Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab - BIO-RAD

Las reacciones no repetibles a menudo se deben a :
• lavado inadecuado de la microplaca;
• contaminación de muestras negativas por suero o plasma con un elevado contenido de anticuerpos;
• contaminación de la solución sustrato con agentes oxidantes (lejía, iones metálicos, etc...);
• contaminación de la solución de detención.
Si después de un nuevo test la absorbencia de uno de los duplicados es igual o mayor que el valor
discriminatorio, el resultado inicial es repetible y la muestra se considera positiva con el test
Genscreen ULTRA VIH Ag-Ab, sujeta a las limitaciones del procedimiento descrito más abajo.
14. VERIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE LA MUESTRA Y PIPETEADO
DE LOS REACTIVOS
Verificación por pipeteado de la muestra y del conjugado 1
Después de la distribución del conjugado 1 (R6) y de las muestras, es posible verificar la presencia
simultánea del conjugado 1 y de las muestras que se han de someter al test en pocillos mediante
una lectura espectrofotométrica a 620 nm : la densidad óptica de un pocillo que contiene el
conjugado 1 y la muestra es superior a 0,600 (una DO inferior indica una pobre distribución del
conjugado 1 o de la muestra).
Verificación por pipeteado de la muestra y del conjugado 2
Después de la distribución del conjugado (R7a + R7b) es posible verificar su presencia mediante una
lectura espectrofotométrica a 450 / 620 nm : la densidad óptica de un pocillo que contiene el
conjugado 2 es superior a 0,100 (una DO inferior indica una pobre distribución del conjugado 2).
Verificación por pipeteado de la solución de desarrollo
Es posible verificar la presencia de una solución de desarrollo rosada en el pocillo mediante una
lectura automática a 490 nm : un pocillo con la solución de desarrollo debe tener una densidad
óptica superior a 0,100 (una DO inferior indica una pobre distribución de la solución de desarrollo).
15. RESULTADOS
Los resultados del test Genscreen ULTRA VIH Ag-Ab han sido determinados mediante tests de
muestras sanguíneas de donantes al azar, de pacientes con infección por VIH y de paneles
comerciales de seroconversión. Además, el límite de sensibilidad del Ag VIH ha sido probado por
medio del estándar francés AFSSAPS.
Otros pacientes con enfermedades no relacionadas con la infección por el VIH también fueron
sometidos al test.
Especificidad
La especificidad ha sido evaluada sometiendo al test a :
1. 6038 donantes de sangre tomados al azar en 3 sitios diferentes. La especificidad de los donantes
de la sangre arbitrarios fue del 99,95% (6035 muestras negativas / 6038 muestras sometidas a
test) con 3 muestras reactivas repetidas que dieron negativo al VIH la segunda vez mediante
inmunotransferencia y test del Ag p24 VIH.
2. 409 muestras clínicas en 2 laboratorios clínicos hospitalarios, 14 muestras fueron inicialmente
reactivas y 12 de ellas fueron asimismo reactivas una segunda vez (positiva en un segundo test) :
11 fueron confirmadas por inmunotransferencia VIH, 1 no fue confirmada y se consideró como
falso positivo. La especificidad de esta población es del 99,75% (397/398).
3. 313 pacientes con distintas patologías o un estado no vinculado con el VIH (mujeres embarazadas, factor
reumatoide, enfermedad autoinmune (lupus eritematoso diseminado), cirrosis, insuficiencia renal crónica,
diálisis, Ig anti-ratón u otras infecciones virales o bacterianas (hepatitis A, B, C, rubeola, toxoplasmosis,
parotiditis, sarampión, VCM, VHS, VEB, VVZ, HTLVI, paludismo, pacientes vacunados contra la gripe).
La especificidad fue del 98,72% (309/313) con 4 reacciones no específicas y no significativas.
Sensibilidad
La sensibilidad ha sido evaluada mediante un test de muestras positivas al Ab VIH, muestras de pacientes
con infección aguda y de paneles comerciales de seroconversión y muestras de Ag VIH (puro o diluido).
1) Confirmación de muestras positivas al Ab VIH
Se sometieron al test 744 muestras positivas de un seguimiento de 2 pacientes infectados por VIH-1
y VIH. Este estudio mostró una sensibilidad del 100 %.
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