Cytomégalovirus - Diagenode Diagnostics

PAGE 30
DIAGENODE CYTOMEGALOVIRUS PCR EN TEMPS REEL MANUEL D'UTILISATION
Évaluation des performances
1. Sensibilié analytique
La détermination de la sensibilité analytique a été réalisée sur un standard international de l'OMS
pour le cytomégalovirus humain pour les techniques d'amplification des acides nucléiques
(réf: code NIBSC 09/162).
La PCR a été réalisée comme décrit précédemment (voir point B.3 Préparation de la réaction
de PCR).
Les conditions de PCR:
Méthode d'extraction utilisée: EasyMag ® Biomerieux
Mastermix: Quantifast multiplex PCR
PCR en temps réel: Roche Lc 480 - V 50 µl
Volume du contrôle: 10 µl
Une dilution est considérée comme positive si la fluorescence relative franchit le seuil tel que
déterminé par Roche LC480.
Nous avons appliqué une analyse statistique de type Probit aux résultats obtenus afin de
déterminer la sensibilité analytique exprimée par une valeur seuil positive de 95%.
Ceci représente la concentration de la cible à laquelle 95% des tests donnent des résultats positifs
suite à une dilution en série du matériel de référence.
Le Tableau 1 montre les coefficients du modèle d’ajustement. La représentation de ce modèle est
présentée à la Figure 1.
Estimation Erreur Std. Valeur Z Pr (>1z1)
(Interception) -7.74 2.25 -3.44 5.86E-04
Concentration (UI/ml) 3.22 0.89 3.61 3.01E-04
Selon le modèle Probit ajusté, la limite inférieure de détection de la méthode a été établie à
820 Ul/ml (P > 0.05 ± 0.0522).
Europe Diagenode sa / CHU - Tour GIGA - B34 - 3 e étage // Avenue de l’Hôpital, 1 // 4000 Liège (Sart Tilman) // Belgium // Phone: (+32) 4 364 20 50 // Mail: info@diagenode.com