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Introducción 20
al., 1975; Stepanova et al., 1999), están siendo sustituidos por ensayos de
activación de oncogenes (Deveraux, 1994; Abshire et al., 1996), o la utilización
de modelos con animales transgénicos (Jowett et al., 1991; Murti et al., 1994;
Ryskova et al., 1997)
La detección de roturas en las cadenas de ADN puede realizarse
mediante los ensayos de desnaturalización en medio alcalino, (Shugart, 1988;
1998; 1996b; Meyers-Schone et al., 1993; Everaart et al., 1998), electroforesis
en geles alcalinos o neutros (Theodorakis et al., 1994) o el ensayo Comet
(Ostling and Johanson 1984; Michelmore and Chipman 1998; Singh et al.,
1988; Olive et al., 1992; Fairbairn et al., 1995), todos ellos basados en la
desnaturalización “in vitro” de la doble hélice a determinado pH. La proporción
de ADN de cadena sencilla detectada se considera que está relacionada con el
número de roturas.
Los daños estructurales son reparados la mayor parte de las veces por
los mecanismos celulares, pero cuando no es así y persisten o son reparados
erróneamente, pueden interferir en la fidelidad de la replicación y producir
cambios irreversibles en el genoma. Estos efectos tardíos e irreversibles, tales
como el intercambio de cromátidas, las aberraciones cromosómicas o el
incremento en la frecuencia de micronúcleos, se denominan efectos
citogenéticos y para la detección de los mismos se han incorporado
recientemente técnicas de análisis automático de imagen y de citometría de
flujo. (Gordon et al., 1989; Custer et al., 1994; 1997; Lamb et al., 1995; Grawe