Proyecto FIA: “Desarrollo de un acaricida biológico para el manejo ...

Proyecto FIA: “Desarrollo de unacaricida biológico para el manejono contaminante de Varroa destructoren colmenares comerciales”Marta Rodríguez y Marcos Gerding

Varroa destructorDaños:Directos: malformaciones enalas, patas y abdomen.Acortamiento de la vida útil delas obreras.•Indirectos: Transmisión deenfermedades. causadas porvirus y bacteriasAtaca a toda la casta de abejasy en todas las edades.

FaseforéticaInfestaciónde la críaL1L2HuevoL3L4L5Abeja adulta01OperculaciónceldaAlimentación23Críaoperculada45Postura6HuevoFaseReproductivaProtoninfaEmergenciaabeja7Deutoninfa98♂Adulta1211♀10♀♀Apareamiento

Cuadro 1. Medicamentos Veterinarios de Uso Apícolas Registradosen el SAG (Actualizado en Junio de 2009).Nº RegistroSAGNombreComercialIngredienteActivoFormaFarmacéuticaImportador614BayvarolFlumetrina 3,6 mgTirasBayer S. A.1828AmitrazAmitraz 6,25%TirasJPMExportaciones1917VerostopFlumetrina 3,6 mgTirasCentrovet Ltda.2040Api Life VarTimol,Levomentol,Aceite deEucaliptus,AlcanforTablillasEvaporantesSoc. deInversionesCarmencita Ltda.Fuente SAG: www.sag.gob.cl

Cuadro 2. Medicamentos de Uso apícola no registrados en el SAG.Nombre ComercialMavrickApistánFluvalinato (tablitas)AsuntolProductos para control de polillaFumidil BÁcidos orgánicos y esencialesPrincipio activoFluvalinatoCoumaphosParadiclorobenceno, azufre, sulfurode carbono, hidróxido de sodioBiciclohexilamonio de fumagilinaÁcido oxálico y fórmicoTimol (aceite esencial de tomillo)Mentol, EucaliptolFuente SAG: www.sag.gob.cl

OBJETIVO GENERALEstablecer una estrategia de manejo no contaminante de varroasismediante la elaboración y uso de un bio acaricida, en base aHongos Entomopatógenos, para la producción limpia de miel.

HONGOS ENTOMOPATÓGENOS(HEP) Patógenos facultativos Colonizan diversos substratos,incluido la quitina Alta capacidad reproductiva Producen enzimas y toxinas Afectan ingesta y comportamientodel insecto Diversos hábitat

Características de los HEP Microorganismos heterótrofos Pueden actuar como parásitosy/o saprófitos. Se reproducen en diferentesestadíos de los insectos Alta capacidad reproductiva Habitan en substratos diversos

Colección de Hongos Entomopatógenos INIA - CRIQuilamapuMetarhiziumanisopliaeBeauveriabassiana

ADULTOLARVACONTROLNombre común: Pololo verdeNombre científico: Hylamorpha elegansMetarhizium anisopliaeNombre común: Pololo caféNombre científico: Phytoloema hermanniBeauveria bassianaNombre común: Pololo doradoNombre científico: Sericoides viridisMetarhizium anisopliaeNombre común: Capachito de los frutalesNombre científico: Asynonychus cervinusBeauveria bassianaNombre común: Gorgojo de la frutillaNombre científico: Otiorhynchus sulcatusNombre común: Cabrito de la frambuesaNombre científico: Aegorhinus superciliosusMetarhizium anisopliaeBeauveria bassianaNombre común: Burrito de la vidNombre científico: Naupactus xantographusMetarhizium anisopliae

Selección de aislamientos por resistencia a altas TemperaturasAislamientosOrigenTemperatura °C35 30 25 20Qu-M326Melipilla,MetropolitanaQu-M204Precordillerade la costa,OsornoQu-B303Valle de LlutaRegión deAtacamaQu-B912Isla de Pascua

Pruebas de patogenicidad

Incubación en oscuridad a 25-30ºC

Mortalidad de Varroa destructor con diferentes aislamientos de losHongos Entomopatógenos Metarhizium anisopliae y Beauveriabassiana.10010090908080aba7070Mortality (%)60504030a60504030bcbcbbcbc2010abbbc2010cccc0ccc0cccccccControlQu-B249Qu-B303Qu-B323Qu-B389Qu-B392Qu-B916ControlQu-M33Qu-M38Qu-M82Qu-M94Qu-M150Qu-M151bQu-M204Qu-M256Qu-M285Qu-M326Qu-M354Qu-M448Qu-M518Qu-M824Qu-M836Qu-M845Qu-M984Figure 1. Varroa destructor mortality caused by the inoculation with different isolates of Beauveria bassiana (Qu-B) and Metarhizium anisopliae var. anisopliae (Qu-M).

Dosis: 5x10 10 conidias por colmena.

Niveles de Infestación de Varroa destructor en colmenas1412ControlConidias on filter paperDry ConidiaConidia dispenseraLevel Infestation (% mites hives -1 )108642aaaaabbab0Before InoculationAfter Inoculation

Mortalidad acumulada de V. destructor a través del tiempo con diferentes métodos deaplicación del aislamiento Qu-M845 de Metarhizium anisopliae var. anisopliae.3 0 02 7 02 4 0T estig oC o n id ia s (e sta m p ad a s)C o n id ia sD isp en sad o raMortalidad acumulada(varroas caídas colmena -1 )2 1 01 8 01 5 01 2 09 06 03 00a bcc0 2 4 6 8 1 0 1 2 1 4 1 6 1 8 2 0 2 2 2 4T ie m p o (d ía s)

Mortalidad acumulada de V. destructor a través del tiempo en colmenas tratadas con elaislamiento Qu-M845 de Metarhizium anisopliae var. anisopliae. A. Aplicado el 5, 8, 12 y 16de septiembre. B. Aplicado el 19, 23, 27 y 31 de octubre.5 04 03 0T e s t ig oQ u - M 8 4 5Y = - 9 ,7 6 8 + 4 ,1 7 5 XR 2 = 0 ,9 0AMortalidad Acumulada (Nº de acaros colmena -1 )2 01 001 8 01 5 01 2 09 00 2 4 6 8 1 0 1 2Y = 1 7 ,2 7 8 + 6 ,8 9 0 XR 2 = 0 ,9 5 8 8 8Y = - 1 ,1 7 2 + 0 ,5 4 1 XR 2 = 0 ,9 1B6 03 0Y = 7 ,0 6 1 + 3 ,1 8 0 XR 2 = 0 ,9 7 8 100 5 1 0 1 5 2 0 2 5T i e m p o ( D í a s )

Mortalidad acumulada de abejas a través del tiempo en colmenas tratadas con elaislamiento Qu-M845 de Metarhizium anisopliae var. anisopliae. A. Aplicado el 5,8, 12 y 16 de septiembre. B. Aplicado el 19, 23, 27 y 31 de octubre.76TestigoQ u-M 845A543Mortalidad acumulada (Nº abejas colmena -1 )2100 2 4 6 8 10 1276543y = 1,35*exp(x/12,15) - 1,5R 2 = 0.90436y = 15,21*exp(x/68,50) - 15,17R 2 = 0.91415y = 0,11*exp(x/4,0) - 0,25R 2 = 0.83184B21y = 1,13*10 6 *exp(x/3,89*10 6 ) - 1,13*10 6R 2 = 0.7711700 2 4 6 8 10 12Tiem po (días)

Mortalidad acumuladaM o rtalid ad acu m u lad a(Nº d e Varro as p o r co lm en a)(número de individuos)20019018017016015014013012011010090807060504030201002 0 01 8 01 6 01 4 01 2 01 0 08 06 04 02 00T e s tig oH o n g o*** Mortalidad de****5 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0 3 5D ía s d e s d e la a p lic a c ió nTimol1 4 7 8 11 14 18 21 25 28 32 35 39 42 46 49 54 56 61 70**Varroa encolmenas sin tratary tratadas conMetarhziumMortalidad deVarroa encolmenas tratadascon Timol puro yMetarhzium.Tiempo (Días)

Porcentaje de Infestación inicial y final en abejasadultas de colonias tratadas con Timol y MetarhiziumInfestación (%)2,521,510,521nov (Inicio)14-dic10-ene0Testigo Timol HongoTratamiento

Nivel de Infestación de V. destructor en colmenasantes y después de tratadas.Infestación (%)131211109876543210Antes cbDespuéscbababab ababaaaAc. Formico 10¹º conidias 5*10¹º conidias 10¹¹ conidias 5*10¹¹ conidias TestigoTratamientos

Tratamientos concentraciones deinóculo: 0, 10 6 , 10 7 , 10 8 y 10 9 conidiasmL -1 del aislamiento Qu-M845,mezcladas con jarabe de miel: 70%de miel y 30% de agua.Aislamiento Qu-M845 de M. anisopliae

•El diseño experimental: completo al azar, cinco tratamientos y cincorepeticiones.•Para evaluar la mortalidad en el tiempo se utilizó el test de Friedman, laseparación de grupos se efectúo con el test de Conover-In man y lamortalidad de los tratamientos a un mismo periodo de tiempo se evaluó conel test de Kruskal-Wallis, todos ellos con un nivel de significancia deP

Figura Nº 1. Mortalidad a través del tiempo de Apis mellifera,con cinco concentraciones de Metarhizium anisopliae,aislamiento Qu-M845.Mortalidad (%)100806040Concentracion conidias/ mL10 910 810710 602001 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17Tiempo (dias)

Tráfico de abejas en colmenas tratadas con diferentesmétodos de aplicación de una concentración de 5x10 11conidias por colmena del aislamiento Qu-M845.T ra fic o d e a b e ja s10009008007006005004003002001000Ac fórmicoConidias estampadasPulverización de conidiasTestigoaaab0 2 5 6 7 8 9 12 13 15 19 21 23Tiempo (Días)

Peso de las colmenas antes y de después de tratadas.454035antesdespuesaaaaaaaa30Peso (Kg)2520151050Ac. FórmicoConidiasestampadasEspolvoreoTestigoTratamientos