DNA Extraction & Inhibition Control Real-Time PCR - Diagenode ...

DIA-EIC/DNA-050
11. Paramétrer le volume de l’échantillon à 50 µl.
12. Paramétrer « Data Collection » au Stage 3, Step 2.
13. Entrer les informations sur l’échantillon dans le « Set Up Tab ».
14. Sauvegarder le fichier format .sds.
15. Cliquer Start.
‣ Biorad ICycler
1. Sélectionner « In library ».
2. Cliquer « View Protocol ».
3. Cliquer « Create a new protocol ».
4. Définir le « Thermal profile » comme décrit ci-dessous :
Stage Description
1 2 minutes à 50° C (1 cycle)
2 10 minutes à 95° C (1 Cycle)
3 Cycle program (40 Cycles)
Step 1: 15 secondes à 95° C
Step 2: 1 minute à 60° C
5. Cliquer « Save this protocol ».
6. Cliquer « Run with selected protocol ».
7. Sélectionner « Edit plate set up ».
8. Dans « Samples whole plate loading », entrer les informations sur l’échantillon.
9. Dans « Select and load fluorophores », sélectionner les détecteurs comme montré cidessous:
Detector name Reporter
DIA-DNA/EIC(YD)-050 Yellow Dye Vic/Hex
DIA-DNA/EIC(DR)-050 Orange Dye Vic/Hex
DIA-DNA/EIC(Cy5)-050 Cy5 Cy5
10. Cliquer « Save this plate set up».
11. Cliquer « Run with selected protocol ».
12. Dans « Run prep », sélectionner « 50 µl sample volume ».
13. Dans « Select run purpose », sélectionner « PCR quantification melt curve ».
14. Cliquer « Begin Run ».
15. Sauvegarder le fichier en format .opd.
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