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Résumés/Abstracts
Delegates/Participants
Présentation orale no. 14
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Étude Proteomic Détermination des interactions analysis de l'effet of d' outer Actinobacillus des membrane adjuvants CpG pleuropneumoniae proteins et toxine of Actinobacillus choléra et d'autres sur la pleuropneumoniae:
réponse Pasteurellaceae immuni-
identification taire contre avec of le immunogenic des fimbriae cellules F4 épithéliales administré candidates d'origine oralement for vaccine porcine chez development.
le porc
Jacqueline Eliane Auger*, W. Chung Mahendrasingh (1), Christopher Ng-Thow-Hing (1), Bernard F. Gibbs (2), John H.E. Nash (3), Mario
* Delisle, B.* Ramjeet*, J.M. Fairbrother** Irazu Contreras**, C. Calinescu** Martin Olivier**, Marcelo
Jacques Gottschalk* (4), and et James Mario W. Jacques* Coulton (1)
M.A. Mateescu* et É. Nadeau
(1) Department of Microbiology and Immunology, McGill University, 3775 University Street, Montreal, QC, Canada H3A 2B4
*Laboratoire (2) Sheldon * GREMIP, de Biotechnology référence Faculté Center, EcL, de McGill Groupe médecine University, de 3773 Recherche vétérinaire, University Street, sur St-Hyacinthe, Montreal les Maladies QC, Canada QC Infectieuses
H3A 3B4
(3) **Departement Institute for Biological Sciences, National Research Council of Canada, 100 Sussex Drive, Ottawa, ON, Canada K1A 0R6
(4) du Groupe Porc de (GREMIP), of Microbiology
recherche sur les Faculté maladies de and
infectieuses médecine Immunology, McGill University, Montréal, QC
du porc, vétérinaire, Département de Université pathologie et microbiologie, de Montréal,
Faculté de
médecine vétérinaire, Université de Montréal, St-Hyacinthe, QC, Canada J2S 7C6
St-Hyacinthe, QC, Canada.
** Nous
Dép. avons
chimie standardisé
et biochimie, Université du Québec à Montréal, QC, Canada.
un modèle
Université
in
du
vitro
Québec
d’adhérence
à Montréal,
pour l’étude
QC, Canada.
de bactéries
The Gram-negative bacterial pathogen Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) causes porcine
pathogènes des voies respiratoires du porc en utilisant deux lignées cellulaires porcines, no-
Les infections aux Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC) positif au fimbriae F4
tamment pneumonia, la a highly lignée infectious de cellules respiratory de disease trachée that « contributes Newborn to Pig major Trachea economic » (NPTr) losses in et the la swine lignée industry. de
causent notamment chez le porc la diarrhée post-sevrage (DPS), une maladie caractérisée
cellules
With par pressures une de
diarrhée poumon
to reduce aqueuse, « St. Jude
the use of des Porcine
antibiotics pertes in de Lung
agricultural croissance » (SJPL). Avec
livestock, et de l’aide
vaccination la mortalité de ce
against dans modèle,
bacterial les 2 nous
pathogens premières
avons
has
étudié semaines les interactions suivant le sevrage, hôte-pathogène engendrant de des l’agent pertes étiologique économiques de importantes. la pleuropneumonie Le fimbriae
porcine,
emerged F4 est Actinobacillus une as a structure safer and more pleuropneumoniae, protéique cost-effective immunogène approach ainsi for responsable que disease d’autres control. de Pasteurellaceae l'adhésion Current vaccines de la against bactérie comme APP provide aux
Haemophilus
intestins, faisant parasuis, de Actinobacillus lui un bon candidat suis et pour Pasteurella un vaccin multocida. sous-unitaire En oral. premier L’objectif lieu nous de cette
avons
only examiné partial protection, have little impact on morbidity, or are serotype-specific. Therefore an effective vaccine
étude est les d’évaluer propriétés la d’adhérence réponse humorale et d’invasion anti-F4 de stimulée ces diverses par l’administration bactéries pathogènes orale de
du
porc.
offering fimbriae Nous
cross-protection F4 avons supplémentés ensuite étudié
against de different différents la réponse cellulaire des lignées épithéliales suite à une in-
serotypes adjuvants. of APP is Pour urgently ce needed. faire, des Outer porcelets membrane sevrés (OM) et proteins, posifectiontifs
pour par le récepteur A. pleuropneumoniae intestinal spécifique serotype au 1 fimbriae en évaluant F4 ont l’expression été immunisés de facteurs oralement de avec
trans-
localized cription, du fimbriae at en the quantifiant F4 bacterial semi purifiés cell surface, la production uniquement are attractive de ou du vaccine cytokines fimbriae candidates ainsi F4 supplémentés qu’en because détectant they de are la exposed des toxine indicateurs
as choléra
targets to
d’apoptose. complète ou Nos d’un résultats ADN CpG indiquent spécifique des différences à l'espèce porcine d’adhérence (CpG entre D19), les deux souches adjuvants
ainsi
the immune system and play key roles in infection. Using the genome sequence of APP serotype 5b, we scanned in
qu’entre immunostimulateurs. les lignées. La Chacune croissance des d’ formulations A. pleuropneumoniae vaccinales a sérotype été incorporée 1 sous conditions dans un sysres-
silico treintetème for de proteins en livraison fer predicted ou en macroscopique NAD to be n’a localized pas composées at affecté the cell surface l’adhérence, de carboxyméthyl-amidon and constructed et ce a aux consensus deux (CM-A). prediction lignées. Des list En of porcs
ce 93 qui OM
concerne recevant que l’invasion, que le CM-A la souche uniquement d’ A. ont pleuropneumoniae de plus été utilisés testée comme n’envahie groupe pas contrôle. les cellules Des
proteins. We previously described proteomic analyses utilizing 1D gel electrophoresis, followed by identification with
dans échantillons notre modèle de sangs tandis et de que fèces les autres ont été espèces récoltés de à Pasteurellaceae différents intervalles testées post-vaccination
ont démontré
LC-MS/MS. la ainsi capacité que des The outcome d’envahir contenus intestinaux established ces cellules. à la nécropsie. the first OM La proteome détection Les réponses of APP de grown la production humorales des under nutrient-rich de IgM cytokines et des IgA
conditions. pro- We
inflammatoires anti-F4 ont été par analysées les deux par lignées ELISA. Nous suite avons à une d’abord induction observé par des une cellules production A. pleuropneumo-
légèrement
identified niae plus inactivées élevé, 47 OM mais proteins a non démontré representing statistiquement une 50% augmentation of significative, the predicted de d’IgM OM la proteome, production sérique anti-F4 most de of IL-8 à which environ par have les 10 not cellules jours
been
après la dernière vaccination pour les groupes vaccinés en comparaison avec le groupe
characterized. NPTr,
après
mais
la dernière
aucune
vaccination
We now production
pour
describe differences d’autres
les groupes
in cytokines
vaccinés
OM protein n’a profiles été
en
between détectée
comparaison
APP pour
avec
grown les under deux
le groupe
nutrient lignées,
non vacciné. La production d'IgA sérique anti-F4 était négligeable dans tous les groupes. rich
ceci
non
malgré
vacciné.
une
La
augmentation
production d'IgA
de
sérique
l’expression
anti-F4
du
était
facteur
négligeable
de transcription
dans tous
NF-kB.
les groupes.
A. pleu-
La moyenne géométrique des titres d'IgM anti-F4 mucosaux des porcs vaccinés avec la for-
conditions La moyenne
ropneumoniae and under géométrique
a démontré nutrient deprived des titres
être hautement conditions d'IgM anti-F4 that cytotoxique resemble mucosaux those des
mais in porcs
n’induit vivo: iron-restriction; vaccinés avec
pas l’apoptose growth-factor la for-
des
mulation comprenant le CpG était près de 2 fois supérieure (P < 0,05) à celui du groupe vac-
cellules épithéliales SJPL et NPTr. Cette étude a permis d’augmenter notre compréhension
nicotinamide ciné avec adenine le fimbriae dinucleotide-restriction. F4 uniquement tandis Furthermore, que la we moyenne detected géométrique immunoreactive des OM titres proteins des
by
de
porcs
la pathogenèse
vaccinés avec
des
la formulation
espèces de
comprenant
Pasteurellacea
la toxine
testées
choléra
ainsi
était
que
environ
des interactions
de 4 fois inféhôte-
porcs vaccinés avec la formulation comprenant la toxine choléra était environ de 4 fois infé-
immunoblot pathogène analyses durant of 1D une and infection 2D gels probed par A. with pleuropneumoniae. post-convalescent sera En from plus, infected ces animals. résultats These démon- studies
rieure (P < 0,001) à celui du groupe vacciné avec du fimbriae F4 uniquement. Tel que obsertrent
le grand potentiel de ces lignées pour l’étude de la pathogenèse et des interactions
direct vé pour our selection le sang, of la potential production vaccine d'IgA candidates mucosaux for APP était that négligeable are immunogenic pour and tous are les expressed groupes.
under
hôte-pathogène En conclusion, le de CpG micro-organismes D19, mais non la pathogènes toxine choléra, des démontre voies respiratoires un effet d’adjuvant du porc. muco-
conditions sal lorsque that reflect administré infection oralement in the porcine chez host. le porc nouvellement sevré. Ainsi, la formulation
vaccinale contenant du fimbriae F4 supplémentés de CpG D19 serait le meilleur candidat
pour stimuler la réponse humorale intestinale anti-F4 chez le porc.