Info - Leica Biosystems
Info - Leica Biosystems
Info - Leica Biosystems
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Immunhistokemisk fremgangsmåde til anvendelse af Novocastra TM<br />
antistoffer på frossent muskelvæv.<br />
Nødvendige reagenser, der ikke medfølger<br />
1. Standardopløsningsmidler anvendt i immunhistokemi.<br />
2. 50 mM Tris-bufferjusteret saltvandsopløsning (TBS) pH7,6.<br />
3. Antistofdiluent - normalt serum optimalt fortyndet i TBS.<br />
4. Normale sera fra de arter, i hvilke det sekundære antistof opformeres.<br />
5. Sekundært peroxidasekonjugeret antistof - anvendes ifølge producentens anbefalinger.<br />
6. 3,3’ diaminobenzidintetrahydrochlorid (DAB) - fremstilles ifølge producentens anbefalinger.<br />
7. Monteringsmedium - fremstilles ifølge producentens anbefalinger.<br />
Nødvendige reagenser, der ikke medfølger<br />
1. Inkubator indstillet til 25 o C.<br />
2. Almindeligt laboratorieudstyr til immunhistokemi.<br />
3. Elektrisk ventilator til tørring af objektglas.<br />
Antigengenfindingsopløsninger (se Anbefalinger vedrørende anvendelse)<br />
Ikke anvendelig til frosne vævssnit.<br />
Metodologi<br />
Inden ibrugtagning af denne metodologi, skal brugere være oplært i immunhistokemiske teknikker.<br />
Brugeren bør bestemme de optimale fortyndinger for antistoffer. Med mindre andet er anført, skal alle trin udføres ved 25 o C.<br />
1. Snit og monter 4–10 µm tykke vævssnit på objektglas coatet med et passende vævsadhæsiv og lufttør i mindst en time.<br />
2. Inkuber vævsnittene i optimalt fortyndet primært antistof (se Anbefalinger vedrørende anvendelse).<br />
3. Vask i TBS i 2 x 5 minutter, mens de vugges forsigtigt.<br />
4. Inkuber vævssnittene med et passende peroxidasekonjugeret sekundært antistof.<br />
5. Vask i TBS i 2 x 5 minutter, mens de vugges forsigtigt.<br />
6. Inkuber vævssnittene i DAB.<br />
7. Skyl vævssnittene i rent vand.<br />
8. Tør, klar og monter vævssnittene.<br />
Rettelser til tidligere udgave<br />
Ingen rettelser.<br />
Udgivelsesdato<br />
5. februar 2004 (CEprotocol/Frozen Muscle).<br />
NCL-b-DG<br />
Page 37