BACTEC MYCO/F-Sputa Culture Vials - BD

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Frascos de cultivo BACTEC MYCO/F para esputos
Caldo Middlebrook 7H9 suplementado
Español
DENOMINACION
Los frascos de cultivo BACTEC de tipo MYCO/F para esputos (caldo Middlebrook 7H9 modificado con CO2 ) permiten el crecimiento y la detección de micobacterias cuando
se suplementan con la solución de Suplemento/F.
USO PREVISTO
Los medios de cultivo MYCO/F para esputos con BACTEC Suplemento/F y mezcla antibiótica BACTEC PANTA/F añadidos, cuando sea necesario, se utilizan con el instrumento
BACTEC 9000MB de la serie fluorescente como un procedimiento cualitativo para el cultivo in vitro y recuperación de micobacterias. Las muestras que pueden
ser utilizadas son las muestras clínicas descontaminadas y digeridas y los fluidos corporales estériles no sanguíneos.
RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA
Desde mediados de 1980 con la diseminación de la epidemia del SIDA, Mycobacterium tuberculosis (MTB) y otras micobacterias además de tuberculosis (MOTT), especialmente
el complejo Mycobacterium avium (MAC), han venido resurgiendo. Desde 1985 hasta 1992, el número de casos informados de MTB aumentó en 18%. La
tuberculosis continúa siendo la causa de muerte de aproximadamente 3 millones de personas al año en todo el mundo, constituyendo así, la primera causa de muerte
entre las enfermedades infecciosas. 1 Entre 1981 y 1987, las encuestas de casos de SIDA indicaron que 5,5% de los pacientes con SIDA tenían infecciones micobacterianas
diseminadas de tipo no tuberculoso, como por ejemplo, MAC. En 1990, el aumento de casos de infecciones micobacterianas diseminadas no tuberculosas resultó en una
incidencia acumulada de 7,6%. 2 Además de la reaparición de MTB, las cepas de MTB resistentes a múltiples antibióticos (MDR-TB) constituyen una gran preocupación.
Retrasos en los análisis de laboratorio para el crecimiento, identificación e informe de casos relacionados a MDR-TB contribuyeron, al menos en parte, a la diseminación
de la enfermedad.
Los U.S. Centers for Disease Control and Prevention (CDC) han recomendado que los laboratorios deben hacer todos los esfuerzos para utilizar los métodos más rápidos
disponibles para el diagnóstico y análisis de micobacterias. Estas recomendaciones incluyen el uso de medios líquidos y sólidos para el cultivo micobacteriano. 3
El sistema BACTEC 9000MB está diseñado para la detección rápida de micobacterias en muestras clínicas no sanguíneas. El sistema incluye un medio de cultivo líquido
(frasco de cultivo MYCO/F para esputos), un suplemento de crecimiento (Suplemento/F) y un suplemento antibiótico (BACTEC PANTA/F). El BACTEC Suplemento/F contiene
intensificadores de crecimiento para micobacterias, y es utilizado también para reconstituir el BACTEC PANTA/F. El BACTEC PANTA/F contiene agentes antimicrobianos
utilizados para suprimir el crecimiento de microorganismos infecciosos o presentes normalmente en la flora que puedan haber sobrevivido el proceso de descontaminación
y se recomienda como un aditivo con todas las muestras no estériles. Cada frasco contiene un indicador que puede detectar descensos en el nivel de
oxígeno disuelto en el medio como resultado del metabolismo y crecimiento de microorganismos. El instrumento verifica el aumento de la fluorescencia del indicador,
que es proporcional al descenso en el contenido de oxígeno disuelto. Un resultado positivo indica la presencia presunta de micobacterias viables dentro del frasco. La
detección se limita a los microorganismos capaces de crecer en el medio de cultivo.
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO
Las muestras clínicas no sanguíneas son colectadas y procesadas según los procedimientos normales para la recuperación de micobacterias. Las muestras procesadas son
inoculadas con una jeringa y aguja en el frasco de cultivo BACTEC MYCO/F para esputos que ha sido suplementado con BACTEC Suplemento/F y/o BACTEC PANTA/F,
según el tipo de muestra (refiérase a la sección de procedimientos). La información sobre el paciente es registrada en el sistema computarizado, y se le asigna una
estación al frasco que contiene la muestra conforme al código del menú del instrumento. El frasco es colocado en el sistema BACTEC 9000MB y es incubado continuamente
a 37° C agitando cada 10 minutos para asegurar una recuperación máxima. La respiración de los microorganismos aerobios viables presentes en un frasco suplementado
de medio MYCO/F para esputos ocasiona un descenso neto del nivel de oxígeno en ese frasco. La disminución del oxígeno disuelto da lugar a un aumento en la
fluorescencia del indicador del frasco que detecta el sistema BACTEC 9000MB en la verificación que hace cada diez minutos. El análisis de velocidad de descenso del nivel
del oxígeno disuelto permite determinar si el frasco es positivo, o sea, que la muestra analizada contiene organismos viables. Los frascos de cultivo que permanecen negativos
por un mínimo de 42 días (hasta 56 días), y que no muestran señales visibles de positividad, son retirados del instrumento y esterilizados antes de desecharse.
REACTIVOS
Antes de realizar el procedimiento, los frascos de cultivo BACTEC MYCO/F para esputos contienen los siguientes reactivos:
Componentes
Agua desmineralizada .....................................................40 mL Sulfato de amonio .........................................................0,05% p/v
Base de caldo Middlebrook 7H9.......................................0,47% p/v Citrato férrico de amonio .............................................0,006% p/v
Hidrolizado de caseína ......................................................0,10% p/v Polisorbato 80 ................................................................0,0025% p/v
Suplemento H.....................................................................0,30% p/v Hemina ...........................................................................0,0005% p/v
Glicerol................................................................................0,10% p/v
Todos los medios BACTEC se suministran con CO2 añadido. La composición puede haberse modificado de acuerdo con las necesidades específicas de rendimiento.
Antes de inocular muestras del aparato respiratorio y muestras no estériles, es necesario añadir 2,0 mL de la solución del suplemento antibiótico BACTEC PANTA/F,
reconstituida con BACTEC Suplemento/F, a cada frasco de 40 mL de medio BACTEC MYCO/F para esputos. Antes de inocular fluidos corporales estériles no sanguíneos,
cada frasco de 40 mL de medio BACTEC MYCO/F para esputos debe ser suplementado con 2,0 mL de BACTEC Suplemento/F. Por favor, consulte los prospectos de
BACTEC PANTA/F (PP-102) y BACTEC Suplemento/F (PP-103) para más información.
PRECAUCIONES
Precauciones: diagnóstico in vitro.
Este producto contiene goma natural seca.
PRUEBA PARA MUESTRAS POTENCIALMENTE INFECCIOSAS. Deben seguirse las precauciones universales4,5 y normas institucionales en el manejo y desecho de
cualquier material contaminado.
Son recomendados los niveles de bioseguridad tipo 2, laboratorios y equipos de prevención, para la preparación de tinción ácido-resistente y para el cultivo de muestras
clínicas. Para actividades que involucren la propagación y manipulación de Mycobacterium tuberculosis o especies micobacterianas en cultivo, se requieren prácticas
de bioseguridad nivel 3, laboratorios y equipo de prevención conforme a las recomendaciones del CDC. 6
Se debe examinar cada frasco antes de usarlo para ver si se presentan indicios de contaminación, por ejemplo, turbidez, membrana de goma hinchada o hundida, o
fugas. En raras ocasiones, el cuello del frasco de vidrio puede estar rajado y puede romperse al quitar el tapón a presión o durante su manipulación. También, es posible
que un frasco presente un sellado incompleto del tapón, como por ejemplo, cuando el borde de metal en la superficie inferior del tapón no está uniformemente
extendido debajo del final del cuello del frasco. En ambos casos, el contenido de los frascos puede gotear o derramarse, especialmente si se invierte el frasco. NO SE
DEBE USAR ningún frasco que presente indicios de contaminación, daño o sellado incompleto.
Para reducir a un mínimo la posibilidad de pérdidas durante la inoculación de las muestras en los frascos de cultivo, use jeringas de tuberculina con aguja fija de calibre
25. Se debe utilizar la técnica de inoculación con una sola mano y un soporte adecuado para el frasco para evitar el riesgo de pincharse accidentalmente con la aguja.
NO deben utilizarse agujas que tengan un calibre mayor de 20. El uso de agujas más grandes durante la adición del suplemento, liberación de la presión o preparación
de subcultivos puede dañar permanentemente la membrana de goma del frasco y causar fugas.
Frascos de cultivo positivos para subcultivos o para teñir, etc.: Antes de tomar una muestra, es necesario liberar el gas que frecuentemente se acumula debido al metabolismo
de los microorganismos. De ser posible, la toma de muestras debe efectuarse en una cámara de seguridad biológica. El operario debe llevar puesta ropa de
protección, incluyendo guantes y mascarilla. Vea la sección titulada PROCEDIMIENTO para obtener más información sobre subcultivos.
Un frasco contaminado puede contener presión positiva. Si se analiza un frasco contaminado, gas y/o medio de cultivo contaminado puede escaparse del frasco, creando
un aerosol peligroso. Es posible que la contaminación del frasco no se vea fácilmente.
Todos los frascos inoculados con MYCO/F para esputos deben esterilizarse en el autoclave antes de desecharse.
FRASCOS ROTOS O MAL SELLADOS
Si se observa que un frasco inoculado pierde líquido o si se rompiera accidentalmente, siga el procedimiento establecido en su laboratorio para el manejo de derrames
de micobacterias. Como mínimo, se deberán seguir las precauciones universales. Se recomienda el uso de alguna forma aprobada de protección respiratoria. Cualquier
frasco que tuviera pérdidas mínimas limitadas a la membrana de goma o al tapón del frasco puede desinfectarse localmente con un desinfectante micobactericida, seguido
de alcohol isopropílico al 70%. Si esto ocurriera dentro del instrumento, existe un riesgo potencial de exposición al aerosol. Apague el instrumento y cierre las puertas
inmediatamente. Desaloje el área afectada. Póngase en contacto con el(los) Oficial(es) de Seguridad o de Control de Infecciones de su departamento. Determine la
necesidad de apagar o modificar el ajuste de las unidades de control de aire de la zona afectada. No vuelva a esa zona hasta que todos los posibles aerosoles se hayan
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