APUNTES DE CIENCIA - hgucr

T E S I S D O C T O R A L
En la actualidad, existen ensayos clínicos en
marcha que estudiarán el valor de la combinación
de las terapias antiangiogénica y antihormonal
[4], aunque se apoyan en escasos estudios
preclínicos [5]. Dichas investigaciones podrían
revelar algunos aspectos moleculares para un
uso más racional de dicha combinación
terapéutica [6].
OBJETIVOS:
En cuanto a los objetivos, nos planteamos:
1) Conocer la actividad in vitro de
bevacizumab, en diferentes líneas celulares de
cáncer de mama, determinando su efecto
antitumoral, midiendo la proliferación y la
inducción a la apoptosis.
2) Observar cómo la dependencia
hormonal produce una variabilidad en las
condiciones de proliferación celular y la acción de
tratamientos anti-diana.
3) Describir la acción autocrina de VEGF
en la célula tumoral, comprobando cómo se
alteran sus rutas de señalización intracelular y
sus receptores.
4) Analizar la secreción de VEGF al medio
de cultivo extracelular, en función de los
tratamientos y ambiente estrogénico.
MATERIAL Y MÉTODOS:
Utilizamos líneas celulares de cáncer de
mama con diferente dependencia estrogénica
(MCF-7, BT-474 y MDA-MB-231). Dichas células
se sometieron a un gradiente estrogénico (con
estradiol) y fueron tratadas con antiestrogénicos
(fulvestrant o tamoxifeno) con o sin un
antiangiogénico puro (bevacizumab -anti-VEGF
[vascular endothelial growth factor]-). Se
determinaron la proliferación y la apoptosis
celular. Con la técnica de western-blot, utilizando
anticuerpos específicos, se analizaron, además,
vías de señalización intracelular implicadas en la
proliferación y supervivencia de la célula, aparte
de la activación de receptores estrogénicos y la
activación de la enzima ciclooxigenasa-2. La
cuantificación de los niveles de VEGF-A (mayor
proangiogénico) se realizó mediante la técnica de
ELISA.
RESULTADOS:
Nuestros resultados mostraron que en las
líneas celulares con dependencia estrogénica
(MCF-7 y BT-474) el efecto pro-proliferativo del
estradiol disminuyó después de tratamiento con
bevacizumab, no variándose la proliferación de la
línea hormonodependiente MDA-MB-231 (como
se aprecia en las Figuras 2A, 2B y 2C).
Figura 2A. Proliferación de la línea MCF-7
tras los diferentes tratamientos:
B = bevacizumab
F = fulvestrant
E0 = sin estradiol
E100 = estradiol 100 nM
64 Apunt. Cienc. 2012 VOL 2(1)