DNA Extraction & Inhibition Control Real-Time PCR - Diagenode ...

Ref.: DIA-EIC/DNA-050.Vs1 Note.Vs1 (10.2007)
DNA Extraction
&
Inhibition Control
Real-Time PCR
Manuel d’utilisation

Informations générales ------------------------------------------------------------------------------------- 1
Informations sur le pathogène ---------------------------------------------------------------------------- 1
Description du produit -------------------------------------------------------------------------------------- 1
Composants--------------------------------------------------------------------------------------------------- 1
Conservation ------------------------------------------------------------------------------------------------- 2
Avertissements et précautions ----------------------------------------------------------------------------- 2
Matériel non fourni ----------------------------------------------------------------------------------------- 3
Collection de l’échantillon, stockage et transport ------------------------------------------------------ 3
I. Sample Collection ---------------------------------------------------------------------------------------------3
II. Stockage de l’échantillon ------------------------------------------------------------------------------------3
III. Transport de l’échantillon -------------------------------------------------------------------------------3
Protocole ------------------------------------------------------------------------------------------------------ 4
I. Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition -------------------------------------------------------------4
II. Extraction/Isolation d’ADN de l’échantillon ------------------------------------------------------------5
III. Configuration des réactions PCR (ABI 7000, ICycler Biorad) -----------------------------------7
IV. Configuration de l’instrumentation PCR temps réel-----------------------------------------------7
‣ Système PCR Temps Réel ABI 7000 ------------------------------------------------------------------------------- 7
‣ Biorad ICycler --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 8
IV. Interprétation des résultats ------------------------------------------------------------------------------9
Performance du contrôle interne ------------------------------------------------------------------------- 9
V. Résolution des problèmes---------------------------------------------------------------------------- 10
VI. Spécifications--------------------------------------------------------------------------------------- 10
I. Sensibilité ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 10
II. Specificité ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 10
III. Evaluation du diagnostic ------------------------------------------------------------------------------- 11
Limites-------------------------------------------------------------------------------------------------------- 11
Contrôle qualité --------------------------------------------------------------------------------------------- 11
Note pour l’acheteur --------------------------------------------------------------------------------------- 12

DIA-EIC/DNA-050
Informations générales
Le Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition PCR Temps Réel de Diagenode est une
technique de diagnostic in vitro utilisée par les laboratoires cliniques et les scientifiques de
laboratoire qualifiés.
Le Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition PCR Temps Réel de Diagenode a été validé
sur les systèmes PCR temps réel ABI 7000 et Biorad Icycler.
Le kit est compatible aves la plupart des systèmes PCR temps réel (demander pour plus
d’informations).
Informations sur le pathogène
Le Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition est un virus à ADN ne présentant aucune similarité
de séquence avec le génome humain, les virus et autres pathogènes affectant l’humain.
Le contrôle ADN d’extraction & d’inhibition est un virus complet, gardant son
pouvoir infectieux. Ce virus est repertorié dans la classe Ea1* établie par l’EFP
(European Federation of Biotechnologies). Ce virus n’a pas reporté comme
dangereux pour l’humain mais doit être manipulé sous une hotte stérile.
*(Plus de détails à la fin du manuel)
Description du produit
Ce produit consiste en un contrôle ADN d’Extraction et d’Inhibition pour PCR temps réel.
Ce contrôle ADN d’Extraction et d’Inhibition a été principalement validé avec des échantillons
respiratoires, de sang total et d’urine.
Différents fluorochromes sont disponibles pour ce contrôle:
• Yellow dye (émission 548 nm), Ref.: DIA-EIC/DNA(YD)-050
• Orange Dye (émission 575 nm), Ref.: DIA-EIC/DNA(DR)-050
• Cy5 Dye (émission 662 nm), Ref.: DIA-EIC/DNA(Cy5)-050
Composants
‣ DIA-EIC/DNA(YD)-050
Tube vert: Amorces et sonde (yellow dye).
Tube jaune: Virus à ADN.
‣ DIA-EIC/DNA(DR)-050
Tube bleu ciel: Amorces et sonde (orange dye).
Tube jaune: Virus à ADN.
‣ DIA-EIC/DNA(Cy5)-050
Tube vert: Amorces et sonde (Cy5 dye).
Tube jaune: Virus à ADN.
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DIA-EIC/DNA-050
Les sondes, amorces et virus à ADN contenus dans ce kit sont en quantité suffisantes
pour 50 tests (50 µl).
Conservation
Le tube amorces et sonde doit être stockées à -20° C, le tube virus ADN à -70° C. La date
d’expiration du kit, mentionné sur l‘étiquette, doit être contrôlé. La répétition des cycles
congélation-décongélation doit être évitée, faire des aliquots si nécessaire. Il est également
recommander d’utiliser ce kit dans la glace.
Avertissements et précautions
Extraction/PCR:
• Les kits PCR temps réel de Diagenode doivent être utilisés par des scientifiques ou
techniciens de laboratoire possédant une forte connaissance en biologie moléculaire et
plus particulièrement de la plateforme PCR temps réel.
• Pour obtenir des résultats optimaux, Diagenode suggère plusieurs méthodes d’extraction
pour éviter au maximum la présence d’inhibiteurs de PCR.
• Un contrôle d’extraction ou d’inhibition doit être utilisé pour chaque réaction PCR.
Attention:
Diagenode commercialise un contrôle qualitatif ADN d’extraction et/ou d’inhibition. Il est
donné la possibilité, avec l’appréciation des scientifiques/techniciens de laboratoire, de
changer la procédure d’extraction selon les résultats obtenus pour ce contrôle
d’extraction et/ou d’inhibition afin de retrouver un résultat approprié.
• Le contrôle d’extraction viral doit être manipulé sous une hotte stérile.
Contamination:
• Le dépôt d’acide nucléique, l’isolation et l’amplification en temps réel doivent être
exécutés dans des locaux séparés
• Garder les tubes fermés s’ils ne sont pas en cours d’utilisation.
• Le laboratoire PCR (Hotte, plateforme d’extraction AND/ARN, blouse…) doit être nettoyé
avec les produits appropriés.
• Les kits contaminés doivent être jetés dans une poubelle spécifique pour produits
biologiques.
• Ce kit ne doit pas être utilise par un scientifique/technicien de laboratoire malade
présentant les mêmes symptômes que provoque le paramètre recherché.
• Les contrôles positifs et négatifs doivent être réalisés à chaque réaction PCR.
• Des gants doivent être portés.
• Des tips résistants aux aérosols pour tous les mixs PCR.
• Avant ouverture, les tubes doivent être centrifugés.
• Ne pas pipeter avec la bouche. Ne pas fumer, manger ou boire dans les locaux où sont
manipulés les réactifs.
• Le kit ne doit pas être utilisé par les femmes enceintes.
Conservation:
• Le kit doit être mis à l’abri de la lumière.
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DIA-EIC/DNA-050
Pour tout problème/question, contacter :
Tel: +32(0)43642050
info@Diagenode.com
Matériel non fourni
• Pipettes
• Tips stérils avec filtres
• Powder-free gloves
• Vortex
• Centrifugeuse de paillasse
• Tubes pour microcentrifugeuse) RNase/Dnase-free (1,5 and/or 2 ml)
• Eau RNase/DNase-free
• Kit d’isolation d’ADN (voir : échantillon Extraction/Isolation d’ADN)
• Consommables et accessoires (tubes, microcentrifugeuse, plaques, plastique adhésif)
pour un ABI 7000 ou un Biorad ICycler.
• Taqman® Universal PCR Master Mix, Applied Biosystems (Roche)
• Instrumentation PCR temps réel : ABI 7000 or Biorad ICycler.
Collection de l’échantillon, stockage et transport
I. Collection de l’échantillon
Echantillons respiratoires:
Les échantillons respiratoires humains tels que le lavage broncho-alvéolaire, crachat et
écouvillon nasopharyngé peuvent être collectés.
Echantillon sanguin:
Les Echantillons sanguin tels que le sang total et/ou plasma peuvent être collectés.
Echantillon urinaire.
II. Stockage de l’échantillon
L’échantillon humain peut être stocké à 4°C pendant un maximum de 24h ou de -20°C à -80°C
pour une plus longue période.
L’échantillon humain doit être stocké dans des tubes en polypropylène RNA/DNAse free. La
sensibilité de la PCR peut être réduite suivant les répétions de cycles congélationdécongélation.
III. Transport de l’échantillon
L’échantillon humain doit être transporté dans un conteneur adapté. L’échantillon doit être
transporté suivant les instructions locales et nationales sur le transport de matériel pathogène.
• Les échantillons respiratoires humains et de plasma doivent être transportés à
-20° C.
• Les échantillons de sang total et d’urine doivent être transportés à +4° C.
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Protocole
I. DNA extraction & inhibition control
Le contrôle ADN d’extraction & d’inhibition de Diagenode est une culture virale contenant une
charge virale de 1.000 TCID50/ml.
Les résultats suivants sont obtenus avec l’utilisation du Nuclisens EASYMAG System
(Biomerieux).
Procédure:
• 10 µl de chaque dilution extrait dans 500µl d’eau.
• Nuclisens EASYMAG System on board extraction.
• Elution dans 60 µl.
• 5 µl utilisé for PCR.
• TaqMan® Universal PCR mastermix (Applied Biosystems).
• Les tests ont été réalisés sur un ABI Prism® 7000 instruments (Applied
Biosystems).
La valeur du Ct pour 1.000 TCID50/ml est +/-28,5. Le
graphique montre également les résultats pour d’autres
dilutions.
(10.000 TCID50/ml est +/-24,8, 100 TCID50/ml est +/-
31,5 et 10 TCID50/ml est +/-35)
Pour l’extraction et l’isolation d’ADN d’un
échantillon, ajouter 10µl de la culture virale
contrôle dans l’échantillon juste avant le
démarrage de la procédure d’extraction.
(La concentration peut être modifiée afin d’adapter les
PCR multiplexs avec la méthode d’extraction utilisée)
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II. Sample Extraction/DNA Isolation
Diagenode suggère plusieurs méthodes d’extraction pour éviter au maximum la présence
d’inhibiteurs de PCR.
• Nuclisens EASYMAG System (Biomerieux)
Echantillons cliniques: prélèvement nasal, crachats, lavage broncho-alvéolaire.
Les procédures de pré-extraction suivantes sont recommandées :
Préparation pour sang total:
• Collecter le sang total dans un tube traité à l’EDTA.
NB: le tube contenant l’échantillon ne doivent pas être laissé à température ambiante plus de 4h
(24 heures à + 4° C) jusqu’aux manipulations suivantes.
• Utiliser 100 µl de sang total pour la procédure d’extraction (Nuclisens Lysis
Buffer).
Préparation de plasma provenant du sang total:
• Collecter le sang total dans un tube traité à l’EDTA.
• Centrifuger 15 minutes à 1,000 g.
• Ouvrir le tube et collecter délicatement la fraction de plasma without disturbing
the buffy coat layer, transférer le plasma dans un nouveau tube de stockage.
NB: Si l’échantillon ne peut être utilisé dans les deux heures, le stocker à -20° C ou -70° C.
• Utiliser 100 µl - 1ml de plasma pour la procédure d’extraction (Nuclisens Lysis
Buffer).
Préparation de sérum provenant du sang total:
• Collecter le sang total dans un tube sec.
• Laisser le tube à température ambiante jusqu’à la coagulation complète.
• Séparer le sérum par centrifugation 15 min./1,000g.
• Ouvrir le tube and transférer le sérum dans un nouveau tube de staockage.
NB: Si l’échantillon ne peut être utilisé dans les deux heures, le stocker à -20° C ou -70° C.
• Utiliser 100 µl-1ml de sérum pour la procédure d’extraction (Nuclisens Lysis
Buffer).
Expertoration, lavage broncho-alvéolaire (LBA):
• 250 µl de crachats
• Ajouter 250 µl de tampon protéinase K (1mg/ml protéinase K, 0,5% SDS, 20
mM Tris-HCl, pH 8.3), vortexer
• Laisser incuber 60 min. à 55°c
• Utiliser les 500 µl de crachats pour la procédure d’extraction (Nuclisens Lysis
Buffer)
Prélèvement de gorge (isolation totale des acides nucléiques):
• Ajouter 1 ml d’une solution saline à l’échantillon, vortexer
• Incuber 1 min. à température ambiante, vortexer
• Essorer l’écouvillon sur le coté du tube puis le retirer.
NB: Si aucune autre manipulation n’est réaliser le même jour, l’échantillon doit être stocké à
-70°C.
• Utiliser les 200µl ainsi obtenus pour la procédure d’extraction (Nuclisens Lysis
Buffer)
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DIA-EIC/DNA-050
Pour l’isolation d’ADN, se référencer au protocole Nuclisens lysis buffer, délivré avec le
Nuclisens EasyMag System, avec les instructions suivantes:
Volume d’ADN élué: 60µl
• Autres systèmes d’extraction testés
‣ Echantillons sanguin:
DNA blood Miniprep Kit (Qiagen Ref. 51304)
Suivre les instructions du constructeur avec ces indications:
Volume de l’échantillon humain extrait: 140 µl
Volume d’ADN isolé: 60 µl
‣ Echantillons urinaire:
Amplicor CT/NG specimen preparation kit (CT/NG prep) (Roche Ref. 20759414112)
Suivre les instructions du constructeur avec ces indications:
Volume de l’échantillon humain extrait: 500 µl
Volume d’ADN isolé: 200 µl lysis buffer et 200 µl specimen diluent
‣ Expectorations, lavage broncho-alvéolaire (LBA):
Amplicor respiratory specimen preparation kit (RSP prep) (Roche Ref. 20756903122)
Suivre les instructions du constructeur avec ces indications:
Volume de l’échantillon humain extrait: 200 µl
Volume d’ADN isolé: 300 µl (50 µl RL buffer and 50 µl RN buffer)
Si une réaction PCR est lancée le même jour, l’ADN extrait peut être conservé dans la
glace. Pour une conservation plus longue l’ADN doit être conserve à -20°C.
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III. PCR Reaction Set-up (ABI 7000, Icycler Biorad)
25 µl -------------------- master mix 2X
(non inclus: Taqman® Universal PCR Master Mix, Applied Biosystems (Roche))
5 µl ---------------------- amorces et sonde pour le contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition
5 (or 10) µl ------------- amorces et sonde pour le pathogène humain recherché
5 (or 10) µl ------------- échantillon
Eau si nécessaire.
-----------------------------------
50 µl ---------- Volume final
Attention :
Un nouveau mix doit être préparé pour toute nouvelle PCR. Un master mix (non inclus) et
amorces/sondes incluses dans le kit doivent être placés dans la glace pendant la préparation de
la PCR.
IV. Real Time PCR Instrument Set Up
‣ Système PCR Temps Réel ABI 7000
1. « Open a New File ».
2. Sélectionner « suivant » et cliquer « Next ».
a. Assay: Absolute
b. Container: 96-well plate
c. Template: Blank
3. Cliquer OK.
4. Sélectionner « Detectors ». Si nécessaire, créer de nouveaux détecteurs avec les configurations
« reporter et le quencher » montré ci-dessous.
Detector name Reporter Quencher
DIA-DNA/EIC(YD)-050 Yellow Dye Vic (none)
DIA-DNA/EIC(DR)-050 Orange Dye NED (none)
DIA-DNA/EIC(Cy5)-050 Cy5 Cy5 (none)
5. Sélectionner Passive Reference: Rox.
6. Cliquer Next.
7. Selectionner wells et ajouter les 2 detecteurs pour les puits utilisés.
8. Cliquer Next.
9. Vérifier la configuration en utilisant le « Well Inspector » dans « le Set Up Tab ». Vérifier
que les reporteurs and quenchers sont configurés correctement et que la référence
passive est Rox.
10. Sélectionner « Instrument Tab » et définir le « Thermal Profile » comme décrit cidessous:
Stage Description
1 2 minutes à 50° C (1 cycle)
2 10 minutes à 95° C (1 Cycle)
3 Cycle program (40 Cycles)
Step 1: 15 secondes à 95° C
Step 2: 1 minute à 60° C
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DIA-EIC/DNA-050
11. Paramétrer le volume de l’échantillon à 50 µl.
12. Paramétrer « Data Collection » au Stage 3, Step 2.
13. Entrer les informations sur l’échantillon dans le « Set Up Tab ».
14. Sauvegarder le fichier format .sds.
15. Cliquer Start.
‣ Biorad ICycler
1. Sélectionner « In library ».
2. Cliquer « View Protocol ».
3. Cliquer « Create a new protocol ».
4. Définir le « Thermal profile » comme décrit ci-dessous :
Stage Description
1 2 minutes à 50° C (1 cycle)
2 10 minutes à 95° C (1 Cycle)
3 Cycle program (40 Cycles)
Step 1: 15 secondes à 95° C
Step 2: 1 minute à 60° C
5. Cliquer « Save this protocol ».
6. Cliquer « Run with selected protocol ».
7. Sélectionner « Edit plate set up ».
8. Dans « Samples whole plate loading », entrer les informations sur l’échantillon.
9. Dans « Select and load fluorophores », sélectionner les détecteurs comme montré cidessous:
Detector name Reporter
DIA-DNA/EIC(YD)-050 Yellow Dye Vic/Hex
DIA-DNA/EIC(DR)-050 Orange Dye Vic/Hex
DIA-DNA/EIC(Cy5)-050 Cy5 Cy5
10. Cliquer « Save this plate set up».
11. Cliquer « Run with selected protocol ».
12. Dans « Run prep », sélectionner « 50 µl sample volume ».
13. Dans « Select run purpose », sélectionner « PCR quantification melt curve ».
14. Cliquer « Begin Run ».
15. Sauvegarder le fichier en format .opd.
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DIA-EIC/DNA-050
V. Interpretation of Results
Détection du signal
Yellow dye
Orange dye
Cy5 dye
Signal au-delà du seuil
Signal en deçà du seuil
Interprétation des résultats
L’échantillon est positif
pour le contrôle ADN
d’Extraction & d’Inhibition
La PCR est valide.
L’échantillon est négatif
pour le contrôle ADN
d’Extraction & d’Inhibition
La PCR n’est pas valide.
Pour une PCR validée, les expériences suivantes doivent être réalisées à chaque
lancement d’une PCR:
• PCR négative : eau avec le contrôle ADN d’extraction & d’inhibition.
• PCR positive : échantillon positif du pathogène humain recherché
Les résultats suivants doivent être obtenus:
Echantillon
Détection du signal
Détection du signal
Yellow dye
Dye for human pathogen
Orange dye
researched detection
Cy5
Eau Signal en deçà du seuil Signal au-delà du seuil
Pathogène humain
recherché
Signal au-delà du seuil /
Performance du contrôle interne
La performance du contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition a été évalué sur 137 spécimens
cliniques (lavage broncho-alvéolaire, expectoration and écouvillon/lavage nasopharyngé):
• Les échantillons cliniques ont été extraits sur Nuclisens EASYMAG System
(Biomerieux).
(Voir II. Extraction/Isolation d’ADN de l’échantillon.)
• Protocole PCR. (Voir III. Configuration des réactions PCR (ABI 7000, ICycler Biorad)
• ABI 7000 Real Time PCR system.
Le contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition a été ajouté à chaque échantillon avant l’extraction
(Voir I. Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition) Les résultats suivants ont été obtenus:
N (échantillons) = 93
Ct
Moyenne des résultats 32,24
Déviation standard 1,54
Minimum 27
Maximum 35
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Des résultats équivalents ont été obtenus avec la procédure d’extraction Qiagen DNA blood
Miniprep Kit.
(Voir II. Extraction/Isolation d’ADN de l’échantillon.)
Résolution des problèmes
‣ Isolation des acides nucléiques
Se référer au manuel du constructeur.
‣ PCR
Le signal détecté pour le contrôle ADN d’extraction et/ou d’inhibition est négatif ou faible :
• Les conditions PCR ne correspondent pas avec le protocole. Vérifier les
conditions PCR.
• La réaction PCR est inhibée. Vérifier la méthode d’isolation d’ADN.
• Les conditions de stockage ne correspondent pas avec les
recommandations du kit.
‣ Système PCR temps réel
Se référer au manuel du constructeur.
Spécifications
I. Sensibilité
Voir chapitre Performance du contrôle interne
II. Specificité
Les amorces et sondes spécifiques ont été obtenues à partir de littérature Elles ont également
été vérifiées pour des possibles homologies avec d’autres séquences connues par comparaison
de séquence.
Les tests de réaction croisée ont été réalisés avec les espèces bactériennes suivantes :
Neisseria meningitidis Legionella pneumophila Listeria monocytogenes
Neisseria Gonoridae Mycoplasma pneumoniae Bartonella
Streptococcus pneumoniae Bordetella Borrelia burgdorferi
Streptococcus B Chlamydia pneumoniae Treponema pallidum
Haemophilus influenzae
Staphylococcus aureus
Les tests de réaction croisée ont été réalisés avec les virus suivants :
Adenovirus HBV CMV
Varicella-Zoster Herpes Parvovirus
Les tests de réaction croisée ont été réalisés avec les espèces fongiques suivantes :
Aspergillus Candida(s)
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Les tests de réaction croisée ont été réalisés avec le parasite suivant :
Toxoplasma gondii
III. Evaluation du diagnostic
Voir chapitre Performance du contrôle interne
Limites
• Tous les réactifs doivent être utilisés exclusivement pour le diagnostic in vitro.
• Respecter les informations du manuel est obligatoire pour avoir un résultat optimal.
• Des résultats reproductibles sont dépendants de la collection du spécimen en question,
du transport, su stockage et des procédures.
• Ce test à été validé pour être utilise avec un lavage bronchoalvéolaire, crachat et
écouvillon/lavage nasopharyngé.
• Ce test à été validé pour être utilise avec un ABI 7000 real Time PCR system et un
Biorad ICycler system
Note importante:
Le Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition PCR Temps Réel de Diagenode peut
également être utilisé avec un ABI 7500 Real Time PCR system, Corbett Research Rotor-
Gene 3000 TM Real time PCR System, Stratagene Mx3000P TM QPCR System, Roche
LightCycler® 2.0 ou 480 Real time PCR System.
(Demander pour les paramètres).
Contrôle qualité
Diagenode a obtenu les certifications ISO 9001 et ISO 13485 pour le design, la production et la
vente de kits diagnostic basés sur la technologie PCR temps réel.
Le Contrôle ADN d’Extraction & d’Inhibition PCR Temps Réel de Diagenode est testé contre des
éléments spécifiques prédéterminés pour assuré la qualité du produit.
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Note pour l’acheteur
Ce produit est optimisé pour la « polymerase chain reaction » (PCR) protégée par des brevets appartenant
à Roche Molecular Systems, Inc., and F. Hoffmann-La Roche ltd. (Roche). Aucune licence sous ces
brevets pour utiliser le procédé PCR n’est véhiculée expressément ou par implication de l’acheteur par
l’achat de ce produit. Une licence pour l’utilisation du procédé PCR pour certaines activités de recherches
et développement accompagne l’achat de certains réactifs de fournisseurs agréés, lorsqu’elle est utilisée en
conjonction avec un thermocycleur authorisé ou est disponible d’Applied Biosystems. Des informations
supplémentaires sur l’achat de licence pour utiliser le procédé PCR peuvent être obtenues en contactant le
Director of Licensing at Applied Biosystems, 850 Lincoln Center Drive, Foster City, California 94404 ou
à Roche Molecular Systems, Inc, 1145 Atlantic Avenue, Alameda, California 94501.
• Applied Biosystems est une marque déposée et ABI Prism ® est une marque de Applera Corporation ou ses
filiales aux USA et/ou certains autres pays.
• Rotor-Gene 300 TM est une marque de Corbett Research.
• LighCycler® 2.O or 480 est une marque de Roche.
• Stratagene Mx3000P TM QPCR System est une marque de Stratagene.
• Nuclisens EASYMAG System est une marque de Biomerieux.
• Amplicor respiratory specimen preparation kit (RSP prep) est une marque de Roche.
• Amplicor CT/NG specimen preparation kit (CT/NG prep) est une marque de Roche..
• QIAamp DNA Mini Kit (50) (Blood and Body Fluid Spin Protocol) est une marque de Qiagen.
• Taqman® Universal PCR Master Mix est une marque de Applied Biosystems.
Class Ea1: Virus pouvant causer des maladies aux animaux, et qui présente les caractéristiques
suivantes (avec des degrés variables) : importance géographique limitée, faible transmission interespèces,
vecteur ou porteur inexistant. Aucune mesure d’isolement particulière n’est requise. Il
existe des traitements préventifs ou curatifs.
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Diagenode S.A.
CHU, Tour GIGA, B34 (3 e étage), avenue de l’Hôpital, 1
Sart Tilman 4000 Liège- BELGIUM
Tel: +32(0)43642050
Fax: +32(0)43642051
Email: order@Diagenode.com
http://www.Diagenode.com
info@Diagenode.com