Filtros para centrífuga Centriprep® - Millipore

Guía del usuario
Filtros para centrífuga
Centriprep®
Filtros Centriprep® 10K y 30K para diagnóstico in vitro
Filtros Centriprep® 3K y 50K solo para investigación,
no para procedimientos diagnósticos
Español
Introducción
Los filtros para centrífuga Centriprep® son unidades de ultrafiltración desechables utilizados para purificar,
concentrar, desalar y filtrar muestras biológicas en el intervalo de volumen de 2 a 15 ml. Estas unidades de
ultrafiltración listas para usar están diseñadas para funcionar en la mayoría de las centrífugas en las que se
utilicen tubos de centrífuga de 50 ml. Son fáciles de usar y ofrecen un caudal elevado. Los filtros Centriprep®
consisten en un recipiente para la muestra con un tapón de cierre con giro, un recolector de filtrado que
contiene una membrana de celulosa regenerada Ultracel® de baja adsorción y un tapón de estanqueidad para
aislamiento de la muestra.
El diseño del filtro Centriprep® permite que se produzcan a la vez filtración y sedimentación de partículas finas
sin obstrucción de la membrana. Utilizando un filtro Centriprep® 50K puede concentrarse una muestra de 15 ml
hasta 0,6 ml en tan solo 20 minutos; la concentración de volúmenes menores tarda incluso menos tiempo.
Gracias a la baja capacidad de adsorción de la membrana se alcanzan elevados factores de concentración;
además, es habitual una recuperación superior al 90% de los solutos macromoleculares retenidos. Un bloqueo
automático incorporado proporciona un volumen final de muestra concentrada de 0,5 a 0,6 ml.
Ventajas del producto
Con las muestras biológicas, los filtros para centrífuga Centriprep® ofrecen muchas ventajas en comparación con
técnicas de concentración como la precipitación química, la evaporación, la liofilización y la diálisis. El tiempo
de preparación es mínimo y basta con centrifugar el filtro hasta alcanzar la concentración deseada. El proceso
de filtración es suave, evitando posibles problemas, como la desnaturalización de la muestra y la concentración
de sales del tampón. Dado que, dentro del filtro Centriprep®, se producen simultáneamente la concentración
y la desalación de la muestra, se evitan las pérdidas debido a transferencia del material. El diseño es ideal para
las disoluciones que contienen material particulado fino, porque la filtración se produce en la dirección opuesta
a la sedimentación, reduciendo la obstrucción de la membrana. El diseño todo en uno del filtro Centriprep®
proporciona también seguridad añadida cuando se trabaja con muestras peligrosas. Dado que todos los materiales
están contenidos dentro del filtro, se reduce al mínimo la exposición del operario a los riesgos biológicos.
Filtros para centrífuga Centriprep®
1

Indicaciones de uso
AVISO: Los filtros Centriprep® 10K y 30K son para diagnóstico in vitro. Los Centriprep® 3K y 50 K son
solo para investigación; NO están pensados para su utilización en procedimientos diagnósticos.
Aplicaciones en investigación: Los filtros para centrífuga Centriprep® 3K pueden utilizarse para
concentrar y desalar oligonucleóticos, péptidos, factores de crecimiento y proteínas pequeñas. Las
aplicaciones para los filtros Centriprep® 10K, 30K y 50K son la concentración y la desalación de los
eluídos de la columna y las fracciones del gradiente que contienen proteínas, enzimas y anticuerpos; la
recuperación de biomoléculas de los sobrenadantes, lisados o extractos de cultivos celulares o de otras
muestras biológicas; la purificación de los componentes de bajo peso molecular (por ejemplo, aminoácidos
y antibióticos) de los líquidos fisiológicos, los medios de cultivo celular o los caldos de fermentación.
Uso para diagnóstico in vitro: Los filtros para centrífuga Centriprep® 10K y 30K pueden utilizarse para
concentrar macromoléculas en suero, orina, líquido cefalorraquídeo y otros líquidos corporales antes de
analizarlos. Todos los demás filtros para centrífuga Centriprep® están pensados solo para investigación, no
para ser utilizados en procedimientos diagnósticos.
Límites de peso molecular nominal
La línea de productos Centriprep® consta de filtros con los siguientes límites de peso molecular nominal
(NMWL):
● Filtro Centriprep® 3K — NMWL 3.000 (portamembranas amarillo)
● Filtro Centriprep® 10K — NMWL 10.000 (portamembranas verde)
● Filtro Centriprep® 30K — NMWL 30.000 (portamembranas transparente)
● Filtro Centriprep® 50K — NMWL 50.000 (portamembranas rosa)
Componentes del filtro Centriprep®
Tapón de estanqueidad
Tapón de cierre con giro
Ranura de ventilación
Resalto del recolector de filtrado
Recolector de filtrado
Portamembranas
Recipiente para la
muestra
Línea de llenado
2 Filtros para centrífuga Centriprep®

Control de la polarización
Equipo necesario
Los filtros Centriprep® pueden centrifugarse en una centrífuga de velocidad variable que tenga un rotor de
cubeta oscilante o un rotor de ángulo fijo y un portamuestras en el que quepan bien tubos de centrífuga de
50 ml. La centrífuga debe funcionar a 500 — 3.000 x g. En www.millipore.com/rotorguide encontrará una
lista de centrífugas y rotores compatibles.
Limitaciones
Con rotores de ángulo fijo, el control de polarización puede verse adversamente afectado a fuerzas g bajas
(por debajo de 2.000 x g). El flujo de filtrado puede reducirse dependiendo de la composición de la muestra
y de la concentración del soluto. Con cualquier tipo de centrífuga, no deben superarse los siguientes
límites, ya que una fuerza g excesiva puede provocar fugas o estropear el filtro.
Dispositivo Fuerza centrífuga máxima
Centriprep® 3K y 10K 3.000 × g
Centriprep® 30K y 50K 1.500 × g
Conservación y periodo de validez del dispositivo
Para obtener los mejores resultados, guarde los filtros Centriprep® a 15-30 °C. El rendimiento puede verse
afectado de manera adversa si los filtros se conservan a temperaturas extremas (es decir, por debajo de 0 °C
o por encima de 40 °C). El periodo de validez es de tres años a partir de la fecha de fabricación. Consulte la
fecha de caducidad en la etiqueta del envase.
Preenjuague
Fuerza centrífuga
Filtración
Rotor de cubeta
oscilante
Las membranas del filtro para centrífuga Centriprep® contienen restos de glicerina. Si esto interfiere en
el análisis, llene el filtro con aproximadamente 15 ml de tampón o agua desionizada y centrifugue hasta
alcanzar el primer punto de equilibrio. Decante el filtrado y concentre. Repita cuantas veces sea necesario
hasta que no se observen más interferencias. Una vez humedecidas, las membranas deben mantenerse
húmedas para que sigan siendo funcionales.
Filtros para centrífuga Centriprep®
Capa de
polarización
Filtración
Rotor de ángulo
fijo
3

Aspecto de la membrana y del filtro
● En ocasiones un filtro Centriprep® no utilizado puede tener unas pocas gotas de humedad en el
recolector de filtrado o en el recipiente para la muestra. Esto se debe a la condensación de humedad en
la membrana y no afecta al rendimiento.
● Después de la centrifugación, puede quedar una pequeña cantidad de filtrado (aproximadamente
0,5 ml) entre la membrana y el portamembranas del filtro Centriprep®. Esto es normal y no afecta al
funcionamiento ni al rendimiento del filtro.
● La membrana Ultracel® utilizada en los filtros para centrífuga Centriprep® puede aparecer ligeramente
arrugada después de la centrifugación.
Reutilización del filtro para centrífuga
Los filtros Centriprep® están pensados para un solo uso. Los intentos de limpiar el filtro pueden estropear la
superficie de la membrana o el sello, pudiendo poner en peligro la integridad de la unidad y afectando así al
rendimiento.
Principio de funcionamiento
Lo primero es aflojar el tapón de cierre con giro del recipiente de la muestra y retirar el recolector de filtrado.
A continuación se añade la muestra, se reinserta con cuidado el recolector de filtrado en el recipiente
de la muestra (desplazando disolución) y se aprieta el tapón, cerrando herméticamente el dispositivo. El
filtro para centrífuga montado se centrifuga a 1.000 - 3.000 x g, dependiendo del NMWL de la membrana
utilizada.
La inmersión del recolector de filtrado en la disolución de la muestra crea un ligero diferencial de presión
hidrostática que ejerce una fuerza de empuje ascendente sobre la membrana del fondo del recolector de
filtrado. Por sí misma, la presión hidrostática ejercida por la disolución desplazada es demasiado débil como
para producir ultrafiltración. La centrifugación aumenta esta presión, forzando el paso de los materiales
de bajo peso molecular y el disolvente a través de la membrana al recolector de filtrado. Los solutos con
pesos moleculares por encima del NMWL de la membrana permanecen en el recipiente de la muestra y se
van concentrando cada vez más mientras continúe la centrifugación. La ultrafiltración se produce en la
dirección opuesta al vector de la fuerza centrífuga.
La presión diferencial creada por el aumento del nivel de la disolución es importante en el funcionamiento
del filtro para centrífuga. Durante la centrifugación, el menisco de la disolución de la muestra desciende
a medida que asciende el menisco del filtrado. En el proceso, el recolector de filtrado pierde su fuerza de
empuje y se hunde hasta el fondo del recipiente de la muestra, permitiendo la recolección máxima de
filtrado. Por fin se llega a un equilibrio en el que los meniscos alcanzan alturas iguales. En este momento se
interrumpe la filtración, ya que la diferencia de presión hidrostática es ahora cero.
Si se quiere una mayor concentración, habrá que decantar el filtrado antes de centrifugar el filtro una
segunda vez. La decantación permite restablecer la presión diferencial entre el menisco de la muestra y el
menisco del filtrado, lo que permite el reinicio de la filtración. La filtración continúa hasta que se alcanza
un nuevo punto de equilibrio. Nótese que la presión diferencial cambia constantemente durante el procedimiento
a medida que los meniscos suben y bajan.
Los filtros para centrífuga Centriprep® están diseñados para mantener caudales elevados reduciendo al
mínimo la acumulación de solutos en la membrana durante el funcionamiento. La fuerza centrífuga hace
que los materiales densos se hundan en el fondo del recipiente de la muestra alejándose de la membrana.
Dado que la membrana Centriprep® “flota” por encima de esta capa de polarización, se utiliza siempre
la superficie completa de la membrana, y no se restringe el flujo del filtrado. Esto es particularmente
beneficioso cuando se trabaja con suspensiones, que pueden obstruir o ensuciar fácilmente una membrana.
4 Filtros para centrífuga Centriprep®

Cómo utilizar los filtros para centrífuga Centriprep®
Desmonte el dispositivo
y añada muestra hasta la
línea de llenado.
Vuelva a montarlo
y colóquelo en la
centrífuga.
Centrifugar
hasta
concentrado
Centrifugue hasta que
se igualen los niveles
de la solución.
1. Gire el tapón de cierre con giro del recipiente de la muestra en dirección contraria a las agujas del
reloj, luego saque el conjunto colector de filtrado/tapón y déjelo aparte.
AVISO: Tenga cuidado de no tocar, arañar o estropear la membrana del fondo del recolector de filtrado
durante el desmontaje, el llenado y el remontaje del filtro.
2. Añada la solución al recipiente de la muestra. La línea que se observa en el lateral del recipiente marca
el volumen de llenado máximo de 15 ml. No supere este volumen.
NOTA: Para soluciones que contienen material particulado, como las suspensiones celulares, un
volumen de partida superior a 5 ml tendrá como resultado una reducción de los caudales. Para
obtener mejores resultados cuando se trabaja con una muestra que contiene más del 10% de
sólidos, hay que limitar el volumen inicial de la muestra a 5 ml o menos.
3. Ajuste el tapón de giro con rosca completamente en el resalto del recolector de filtrado. Si es
necesario, apriete el tapón hacia abajo hasta que tope con el resalto.
4. Inserte con cuidado el recolector de filtrado tapado en el recipiente de la muestra empujando con suavidad
hacia abajo hasta que el recolector desplace la disolución. Gire el tapón con rosca en la dirección
horaria para sellar el recipiente de la muestra. Por último, asegúrese de que el tapón de estanqueidad
está bien ajustado al tapón de cierre con giro.
5. Coloque en la centrífuga el filtro Centriprep® montado y equilibre con un dispositivo similar.
PRECAUCIÓN: Antes de centrifugar, compruebe que no hay nada que pueda obstruir el giro de los
rotores de cubeta oscilante. Cualquier obstrucción puede estropear el filtro Centriprep®
y provocar posibles pérdidas de muestra. Para mayor garantía, el filtro Centriprep®
puede utilizarse en adaptadores que no tengan amortiguadores de goma.
6. niveles de líquido en el interior y el exterior del recolector de filtrado. En la sección “Tiempos de
concentración para disoluciones proteicas diluidas” que aparece a continuación en este documento se
indica cómo alcanzar diversos volúmenes de concentración en las aplicaciones de concentración.
7. Si es necesaria una mayor concentración después del equilibrado, retire el filtro de la centrífuga y
retire el tapón de estanqueidad. Con la ranura de ventilación orientada hacia arriba, decante el filtrado;
vuelva a colocar el tapón y centrifugue el filtro una segunda vez. Para aplicaciones de filtración,
reserve el filtrado.
8. Después de la segunda centrifugación, decante el filtrado restante. Si desea una posterior concentración,
vuelva a centrifugar el filtro; de lo contrario, siga al paso 9.
9. Afloje el tapón de cierre con giro (gire en dirección antihoraria) y retire el recolector de filtrado. Retire
la muestra utilizando una pipeta o vierta el concentrado en un recipiente adecuado.
Filtros para centrífuga Centriprep®
Oriente la ranura de ventilación
hacia arriba y decante el
filtrado. Vuelva a centrifugar.
Centrifugar
hasta
concentrado
Desmonte y recupere
el concentrado.
5

Tiempos de concentración habituales para disoluciones
proteicas diluidas
Volumen de partida
Tiempo de centrifugación (min.)
en el filtro
y volumen de concentrado (ml)
Centriprep® 3K Primera
Segunda
Tercera
centrifugación centrifugación centrifugación
min ml min ml min ml
5 ml 50 1,2 10 0,8 10 0,5
10 ml 65 2,0 10 1,0 10 0,5
15 ml 95 3,1 35 1,2 10 0,6
Centriprep® 10K Primera
centrifugación
Segunda
centrifugación
Tercera
centrifugación
min ml min ml min ml
5 ml 15 1,3 10 0,6 N/A
10 ml 30 2,1 10 1,0 5 0,5
15 ml 40 3,2 10 1,2 5 0,5
Centriprep® 30K Primera
centrifugación
Segunda
centrifugación
Tercera
centrifugación
min ml min ml min ml
5 ml 5 1,3 5 0,8 5 0,5
10 ml 10 2,4 5 1,2 5 0,4
15 ml 15 3,2 10 1,1 5 0,5
Centriprep® 50K Primera
centrifugación
Segunda
centrifugación
Tercera
centrifugación
min ml min ml min ml
5 ml 5 1,4 5 1,0 5 0,6
10 ml 10 2,2 5 1,1 5 0,6
15 ml 10 3,4 5 1,3 5 0,6
Condiciones de centrifugación y proteínas utilizadas en los estudios de tiempo
de concentración
NMWL del
dispositivo 3K 10K 30K 50K
Proteína Citocromo c
(0,25 mg/ml)
Albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Fuerza g 3.000 × g 3.000 × g 1.500 × g 1.500 × g
Rotor oscilante, 25 °C
N/A = no aplicable; no es necesaria una tercera centrifugación
6 Filtros para centrífuga Centriprep®

Rendimiento
Los caudales y las características de recuperación de los filtros para centrífuga Centriprep® se han ensayado
con diversos solutos bien conocidos. Estos resultados, que se resumen en las siguientes secciones,
pueden utilizarse para estimar el rendimiento con otros solutos.
La fuerza centrífuga relativa (RCF) se mide en la base del recolector de filtrado y se calcula como sigue:
RCF = 1,118 × 10 -5 × radio × (RPM) 2
Radio = distancia en centímetros, medida desde el centro de rotación hasta la base del recolector de
filtrado
RPM = revoluciones por minuto.
Nota: RCF y RPM no son lo mismo (es decir, 3,000 × g NO equivalen a 3.000 RPM.) Compruebe las
instrucciones de conversión de fuerza g en RPM en la guía de funcionamiento de la centrífuga, o
utilice la fórmula anterior.
Caudal
La velocidad de filtración se ve afectada por diversos parámetros operativos, entre ellos la concentración
de la muestra, el volumen de partida, la fuerza centrífuga relativa, el tipo de rotor utilizado, el NMWL de la
membrana y la temperatura. Cuando se concentran disoluciones diluidas, los rotores de cubeta oscilante y
de ángulo fijo producen caudales comparables.
Para las disoluciones que contienen más del 10% de sólidos, un volumen de partida superior a 5 ml suele
provocar una reducción de los caudales. Un volumen de 5 ml o inferior produce los mayores caudales,
porque limita la cantidad de sólidos que pueden acumulares y obstruir la membrana.
Cuando se trabaja a bajas temperaturas deben prolongarse los tiempos de centrifugación. A 4 °C, los
caudales son aproximadamente 1,5 veces más lentos que a 25 °C. Las disoluciones viscosas pueden precisar
también tiempos de centrifugación más prolongados. Por ejemplo, utilizando un filtro Centriprep® 10K, una
disolución de 1 mg/ml de BSA en glicerina al 50% tardaría cinco veces más en concentrarse que la proteína
idéntica en una disolución acuosa tamponada.
Retención y recuperación
Las membranas hidrófilas y anisótropas de los filtros para centrífuga Centriprep® se caracterizan por un
límite de peso molecular nominal, es decir, por su capacidad para rechazar moléculas por encima de un
peso molecular específico.
Dado que es un parámetro fácil con el que trabajar, el peso molecular se utiliza para clasificar la
permeabilidad y la selectividad de la membrana en función de los resultados obtenidos con proteínas bien
caracterizadas.
Sin embargo, el peso molecular puede no ser válido para todos los solutos. Por ejemplo, la capacidad de
retención puede ser mayor para una molécula globular que para una molécula lineal que tenga el mismo
peso molecular nominal. Cuando se evalúe la capacidad de retención del soluto deben considerarse
también los efectos del pH y la fuerza iónica sobre las dimensiones y el comportamiento de una molécula
en una disolución particular.
Una baja recuperación de soluto en el concentrado puede indicar posibles pérdidas por adsorción o por
paso a través de la membrana. Las pérdidas por adsorción dependen de la concentración del soluto y su
naturaleza (hidrófobo o hidrófilo), la temperatura, el tiempo de contacto con las superficies, la composición
de la muestra y el pH.
Filtros para centrífuga Centriprep®
7

Recuperación de concentrado típica
Soluto y concentración de partida
Peso molecular
nominal
Centriprep®, % de recuperación
del concentrado
3K 10K 30K 50K
IgG Fr. II (1 mg/ml) 156.000 – – – 99
Albúmina sérica bovina (1 mg/ml) 67.000 – 97 98 93
Ovalbúmina (1 mg/ml) 45.000 – 95 90 –
α-Quimotripsinógeno (1 mg/ml) 25.000 94 93 – –
Citocromo C (0,25 mg/ml) 12.400 96 96 8 4
Vitamina B12 (0,2 mg/ml) 1.355 12 – 5 –
Volumen de partida 15 ml, 25 °C, rotor oscilante
Resultados basados en los tiempos de centrifugación recomendados indicados en la sección “Tiempos de
concentración para disoluciones proteicas diluidas”
Recuperación proteica habitual, filtro Centriprep® 30K
Concentración % de recuperación de concentrado ± 1 DE
100 µg/ml 98,2 ± 1,7
1.000 µg/ml 96,6 ± 0,2
Volumen de partida 15 ml, 25 °C, rotor oscilante, 1.500 x g
Albúmina bovina sérica, dos centrifugaciones de 25 minutos
Desalación
Para desalación o cambio de disolvente, la muestra se concentra hasta alcanzar el punto de equilibrio. El filtrado
se desecha, luego se reconstituye la muestra hasta el volumen original añadiendo un disolvente apropiado y
se mezcla en un Vórtex. A continuación, la muestra se concentra y se reconstituye una vez más. Este proceso se
repite hasta que se haya reducido de manera suficiente la concentración del microsoluto contaminante.
El siguiente ejemplo teórico ilustra el proceso de desalación de una muestra:
Etapa del proceso
Volumen
de la muestra
Concentración
proteica
Concentración
de NaCl
Muestra inicial 15 ml 1 mg/ml 500 mM
Centrifugación hasta concentración 3 ml 5 mg/ml 500 mM
Volver a reconstituir hasta 15 ml
con NaCl 10 mM
Centrifugación hasta concentración/
desalación n° 1
Volver a reconstituir hasta 15 ml
con NaCl 10 mM
Centrifugación hasta concentración/
desalación n° 2
Volver a reconstituir hasta 15 ml
con NaCl 10 mM
Centrifugación hasta concentración/
desalación n° 3
15 ml 1 mg/ml 108 mM
3 ml 5 mg/ml 108 mM
15 ml 1 mg/ml 29,6 mM
3 ml 5 mg/ml 29,6 mM
15 ml 1 mg/ml 13,9 mM
3 ml 5 mg/ml 13,9 mM
8 Filtros para centrífuga Centriprep®

Gráficos de rendimiento
Perfiles de filtración típicos para los filtros Centriprep® utilizando disoluciones proteicas
diluidas habituales
Filtro Centriprep® 3K
Variables de
funcionamiento:
● fuerza g: 3.000 × g
● temperatura: 25 °C
● rotor oscilante
● soluto: citocromo c,
0,25 mg/ml
Volúmenes de partida
5, 10 y 15 ml
Filtrado decantado a los
tiempos indicados
Filtro Centriprep® 10K
Variables de
funcionamiento:
● fuerza g: 3.000 × g
● temperatura: 25 °C
● rotor oscilante
● soluto: albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Volúmenes de partida
5, 10 y 15 ml
Filtrado decantado a los
tiempos indicados
Volumen de concentrado (ml)
Volumen de concentrado (ml)
Filtros para centrífuga Centriprep®
Tiempo de centrifugación (minutos)
Tiempo de centrifugación (minutos)
9

Figuras de rendimiento, continuación
Filtro Centriprep® 30K
Variables de
funcionamiento:
● fuerza g: 1.500 × g
● temperatura: 25 °C
● rotor oscilante
● soluto: albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Volúmenes de partida
5, 10 y 15 ml
Filtrado decantado a los
tiempos indicados
Filtro Centriprep® 50K
Variables de
funcionamiento:
● fuerza g: 1.500 × g
● temperatura: 25 °C
● rotor oscilante
● soluto: albúmina sérica
bovina, 1 mg/ml
Volúmenes de partida
5, 10 y 15 ml
Filtrado decantado a los
tiempos indicados
Volumen de concentrado (ml)
Volumen de concentrado (ml)
Tiempo de centrifugación (minutos)
Tiempo de centrifugación (minutos)
10 Filtros para centrífuga Centriprep®

Cómo cuantificar las recuperaciones
Calcule la recuperación total, el porcentaje de recuperación de concentrado y el porcentaje de recuperación
de filtrado utilizando el método que se indica a continuación. Este procedimiento proporciona una estrecha
aproximación de las recuperaciones para las disoluciones que contienen concentraciones máximas de
aproximadamente 20 mg/ml.
NOTA: Las técnicas de ensayo apropiadas son la espectrofotometría de absorción, el radioinmunoensayo,
el índice de refracción y la conductividad.
Procedimiento de pesada
La densidad de la mayoría de las proteínas diluidas es casi igual a la densidad del agua (es decir, 1 g/ml).
Aprovechando esta propiedad, pueden cuantificarse los volúmenes de concentrado y de filtrado pesándolos
y convirtiendo las unidades de gramos a mililitros. Esta técnica es válida sólo para disoluciones con
concentraciones de aproximadamente 20 mg/ml o inferiores.
1. Antes de usarlo, pese el recipiente de la muestra y un tubo de ensayo vacío (capacidad de 15 ml).
2. Rellene el recipiente de la muestra con disolución y vuelva a pesar.
3. Monte el filtro para centrífuga y centrifugue según las instrucciones. Decante el filtrado en el tubo de
ensayo pesado previamente. Si desea una mayor concentración, centrifugue una segunda vez, decantando
el filtrado en el tubo de ensayo que contiene el primer filtrado. Vuelva a pesar el tubo de ensayo
más los filtrados.
4. Desmonte el dispositivo y vuelva a pesar el recipiente de la muestra más el concentrado.
5. Reste el peso del tubo de ensayo vacío o del recipiente de la muestra para calcular los pesos del
material de partida, filtre y concentre.
6. Ensaye el material de partida, el filtrado y el concentrado para determinar la concentración de soluto.
7. Calcule las recuperaciones utilizando los datos de peso/volumen y las concentraciones medidas, de la
siguiente forma:
% de recuperación del concentrado = 100 ×
Wf × Cf % de recuperación del filtrado = 100 ×
Wo × Co % de recuperación total = % de recuperación del concentrado + % de recuperación del filtrado
W c = peso total del concentrado antes del ensayo
W o = peso del material de partida original
W f = peso del filtrado
C c
= concentración del concentrado
C o = concentración del material de partida original
C f = concentración del filtrado
Filtros para centrífuga Centriprep®
W c × C c
W o × C o
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Especificaciones
Capacidad del recipiente de la muestra 15 ml
Volumen de concentrado final a 25 °C 0,5 – 0,6 ml
Capacidad del recolector de filtrado 12 ml
Fuerza centrífuga relativa máxima
Filtro Centriprep® 3K 3.000 × g
Filtro Centriprep® 10K 3.000 × g
Filtro Centriprep® 30K 1.500 × g
Filtro Centriprep® 50K 1.500 × g
Área de membrana activa 2,84 cm 2
Volumen de retención (membrana
y portamembranas)
Dimensiones
0,5 ml
Diámetro del tapón de cierre con giro 36,5 mm (el tapón sobresale del portamuestras de la
centrífuga)
Diámetro de recipiente de la muestra 28,1 mm
Longitud 135 mm
Materiales de fabricación
Membrana Celulosa regenerada Ultracel®
Recipiente para la muestra Policarbonato
Portamembranas Policarbonato
Recolector de filtrado Policarbonato
Tapón de cierre con giro Nailon
Tapón de estanqueidad Polipropileno
12 Filtros para centrífuga Centriprep®

Compatibilidad química
Los dispositivos Centriprep® están pensados para su uso con líquidos biológicos y disoluciones acuosas.
Antes de usarlos, verifique que la muestra es compatible desde el punto de vista químico con el dispositivo.
Se ha evaluado la compatibilidad química de las disoluciones indicadas a continuación con los filtros
Centriprep®.
Ácidos Concentración Concentración
Ácido acético ≤ 80% Ácido nítrico ≤ 10%
Ácido clorhídrico ≤ 1,0 N Ácido sulfúrico ≤ 3%
Ácido fórmico ≤ 50% Ácido tricloroacético (TCA) ≤ 10%
Ácido fosfórico ≤ 30% Ácido trifluoroacético (TFA) ≤ 50%
Ácido láctico ≤ 50%
Álcalis
Hidróxido de amonio ≤ 5% Hidróxido sódico ≤ 0,1 N
Alcoholes
Etanol ≤ 70% Metanol ≤ 60%
Isopropanol ≤ 70% n-Butanol ≤ 90%
Detergentes
Desoxicolato sódico ≤ 5% Dodecilsulfatosódico (SDS) ≤ 2%
Detergente Alconox® ≤ 1% Surfactante Nonidet P-40 ≤ 2%
Detergente Lubrol® PX ≤ 0,1% Surfactante Triton® X-100 ≤ 0,002%
Detergente PyroCLEAN 1:10 Surfactante Tween® 20 ≤ 0,1%
Detergente Tergazyme® ≤ 1%
Disolvente orgánicos
Acetona no recomendado Etilacetato no recomendado
Acetonitrilo ≤ 30% Formaldehído ≤ 5%
Benceno no recomendado Piridina no recomendado
Cloroformo no recomendado Tetracloruro de carbono no recomendado
Dimetilformamida ≤ 50% Tetrahidrofurano no recomendado
Dimetilsulfóxido (DMSO) ≤ 5% Tolueno no recomendado
Dioxano no recomendado
Varios
Carbonato sódico ≤ 20% Polietilenglicol ≤ 10%
Dietilpirocarbonato ≤ 0,2% Sulfato de amonio Saturado
Ditiotreitol (DTT) ≤ 0,1 M Tampón fosfato (pH 8,2) ≤ 1 M
Fenol ≤ 1% Tampón Tris (pH 8,2) ≤ 1 M
Glicerina ≤ 70% Tiocianato de guanidina ≤ 0,5 M
HCl de guanidina ≤ 6 M Tiocianato sódico ≤ 3 M
Imidazol ≤ 100 mM Urea ≤ 8 M
Mercaptoetanol ≤ 0,1 M
Filtros para centrífuga Centriprep®
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Etiqueta del producto para diagnóstico in vitro
En la siguiente tabla se definen los símbolos que aparecen en las etiquetas de los filtros Centriprep® 10K
y 30K.
Símbolo Definición Símbolo Definición
V
Producto sanitario para diagnostico
in vitro N
Fecha de fabricación
h Número de catálogo M Fabricante
D No reutilizar l Limitación de temperatura
H Fecha caducidad d Producto no estéril
g Código de lote C
Información para pedido de los productos
Marca de conformidad con la CE
En esta sección se indican los números de catálogo de los dispositivos de ultrafiltración Centriprep®.
Encontrará la información de contacto en la sección de Asistencia técnica. Puede adquirir estos productos
por Internet en www.millipore.com/products.
Descripción 24/envase 96/envase
Para diagnóstico in vitro
Filtro Centriprep® 10K (NMWL, 10.000) 4304 4305
Filtro Centriprep® 30K (NMWL, 30.000) 4306 4307
Solo para investigación
Aviso
Filtro Centriprep® 3K (NMWL, 3.000) 4302 4303
Filtro Centriprep® 50K (NMWL, 50.000) 4310 4311
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como un compromiso por parte de Merck Millipore Ltd. (“Millipore”) ni de ninguna de sus empresas
afiliadas. Ni Merck Millipore Ltd. ni ninguna de sus empresas afiliadas acepta responsabilidad alguna por
cualquier error que pudiera aparecer en este documento.
Asistencia técnica
Para más información, póngase en contacto con su oficina más próxima. Encontrará información de
contacto actualizada para todo el mundo en nuestra página Web www.millipore.com/offices. También
puede visitar el apartado correspondiente al servicio técnico en nuestra página Web
www.millipore.com/techservice.
Garantía
La garantía aplicable a los productos indicados en esta publicación puede encontrarse en
www.millipore.com/terms (en los “Términos y condiciones de venta” aplicables a su transacción de
compra).
14 Filtros para centrífuga Centriprep®

Fabricado en Irlanda
Merck Millipore Ltd.
Tullagreen,
Carrigtwohill,
Co. Cork, IRL
La marca M es una marca comercial de Merck KGaA, Darmstadt, Alemania.
Millipore, Centriprep y Ultracel son marcas registradas de Merck KGaA.
Alconox y Tergazyme son marcas registradas de Alconox, Inc.
Lubrol es una marca registrada de Imperial Chemical Industries PLC.
Nonidet es una marca comercial de Royal Dutch/Shell Group.
PyroCLEAN es una marca comercial de ALerCHECK, Inc.
Triton es una marca registrada de Union Carbide Corp.
Tween es una marca registrada de ICI Americas Inc.
© 2012 EMD Millipore Corporation. Todos los derechos reservados.
PR03522TR, Rev. A, Español, 03/12
Filtros para centrífuga Centriprep®
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