Cytomégalovirus - Diagenode Diagnostics
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PAGE 20<br />
DIAGENODE CYTOMEGALOVIRUS PCR EN TEMPS REEL MANUEL D'UTILISATION<br />
• PCR 25 μl<br />
(ABI 7000-7300-7500-7900HT-StepOnePlus/ Roche Lc480-Lc2.0/ Biorad iCycler-IQ5- CFX 96 /<br />
Agilent Stratagene MX3000P-3005P/ Qiagen Rotor-Gene)<br />
PCR qualitative<br />
12.5 μl ................ 2X Mastermix<br />
2.5 μl ................ Amorces & sonde d'hydrolyse pour le cytomégalovirus <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................ Amorces & sonde d'hydrolyse pour le contrôle d'inhibition <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................ Contrôle d'inhibition plasmide <strong>Diagenode</strong><br />
5 μl ................ Échantillon humain (ou contrôle positif CMV)<br />
25 μl ................ Volume final<br />
N.B.<br />
Avec le système ABI, vous pouvez ajouter 1 μl de solution ROX (Qiagen).<br />
Ajustez le volume d’eau (H20 PCR grade) à 1 μl.<br />
Courbe quantitative<br />
12.5 μl ................ 2X Mastermix<br />
2.5 μl ................ Amorces & sonde d'hydrolyse pour le cytomégalovirus <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................ Amorces & sonde d'hydrolyse pour le contrôle d'inhibition <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................ Contrôle d'inhibition plasmide <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................ Courbe quantitative <strong>Diagenode</strong>: 4 .10 5 ou 4 .10 4 ou 4 .10 3 ou 4 .10 2 ou<br />
4 .10 1 copies/µl<br />
2.5 μl ................ H 2 O PCR grade <strong>Diagenode</strong><br />
25 μl ................ Volume final<br />
N.B.<br />
Avec le système ABI, vous pouvez ajouter 0,5 μl de solution ROX (Qiagen).<br />
Ajustez le volume d’eau (H20 PCR grade) à 0,5 μl.<br />
• PCR 20 μl<br />
(Roche Lc2.0)<br />
Pour le LightCycler 2.0 (Lc2.0), nous conseillons le LightCycler ®<br />
fourni) (Réf : 04535286001).<br />
TaqMan ® Master, Roche (non<br />
PCR qualitative<br />
4 μl ................. 5X Mastermix<br />
2 μl ................. Amorces & sonde d'hydrolyse pour le cytomégalovirus <strong>Diagenode</strong><br />
2 μl ................. Amorces & sonde d'hydrolyse pour le contrôle d'inhibition <strong>Diagenode</strong><br />
2.5 μl ................. Contrôle d'inhibition plasmide <strong>Diagenode</strong><br />
5 μl ................. Échantillon humain (ou contrôle positif CMV)<br />
4.5 μl ................. H 2 O PCR grade <strong>Diagenode</strong><br />
20 μl ................. Volume final<br />
Europe <strong>Diagenode</strong> sa / CHU - Tour GIGA - B34 - 3 e étage // Avenue de l’Hôpital, 1 // 4000 Liège (Sart Tilman) // Belgium // Phone: (+32) 4 364 20 50 // Mail: info@diagenode.com
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