 ml diethyl ether (ba lần). 

Dịch chiết làm sạch với NaCl bão hòa 

<strong>và</strong> 3 lần với 30 mL NaHCO 3 10 -2 

g/ml. Làm khô bằng 10 g Na 2SO 4. Lọc. 

Bốc hơi <strong>và</strong> vừa đủ 50 mL với ACN. 

Điều chỉnh pH <strong>và</strong> pha loãng. 

Chiết xuất <strong>và</strong>o benzen hoặc 

chloroform. Dẫn xuất hóa với 

phosphorochloridat. Làm sạch (Florisil 

minicolumn). 

1 g mẫu với 25 mL nước. Lắc siêu âm 

(5 phút). Sau đó, SPE (C18 sorbent) 

với 1 mL dung dịch mẫu. Dung dịch 

rửa giải được pha loãng đến 10 mL với 

nước. Lọc. 

1 g mẫu với 5 mL methanol. Ly tâm 

(15 phút). 100 µL dịch trên bề mặt 

được pha loãng (1:20) trong nước. SPE 

(cột Licrolut RP-18). Rửa giải bằng 

methanol. Bốc hơi đến khô <strong>và</strong> hòa tan 

lại trong 2 mL methanol. 

1,2 g mẫu với nước. Thêm 1 mL HCl. 

Pha loãng đến 100 mL bằng nước. 

Lọc. 2 mL mẫu cho qua cột C18. Rửa 

giải bằng methanol. Bổ sung 5,5 mL 

nước, 2 giọt 0,2 N NaOH, <strong>và</strong> 0,5 ml IS 

<strong>và</strong>o dung dịch rửa giải. 

1 g mẫu với 2,0 ml dung dịch đệm 

natri tetraborat 50 mM <strong>và</strong> 2 ml ACN. 

Pha loãng đến 10 mL với nước. Lắc 

siêu âm. Chiết xuất bằng C8. Rửa giải 





FIA-HPLC- 

UV 

LOD 

0.012– 

0.03 

µM 

FIA-LC-UV 0.03– 

0.85 

µg/ 

mL 

GC-FPD 

HPLC-ED 

(HPLC đầu dò 

điện hóa) 

Không 

đưa ra 

0.4 µg/ 

mL 

HPLC-UV 0.1– 

0.3 µg/ 

mL 

CE-UV 1.42– 

2.86 

µg/ 

mL 

MEKC 0.07– 

0.1 µg/ 

mL

Stt 

Các 


35 MP, EP, 

PP, BP 

36 MP, EP, 

PP, BP 

37 MP, EP, 

PP, BP, 

IPP, IBP 

38 MP, EP, 

PP, BP 

39 MP, EP, 

PP, BP 

40 MP, EP, 

PP 

Nền mẫu 

kem. 

Xịt tóc, nước 

hoa, thuốc 

khử mùi, 

kem, lotion 

Xịt tóc, nước 

hoa, thuốc 

khử mùi, 

kem, 

lotion… 

Kem, lotion 

<strong>và</strong> bọt rửa 

mặt 


với đệm natri tetraborate 10 mM có 

chứa 60% (v / v) ethanol. Đối với <strong>một</strong> 

<strong>số</strong> mẫu, đầu tiên khuấy với 5 mL 

ethanol <strong>và</strong> lọc. 

1 g mẫu với 10 mL methanol. Lắc siêu 

âm (30 phút). Làm khô dưới N 2. C18 

(3 mL). Rửa giải với 5 mL methanol. 

Làm khô dưới N 2. Hòa tan lại trong 1 

mL methanol. Lọc. 

Các mẫu được pha loãng với methanol 

<strong>và</strong> lắc siêu âm. SPE 3ml mẫu sử dụng 

C18. 

1 g mẫu với 5 mL THF. Lắc siêu âm (1 

phút). Thêm IS, 50 mL dung dịch NaCl 

bão hòa, <strong>và</strong> 5 ml 10% H 2SO 4. Chiết 

xuất với 50 ml ete diethyl. Làm khô 

pha hữu cơ. Hơi bay hơi đến khô (40 ° 

C). Hoà tan trong 10 ml methanol. Ly 

tâm (5 phút). 2 mL dịch trên bề mặt 

đem bay hơi. Hòa tan lại trong 10 ml 

hexanechloroform (75:25). SPE với cột 

Sep-Pak Florisil (1 mL). Rửa giải bằng 

10 ml hexaneethyl acetat (70:30). Bay 

hơi. Hòa tan lại trong 2 ml methanol 

bằng siêu âm (1 phút). 

1,0 g mẫu đã được pha loãng (giữa 

1:20 <strong>và</strong> 1: 100). Lắc siêu âm (30 phút). 

Ly tâm. Điều chỉnh pH đến 3. 1 mL 

dung dịch được sử dụng cho SPE (cột 

chứa 20 mg MWCNTs). Rửa giải với 2 

mL axeton (1 mL/ phút). Dịch chiết 

bốc hơi đến khô. Hòa tan lại trong 500 

µL pha động. 



HPLC-UV-vis 

GC-MS 

LOD 

Không 

đưa ra 

GC-MS 1. 10 - 

HPLC-UV 

4 

–5 10 - 

3 

µg/ 

mL 

10 ng 

Dưỡng ẩm, 

chống nhăn 

<strong>và</strong> kem tay, 

kem che 

khuyết điểm, 

C-CAD 

(Corona 

charged 

aerosol 

detector) 

lotion, dầu 

gội đầu <strong>và</strong> 

kem dưỡng 

làm dịu da 

sau khi phơi 

nắng 

Mỹ phẩm Chiết pha rắn nền graphene. CE-UV-vis 0.10– 

0.15 

µg/ 

mL 



Kem đánh 

răng <strong>và</strong> kem 

5 mg mẫu với 3 mL methanol. Lắc siêu 

âm (5 phút) <strong>và</strong> pha loãng đến 50 ml 

bằng nước. Ly tâm (15 phút). Lọc lớp 

dịch phía trên <strong>và</strong> pha loãng đến 500 

mL với nước. Chiết xuất sử dụng 100 

mg Fe 3O 4 hạt nano phủ 100% 

0.5– 

2.1 µg/ 

mL 

HPLC-UV 3. 10 -3 

- 4.10 - 

3 

µg/ 

mL

Stt 

Các 


Nền mẫu Nhận xét về chuẩn bị mẫu 

Polyaniline có khuấy trộn (2 phút). Sự 

giải hấp thụ với 100 µL 3% (v / v) acid 

axetic trong ACN. 

5. Matrix solid-phase extraction 

41 MP, EP, 

PP, BP, 

IPP, IBP, 

BzP 

Son môi, 

kem che 

khuyết điểm, 

gel tay, sữa 

dưỡng thể <strong>và</strong> 

chống nắng, 

kem khử 

mùi. 

0,5 g mẫu được trộn với Na 2SO 4 <strong>và</strong> 

Florisil (5 phút). Chuyển sang <strong>một</strong> cột 

<strong>và</strong> rửa giải với hexane / axeton. Bổ 

sung 100 µL acetic anhydrit có chứa 

2,5% pyridin <strong>và</strong>o dd rửa giải đến 1 

mL. Gia nhiệt (80 ° C, 10 phút). Làm 

nguội. 

6. Chiết pha rắn micro phân tán 

42 MP, EP, 

PP, BP 

Nước súc 

miệng, kem 

tay. 

Siêu âm 10 mL mẫu với 5 mg hạt nano 

magnetite chức hóa nhóm amino (2 

phút). Thêm 15 µl hexyl acetat. Khuấy 

(5 phút). Rửa giải với 25 µL ACN bởi 

siêu âm (2 phút). Thêm <strong>và</strong>o 10 µL 

acetic anhydrit <strong>và</strong> 10 µL pyridin. 

Khuấy (5 phút). Bay hơi. Hòa tan lại 

với 5 µL ACN. 

7. Vi chiết pha rắn 

43 MP, EP, Kem chống Phân tán mẫu trong 20 g/ L NaCl. 

PP, BzP nắng, lotions, Siêu âm (10 phút). Sợi phủ polymer 

kem. PEG-DA ngâm trong 10 mL dung 

dịch mẫu (20 phút, 65 ° C). Giải hấp 

thụ trong 1 mL methanol. Siêu âm (3 

phút) <strong>và</strong> lọc. 

44 MP, EP, Lotions, kem 0,1 g mẫu với 2 mL methanol. Lắc. 

PP, BP, 

Vừa đủ đến 100 mL bằng nước. Từ 4 

IPP, IBP 

mL vừa đủ thành 100 mL với nước có 

12% NaCl. 30 mL được sử dụng cho 

SPME sử dụng sợi PA <strong>và</strong> 30 mL dung 

dịch mẫu (40 phút, 40 ° C). Giải hấp 

thụ bằng nhiệt. 

45 MP, EP, Tonics Pha loãng mẫu 10 lần với NaCl 0.4 g/ 

PP 

mL. SPME bằng cách nhúng sợi bọc 

polyaniline-polypyrrole trong dung 

dịch mẫu (30 phút, 600 rpm). Giải hấp 

thụ bằng nhiệt (15 phút). 

46 MP, EP, 

PP, BP, 

IPP, IBP 



Sữa dưỡng 

(emulsion), 

lotions <strong>và</strong> 

kem dưỡng 

thể 

8. Chiết hấp thụ trên thanh khuấy (SBSE) 

0,02 g mẫu được chiết xuất bằng CO 2 

ở 13.840 kPa, 55°C (chiết tĩnh 10 phút, 

chiết động 15 phút). Tập hợp trong <strong>một</strong> 

lọ với 100 µL BSTFA trong 0.1% 

TMCS. HS-SPME sử dụng sợi PA (15 

phút, 50 °C). 



LOD 

GC-MS 1.4 10 - 

7 

–3.9 

10 -6 % 

(w/w) 

GC-FID 5. 10 -5 

–3. 10 - 

4 

µg/ 

mL 

UPLC-DAD 0.12– 

0.15 

µg/ 

mL 

GC-MS 4. 10 -4 

–8.5 

10 -2 

µg/ 

mL 

GC-FID 0.07– 

17 µM 

GC-MS 5. 10 -4 

–8.3 

10 -3 

µg/g

Stt Các 


47 MP, EP, 

PP, BP 

Nền mẫu 

Kem, chống 

nắng 

9. Vi chiết pha lỏng 

48 MP, EP, 

PP, BP 

49 MP, EP, 

PP 

50 MP, EP, 

PP 

51 MP, EP, 

PP, BP, 

IPP 

52 MP, EP, 

PP, IBP 

53 MP, EP, 

PP 

Rửa mặt, 

kem cân 

bằng độ ẩm, 

kem cạo râu, 

kem dưỡng 

ẩm, keo vuốt 

tóc 

Kem đánh 

răng, dầu gội 

đầu, nước 

súc miệng 

Nước súc 

miệng 

Gel tẩy 

trang, dung 

dịch nước 

súc miệng <strong>và</strong> 

gel dưỡng 

tóc 


0,5 g mẫu phân tán với 100 mL đệm 

phosphate. Đun nóng. SBSE sử dụng 

thanh khuấy tráng PDMS (40 phút, 

1200 vòng / phút). Giải hấp thụ trong 

methanol / nước (20 phút). 

1 g mẫu với 5 mL ethanol. Lắc xoáy (3 

phút) <strong>và</strong> siêu âm (5 phút). Ly tâm (5 

phút). Dịch trong phía trên được lọc <strong>và</strong> 

pha loãng 50 lần bằng ethanol. 

DLLME. Để có 200 µL dịch chiết 

xuất, bổ sung 150 µL pyridin. Một hỗn 

hợp gồm 50 µL chloroform <strong>và</strong> 10 µL 

IBCF (isobutyl chloroformate) được 

tiêm. Lắc xoáy (30 giây). Ly tâm (3 

phút). 

0.1 g-0.25 g mẫu phân tán trong nước 

thành 1000 mL. Điều chỉnh pH đến 6. 

DLLME. 10 ml dung dịch trong bình 

nón được đặt trong bể siêu âm <strong>và</strong> tiêm 

30 µL 1-octanol. Siêu âm (2 phút). 

Nhũ tương được chuyển <strong>và</strong>o <strong>một</strong> xilanh 

10ml để lọc trực tiếp <strong>và</strong> phân tách 

pha trước khi phân tích. 

DLLME. 1ml mẫu được phân tán trong 

100ml nước. 2 g NaCl được thêm <strong>và</strong>o 

10 mL dung dịch mẫu. 0,5 ml acetone 

<strong>và</strong> 20 µl octanol được tiêm. Ly tâm (10 

phút) 

0.05 g mẫu với 5 mL axeton / nước (1: 

1). Siêu âm (5 phút). Pha loãng với 

nước <strong>và</strong> lọc. SDME (47 °C, 20 phút) 

sử dụng 3 µL hexyl acetate như chất 

chiết xuất. Sau khi giọt co lại, 0.4 µL 

BTMSA được lấy để tạo dẫn xuất 

trong xi-lanh. 

0,5 g mẫu với 50 mL nước. HF-LPME 

(Vi chiết pha lỏng sợi rỗng) sử dụng 

DHE trong màng chất lỏng được chống 

đỡ <strong>và</strong> 7 µL đệm glycine như acceptor. 

Chiết xuất trong 30 phút, 700 vòng / 

phút. 



Gel dưỡng 

tóc <strong>và</strong> hồi 

phục tóc sau 

khi tắm 

nắng, kem, 

xà phòng, 

thuốc mỡ, 

lotion, kem 

chống nắng 

Kem chống 

nắng, gel 

dưỡng da sau 

5 mg mẫu với methanol 20% (v / v) <strong>và</strong> 

1 mL HCl. Siêu âm (10 phút). Pha 

loãng với nước đến 150 mL <strong>và</strong> điều 



LOD 

LC-UV-vis 0.03– 

0.2 

µg/g 

GC-FID 0.029– 

0.102 

µg/ 

mL 

HPLC-UV 5 10 -4 

–2 10 - 

4 

µg/ 

mL 

GC-FID 5 10 -3 

–0.015 

µg/ 

mL 

GC-MS 1. 10 -6 

–1.5 

10 -5 

µg/ 

mL 

HPLC-UV 

Không 

đưa ra 

HPLC-UV 2 10 -4 

–5 10 -4 

µg/

Stt 

Các 


54 MP, EP, 

PP 

Nền mẫu 


cạo râu chỉnh pH đến 6. SFODME. 30 µL 

dung môi siêu phân tử <strong>và</strong>o 24 mL dung 

dịch mẫu. Khuấy (30 phút, 30 ° C). 

Vial được làm lạnh <strong>và</strong> khuấy (3 phút, 

600 rpm). Giọt hóa rắn được sử dụng 

cho phân tích. 

Mỹ phẩm USAEME. 40µL 1-octanol đã được 

tiêm <strong>và</strong>o dung dịch mẫu (5% w / v). 

Siêu âm. Ly tâm. Pha hữu cơ được lấy 

để phân tích. 

10. Chiết xuất siêu tới hạn 

55 MP, EP, 

PP , BP 

Kem, sữa 

dưỡng da 

0,05 g mẫu trộn với 1,3 g cát biển. SFE 

(CO 2 siêu tới hạn, 14.000 kPa, 65 o C), 

chiết tĩnh 5 phút <strong>và</strong> chiết động 20 phút. 

Pha loãng trong methanol. Bốc hơi 

dung môi. 

56 MP, EP, Kem 0,02 g mẫu. SFE với ACN 0,05% - 

PP, BP 

CO 2 siêu tới hạn có sửa đổi(12100 

KPa, 40°C). Chiết tĩnh15 phút, chiết 

động 20 phút. Tập trung lại trong 7-8 

mL ACN. Pha loãng thành 10 mL với 

ACN. Lọc. Pha loãng 0,5 ml dịch chiết 

đến 10 mL với đệm borat 30 mM. 

57 MP, EP, Kem, lotions, 0.2-0.3 g mẫu. SFE với CO 2 siêu tới 

PP, BP sữa 

hạn (60°C). Hai bước 7 phút (chiết 

động). Tập trung lại trong 1,2 mL 

methanol. Pha loãng đến 3 mL với 

methanol. 

11. Chiết lỏng cao áp 

58 MP, EP, Kem, lotions, 0,5 g mẫu được trộn với 0,1 ml axetic 

PP, BP, sản phẩm anhydrit <strong>và</strong> 2,5% pyridin, 1g Na 2SO 4 

IPP, IBP, làm tóc <strong>và</strong> 1g Florisil. PLE với hexane / 

BzP 

acetone (1500 psi, 120°C, 15 phút). 



BSTFA: N,O bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamid; 

BTMSA: N,O-bis(trimethylsilyl) acetamid 

FIA: Flow-injection analysis (Phân tích dòng chảy) 

TMCS: Trimethylchlorosilan 



LOD 

mL 

HPLC-UV 2.5 10 - 

4 

–6 

10 -4 

µg/ 

mL 

HPLC-MS 4.7 10 - 

3 

– 

0.142 

µg/ 

mL 

CZE-UV-vis 0.97– 

1.33 

ng 

HPLC-UV-vis 

Không 

đưa ra 

GC-MS 5,3.10 - 

6 

– 9,8. 

10 -6 % 

(w/w)

Phụ lục 3 

Thườ ng <strong>quy</strong> kĩ thuâṭ 

Đinh ̣ tính và điṇh lươṇg 5 chất bảo quản isopropyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>, 

phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> trong sữa rử a măt ̣ và nướ c 

sú c miêṇg bằng HPLC-DAD 

1. Mục đích: 

Mô tả các bước tiến hành để <strong>định</strong> tính, <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> 5 chất bảo quản 


trong sữa rử a măt ̣ và nướ c súc miêṇg. 

2. Phạm vi áp dụng: 

- Thường qui này được áp dụng trong viện kiểm nghiệm Thuốc Trung ương 

bởi những cán bộ được đào tạo phù hợp. 

- Thường qui này được áp dụng để <strong>định</strong> tính <strong>và</strong> <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> 5 chất bảo quản 

trong sữa rử a măt ̣ và nướ c súc miêṇg. 

3. Tài liệu tham khảo: 

- AOAC (1998), Peer-Verified Methods Program, Manual on policies and 

procedures, Arlington, Va., USA. 

- ASEAN (2003), Hiệp <strong>định</strong> hệ thống hòa hợp ASEAN trong quản lý mỹ phẩm, Bản 

dịch của Cục quản lý Dược, 2008. 

- Bộ Y tế, (Cục Quản lý dược Việt Nam), (2015), Công văn <strong>số</strong> 6577/QLD-MP về 

việc cập nhật qui <strong>định</strong> về các chất dùng trong mỹ phẩm, ngày 13/4/2015. 

4. Trách nhiệm: 

Tất cả cán bộ của khoa Kiểm nghiệm Mỹ phẩm có trách nhiệm thực <strong>hiện</strong> 

theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> thường <strong>quy</strong> này khi kiểm tra 5 chất bảo quản isopropyl<strong>paraben</strong>, 

isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> trong sữa rử a măt 

̣ 

và nướ c súc miêṇg. 

5. Nội dung 



5.1. Nguyên lý của phương pháp

5 <strong>paraben</strong> được hòa tan <strong>và</strong> chiết ra bằng methanol. Sau đó được phân tích bằng 

thiết bị HPLC trang bị DAD đặt tại bước sóng 254 nm. 

Sự có mặt của isopropyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, 

benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> có thể được khẳng <strong>định</strong> bằng cách so sánh thời 

gian lưu <strong>và</strong> phổ UV-VIS của pic nghi ngờ trên sắc ký đồ mẫu thử với các pic 


tương ứng trong sắc ký đồ mẫu chuẩn. 

5.2. Thiết bị, thuốc thử <strong>và</strong> chất chuẩn 

5.2.1. Chất chuẩn, dung môi, hóa chất: 

* Chất chuẩn: 

Isopropyl<strong>paraben</strong>, isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và 

pentyl<strong>paraben</strong> 

* Dung môi, hóa chất 

- Acetonitril HPLC 

- Methanol tinh khiết phân tích 

5.2.2. Thiết bị <strong>và</strong> dụng cụ 

- Máy sắc ký lỏng có trang bị DAD 



- Cân phân tích chính xác tới 0,01 mg 

- Máy lắc siêu âm 

- Dụng cụ thủy tinh: Bình <strong>định</strong> mức, cốc thủy tinh, đũa thủy tinh 

5.2.3. Đối tượng nghiên <strong>cứu</strong> 

- Dầu rửa mặt, tẩy trang dạng bọt 2 trong 1 Naïve do công ty Kracie home 

products, Ltd., Nhật Bản sản xuất. 

- Nước súc miệng Colgate Plax peppermint fresh do Thái Lan sản xuất

5.3. Quy <strong>trình</strong> thử 

5.3.1. Chuẩn bị mẫu thử 

Cân chính xác khoảng 0,5 g kem <strong>và</strong>o cốc có mỏ 50 ml, thêm 10 ml 

methanol, dùng đũa thủy tinh phân tán đều kem trong cốc, chuyển <strong>và</strong>o bình <strong>định</strong> 

mức 50,0 ml. Tráng rửa cốc nhiều lần với 30 ml methanol <strong>và</strong> chuyển <strong>và</strong>o bình <strong>định</strong> 

mức trên, lắc siêu âm 10 phút. Để nguội, thêm methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều. 

Lọc qua giấy lọc, lọc qua màng lọc 0,45 µm. 

5.3.2. Chuẩn bị mẫu chuẩn hỗn hợp: 

Cân chính xác khoảng 20,0 mg từ ng chất chuẩn isopropyl<strong>paraben</strong>, 

isobutyl<strong>paraben</strong>, phenyl<strong>paraben</strong>, benzyl<strong>paraben</strong> và pentyl<strong>paraben</strong> <strong>và</strong>o các bình <strong>định</strong> 

mức 100,0 ml , thêm 30 ml methanol, lắc cho tan. Thêm methanol vừa đủ đến vạch, 

lắc đều. Hút chính xác 2,0 ml từ ng dung dịch trên cùng vào môṭ biǹh điṇh mứ c 50,0 

ml, pha loãng bằng methanol. Lọc qua màng lọc 0,45 µm. 

5.3.3. Chuẩn bị mẫu đánh giá: 

- Dùng trong thường <strong>quy</strong> kiểm tra mẫu: chuẩn bị mẫu chuẩn thứ 2 tương tự 

chuẩn 1, yêu cầu hệ <strong>số</strong> tương đồng giữa 2 chuẩn là 0,98 – 1,02. 

- Dùng trong trường hợp mẫu không đạt <strong>và</strong> nền mẫu phức tạp: Cân chính xác 

khoảng 0,5 g sữa rử a măt ̣ hoặc nướ c súc miêṇg <strong>và</strong>o cốc có mỏ hoặc bình <strong>định</strong> mức 

theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>, thêm chính xác <strong>một</strong> <strong>lượng</strong> chuẩn sao cho nồng độ cuối cùng thu 

được tương ứng với khoảng 100 – 120 % nồng độ <strong>định</strong> <strong>lượng</strong> <strong>và</strong> tiếp tục xử lý mẫu 

theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong>. 

5.3.4. Điều kiện sắc ký: 



- Cột Luna C18, (250 x 4,6 mm), 5 µm với tiền cột thép không gỉ (3 cm x 4,6 

mm) được nhồi pha tĩnh C18 (5 µm). 

- Pha động: Acetonitril - nước (40:60). 

- Tốc độ dòng: 1,0 ml/min.

- Thể tích tiêm: 10 µl 

- DAD đặt ở bước sóng 254 nm. 

5.3.5. Cách tiến hành: 

Tiêm riêng biệt các dung dịch chuẩn, dung dịch thử <strong>và</strong> dung dịch mẫu QC 

<strong>và</strong>o hệ thống sắc ký. Tiến hành sắc ký khoảng 50 phút. Ghi lại các sắc ký đồ. 

5.3.6 Yêu cầu tính thích hợp hệ thống: 

Tiêm lặp lại 6 lần dung dịch chuẩn hỗn hợp: 

- RSD của thời gian lưu không được lớn hơn 1,0 % <strong>và</strong> RSD của diện tích píc 

không được lớn hơn 2,0 %. 

- Hệ <strong>số</strong> phân giải giữa các <strong>paraben</strong> không được nhỏ hơn 1,5. 

- Hệ <strong>số</strong> bất đối không được lớn hơn 2,0. 

- Số đĩa lý thuyết không được nhỏ hơn 2500. 

5.3.7. Cách đánh giá kết quả: 

* Định tính: 

- Dựa <strong>và</strong>o thời gian lưu: so sánh thời gian lưu của píc thu được từ dung dịch 

thử <strong>và</strong> píc thu được từ dung dịch chuẩn. 



- So sánh phổ UV-VIS của píc thu được từ dung dịch thử có thời gian lưu 

tương ứng với píc thu được từ dung dịch chuẩn <strong>và</strong> hệ <strong>số</strong> chồng phổ của các pic này 

phải không được nhỏ hơn 0,99. 

* Định <strong>lượng</strong>: 

- Từ các giá trị diện tích píc, <strong>lượng</strong> cân mẫu chuẩn <strong>và</strong> mẫu thử, độ pha loãng 

tính ra hàm <strong>lượng</strong> các chất bảo quản có trong chế phẩm.

- Từ các giá trị diện tích píc, <strong>lượng</strong> cân mẫu chuẩn <strong>và</strong> mẫu thử, <strong>lượng</strong> chuẩn 

thêm <strong>và</strong>o mẫu QC <strong>và</strong> độ pha loãng của các dung dịch tính ra phần trăm thu hồi các 

chất bảo quản. Yêu cầu phần trăm thu hồi phải từ 95 % đến 105 % (Theo AOAC). 

6. Qui <strong>định</strong> chung 

Tất cả cán bộ của khoa khi tiến hành kiểm tra 5 <strong>paraben</strong> 


trong mỹ phẩm phải thực <strong>hiện</strong> đúng theo <strong>quy</strong> <strong>trình</strong> thường <strong>quy</strong> này <strong>và</strong> các biểu mẫu 

có liên quan. 

7. Tài liệu viện dẫn <strong>và</strong> các biểu mẫu liên quan 



Phụ lục 4 

Một <strong>số</strong> sắc kí đồ phân tích 5 <strong>paraben</strong> 

IPP, PheP, BzP, IBP, PeP 



Report(Report Editor) 

 

Analysis Report 

26/03/2018 18:39:13 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : C 1.100_1.lcd 

Method Filename : tp.lcm 

Batch Filename : 10012018.lcb 

Vial # : 1-39 Sample Type : Unknown 

Injection Volume : 10 uL 

Date Acquired : 10/01/2018 22:36:19 Acquired by : System Administrator 

Date Processed : 15/03/2018 11:01:00 Processed by : tammp 

 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 2.496 

/ 2.886 

C 1.100_1.lcd 

Isopropyl PB / 13.914 

PDA Multi 1 254nm,4nm 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.496 

2.886 

13.914 

21.215 

26.328 

Area 

13724 

26056 

101160 

89515 

80681 

Phenyl PB / 21.215 

Benzyl PB / 26.328 

C 1.100_1.lcd 

Tailing Factor Resolution(USP) Number of Theoretical Plate(USP) 

-- 

-- 

1.141 

1.111 

1.094 

-- 

0.083 

15.265 

11.986 

6.349 

1 

145 

13090 

13450 

14351 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\C 1.100_1.lcd


 


26/03/2018 18:41:09 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

20 

15 

10 

5 

0 

/ 2.496 

/ 2.879 

C 2.100_1.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.496 

2.879 

13.902 

21.185 

26.295 

Area 

13710 

28047 

203923 

181562 

165956 



C 2.100_1.lcd 


-- 

-- 

1.159 

1.118 

1.098 

-- 

0.086 

14.976 

12.062 

6.344 

2 

135 

13356 

13604 

14143 





 


26/03/2018 18:41:59 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

30 

20 

10 

0 

/ 2.544 

/ 2.863 

/ 2.992 

C 3.100_1.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.544 

2.863 

2.992 

13.851 

21.117 

26.199 

Area 

13922 

17547 

12922 

303000 

269439 

247669 



C 3.100_1.lcd 


-- 

-- 

-- 

1.162 

1.121 

1.101 

-- 

0.147 

0.081 

10.313 

11.741 

6.196 

13 

54 

55 

12504 

12949 

13612 





 


26/03/2018 18:46:30 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 







Date Processed : 18/01/2018 15:42:28 Processed by : System Administrator 

 

mAU 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 2.496 

/ 2.874 

C 5.100_3.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.496 

2.874 

13.867 

21.150 

26.245 

Area 

12504 

26314 

503149 

449949 

412952 



C 5.100_3.lcd 


-- 

-- 

1.158 

1.121 

1.099 

-- 

0.130 

15.446 

11.844 

6.234 

4 

152 

12815 

13080 

13761 





 


26/03/2018 18:47:24 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 2.868 

C 8.100_1.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.868 

13.839 

21.078 

26.127 

Area 

25201 

811058 

726070 

667477 



C 8.100_1.lcd 


-- 

1.154 

1.121 

1.099 

-- 

16.376 

11.795 

6.203 

182 

12749 

13080 

13773 





 


26/03/2018 18:48:03 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

100 

75 

50 

25 

0 

/ 2.480 

/ 2.870 

C 10.100_1.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.480 

2.870 

13.650 

20.771 

25.760 

Area 

12361 

28346 

1025100 

918033 

844418 



C 10.100_1.lcd 


-- 

-- 

1.153 

1.122 

1.100 

-- 

0.197 

15.036 

11.618 

6.130 

11 

148 

12429 

12740 

13349 





 


26/03/2018 18:48:38 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

100 

75 

50 

25 

/ 2.528 

/ 2.877 

C 15.100_1.lcd 



0 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.528 

2.877 

13.648 

20.745 

25.699 

Area 

12113 

31264 

1560129 

1398345 

1289020 



C 15.100_1.lcd 


-- 

-- 

1.177 

1.135 

1.113 

-- 

-- 

14.961 

11.485 

6.060 

-- 

149 

12134 

12560 

13208 





 


26/03/2018 18:49:14 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

150 

100 

50 

/ 2.472 

/ 2.878 

/ 6.281 

C 20.100_1.lcd 



0 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.472 

2.878 

6.281 

13.524 

20.558 

25.477 

Area 

10792 

25515 

23744 

2090358 

1884605 

1735624 



C 20.100_1.lcd 


-- 

-- 

1.302 

1.177 

1.139 

1.116 

-- 

0.044 

5.778 

19.494 

11.508 

6.070 

-- 

155 

9823 

12206 

12593 

13172 





 


Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : L03_4ppm.4.lcd 

Method Filename : tp 2 PB.lcm 






 

09/02/2018 14:44:14 Page 1 / 2 

mAU 

20 

15 

10 

5 

0 

/ 2.191 

/ 2.279 

/ 2.528 

/ 2.883 

/ 3.220 

/ 3.333 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

/ 5.336 

L03_4ppm.4.lcd 

Isobutyl PB / 23.633 


0 10 20 30 40 50 60 

min 

Ret. Time 

2.191 

2.279 

2.528 

2.883 

3.220 

3.333 

5.336 

23.633 

43.220 

Area 

42336 

14317 

8275 

14069 

43988 

13359 

1713 

189481 

171415 

Tailing Factor Resolution(USP) Theoretical Plates/meter(USP) 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.143 

1.014 

1.036 

-- 

0.158 

0.050 

0.069 

0.663 

0.395 

8.235 

38.445 

18.310 

737 

6750 

7 

1643 

14079 

13776 

81438 

103486 

104514 



Pentyl PB / 43.220 

 

 

Oven Model 

Enable Oven 

Oven Temperature 

Maximum Temperature 

Method 

: LC-2040 Oven 

: Use 

: 40 C 

: 90 C 

 

Time Module Command Value 

0.01 Controller Stop 

D:\Viet Ai\PB\25.01.2018\2PB\L03_4ppm.4.lcd


09/02/2018 14:44:14 Page 2 / 2 

 

Mode 

: Low pressure gradient 

Pump A 

: LC-2040 Pump 

Flow 

: 1.0000 mL/min 

B Conc. : 0.0 % 

C Conc. : 40.0 % 

D Conc. : 60.0 % 

B Curve : 0 

C Curve : 0 

D Curve : 0 

PressMax 

: 300 bar 

PressMin 

: 0 bar 

LPGE Mode 

: Auto 

Compressibility Setting : Off 

Gradient Start Adjustment : None 

 

Lamp 

Use Cell Temp. 

Cell Temp. 

: D2 

: Use 

: 40 C 





 


27/03/2018 17:55:03 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

30 

20 

10 

0 

/ 2.171 

/ 2.315 

/ 2.640 

/ 2.914 

/ 3.230 

/ 5.309 




0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

Ret. Time 

2.171 

2.315 

2.640 

2.914 

3.230 

5.309 

23.295 

42.530 

Area 

41551 

21315 

3530 

12088 

59788 

1711 

382359 

355376 




-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.188 

1.057 

1.046 

-- 

0.407 

0.394 

0.257 

0.581 

7.072 

38.511 

18.485 

321 

1757 

55 

281 

1067 

12197 

15777 

16135 



D:\Viet Ai\PB\25.01.2018\L03_8ppm.3.lcd


 


27/03/2018 17:47:49 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

30 

20 

10 

0 

/ 1.936 

/ 2.161 

/ 2.247 

/ 2.600 

/ 2.803 

/ 3.231 

/ 3.354 

/ 5.325 




0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

Ret. Time 

1.936 

2.161 

2.247 

2.600 

2.803 

3.231 

3.354 

5.325 

23.364 

42.616 

Area 

32002 

15887 

14216 

15217 

22836 

34534 

7460 

1653 

580943 

542976 




-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.150 

1.028 

1.026 

-- 

0.224 

0.172 

0.198 

0.093 

0.647 

0.519 

9.472 

38.432 

18.108 

35 

152 

914 

10 

108 

2716 

3534 

12496 

15602 

15301 





 


27/03/2018 18:04:43 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 1.654 

/ 2.264 

/ 2.576 

/ 2.897 / 3.416 




0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

Ret. Time 

1.654 

2.264 

2.576 

2.897 

3.416 

23.642 

43.285 

Area 

7062 

2165 

8144 

11679 

483733 

189897 

171088 




0.910 

-- 

-- 

-- 

0.794 

1.013 

1.036 

-- 

3.075 

0.575 

0.383 

0.868 

37.040 

18.345 

2552 

1158 

158 

182 

1642 

15694 

15589 





 


27/03/2018 17:50:37 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

30 

20 

10 

0 

/ 2.568 

/ 2.897 

/ 1.695 

/ 3.569 




0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

Ret. Time 

1.695 

2.568 

2.897 

3.569 

23.570 

43.096 

Area 

6638 

7017 

11424 

482377 

379171 

352205 




0.863 

-- 

-- 

0.714 

1.001 

1.012 

-- 

1.839 

0.439 

1.190 

33.634 

18.098 

2067 

165 

276 

1088 

15532 

15133 





 


27/03/2018 18:00:55 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

30 

20 

10 

0 

/ 3.208 

/ 1.593 / 2.576 

/ 2.900 




0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isobutyl PB 

Pentyl PB 

Ret. Time 

1.593 

2.576 

2.900 

3.208 

23.422 

42.781 

Area 

6758 

6827 

10665 

475469 

565788 

527899 




0.854 

-- 

-- 

1.031 

1.031 

1.026 

-- 

2.323 

0.466 

0.622 

37.519 

18.192 

2993 

199 

309 

1516 

15687 

15369 





 


27/03/2018 18:12:53 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD 200 + 48L03.lcd 

Method Filename : tp LOD.lcm 






 

mAU 

0.4 

0.3 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 1.780 

/ 2.062 2.575 

/ 2.931 

/ 3.685 

/ 3.347 

/ 5.416 

LOD 200 + 48L03.lcd 

IsoPropyl PB / 14.112 


-0.1 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

1.780 

2.062 

2.575 

2.931 

3.347 

3.685 

5.416 

14.112 

21.689 

26.976 

Area 

34177 

97341 

12641 

26153 

1578 

3918 

1996 

2917 

2096 

2014 



LOD 200 + 48L03.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.122 

1.004 

-- 

-- 

-- 

0.574 

0.737 

0.302 

0.615 

1.203 

5.504 

24.730 

13.077 

6.775 

93 

1133 

81 

94 

8904 

1236 

10671 

13079 

17009 

14519 



D:\Viet Ai\PB\LOD\16.01.2018\LOD 200 + 48L03.lcd


Status:Manual Integration 

 


27/03/2018 18:12:02 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 

1.510 

2.302 

/ 2.552 

/ 2.911 

LOD 200 + 48L10.lcd 



-0.1 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

1.510 

2.302 

2.552 

2.911 

14.325 

22.048 

27.453 

63.385 

Area 

6511 

21078 

244953 

190788 

2354 

1696 

1826 

32170 



LOD 200 + 48L10.lcd 


0.881 

-- 

-- 

-- 

1.098 

1.030 

0.974 

-- 

-- 

1.816 

0.501 

0.687 

18.092 

13.893 

7.600 

23.319 

2778 

148 

1801 

210 

15647 

18207 

20400 

12017 






 


27/03/2018 18:13:36 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 1.793 

/ 2.041 

/ 2.297 

/ 2.563 

/ 2.760 

/ 2.941 

/ 3.552 

/ 3.620 

/ 3.348 

/ 5.415 

LOD 400 + 48L03.lcd 



-0.1 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

1.793 

2.041 

2.297 

2.563 

2.760 

2.941 

3.348 

3.552 

3.620 

5.415 

14.085 

21.589 

26.856 

Area 

34885 

75065 

16674 

12540 

5112 

20116 

1555 

2299 

2169 

1862 

2040 

1416 

1327 



LOD 400 + 48L03.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.153 

1.085 

0.883 

0.995 

-- 

0.192 

0.328 

0.196 

0.057 

0.054 

0.668 

0.411 

-- 

-- 

26.096 

14.750 

7.520 

9 

1979 

45 

59 

4 

119 

9241 

277 

-- 

11385 

14903 

24120 

16170 






 


27/03/2018 18:15:31 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 

1.512 

2.294 

/ 2.547 

/ 2.902 

/ 7.151 

LOD 400 + 48L10.lcd 



-0.1 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

1.512 

2.294 

2.547 

2.902 

7.151 

14.144 

21.685 

27.029 

62.192 

62.279 

Area 

6968 

23722 

237163 

211081 

1077 

1165 

1105 

800 

14929 

18248 



LOD 400 + 48L10.lcd 


0.936 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.007 

1.139 

1.149 

-- 

-- 

-- 

2.268 

0.623 

0.782 

7.238 

14.470 

12.750 

6.589 

9.622 

0.015 

2860 

253 

1849 

299 

3233 

14897 

14538 

14351 

1508 

2623 






 


27/03/2018 18:14:17 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD 400.lcd 







 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 2.574 

/ 2.946 

/ 2.143 

/ 2.358 

/ 3.667 

LOD 400.lcd 



-0.1 

0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.143 

2.358 

2.574 

2.946 

3.667 

14.050 

21.565 

26.797 

Area 

1008 

1674 

11543 

30224 

5366 

1427 

929 

1259 



LOD 400.lcd 


0.990 

-- 

-- 

-- 

-- 

0.968 

0.995 

1.034 

-- 

0.131 

0.078 

0.223 

1.124 

25.903 

14.055 

7.602 

1669 

9 

18 

162 

1689 

15967 

19077 

20308 



D:\Viet Ai\PB\LOD\16.01.2018\LOD 400.lcd



 


26/03/2018 19:11:26 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD PL 200.lcd 







 

mAU 

0.50 

0.25 

0.00 

/ 2.488 

/ 2.873 

LOD PL 200.lcd 



0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Isopropyl PB 

Phenyl PB 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.488 

2.873 

13.516 

20.405 

25.250 

Area 

12642 

29205 

2283 

1901 

1846 



LOD PL 200.lcd 


-- 

-- 

1.016 

0.998 

0.906 

-- 

0.069 

15.102 

12.652 

6.981 

1 

143 

14425 

16326 

18174 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\LOD PL 200.lcd



 


27/03/2018 17:42:36 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD 0.03 ppm + 48L03.lcd 







 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 2.196 / 2.274 / 2.581 

/ 3.238 

LOD 0.03 ppm + 48L03.lcd 


-0.1 

0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IBP 

PeP 

Ret. Time 

2.196 

2.274 

2.581 

3.238 

23.639 

43.281 

Area 

20869 

20240 

27634 

63543 

1307 

1277 

IBP / 23.639 

PeP / 43.281 



-- 

-- 

-- 

-- 

1.002 

1.411 

-- 

0.081 

0.424 

1.751 

39.510 

26.608 

113 

68 

908 

1009 

22888 

41351 



D:\Viet Ai\PB\20.01.2018\LOD 0.03 ppm + 48L03.lcd



 


27/03/2018 17:43:24 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD 0.03 ppm + 48L10.lcd 







 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 2.573 

/ 1.902 2.891 

/ 3.089 

/ 4.028 

/ 2.312 

/ 3.508 

/ 4.767 

/ 7.073 



-0.1 

0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoButyl PB 

Ret. Time 

1.902 

2.312 

2.573 

2.891 

3.089 

3.508 

4.028 

4.767 

7.073 

23.700 

Area 

8501 

1207 

10957 

20383 

6737 

8170 

493866 

350 

841 

1154 

IsoButyl PB / 23.700 



1.119 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

0.712 

1.485 

-- 

1.157 

-- 

0.469 

0.068 

0.089 

0.234 

0.405 

0.651 

3.224 

6.235 

29.910 

1203 

36 

3 

143 

292 

108 

4118 

8449 

2826 

26753 



D:\Viet Ai\PB\20.01.2018\LOD 0.03 ppm + 48L10.lcd


 


27/03/2018 17:41:26 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : LOD 0.03 ppm.lcd 







 

mAU 

0.2 

0.1 

0.0 

/ 2.581 

/ 2.893 

/ 3.092 

/ 3.318 / 3.643 

/ 4.780 

/ 7.086 / 8.864 

/ 8.976 

/ 9.341 

LOD 0.03 ppm.lcd 

IsoButyl PB / 23.667 


-0.1 

0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoButyl PB 

Ret. Time 

2.581 

2.893 

3.092 

3.318 

3.643 

4.780 

7.086 

8.864 

8.976 

9.341 

23.667 

Area 

13289 

21236 

7084 

132 

7700 

351 

580 

343 

143 

214 

1061 

LOD 0.03 ppm.lcd 


-- 

-- 

-- 

1.020 

0.713 

1.153 

1.057 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

0.116 

0.230 

0.560 

1.427 

3.880 

8.409 

4.786 

0.267 

0.604 

21.784 

5 

138 

274 

48718 

1362 

9997 

6290 

8461 

6230 

2464 

28312 



D:\Viet Ai\PB\20.01.2018\LOD 0.03 ppm.lcd


Status:Manual Integration/Temporary 

 


26/03/2018 19:39:06 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : 48L01.1.lcd 







 

mAU 

5.0 

2.5 

0.0 

48L01.1.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Benzyl PB 

Ret. Time 

25.033 

Area 

30192 


48L01.1.lcd 


1.033 

-- 

16553 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\Mau\48L01.1.lcd



 


26/03/2018 19:36:01 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 2.711 2.269 

/ 3.058 

/ 5.269 

/ 4.756 

/ 6.405 

48L02.2.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Benzyl PB 

Ret. Time 

2.269 

2.711 

3.058 

4.756 

5.269 

6.405 

25.027 

Area 

111914 

63980 

190435 

5358 

24008 

2566 

38211 


48L02.2.lcd 


-- 

-- 

-- 

1.093 

1.285 

1.215 

1.061 

-- 

0.842 

0.546 

4.661 

2.136 

5.074 

35.638 

1455 

178 

718 

4891 

10258 

11450 

15440 





 


27/03/2018 10:06:37 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 3.080 

/ 3.248 

/ 2.267 

/ 1.819 

/ 5.266 

/ 6.406 

48L03.1.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.819 

2.267 

3.080 

3.248 

5.266 

6.406 

Area 

28346 

74232 

12547 

19290 

3199 

1494 

48L03.1.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

1.291 

1.364 

-- 

0.889 

1.918 

0.396 

8.086 

4.989 

105 

936 

499 

1900 

10978 

10034 





 


27/03/2018 10:08:22 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 2.526 

/ 2.888 

/ 3.084 

/ 1.728 

/ 1.985 

/ 5.268 

/ 8.156 

48L04.1.lcd 


0 5 10 15 20 25 30 35 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.728 

1.985 

2.526 

2.888 

3.084 

5.268 

8.156 

Area 

36155 

26393 

44058 

12686 

9843 

1687 

3953 

48L04.1.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.152 

1.146 

-- 

0.443 

0.834 

0.236 

0.145 

6.315 

12.262 

92 

324 

140 

27 

618 

11625 

14009 






 


27/03/2018 11:00:02 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

100 

75 

50 

25 

0 

/ 1.659 

/ 2.198 

/ 2.400 

/ 2.880 

/ 3.186 

/ 5.903 / 6.278 

48L05.1.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.659 

2.198 

2.400 

2.880 

3.186 

5.903 

6.278 

Area 

8224 

47895 

76462 

12739 

51013 

183370 

714556 

48L05.1.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.285 

1.292 

-- 

0.791 

0.261 

0.313 

0.250 

10.422 

1.602 

84 

188 

111 

29 

1860 

10931 

10798 





 


27/03/2018 10:58:04 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 


Method Filename : Ace 40.60 T.lcm 






 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 1.475 

/ 1.750 

/ 2.328 

/ 2.534 

/ 2.896 

/ 2.987 

/ 3.080 

/ 6.283 

48L06.1.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.475 

1.750 

2.328 

2.534 

2.896 

2.987 

3.080 

6.283 

Area 

18384 

7721 

4617 

15925 

13454 

4933 

8277 

15202 

48L06.1.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

-- 

1.278 

-- 

1.017 

1.450 

0.342 

0.323 

0.075 

0.048 

1.902 

225 

2260 

205 

330 

47 

272 

15 

11452 





 


27/03/2018 11:01:00 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 







Date Processed : 27/03/2018 09:21:17 Processed by : trangmp 

 

mAU 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 1.480 

/ 1.689 

/ 1.781 

/ 1.855 

/ 2.443 

/ 2.888 / 3.201 

/ 5.921 

/ 6.300 

/ 14.481 

48L07.1.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.480 

1.689 

1.781 

1.855 

2.443 

2.888 

3.201 

5.921 

6.300 

14.481 

Area 

2961 

5615 

3792 

6766 

295379 

9049 

134021 

100359 

104241 

391195 

48L07.1.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

0.912 

-- 

0.840 

1.290 

1.285 

1.140 

-- 

-- 

0.176 

0.310 

3.210 

0.417 

0.287 

10.344 

1.616 

22.502 

-- 

100 

373 

4443 

1470 

38 

1836 

10860 

10857 

14251 





 


27/03/2018 11:01:50 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : 48L07+IPP.lcd 







 

mAU 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 2.386 

/ 1.680 

/ 1.752 

/ 1.824 

/ 2.126 

/ 3.213 

/ 5.903 

/ 6.274 


/ 14.346 

48L07+IPP.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

IsoPropyl PB 

Ret. Time 

1.680 

1.752 

1.824 

2.126 

2.386 

3.213 

5.903 

6.274 

13.468 

14.346 

Area 

9967 

3491 

7570 

6533 

301829 

160065 

123327 

132485 

597425 

487714 

48L07+IPP.lcd 


-- 

-- 

-- 

-- 

1.212 

0.817 

1.271 

1.271 

1.145 

1.130 

-- 

0.115 

0.223 

1.571 

0.902 

2.778 

10.630 

1.601 

20.810 

1.884 

84 

180 

3546 

1049 

923 

2090 

11019 

11037 

14175 

14300 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\Mau\48L07+IPP.lcd


 


27/03/2018 11:02:30 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : 48L07+PP.lcd 







 

mAU 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 2.420 

/ 3.215 

/ 5.898 

/ 6.269 

PP / 14.327 

48L07+PP.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

PP 

Ret. Time 

2.420 

3.215 

5.898 

6.269 

14.327 

Area 

262771 

131646 

104256 

111153 

650034 

48L07+PP.lcd 


1.119 

0.818 

1.284 

1.277 

1.141 

-- 

2.632 

9.901 

1.594 

22.389 

1131 

1652 

10942 

10930 

14258 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\Mau\48L07+PP.lcd


Status:Temporary 

 


27/03/2018 15:01:07 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

10.0 

7.5 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 1.651 

/ 2.581 

/ 5.285 

/ 6.311 

48L08.1.lcd 

/ 19.749 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.651 

2.581 

5.285 

6.311 

19.749 

Area 

23207 

96626 

1211 

9162 

23858 

48L08.1.lcd 


0.788 

1.359 

1.234 

1.262 

1.089 

-- 

3.341 

8.327 

4.597 

30.682 

3565 

536 

10779 

10829 

15556 






 


27/03/2018 15:07:25 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 








 

mAU 

5.0 

2.5 

0.0 

/ 1.542 

/ 2.704 

/ 2.208 

/ 3.080 

/ 6.281 

/ 8.671 

48L09.1.lcd 

/ 19.599 

/ 22.530 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.542 

2.208 

2.704 

3.080 

6.281 

8.671 

19.599 

22.530 

25.587 

34.913 

59.100 

Area 

7104 

1937 

100022 

2224 

1431 

1092 

24586 

7159 

4131 

14297 

11189 

/ 25.587 

/ 34.913 

48L09.1.lcd 


1.035 

-- 

-- 

2.564 

1.166 

1.157 

1.073 

1.097 

0.891 

1.048 

1.030 

-- 

0.148 

0.107 

1.198 

14.806 

9.121 

23.522 

4.242 

3.912 

9.704 

14.866 

2598 

1 

635 

3881 

11471 

14348 

15022 

14742 

15546 

16083 

12058 





 


27/03/2018 15:10:33 Page 1 / 1 

Sample Name 

Sample ID 

: 

: 

Data Filename : Placebo.lcd 







 

mAU 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

/ 3.847 

/ 1.733 

/ 2.282 

/ 2.528 

/ 2.875 

/ 3.080 

Placebo.lcd 


0 10 20 30 40 50 

min 

 

PDA Ch1 254nm 

Name 

Ret. Time 

1.733 

2.282 

2.528 

2.875 

3.080 

3.847 

Area 

6226 

1963 

13738 

17580 

6663 

489858 

Placebo.lcd 


0.847 

-- 

-- 

-- 

-- 

0.685 

-- 

1.944 

0.152 

0.189 

0.240 

1.282 

1913 

503 

13 

179 

212 

1933 



D:\Viet Ai\PB\10.01.2018\Ace 40.60\Cot 25cm\Do dung\Nuoc suc mieng\Placebo.lcd

Nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện và định lượng một số paraben trong mỹ phẩm

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?