Mangifera indica L.

exposée sous une lampe UV à 254 nm jusqu’à décoloration de la plaque. Les zones
antioxydantes apparaissent en jaune sur fond blanc. Il faut faire particulièrement attention aux
substances déjà colorées en jaune, car elles peuvent donner de faux positifs (Calvin, 2001).
❖ Test en solution
Pour ce test, la méthode décrite par Bors et coll.(1984) nécessite la crocine. Celle-ci fut isolée
du safran (Crocus sativus L. Iridaceae) selon Friend et Meyer (1960) et son identité fut
confirmée par ses données 1H et 13C-RMN. Les solutions sont préparées contenant 10 µM
de t-BuOH; 0,5 µM de t-BuOH, ainsi que les composés à tester à différentes concentrations.
Ces solutions sont placées sous la lumière à 254 nm et la décoloration de la crocine est
mesurée en suivant la diminution de l’absorbance à 440 nm au cours du temps à l’aide d’un
spectrophotomètre du type UV Lambda20 (Calvin, 2001).
1.1.3.3. Test mesurant l’activité antioxydante contre le lysosyme
Un mélange du lysosyme (1 mg/ml) et du composé à tester à des concentrations diverses est
incubé pendant 20mn à 40°C dans un tampon phosphate (10 mM, PH 7.4). Les composés à
tester sont dissous dans du MeOH et 5 µl de cette solution sont ajoutées à la solution
protéinique, ceci afin de limiter à 1 % (v/v) la quantité de solvant organique dans l’échantillon
(volume total de 0.5 ml). L’oxydation est initiée par l’addition d’hydrochlorure de 2,2’-
azobis(2-amino-propane)(AAPH) dissoud dans le tampon phosphate.
L’oxydation des protéines s’effectue en présence de 10 mM d’AAPH, avec ou sans
antioxydant pendant 60 mn. Les mesures se font ensuite par électrophorèse capillaire
(Calvin., 2001).
26