o Manuel de procédures techniques - Direction des laboratoires

Matériel
La ponction est réalisée à l’aide d’un trocart : le trocart de Mallarmé qui est composé de 2 éléments
distincts :
- une aiguille creuse, à l’extrémité inférieure effilée. Sa partie supérieure est composée de 2 branches
perpendiculaires à l’axe de l’aiguille, branches permettant une bonne prise en main par l’opérateur ;
- un mandrin à l’extrémité supérieure aplatie afin de pouvoir exercer une pression suffisante. Le
mandrin traverse l’aiguille creuse.
Aiguille et mandrin doivent avoir une extrémité pointue, tranchante et non émoussée.
Prélèvement
Au site de la ponction :
- la peau est soigneusement désinfectée
- le trocart tenu fermement par l’opérateur, est enfoncé perpendiculairement à la peau et à la surface
osseuse avec un mouvement de rotation jusqu’à ce que l’on franchisse la corticale osseuse
- après pénétration, le mandrin est retiré et remplacé par une seringue qui aspire de la substance
médullaire (volume prélevé est inférieur à 0,5cc)
- enlever la seringue et replacer le mandrin
- le contenu de la seringue est déposé directement sur la lame pour un frottis médullaire réalisé de la
même façon qu’un frottis sanguin
NB : si la première aspiration a ramené du matériel, l’aiguille peut être retirée et un pansement légèrement
compressif est appliqué au point de ponction.
Coloration
Les frottis confectionnés sont séchés à l’air et colorés au May Grunwald Giemsa mais éventuellement avec
des colorants cytochimiques.
Lecture
Elle se fera d’abord au faible grossissement pour apprécier la richesse cellulaire puis au fort grossissement
pour l’étude des différentes lignées.
3.2.2. Hémostase
L’exploration de la coagulation doit se faire sur des prélèvements avec comme anticoagulant le citrate
trisodique à raison d’un volume d’anticoagulant pour 9 volumes de sang.
Les tests doivent être réalisés dans les 4 heures qui suivent le prélèvement.
Les outils du contrôle de qualité reposent sur deux types d’échantillons biologiques :
- des pools de plasmas normaux ou anormaux préparés localement et aliquotés
- des plasmas lyophilisés préparés industriellement par différentes firmes pharmaceutiques qui
sont soit des plasmas étalons ou standards de calibration ou alors des plasmas de « contrôle »
ayant une valeur moyenne et un intervalle de confiance déterminée selon la technique utilisée.
Ces différents échantillons sont utilisés pour le contrôle de qualité journalier qui permet la validation
quotidienne des résultats. Il est préférable de passer ces contrôles en début et en cours de série et de
mentionner les résultats sur un graphe. L’ensemble des procédures de contrôle de qualité interne doit être
clairement décrit dans un cahier technique qui doit être régulièrement mis à jour. Le contrôle de qualité
RNL Sénégal : Manuel de Procédures techniques (Page 44)